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人脐带间充质干细胞治疗后失代偿期乙型肝炎肝硬化患者的免疫功能和预后

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中国组织工程研究 2017年第17期21卷 2696-2701页

作者：方雪晴张骏飞宋海燕陈照林董静潘劲劲陈曦刘波陈从新安徽医科大学附属解放军临床学院安徽省合肥市230001 解放军第一○五医院感染病科安徽省合肥市230001

背景:大量体内外实验显示,间充质干细胞对淋巴细胞等免疫细胞有明显的免疫抑制作用。目的:探讨人脐带间充质干细胞对失代偿期乙型肝炎肝硬化患者免疫功能及预后的影响。方法:将118例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者随机分为2组,对照组(n=59... 详细信息

背景:大量体内外实验显示,间充质干细胞对淋巴细胞等免疫细胞有明显的免疫抑制作用。目的:探讨人脐带间充质干细胞对失代偿期乙型肝炎肝硬化患者免疫功能及预后的影响。方法:将118例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者随机分为2组,对照组(n=59)进行内科常规治疗;观察组(n=59)在内科常规治疗的基础上进行人脐带间充质干细胞移植,在入院1周内分2次进行,先经肝固有动脉注射10 mL干细胞悬液,然后经静脉注射10 mL干细胞悬液,细胞总数为(4.0-4.5)×10~8。于治疗前、治疗1,4周后,检测血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、转化生长因子β水平,以及外周血淋巴细胞亚群比例;治疗后12周,检测两组MELD评分、Child-Pugh分级变化;随访观察肝衰竭、并发症及生存情况。结果与结论:(1)观察组治疗后1,4周的血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平低于对照组(P脐带间充质干细胞移植可减轻失代偿期乙型肝炎肝硬化的炎症反应,改善肝脏功能,降低肝衰竭发生率和死亡率。

关键词：干细胞移植间充质干细胞脐带失代偿期肝硬化细胞因子淋巴细胞亚群预后

不同代次人脐带间充质干细胞的生物学特性及分化

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中国组织工程研究 2017年第13期21卷 2015-2022页

作者：刘雨思王凤昌夏海雄许键炜杨燕崔冬冰王黎龙何志旭舒莉萍贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学儿童医学中心贵州省贵阳市550004 贵州医科大学实验动物中心贵州省贵阳市550004

背景:人脐带间充质干细胞作为组织工程及再生医学领域的新兴种子细胞,其应用价值有赖于能否在长期体外传代扩增后仍保持稳定生物学特性和多向分化能力,需要进一步的实验研究。目的:研究不同培养代次人脐带间充质干细胞重要生物学属性的... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞作为组织工程及再生医学领域的新兴种子细胞,其应用价值有赖于能否在长期体外传代扩增后仍保持稳定生物学特性和多向分化能力,需要进一步的实验研究。目的:研究不同培养代次人脐带间充质干细胞重要生物学属性的差异。方法:采用组织块法分离培养人脐带间充质干细胞,分别采用细胞计数法与MTT法检测第3-6代细胞增殖活性;流式细胞仪检测第1-9代细胞表面标志物;细胞染色法分析第3-6代细胞核型。取第3代人脐带间充质干细胞,检测其分化为神经细胞、成骨细胞及肝样细胞的能力。结果与结论:(1)细胞计数法与MTT方法检测结果一致,第3-6代脐带间充质干细胞的增殖曲线均呈"S"型,在一二天时处于缓慢增长期,2-4 d时处于对数增长期,四五天时处于平台期,五六天时处于衰退期;(2)第1-9代脐带间充质干细胞表面高表达CD90、CD44、CD73,不或低表达CD11b、CD18、CD34、CD43及HLA-DR;(3)第3-6代脐带间充质干细胞核型均为正常人体核型;(4)脐带间充质干细胞可分化为神经细胞、成骨细胞及肝样细胞;(5)结果表明,人脐带间充质干细胞具有高度增殖活性和多向分化特性。

关键词：干细胞脐带间质干细胞组织工程脐带脐血干细胞间充质干细胞生物学特性组织块贴壁培养增殖表型染色体制备诱导分化三胚层

人脐带间充质干细胞对急性淋巴细胞白血病患儿异基因干细胞移植后免疫重建的影响

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中国组织工程研究 2017年第29期21卷 4679-4684页

