检索结果-南通市图书馆

脑源性神经生长因子促进成年大鼠脑海马神经干细胞定向分化的浓度选择

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2007年第46期11卷 9255-9258页

作者：季丽莉佟雷唐源远赵久红王振宇中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室辽宁省沈阳市110001

目的:探讨培养基中表皮生长因子与血清两者浓度一定的条件下,不同浓度的脑源性神经生长因子对成年大鼠脑海马神经干细胞向神经元分化的影响。方法:实验于2007-08在中国医科大学神经解剖研究室完成。①材料:清洁级雄性成年SD大鼠1只,由... 详细信息

目的:探讨培养基中表皮生长因子与血清两者浓度一定的条件下,不同浓度的脑源性神经生长因子对成年大鼠脑海马神经干细胞向神经元分化的影响。方法:实验于2007-08在中国医科大学神经解剖研究室完成。①材料:清洁级雄性成年SD大鼠1只,由中国医科大学实验动物部提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验过程中应用的表皮生长因子、脑源性神经生长因子均由R&D公司提供。②实验方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,剪碎后胰蛋白酶消化,过滤、离心、弃上清,加入含2%B27、20μg/L表皮生长因子、20μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12无血清条件培养基体外培养神经干细胞,传至第4代时利用有限稀释法进行单克隆培养,100倍镜下克隆球直径约为200μm时制备单细胞悬液,稀释后滴加于96孔板内,设立两组,全量新鲜培养基组加入刚配置未使用过的DMEM/F12无血清培养基100μL,半量条件培养基组加入上述曾用于神经干细胞培养且含有其代谢产物的1/2DMEM/F12无血清培养基100μL。③实验评估:观察神经干细胞的单克隆培养增殖情况。对克隆球行巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色。按培养基中脑源性神经生长因子终浓度的不同将所培养细胞设立0,50,100,150,200μg/L组,各组均加入20μg/L表皮生长因子和体积分数为0.1的胎牛血清,1周后行神经元特异性烯醇化酶免疫细胞化学染色,检测神经干细胞向神经元分化情况。结果:①神经干细胞单克隆培养结果:单克隆培养开始时神经干细胞增殖缓慢,半量条件培养基组细胞增殖速度快于全量新鲜培养基组,随着细胞数的增多,两组细胞增殖速度也相应加快,分别在培养后第12天、第15天形成直径为200μm的克隆球。②神经干细胞免疫细胞化学染色结果:单克隆培养后克隆球表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质原纤维酸性蛋白均呈阳性表达。③各组神经干细胞分化为神经元的比例:与0μg/L脑源性神经生长因子组比较,50,100μg/L脑源性神经生长因子组的神经干细胞分化为神经元比例均明显增高(t=2.502～5.025,P0.05)。结论:向含有B27、表皮生长因子、碱性成纤维生长因子的DMEM/F12条件培养基中加入20μg/L表皮生长因子和体积分数为0.1胎牛血清的情况下,脑源性神经生长因子促使神经干细胞向神经元分化的较佳浓度为50μg/L。

关键词：神经干细胞大鼠海马表皮生长因子脑源性神经生长因子分化

脑源性神经生长因子和神经干细胞联合移植对大脑中动脉阻塞大鼠神经功能恢复的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2008年第8期25卷 984-986页

作者：赵宇谢鹏朱晓峰重庆医科大学第一附属医院神经科 400016 佳木斯大学神经科学研究所

目的将脑源性神经生长因子（BDNF）和神经干细胞（NSCs）单独及联合移植应用于大脑中动脉阻塞（MCAo）模型大鼠，观察BDNF和NSCs移植对大鼠缺血性脑卒中神经功能恢复的作用及BDNF对内源性和外源性NSCs增殖、迁移及分化的影响。方法体外... 详细信息

