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Notch1通过非经典的Notch信号通路调节胰腺星形细胞的活化

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中国病理生理杂志 2020年第2期36卷 260-267页

作者：宋海岩周志新张玉祥新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院河南新乡453003 首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069

目的:探讨Notch1在胰腺星形细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)活化中的作用。方法:利用免疫组织化学法与免疫荧光双标法检测Notch1在人胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织的表达情况;原代分离培养小鼠PSCs,... 详细信息

目的:探讨Notch1在胰腺星形细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)活化中的作用。方法:利用免疫组织化学法与免疫荧光双标法检测Notch1在人胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织的表达情况;原代分离培养小鼠PSCs,利用油红O染色、Western blot及RT-qPCR法对其进行鉴定,并利用Western blot及RT-qPCR检测Notch1及其下游关键分子HES1的表达情况;转染Notch1小干扰RNA(Notch1 siRNA)至小鼠PSCs后,利用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin)、I型胶原(collagen typeⅠ,ColⅠ)、Notch1及HES1的表达情况;利用划痕实验与CCK-8实验检测Notch1 siRNA对小鼠PSCs迁移与细胞活力的影响。结果:免疫组化与免疫荧光双标染色结果显示,Notch1表达在α-SMA阳性的PDAC间质细胞中;成功培养了小鼠PSCs细胞,且活化的PSCs中α-SMA、fibronectin和ColⅠ的表达升高,Notch1与HES1的表达均高于未活化的PSCs(P细胞中α-SMA和ColⅠ的表达显著降低,而fibronectin和HES1的表达无显著改变;敲减活化的PSCs中Notch1的表达后,细胞的活力及迁移能力显著降低。结论:Notch1参与调节PSCs的活化,抑制Notch1的表达可抑制活化PSCs标志物α-SMA和ColⅠ的表达,降低PSCs的活化程度、活力及迁移能力,并且Notch1调节PSCs的活化不依赖经典的Notch信号通路。

关键词： Notch信号通路胰腺导管腺癌胰腺星形细胞

Notch3对促进胰腺星形细胞活化的基因表达及信号通路的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第4期37卷 349-353页

作者：宋海岩周志新张玉祥新乡医学院基础医学院新乡市分子神经病学重点实验室河南新乡453003 新乡医学院河南新乡453003 首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069

目的:分离培养小鼠胰腺星形细胞(PSCs),检测Notch3对促进PSCs活化的基因表达及信号通路的影响。方法:对小鼠PSCs进行分离培养及传代。采用免疫荧光染色检测活化的小鼠PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I的表达;细胞分组为空白对照组(... 详细信息

目的:分离培养小鼠胰腺星形细胞(PSCs),检测Notch3对促进PSCs活化的基因表达及信号通路的影响。方法:对小鼠PSCs进行分离培养及传代。采用免疫荧光染色检测活化的小鼠PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I的表达;细胞分组为空白对照组(MOCK组),阴性对照组(转染Notch3 siRNA negative control,NC组),Notch3 siRNA组(转染Notch3 siRNA,N3 siRNA组)及Notch3 siRNA-1组(转染Notch3 siRNA-1,N3 siRNA-1组),提取各组总RNA,测定RNA浓度及纯度后,送至安诺优达基因科技(北京)有限公司进行转录组测序。结果:免疫荧光结果显示,在活化的PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I都有明显的表达。测序结果分析表明,与NC组相比较,在N3 siRNA组与N3 siRNA-1组,α-SMA基因,collagen I基因,fibronectin基因及CTGF基因均表达下调,与胶原蛋白代谢过程相关的基因表达上调,正向调节胶原生物合成的基因表达下调,而负向调节胶原生物合成的基因表达上调,PCNA基因表达下调;在N3siRNA组与N3siRNA-1组,调节细胞聚集的基因表达下调;在细胞组分部分,细胞外基质的基因表达下调;抑制PSCs中Notch3的表达可对细胞粘附分子信号通路,MAPK信号通路及TGF-β信号通路的组成成员的基因表达产生影响。结论:抑制Notch3的表达可抑制PSCs的活化,降低细胞增殖能力,降低迁移聚集能力及ECM合成的能力;抑制Notch3的表达可对其他的信号如细胞粘附分子信号通路,MAPK信号通路及TGF-β信号通路产生影响。

关键词：胰腺星形细胞 Notch3 基因表达信号通路

骨桥蛋白通过PI3K/Akt信号通路激活胰腺星形细胞

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第二军医大学学报 2019年第3期40卷 316-320页