作者：向金峰南阳市中心医院小儿血液科河南省南阳市473000

背景:人脐带间充质干细胞可分泌多种支持造血的细胞因子和生长因子,可改变造血微环境,具有调节及改善机体免疫功能的作用。目的:探讨人脐带间充质干细胞对儿童急性淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植后免疫重建的影响。方法:选取64例... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞可分泌多种支持造血的细胞因子和生长因子,可改变造血微环境,具有调节及改善机体免疫功能的作用。目的:探讨人脐带间充质干细胞对儿童急性淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植后免疫重建的影响。方法:选取64例接受异基因造血干细胞移植治疗的急性淋巴细胞白血病患儿,分为非血缘性供者异基因造血干细胞移植组(allo-HSCT组,n=32)及非血缘性供者异基因造血干细胞移植后输注人脐带间充质干细胞组(allo-HSCT+MSCs组,n=32),观察两组治疗效果及并发症发生情况,比较两组患儿预处理前、移植后1,3,6个月时外周血免疫球蛋白及淋巴细胞亚群水平。结果与结论:①allo-HSCT+MSCs组粒细胞植入时间短于allo-HSCT组(P0.05);③allo-HSCT+MSCs组移植后1,3,6个月血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、IgE水平及外周血T淋巴细胞(CD4^+、CD3^+CD4^+、CD4^+CD8^+)、B细胞(CD19^+)水平均高于allo-HSCT组(P脐带间充质干细胞输注能有效降低急性淋巴细胞白血病患儿异基因造血干细胞移植慢性抗宿主病发生率,有助于粒细胞造血重建及免疫功能重建。

关键词：造血干细胞移植脐带间质干细胞移植白血病组织工程

非病毒诱导体系高效诱导脐带来源间充质干细胞向胰岛细胞分化

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 675-678,I0017页

作者：李晶朱莉赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100005

目的探讨非病毒法诱导脐带来源间充质干细胞(UC-MSC)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,为胰岛细胞移植治疗糖尿病提供临床移植数量级的细胞。方法从人脐带分离间充质干细胞,体外分阶段诱导分化为胰岛细胞。采用RT-PCR方法比较胰岛细胞分化... 详细信息

目的探讨非病毒法诱导脐带来源间充质干细胞(UC-MSC)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,为胰岛细胞移植治疗糖尿病提供临床移植数量级的细胞。方法从人脐带分离间充质干细胞,体外分阶段诱导分化为胰岛细胞。采用RT-PCR方法比较胰岛细胞分化过程中转录因子foxa2、sox17、pdx1、ngn3、pax4、insulin和glut-2在诱导组和非诱导组中的表达水平;免疫荧光染色方法检测胰岛素和C-肽在诱导终末阶段细胞中的表达定位;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测胰岛素及C-肽的分泌以及细胞对葡萄糖刺激的反应性。结果诱导第1阶段末,诱导后细胞foxa2和sox17的表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05);诱导第2阶段末,诱导细胞pdx1、ngn3和pax4的表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05);诱导第3阶段末,诱导细胞的insulin和glut-2表达明显高于未诱导细胞(P均<0.05)。免疫荧光染色结果显示,胰岛素和C-肽均表达于诱导终末分化阶段的细胞,效率可达90%以上。ELISA检测结果显示,诱导第3阶段末细胞胰岛素总量为(346.3 739±32.5 149)μU/ml,明显高于未诱导细胞的(17.69±1.46)μU/ml(P<0.01);诱导后细胞置于5.5 mmol/L葡萄糖环境检测到的基础C-肽释放量为(195.10±8.88)pmol/L/h(P<0.01),细胞置于22 mmol/L葡萄糖环境测定葡萄糖刺激C-肽释放量达到(340.99±7.91)pmol/L/h(P<0.01)。结论以UC-MSC作为种子细胞,采用体外非病毒诱导体系获得的分化终末阶段细胞是具有胰岛素分泌功能的成熟胰岛细胞。

关键词：脐带间充质干细胞胰岛细胞转录因子

脐带间充质干细胞库的建设运营及问题解决策略——《脐带间充质干细胞》连载之二

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中国生物工程杂志 2018年第9期38卷 106-109页