目的将脑源性神经生长因子（BDNF）和神经干细胞（NSCs）单独及联合移植应用于大脑中动脉阻塞（MCAo）模型大鼠，观察BDNF和NSCs移植对大鼠缺血性脑卒中神经功能恢复的作用及BDNF对内源性和外源性NSCs增殖、迁移及分化的影响。方法体外分离、培养新生大鼠海马NSCs，BrdU标记。实验动物随机分为A组（MCAo组）；B组（MCAo＋BDNF组）；C组（MCAo＋NSCs组）；D组（MCAo＋BDNF＋NSCs组），每组16只，移植后进行神经功能损害评分（NSS），用免疫组织化学行BrdU、nestin、BrdU／NSE检测，分析结果。结果移植后的2、4周神经功能评分分别为：A组5．3±0．5、5．3±0．5；B组4．0±0．8、3．8±0．5；C组3．5±0．6、3．5±0．6；D组2．0±0．8、1．8±1．0，D组显著好于其他3组（P〈0．05），B组与C组显著好于A组（P〈0．05）。nestin阳性细胞数：A组1．24±1．13，B组2．59±1．44（P〈0．05），BrdU阳性细胞数：A组0．52±0.68，B组1．65±1．10（P〈0．05）。BrdU阳性细胞数：C组6．08±1．52，D组10．26±1．96（P〈0．05），BrdU／NSE双阳性细胞数：C组1．74±1．04，D组3．58±1．20（P〈0．05）。结论BDNF和NSCs移植单独及联合应用对MCAo大鼠的神经功能恢复均有作用，两者联合具有协同作用。BDNF对内源性NSCs的激活、增殖有促进作用，对外源性NSCs的增殖、迁移及分化有促进作用。

关键词：神经干细胞脑源性神经生长因子移植大脑中动脉阻塞

脑源性神经生长因子促进脑梗死后小鼠内源性神经干细胞的增殖及向神经元分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第33期10卷 4-6页

作者：臧大维刘娟左宪华 Surindar Cheema 天津市第一中心医院神经内科天津市300192 天津市第一中心医院检验科微生物室天津市300192 墨尔本大学医学院Howard Florey研究所

目的:探讨脑源性神经生长因子是否能促进脑梗死后小鼠内源性神经干细胞的活跃,能否刺激其分化成神经元。方法:实验于2004-07/2005-02在墨尔本大学完成。选取10周龄纯种C57BL/6J小鼠24只,分为盐水对照组、脑源性神经生长因子治疗组,每组... 详细信息

目的:探讨脑源性神经生长因子是否能促进脑梗死后小鼠内源性神经干细胞的活跃,能否刺激其分化成神经元。方法:实验于2004-07/2005-02在墨尔本大学完成。选取10周龄纯种C57BL/6J小鼠24只,分为盐水对照组、脑源性神经生长因子治疗组,每组雌雄各6只。①两组均采用结扎左侧大脑中动脉远心端法建立脑梗死模型,同时采用Matsushita描述的方法监测大脑中动脉供血区的血流量,血流量降低至少75%为有效。②脑源性神经生长因子治疗组于梗死后24h给予脑起源神经营养因子治疗,用药方式采用ALZET锇药物泵缓慢释放。将500μg/kg脑起源神经营养因子溶解于生理盐水中,加入到ALZET泵中,可在28d内持续缓慢释放药物。盐水对照组于梗死后24h给予等量生理盐水。③造模前后对两组小鼠运动功能进行Rotarod测试,记录小鼠在Rotarod上的停留时间。采用双重免疫荧光组化及共焦计数系统检测方法,对两组小鼠内源性神经干细胞的数量、密度及其分化方向进行评估。结果:①运动功能测试结果:与梗死前比较,两组小鼠在梗死后第1周均表现出明显的运动功能下降。但梗死后第2,3,4周,脑起源神经营养因子治疗组小鼠在Rotarod上的停留时间延长,运动功能的恢复明显优于盐水对照组,差异有显著性意义(P脑内均出现免疫荧光阳性表达的内源性神经干细胞,主要分布在病灶周围,在损伤侧的对侧也出现表达。脑起源神经营养因子治疗组的表达数量明显高于盐水对照组。③内源性神经干细胞的激活情况:梗死4周后,两组小鼠脑内都出现内源性神经干细胞的再表达,脑起源神经营养因子治疗组内源性神经干细胞数较盐水对照组明显增加,约4.2倍。同时脑起源神经营养因子治疗组分化为神经元的比例明显高于盐水对照组(36%,15%),分化为星形胶质细胞的比例低于盐水对照组(54%,77%),分化为少突胶质细胞的比例二者基本相似(10%,8%)。结论:脑起源神经营养因子可能是基于内源性神经干细胞治疗脑卒中的一种有效的方法.通过调控内源性神经干细胞的增殖分化来治疗神经系统疾病在未来将是一种新的干细胞治疗方法.

