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脐血单个核细胞和CD34^+细胞体外扩增造血干/祖细胞

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华东理工大学学报（自然科学版） 2002年第6期28卷 592-596页

作者：王斌康自珍迟占有谭文松华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

考察了脐血单个核细胞 ( MNC)和 CD3 4 +富集细胞在 SCF+IL- 3 +IL- 6 +FL+Tpo细胞因子组合下的体外扩增特性。实验发现 :CD3 4 +富集细胞具有很高的扩增潜力 ,通过 3周培养总细胞扩增了 ( 883 .2± 3 2 2 .4)倍 ,而 MNC仅扩增了 ( 5 3... 详细信息

考察了脐血单个核细胞 ( MNC)和 CD3 4 +富集细胞在 SCF+IL- 3 +IL- 6 +FL+Tpo细胞因子组合下的体外扩增特性。实验发现 :CD3 4 +富集细胞具有很高的扩增潜力 ,通过 3周培养总细胞扩增了 ( 883 .2± 3 2 2 .4)倍 ,而 MNC仅扩增了 ( 5 3 .3± 6 .2 )倍。对比细胞集落生成和 CD3 4 +细胞的扩增发现 ,MNC的集落密度由最初的 ( 2 70 .9± 5 4 .9) CFCs/ 1 0 5cells上升至第 7天的( 1 496 .3± 41 7.7) CFCs/ 1 0 5cells,CD3 4 +细胞百分比则由最初的 ( 0 .99± 0 .1 8) %上升至第 7天的( 4.4± 1 .9) % ,而 CD3 4 +富集细胞在培养过程中 ,虽然集落总数和 CD3 4 +细胞总数始终呈上升趋势 ,但是其集落密度和 CD3 4 + 细胞百分比则始终呈下降趋势。在两种起始细胞培养中 ,CFU- GM(粒细胞 -巨噬细胞集落形成单位 )在集落中的含量逐渐增加 ,BFU- E(爆式红细胞集落形成单位 )含量则逐渐降低。在 3周的短期培养中 ,MNC可以得到更多的集落形成细胞 ( CFC)和 CD3 4

关键词：造血干/祖细胞脐血 MNC CD34^+细胞体外扩增

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从脐血单个核细胞定向诱导巨核细胞的生成

华东理工大学学报（自然科学版） 2002年第5期28卷 492-495页

作者：蔡海波康自珍徐莉谭文松张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

采用 SCF、TPO、IL- 3、IL- 6、IL- 1细胞因子 ,从脐血单个核细胞定向诱导巨核细胞的形成。比较了 SCF+ TPO+ IL- 1、SCF+ TPO+ IL- 3、SCF+ TPO+ IL- 63种细胞因子组合对刺激巨核细胞生成的作用 ,经体外培养 8d后 ,CD41 + 细胞占培养... 详细信息

采用 SCF、TPO、IL- 3、IL- 6、IL- 1细胞因子 ,从脐血单个核细胞定向诱导巨核细胞的形成。比较了 SCF+ TPO+ IL- 1、SCF+ TPO+ IL- 3、SCF+ TPO+ IL- 63种细胞因子组合对刺激巨核细胞生成的作用 ,经体外培养 8d后 ,CD41 + 细胞占培养物的比例分别达到 ( 5 .64± 0 .77) %、( 5 .73± 1 .2 4 ) %和 ( 2 0 .1± 2 .5 3) % ;每 1 0 4个细胞可形成巨核祖细胞集落形成单位 ( CFU- MK)为( 1 3.7± 5 .7)个、( 1 5 .0± 3.6)个和 ( 93.7± 1 6.0 )个。在 SCF+ TPO+ IL- 6体系中增加 IL- 6的浓度 ,可提高培养液中 CD41 + 细胞的纯度。当 IL- 6的浓度从 1 0μg/L增加到 5 0μg/L时 ,CD41 + 细胞的比例可从 ( 2 0 .1± 2 .5 3) %提高到 ( 2 6.81± 3.2 0 ) % ,但每 1 0 4个细胞形成 CFU- MK数目却从( 93.7± 1 6.0 )个减少到 ( 4 5± 8.6)个 ;这说明 IL- 6对巨核细胞的刺激主要作用在其发育的后期。采用 SCF+ TPO+ IL- 3+ IL - 6细胞因子组合 ,由 1× 1 0 6个单个核细胞培养一周后可诱导出 ( 1 .61±0 .5 8)× 1 0 5个 CD41 + 细胞 ,占培养物的比例可达到 ( 1 8.8± 1 .64) % ,每 1 0 4个细胞形成 CFU- MK数目可达到 ( 1 2 1 .8± 1 0 .3)个。