作者：王佃亮中国人民解放军火箭军总医院药学部组织工程与再生医学实验室

在一定条件下,干细胞可诱导分化成多种功能的细胞或组织器官,用于白血病、淋巴瘤、实体瘤、再生障碍性贫血、放射病、急性心肌梗死、老年性痴呆、帕金森病、糖尿病及其并发症、克罗恩病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨及软骨缺损、... 详细信息

在一定条件下,干细胞可诱导分化成多种功能的细胞或组织器官,用于白血病、淋巴瘤、实体瘤、再生障碍性贫血、放射病、急性心肌梗死、老年性痴呆、帕金森病、糖尿病及其并发症、克罗恩病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨及软骨缺损、系统性红斑狼疮、小儿自闭症、小儿脑瘫、肝硬化、肝纤维化、酒精肝、肝功能衰竭、肾功能衰竭、口干症、烧伤、脊髓损伤、颅脑损伤、肺损伤、下肢缺血和遗传性缺陷等各种难治性疾病的治疗，也有人用于保健。

关键词：间充质干细胞干细胞库类风湿性关节炎脐带再生障碍性贫血系统性红斑狼疮肝功能衰竭连载

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脐带间充质干细胞在器官移植中的研究进展

中国实用外科杂志 2013年第9期33卷 796-799页

作者：汤佳城蔡秀军浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江省腔镜技术研究重点实验室浙江杭州310016

间充质干细胞（mesenchymal stemcells，MSCs）是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞，最早由Friedenstein等于1966年发现报道。目前对MSCs的临床应用研究已涉及绝大多数重要疾病，其中从骨髓分离... 详细信息

间充质干细胞（mesenchymal stemcells，MSCs）是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞，最早由Friedenstein等于1966年发现报道。目前对MSCs的临床应用研究已涉及绝大多数重要疾病，其中从骨髓分离的间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BM-MSCs）是此类研究的主要来源，BM—MSCs细胞环境易被细菌病毒污染，且随年龄增长在数量、增殖和分化能力上呈明显下降趋势。

关键词：脐带间充质干细胞免疫调节器官移植

人脐带间充质干细胞治疗乙型肝炎肝硬化患者发生肝细胞癌的危险因素分析

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中国组织工程研究 2018年第9期22卷 1350-1356页

作者：任浩董静刘力伟陈照林潘劲劲陈曦宋海燕张骏飞陈从新刘波安徽医科大学解放军临床学院安徽省合肥市230032 解放军第一○五医院感染病科安徽省合肥市230031

背景:随着间充质干细胞治疗的不断发展,相关文献报道干细胞治疗可能会导致肿瘤的发生发展。目的:了解人脐带间充质干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者发生肝细胞癌的潜在风险。方法:收集2011年1月至2013年12月在解放军第一○五医院感染... 详细信息

背景:随着间充质干细胞治疗的不断发展,相关文献报道干细胞治疗可能会导致肿瘤的发生发展。目的:了解人脐带间充质干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者发生肝细胞癌的潜在风险。方法:收集2011年1月至2013年12月在解放军第一○五医院感染病科住院治疗的乙型肝炎肝硬化患者,随访36个月,终点为确诊肝细胞癌。对可能影响肝细胞癌发生的相关危险因素进行单因素Logistic和多因素非条件Logistic回归分析。结果与结论:(1)386例患者完成随访,其中171例接受人脐带间充质干细胞治疗的患者为观察组,215例仅接受常规内科综合治疗的患者为对照组;(2)随访12个月时,观察组肝细胞癌的发病率明显高于对照组(P0.05);(3)单因素Logistic回归分析显示观察组和对照组内肝细胞癌患者在年龄、甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、甲胎蛋白异质体比率(AFP-L3%)、高尔基体糖蛋白73(GP73)等方面均显著高于非肝细胞癌患者(P脐带间充质干细胞治疗后乙型肝炎肝硬化患者发生肝细胞癌的独立危险因素;(4)结果表明,人脐带间充质干细胞治疗不会导致乙型肝炎肝硬化患者3年内肝细胞癌总发病率的上升,但可能会引起肝细胞癌发病时间的提前;甲胎蛋白异质体比率可作为人脐带间充质干细胞治疗后乙型肝炎肝硬化患者发生肝细胞癌的早期预测指标。

关键词：癌,肝细胞肝炎,乙型,慢性肝硬化脐带间质干细胞移植组织工程

氯化钴模拟低氧环境下人脐带间充质干细胞增殖及基因蛋白的表达

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中国组织工程研究 2015年第45期19卷 7268-7273页