关键词：干细胞脑源性神经生长因子神经元小鼠

脑源性神经生长因子对顺铂诱导的神经母细胞瘤细胞株生长与凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2004年第11期21卷 1292-1293页

作者：李爱敏张锦华马力荣道建中国医科大学附属二院血液研究室沈阳110004

目的　通过观察脑源性神经生长因子 (BDNF)对顺铂诱导的神经母细胞瘤 (NB)细胞株生长与凋亡的影响 ,探讨TrKB BDNF通路在NB化疗耐药中的作用。方法　应用四甲基偶氮蓝比色 (MTT)法检测不同浓度BDNF对顺铂诱导人NB细胞株SH SY5Y的生长的... 详细信息

目的　通过观察脑源性神经生长因子 (BDNF)对顺铂诱导的神经母细胞瘤 (NB)细胞株生长与凋亡的影响 ,探讨TrKB BDNF通路在NB化疗耐药中的作用。方法　应用四甲基偶氮蓝比色 (MTT)法检测不同浓度BDNF对顺铂诱导人NB细胞株SH SY5Y的生长的影响 ,应用流式细胞仪 (FCM )检测BDNF对顺铂诱导的人NB细胞株SH SY5Y的凋亡率的影响。结果　BDNF可阻断顺铂对TrkB表达的SH SY5Y细胞的杀伤作用 ,且其阻断能力的大小与BDNF浓度有关 ,但不能阻断顺铂对无TrkB表达的SH SY5Y细胞的杀伤作用。顺铂对NB细胞的杀伤作用是通过诱导细胞凋亡 ,BDNF对顺铂这一作用的阻断是通过抑制细胞凋亡而实现的。结论　TrkB BDNF通路在TrkB表达的NB化疗耐药机制中起重要作用。

关键词：顺铂 BDNF 诱导 NB SH 杀伤作用脑源性神经生长因子细胞表达凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

脑源性神经生长因子与脑缺血性损伤

中国临床康复 2003年第22期7卷 3112-3114页

作者：孙鹏飞杜富会周怀琪郭顺林兰州医学院第一附属医院放射科甘肃省兰州市730000

脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)是在脑内合成并广泛分布于中枢神经系统,可促进神经元的存活和生长发育并能防止它们受损死亡,改善神经元病理状态、促进受损伤神经元再生及分化成熟等生物效应的多肽或蛋白质... 详细信息

脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)是在脑内合成并广泛分布于中枢神经系统,可促进神经元的存活和生长发育并能防止它们受损死亡,改善神经元病理状态、促进受损伤神经元再生及分化成熟等生物效应的多肽或蛋白质,在中枢神经系统(CNS)的损伤修复中具有重要的作用。将近年来与其有关的文献进行综合分析,对其在脑缺血后的表达机制、生物学作用及其机制进行探讨,了解其在大脑中的分布,缺血性损伤程度与BDNF表达间的关系,以及影响BDNF表达的因素,有助于其在临床上广泛应用。

关键词：脑源性神经生长因子脑缺血性损伤神经元 BDNF受体脑保护细胞凋亡

脑源性神经生长因子促进骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苏州大学学报（医学版） 2007年第4期27卷 520-523页