关键词：脐血单个核细胞定向诱导巨核细胞细胞因子体外扩增血小板生成癌症治疗

脐血联合单倍型造血干细胞共移植治疗恶性血液病的研究进展

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中国肿瘤临床 2021年第4期48卷 210-214页

作者：赵鸣悦(综述) 符粤文(审校) 郑州大学附属肿瘤医院血液科郑州市450008

单倍型造血干细胞移植(haploidentical hematopoietic stem cell transplantation,haplo-HSCT)近年来被广泛应用,减轻移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生率,减少移植后并发症、提高患者生存质量为目前临床亟待解决的问题。脐血联合haplo-HSCT已逐渐在国内外部分中心开展,其可以克服haplo-HSCT和脐血干细胞移植的局限性,并保留单倍型移植物抗白血病的作用,在加速造血重建、降低GVHD发生率等方面显示出一定的疗效和应用前景,并且可取得与人类白细胞组织相容性抗原(human leukocyte antigen,HLA)全相合移植类似的疗效。本文就该移植方案的疗效及影响因素,并对移植后病毒感染、免疫重建、造血嵌合状态等进行综述,旨在为临床应用提供参考。

关键词：脐血单倍型造血干细胞移植恶性血液病移植物抗宿主病病毒感染

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脐血巨核祖细胞的体外扩增

中国医学科学院学报 2005年第2期27卷 199-204页

作者：冯义肖志坚徐世才卢士红刘斌刘津华韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的联合血小板生成素(TPO)、白细胞介素-11(IL-11)和肝素用脐血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞。方法采用免疫磁珠法(M ACS)分选CD34+细胞,用TPO、IL-11和肝素定向扩增巨核祖细胞,巨核祖细胞集落分析(CFU-M K)测定巨核祖细胞扩增倍数,流... 详细信息

目的联合血小板生成素(TPO)、白细胞介素-11(IL-11)和肝素用脐血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞。方法采用免疫磁珠法(M ACS)分选CD34+细胞,用TPO、IL-11和肝素定向扩增巨核祖细胞,巨核祖细胞集落分析(CFU-M K)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞术检测巨核祖细胞分化过程中不同细胞组群(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+和CD41a+CD61+)的变化,免疫组织化学染色(CD41a)和透射电镜观察巨核细胞形态及超微结构,血小板体外活化实验及非肥胖性糖尿病/严重联合免疫缺陷鼠异种体内移植实验评价扩增的巨核祖细胞功能。结果单用TPO7d时,CD34+CD41a+细胞扩增(4.0±1.7)倍;与IL-11联用后扩增到(10.5±4.8)倍;再加入肝素后扩增达(29.9±6.4)倍,TPO+IL-11+肝素组扩增倍数为TPO组、TPO+IL-11组的7.5、2.85倍,与两组相比差异均有显著性(P50个细胞/集落)达(106.8±26.9)倍,较TPO、TPO+IL-11组均有明显增加(P<0.05)。将扩增第7天的巨核细胞静脉输注于经放射预处理的非肥胖性糖尿病/严重联合免疫缺陷鼠,可明显加速其血小板及白细胞的恢复并提高小鼠生存率。电镜显示扩增的巨核细胞有一定的界膜发育等成熟特征,体外血小板活化实验证实,扩增的巨核细胞在体外可产生血小板。

关键词：脐血巨核祖细胞血小板生成素白细胞介素-11 肝素

层流剪切力对脐血CD34^+细胞向各系分化的影响

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北京工业大学学报 2010年第12期36卷 1691-1694页

作者：景强蔡海波谭文松华东理工大学生物反应器国家重点实验室上海200237

为了研究层流剪切力对造血干细胞体外扩增及向各系造血祖细胞分化的影响,考察了在3组不同大小层流剪切力0、0.03、0.06 Pa的作用下,CD34+细胞为起始细胞的造血干/祖细胞体外扩增和向各系祖细胞分化的情况.结果表明:3组总细胞、CD34+细胞... 详细信息