作者：安薇施新岗朱建伟李桂香孙畅海军军医大学(第二军医大学)长海医院消化内科上海200433

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对胰腺星形细胞(PSC)的影响及其机制。方法构建OPN慢病毒过表达载体(OPN-O/E)并转染PSC,设置空载体转染细胞作为对照组。分别采用CCK-8实验和Transwell小室检测OPN-O/E转染及OPN-O/E转染联合Akt抑制剂LY294002(10... 详细信息

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对胰腺星形细胞(PSC)的影响及其机制。方法构建OPN慢病毒过表达载体(OPN-O/E)并转染PSC,设置空载体转染细胞作为对照组。分别采用CCK-8实验和Transwell小室检测OPN-O/E转染及OPN-O/E转染联合Akt抑制剂LY294002(10μmol/L、50μmol/L)处理后PSC增殖活性和趋化活性,采用蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果 OPN-O/E转染上调OPN表达后,PSC增殖活性增高、趋化活性增高,细胞中磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)和α-SMA表达水平均增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P细胞中PI3K和Akt表达水平与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05)。使用10μmol/L或50μmol/L Akt抑制剂LY294002干预后,细胞中α-SMA及p-Akt的表达被抑制,与OPN-O/E组相比差异均有统计学意义(P均<0.01),Akt的表达无明显变化。结论 OPN通过PI3K/Akt信号通路介导PSC活化,活化后PSC的增殖及趋化活性也增强。

关键词：骨桥蛋白胰腺星形细胞 PI3K/Akt信号通路 α-平滑肌肌动蛋白

转化生长因子-β_2诱导大鼠胰腺星形细胞活化及上皮间质转化的研究

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中国现代医学杂志 2015年第7期25卷 7-11页

作者：张尤历李萍王国英赵义王国乙蔡菁郭柔玉刘鑫徐岷江苏大学附属医院消化科江苏镇江212001

目的探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导大鼠胰腺星形细胞(PSCs)活化及上皮间质转化(EMT)的作用。方法组织块法分离、培养及鉴定大鼠PSCs后,10 ng/ml TGF-β2刺激PSCs 72 h,光镜下观察细胞形态学改变;免疫荧光染色及Western blot法检测... 详细信息

目的探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导大鼠胰腺星形细胞(PSCs)活化及上皮间质转化(EMT)的作用。方法组织块法分离、培养及鉴定大鼠PSCs后,10 ng/ml TGF-β2刺激PSCs 72 h,光镜下观察细胞形态学改变;免疫荧光染色及Western blot法检测α-SMA、Col-Ⅰ的蛋白表达;q RT-PCR及Western blot法分别检测E-caderin、Vimentin基因及蛋白的表达;荧光显微镜观察E-caderin和Vimentin在细胞内的表达情况。结果免疫荧光染色显示新分离PSCs神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、结蛋白(desmin)表达阳性,α-SMA表达阴性,符合其生物学特性。TGF-β2处理PSCs后,光镜下观察细胞体积及胞核变大,伪足发达,脂滴消失;免疫荧光染色及Western blot结果显示α-SMA和Col-Ⅰ表达量显著增加,呈典型活化状态;q RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色结果显示Vimentin的表达明显高于空白对照组,而E-caderin的表达明显降低(P<0.05)。结论 TGF-β2可诱导PSCs活化及上皮间质转化。

关键词：转化生长因子-β2 胰腺星形细胞活化上皮间质转化

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胰腺星形细胞与慢性胰腺炎和胰腺癌(综述)

中国城乡企业卫生 2010年第2期25卷 33-35页

作者：马慧发天津市天和医院普外科 300050

胰腺星形细胞(PSC)是一种与肝星状细胞结构和功能相似的细胞,通常处于静息态,受到致病因子的刺激时可由静息态转变为激活态,转变为"成肌纤维细胞",自分泌和旁分泌的作用下持续增生;PSC的增生和激活是胰腺纤维化发生的中心环节,活化的PS... 详细信息

胰腺星形细胞(PSC)是一种与肝星状细胞结构和功能相似的细胞,通常处于静息态,受到致病因子的刺激时可由静息态转变为激活态,转变为"成肌纤维细胞",自分泌和旁分泌的作用下持续增生;PSC的增生和激活是胰腺纤维化发生的中心环节,活化的PSC合成大量的细胞外基质沉积在胰腺,从而导致胰腺纤维化的发生,在慢性胰腺炎及胰腺癌胰腺纤维化的过程起重要作用。目前针对抑制PSC的活化及增殖进行的靶向治疗也取得了初步进展。本文就PSC的特性、分离方法及其增殖、活化及凋亡,以及PSC在胰腺炎症和肿瘤中的作用和靶向治疗做一综述。