作者：许期年金钧苗宗宁苏州大学附属第一医院脑神经研究室江苏苏州215006

目的探索脑源性神经生长因子(BDNF)在诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经元样细胞过程中的作用。方法应用Ficoll分离骨髓中单核细胞,贴壁培养细胞,观测形态并用流式细胞仪检测其细胞表面标志;用含β-巯基乙醇(BME)、BDNF及碱性成纤... 详细信息

目的探索脑源性神经生长因子(BDNF)在诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经元样细胞过程中的作用。方法应用Ficoll分离骨髓中单核细胞,贴壁培养细胞,观测形态并用流式细胞仪检测其细胞表面标志;用含β-巯基乙醇(BME)、BDNF及碱性成纤维细胞因子(bFGF)的条件培养基使培养的细胞向神经细胞诱导分化;采用免疫荧光染色法对分化的细胞进行鉴定。结果分离培养的贴壁细胞具有典型的BMSCs的形态和细胞表面标志,诱导后细胞表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(NSE)、和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论BMSCs在体外具有分化为神经元样细胞的能力,BDNF具有促进分化的作用。

关键词：脑源性神经生长因子骨髓间充质干细胞神经细胞分化

脑源性神经生长因子过表达慢病毒载体构建及转染脂肪干细胞的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2019年第5期36卷 895-897页

作者：应诚诚王勇李国灏陈琳郭永连华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院泌尿外科武汉430014

目的构建携带大鼠脑源性神经生长因子(BDNF)基因的重组慢病毒表达载体,并转染脂肪干细胞(ADSCs)来获得治疗的种子细胞。方法从已构建好的含BDNF的质粒克隆模板pEGFP-C-BDNF中,利用聚合酶链反应(PCR)方法提取目的基因BDNF,将该基因克隆... 详细信息

目的构建携带大鼠脑源性神经生长因子(BDNF)基因的重组慢病毒表达载体,并转染脂肪干细胞(ADSCs)来获得治疗的种子细胞。方法从已构建好的含BDNF的质粒克隆模板pEGFP-C-BDNF中,利用聚合酶链反应(PCR)方法提取目的基因BDNF,将该基因克隆到慢病毒载体表达质粒GV287(含Flag基因)中,得到重组的UBI-BDNF,通过PCR、酶切、测序和分析比对验证BDNF基因后,将UBI-BDNF质粒和包装质粒pHelper1.0、pHelper2.0共同转染人胚胎肾上皮细胞株293T细胞,经同源重组产生重组慢病毒UBI-BDNF。UBI-BDNF在293T细胞内大量扩增,应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法鉴定和测定滴度,然后转染ADSCs,并通过免疫荧光法及酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测。结果克隆得到791 bp的目的BDNF全长基因,经过PCR扩增、酶切鉴定、序列测定证实,BDNF基因被成功克隆到慢病毒载体中,可实现BDNF基因的表达,且病毒滴度为2.0×109 TU/ml。免疫荧光检测BDNF在转染ADSCs中表达。ELISA检测转染ADSCs上清液中BDNF浓度为891.38~1 196.26 ng/L[(945.33±38.54)ng/L],而绿色荧光蛋白(GFP)转染ADSCs中未检测到。Western blot证实转染ADSCs表达BDNF蛋白。结论成功构建表达大鼠BDNF基因的慢病毒载体并能在ADSCs高表达。

关键词：脑源性神经生长因子慢病毒载体基因工程脂肪干细胞

脑源性神经生长因子对mir124表达及兴奋性电流的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中风与神经疾病杂志 2017年第8期34卷 718-720页

作者：王凤军王洪朋单晶丽邵正凯姜杨薇陈元元宋婷婷邱丽婷哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科黑龙江哈尔滨150001 牡丹江市妇女儿童医院黑龙江牡丹江157000 哈尔滨市第二医院黑龙江哈尔滨150056