作者：韩潇白海尹娇娇杨柯韩燕霞欧剑锋王存邦解放军兰州军区兰州总医院血液科/全军血液病中心甘肃省兰州市730050 兰州大学第二医院血液内科甘肃省兰州市730030

背景:氯化钴可促进人脐带源性间充质干细胞的增殖,具有时间和浓度依赖性,并对其基因蛋白表达具有调控作用。目的:研究氯化钴模拟的低氧环境对人脐带源性间充质干细胞的增殖及基因蛋白表达的影响,旨在建立高效的间充质干细胞体外培养扩... 详细信息

背景:氯化钴可促进人脐带源性间充质干细胞的增殖,具有时间和浓度依赖性,并对其基因蛋白表达具有调控作用。目的:研究氯化钴模拟的低氧环境对人脐带源性间充质干细胞的增殖及基因蛋白表达的影响,旨在建立高效的间充质干细胞体外培养扩增体系。方法:采用组织块法提取人脐带间充质干细胞,氯化钴模拟化学低氧环境,在不同浓度(0,100,150,200,250μmol/L)和不同时间(0,1,2,3,4 d)条件下,用流式细胞仪进行细胞表面相关抗原的鉴定及细胞周期检测;CCK-8法测定细胞增殖情况;RT-PCR测定缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1、白细胞介素6、转化生长因子βmR NA的表达;Western blot测定缺氧诱导因子1α蛋白的表达。结果与结论:人脐带间充质干细胞表面相关抗原CD29、CD73、CD90、CD105表达阳性,CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR呈阴性表达,且不受氯化钴模拟的低氧环境影响。氯化钴模拟的化学性低氧可促进人脐带间充质干细胞增殖,且具有一定时间及浓度依赖性。RT-PCR检测到低氧组缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1 m RNA表达上调,而白细胞介素6及转化生长因子βmR NA表达下调,差异有显著性意义(P脐带间充质干细胞增殖,最佳浓度为200μmol/L,但过高浓度(250μmol/L)时反而抑制其增殖,机制可能与缺氧诱导因子1α基因与蛋白表达增加相关。

关键词：脐带间质干细胞细胞低氧细胞增殖缺氧诱导因子1 组织工程干细胞脐带脐血干细胞人脐带间充质干细胞低氧氯化钴增殖基因表达缺氧诱导因子1α

人脐带间充质干细胞生物学特性及向类肝细胞的分化

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世界华人消化杂志 2008年第15期16卷 1639-1644页

作者：闫俊卿韩涛朱争艳天津市人工细胞重点实验室天津市300170 天津市第三中心医院肝内科天津市300170 天津市肝胆疾病研究所天津市300170

目的:研究脐带间充质干细胞(umbilical cord-mesenchymal stem cells,UC-MSCs)生物学的特性及向肝细胞分化的可能性.方法:从脐带中分离间充质干细胞,体外行传代培养,检测脐带间充质干细胞表面免疫标志、细胞周期和生长活性等,利用肝细... 详细信息

目的:研究脐带间充质干细胞(umbilical cord-mesenchymal stem cells,UC-MSCs)生物学的特性及向肝细胞分化的可能性.方法:从脐带中分离间充质干细胞,体外行传代培养,检测脐带间充质干细胞表面免疫标志、细胞周期和生长活性等,利用肝细胞生长因子、成纤维生长因子4和抑瘤素等细胞因子诱导脐带间充质干细胞向肝细胞分化,用免疫细胞方法对诱导和未诱导的细胞进行免疫学检测,糖原染色进行功能鉴定.结果:从人脐带中可分离到贴壁生长的间充质干细胞,细胞形态类似成纤维细胞,可在体外进行长期稳定培养;CD29、CD105和Vimentin表达阳性,基本不表达CD34、CD31,经加入细胞因子可成功将间充质干细胞向肝细胞诱导分化,分化的细胞表达肝细胞表面标志物ALB、AFP、CK18和CK19,糖原染色呈现阳性.结论:人脐带中可成功分离到间充质干细胞,细胞可实现体外长期培养,表达脐带间充质干细胞的表面标志,在体外脐带间充质干细胞诱导分化为肝细胞,有望成为细胞替代治疗的理想来源之一.

关键词：脐带间充质干细胞肝细胞分化免疫细胞化学流式细胞术