为了研究层流剪切力对造血干细胞体外扩增及向各系造血祖细胞分化的影响,考察了在3组不同大小层流剪切力0、0.03、0.06 Pa的作用下,CD34+细胞为起始细胞的造血干/祖细胞体外扩增和向各系祖细胞分化的情况.结果表明:3组总细胞、CD34+细胞及CD34+38-细胞的扩增无显著性差异;0.03 Pa层流剪切力使造血干细胞更易于向红系祖细胞系分化;0.06 Pa层流剪切力使其更易于向粒-巨噬祖细胞系分化;无层流剪切力作用下造血干细胞更易于向混合系祖细胞系分化.

关键词：层流剪切力脐血造血干/祖细胞体外扩增分化

脐血干/祖细胞短期体外扩增后归巢相关粘附特性的研究

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中华血液学杂志 2003年第2期24卷 64-67页

作者：翟琼莉周余邱录贵李茜韩俊领于珍孟恒星应红光王亚非韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较... 详细信息

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较扩增前后CD34+ 细胞表面VLA 4 (CD4 9d)、VLA 5(CD4 9e)、LFA 1(CD1 1a)、L selectin (CD6 2L)、PECAM 1(CD31 )、ICAM 1(CD54)和HCAM(CD4 4)等归巢相关粘附分子 (CAMs)的表达情况 ,并检测CD34+ 细胞与纤连蛋白 (FN)间的自发粘附率和基质细胞来源因子 1(SDF 1)诱导粘附率。结果　①在第 14天的培养扩增中 ,表达上述CAMs的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度 (15～ 72倍 )的扩增 ;②扩增后CD34+ 细胞表面粘附分子CD4 4、CD1 1a、CD4 9e和CD4 9d的表达与原代CD34+ 细胞持平或高于培养开始时水平 ,而CD6 2L、CD54和CD31 的表达则有不同程度下调 ;③在前 10d的扩增中 ,CD34+ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF 1诱导粘附率均呈上升趋势。结论　所建立的短期培养体系不仅可以支持表达重要CAMs的UCBCD34+ 细胞亚群的有效扩增 ,而且扩增后的HSPC总体上保持原有的粘附功能。

关键词：脐血干/祖细胞体外扩增归巢相关粘附特性研究

脐血间充质干细胞抑制外周血淋巴细胞增殖的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第9期30卷 968-971页

作者：徐志娟盛立霞欧阳桂芳宁波大学医学院附属宁波市第一医院浙江宁波315000

目的研究脐血间充质干细胞(UCBMSC)对成人外周血淋巴细胞增殖的影响。方法分离、扩增UCBMSC并鉴定其表面标志及向成骨细胞及脂肪细胞的分化能力。UCBMSC与淋巴细胞直接共培养并用植物血凝素(PHA)刺激,或在TranswellTM非接触体系中,用PH... 详细信息

目的研究脐血间充质干细胞(UCBMSC)对成人外周血淋巴细胞增殖的影响。方法分离、扩增UCBMSC并鉴定其表面标志及向成骨细胞及脂肪细胞的分化能力。UCBMSC与淋巴细胞直接共培养并用植物血凝素(PHA)刺激,或在TranswellTM非接触体系中,用PHA刺激共培养。两个培养体系均分为阴性对照组(淋巴细胞单独培养组)、阳性对照组(淋巴细胞加PHA刺激组)、实验组(淋巴细胞加PHA和UCBMSC组)。四氮唑衍生物MTS还原法测定细胞增殖并计算抑制率。结果在共培养与TranswellTM非接触体系中不同数量UCBMSC对淋巴细胞增殖均具有抑制作用,且UCBMSC浓度越高,抑制作用越强(P<0.05),具有剂量依赖性。但两体系中UCBMSC与淋巴细胞比值相同时,共培养体系抑制作用较非接触体系强,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 UCBMSC能抑制淋巴细胞增殖,且共培养体系抑制作用较非接触体系强。

关键词：脐血间充质干细胞外周血淋巴细胞植物血凝素细胞生长

脐血血清炎症因子干扰素-γ、白介素-12p70、白介素-17A与早产之间的关联

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环境与职业医学 2021年第9期38卷 952-957页