关键词：胰腺星形细胞慢性胰腺炎胰腺癌

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胰腺星形细胞活化及信号转导

医学综述 2008年第22期14卷 3364-3367页

作者：梁晓强章学林张静喆上海中医药大学龙华医院中医外科研究所上海200032 上海中医药大学龙华医院胆道外科上海200032

胰腺纤维化是慢性胰腺炎的主要病理学特征,而活化的胰腺星形细胞(PSC)是胰腺纤维化发生的始动细胞,也是纤维化过程中的主要效应细胞。国内外研究发现多种因素,如细胞因子(常见的有血小板衍化生长因子、转化生长因子β1、白细胞介素10)... 详细信息

胰腺纤维化是慢性胰腺炎的主要病理学特征,而活化的胰腺星形细胞(PSC)是胰腺纤维化发生的始动细胞,也是纤维化过程中的主要效应细胞。国内外研究发现多种因素,如细胞因子(常见的有血小板衍化生长因子、转化生长因子β1、白细胞介素10)、激活蛋白、氧应激及细胞内压力等诸多因素,均可通过各自的作用来影响PSC的活性,最终通过丝裂原活化蛋白激酶途径、TGF-β/Smad信号转导蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体γ等细胞内信号调节PSC的活化、增殖及胰腺慢性炎症和纤维化形成过程。

关键词：胰腺星形细胞活化信号转导胰腺纤维化

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胰腺星形细胞在胰腺癌中的作用

国际外科学杂志 2010年第7期37卷 490-493页

作者：黄任翔裘正军上海交通大学附属第一人民医院普外科上海200080

胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,因早期诊断困难,恶性程度高,手术切除率低,并对化放疗均不敏感,故预后极差.其病理特征之一是肿瘤中有大量的结缔组织形成反应.而胰腺星形细胞（PSCs）在这一反应中起重要作用,并通过与胰腺癌细胞的相... 详细信息

胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,因早期诊断困难,恶性程度高,手术切除率低,并对化放疗均不敏感,故预后极差.其病理特征之一是肿瘤中有大量的结缔组织形成反应.而胰腺星形细胞（PSCs）在这一反应中起重要作用,并通过与胰腺癌细胞的相互作用,对胰腺癌细胞的增生、侵袭和转移有重要作用.本文就PSCs在胰腺癌发展中的作用及机制作一综述.

关键词：胰腺星形细胞胰腺癌

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胰腺星形细胞在胰腺纤维化中的研究进展

中国普外基础与临床杂志 2017年第5期24卷 638-643页

作者：龙丹周彦妮李鸿生王思琪李露张家碧冯莉李胜富四川大学华西医院卫计委移植工程与移植免疫重点实验室成都610041

目的综述胰腺星形细胞在胰腺纤维化中的研究进展,了解胰腺星形细胞的特性、活化及对胰腺纤维化作用的机制。方法查阅近年来国内外有关胰腺星形细胞及其在胰腺纤维化研究中的相关文献,对胰腺星形细胞及其与胰腺纤维化的关系及致病机制进... 详细信息

目的综述胰腺星形细胞在胰腺纤维化中的研究进展,了解胰腺星形细胞的特性、活化及对胰腺纤维化作用的机制。方法查阅近年来国内外有关胰腺星形细胞及其在胰腺纤维化研究中的相关文献,对胰腺星形细胞及其与胰腺纤维化的关系及致病机制进行综述。结果胰腺炎和终末期移植胰腺伴随的纤维化与胰腺星形细胞的活化密切相关,而胰腺星形细胞的活化对胞内外的一些信号通路分子等的影响和调节的详细机制还需要深一步探讨。结论研究胰腺星形细胞的活化机制能对胰腺纤维化的过程进一步了解,以便于下一步寻找干预的新靶点。

关键词：胰腺炎胰腺纤维化胰腺星形细胞细胞活化

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胰腺星形细胞与胰腺疾病

临床外科杂志 2008年第1期16卷 55-56页

作者：章文豪曹红勇时开网南京医科大学附属南京第一医院普外科 210006

胰腺星形细胞(pancreatic stellate cells,PSC)是一种与肝星状细胞结构和功能相似的细胞,在慢性胰腺炎及胰腺癌胰腺纤维化的过程起重要作用。本文就PSC的特性及其在胰腺炎症以及肿瘤中的作用、PSC的激活及其相关调控和靶向治疗作一综述。

关键词：胰腺星形细胞胰腺炎胰腺癌综述