目的探讨BDNF对海马miRNA-124表达及齿状回颗粒细胞兴奋性突触后电流(s EPSCs)的影响,以明确BDNF对颞叶内侧癫痫(MTLE)发病机制的影响。方法选取哈尔滨医科大学附属第一临床医院神经外科2008年4月-2010年10月手术治疗的MTLE患者12例。RT... 详细信息

目的探讨BDNF对海马miRNA-124表达及齿状回颗粒细胞兴奋性突触后电流(s EPSCs)的影响,以明确BDNF对颞叶内侧癫痫(MTLE)发病机制的影响。方法选取哈尔滨医科大学附属第一临床医院神经外科2008年4月-2010年10月手术治疗的MTLE患者12例。RT-pcr技术检测BDNF孵育后MTLE患者海马组织mir-124表达、膜片钳技术检测BDNF对海马颗粒细胞s EPSCs的影响。结果 (1)BDNF降低了颞叶癫痫海马miRNA-124的表达(P<0.01);(2)BDNF增加了颗粒细胞sEPSCs的频率和幅度(P<0.01)。结论 BDNF降低了颞叶癫痫海马mir-124的表达,提高颗粒细胞sEPSCs的频率和幅度,从而可能对人类MTLE的发病起到促进作用。

关键词：脑源性神经生长因子颞叶内侧癫痫 miRNA-124 自发性兴奋性突触后电流

脑源性神经生长因子经自噬对胚鼠神经元缺氧损伤的保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用儿科临床杂志 2012年第17期27卷 1351-1354页

作者：陈艾周晖童煜毛萌四川大学华西第二医院儿科成都610041

目的探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对胚鼠缺氧神经元是否有保护作用及其机制是否与激活自噬有关。方法将SD大鼠胚鼠(孕17～19 d)的大脑皮质神经元在体外进行原代细胞培养,并进行神经元鉴定。培养7～10 d,选取生长良好的神经元用于前后... 详细信息

目的探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对胚鼠缺氧神经元是否有保护作用及其机制是否与激活自噬有关。方法将SD大鼠胚鼠(孕17～19 d)的大脑皮质神经元在体外进行原代细胞培养,并进行神经元鉴定。培养7～10 d,选取生长良好的神经元用于前后两部分实验。1.第一部分随机分为3组,对照组:不加入药物,只作缺氧处理;3-甲基腺嘌呤组(3-MA组):提前加入不同浓度的3-MA后作缺氧处理,依次为5 mmol.L-13-MA组、10 mmol.L-13-MA组、20 mmol.L-13-MA组;BDNF组:提前加入不同浓度的BDNF后作缺氧处理,依次为50μg.L-1BDNF组、100μg.L-1BDNF组、200μg.L-1BDNF组。观察不同剂量3-MA、BDNF对缺氧神经元损伤的作用。之后以细胞计数盒-8(CCK-8)测定各组细胞活力,确定干预缺氧神经元的最佳药物浓度。2.第二部分分为3组,对照组:单纯缺氧,不加药物;100μg.L-1BDNF组:加入100μg.L-1BDNF;10 mmol.L-13-MA组:加入10 mmol.L-13-MA。免疫蛋白印迹法检测3组缺氧神经元在不同缺氧时间点细胞自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达情况,以LC3Ⅱ/ac-tin的相对表达量判断自噬发生的程度。结果 1.免疫荧光鉴定:与未缺氧神经元比较,缺氧神经元突触回缩,细胞网状结构被破坏。2.神经元细胞活力:50μg.L-1BDNF组缺氧神经元细胞活力最强,100μg.L-1BDNF组缺氧神经元细胞活力其次(Pa神经元活力明显降低。3.免疫印迹:于缺氧1 h、3 h、5 h,100μg.L-1BDNF组缺氧神经元的LC3表达量,均较对照组相应时间点明显上调(Pa神经元起保护作用。

关键词：脑源性神经生长因子氧气剥夺神经元自噬自噬微管相关蛋白轻链3