作者：王雪晴刘蒙王雅斐黄锟伍晓艳陶芳标安徽医科大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学系安徽合肥230032 安徽医科大学出生人口健康教育部重点实验安徽合肥230032 安徽医科大学人口健康与优生安徽省重点实验室安徽合肥230032 安徽医科大学国家卫生健康委配子及生殖道异常研究重点实验室安徽合肥230032

[背景]早产是新生儿发病和死亡的主要原因,已知感染和炎症是早产的危险因素之一,但各炎症因子水平与早产之间的具体关联需进一步研究。[目的]探讨脐血血清炎症因子水平和早产之间的关联。[方法]数据基于2013年5月—2014年9月在马鞍山市... 详细信息

[背景]早产是新生儿发病和死亡的主要原因,已知感染和炎症是早产的危险因素之一,但各炎症因子水平与早产之间的具体关联需进一步研究。[目的]探讨脐血血清炎症因子水平和早产之间的关联。[方法]数据基于2013年5月—2014年9月在马鞍山市妇幼保健院开展的出生队列研究,本研究共1 433对母婴纳入分析。分娩后立即采集脐带血血样,检测8种血清炎症因子浓度,包括干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17A、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。采用Mann-Whitney U检验分析早产组(孕周脐血血清各炎症因子质量浓度的差异。按三分位数将各炎症因子浓度分为低、中、高水平组,调整混杂因素后,采用二分类logistic回归模型分析脐血血清炎症因子水平与早产之间的关联。[结果]1 433名新生儿中3.3%(47例)为早产儿,脐血血清中IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17A、TNF-α的质量浓度的M(P25~P75)分别为1.40(0.97~2.21)、0.46(0.31~0.64)、1.83(1.08~2.87)、6.98(4.58~10.23)、7.25(5.37~9.30)、0.88(0.61~1.25)、1.56(1.02~2.20)、12.81(8.68~17.73)ng·L^(-1),检出率为94.77%~100.00%。早产组脐血血清中IFN-γ、IL-1β、IL-12p70、IL-17A的中位质量浓度均高于足月组(1.99 vs. 1.40、0.61 vs. 0.46、1.23 vs. 0.86、14.59 vs.12.81 ng·L^(-1))(P脐血血清中IFN-γ、IL-12p70、IL-17A高水平组发生早产的OR(95%CI)值为3.09(1.39~6.85)、3.76(1.66~8.53)、2.43(1.16~5.08),而其他炎症因子与早产之间的关联均无统计学意义(P> 0.05)。[结论]脐血血清中IFN-γ、IL-12p70、IL-17A因子水平与早产之间存在正向关联,即高水平炎症因子与早产的发生风险相关。

关键词：炎症炎症因子细胞因子干扰素-γ 白介素脐血早产

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从脐血单个核细胞诱导树突状细胞

华东理工大学学报（自然科学版） 2002年第6期28卷 588-591页

作者：徐莉康自珍蔡海波谭文松华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

探讨了从脐血单个核细胞定向诱导 DC的方法以进一步研究树突状细胞的功能与特性。从脐血中获取单个核细胞 ,在培养液中加入 GM- CSF、TNF- α、IL- 3、IL- 4,培养 1 4d后流式细胞仪分析细胞表面标志 CD1 a;培养末期加入 LPS,流式细胞仪... 详细信息

探讨了从脐血单个核细胞定向诱导 DC的方法以进一步研究树突状细胞的功能与特性。从脐血中获取单个核细胞 ,在培养液中加入 GM- CSF、TNF- α、IL- 3、IL- 4,培养 1 4d后流式细胞仪分析细胞表面标志 CD1 a;培养末期加入 LPS,流式细胞仪分析细胞表面标志 CD83及 HLA- DR。发现用 GM- CSF+TNF-α+IL - 4可获得 ( 3 6 .79± 3 .1 5 ) % CD1 a+ 细胞 ,LPS可使 CD83及 HLA- DR的比例从 ( 0 .5 7± 0 .5 6 ) %及 ( 40 .2 7± 6 .3 3 ) %分别升至 ( 3 2 .79± 1 2 .90 ) %及 ( 95 .5 2± 3 .45 ) %。实验证明脐血单个核细胞作为另一种主要来源 ,经特定细胞因子诱导可生成大量 DC,并能通过 LPS刺激

关键词：脐血树突状细胞单个核细胞定向诱导细胞表面标志