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滇池食蚊鱼胚胎发育特点及与母体的营养联系

中国水产科学 2023年第7期30卷 831-840页

作者：任司琪陈国柱西南林业大学云南省高原湿地保护修复与生态服务重点实验室云南昆明650224 西南林业大学云南省滇池湿地生态系统国家定位观测研究站云南昆明650224 西南林业大学国家高原湿地研究中心/湿地学院云南昆明650224

卵胎生是鱼类为适应特定环境进化出的一种生殖策略。食蚊鱼(Gambusia affinis)是典型的卵胎生鱼类,厘清其卵胎生特征是否在入侵云贵高原过程中发生适应性演化的问题,有助于深入了解其种群快速扩散机制。本研究用常规解剖观察法、称重法... 详细信息

卵胎生是鱼类为适应特定环境进化出的一种生殖策略。食蚊鱼(Gambusia affinis)是典型的卵胎生鱼类,厘清其卵胎生特征是否在入侵云贵高原过程中发生适应性演化的问题,有助于深入了解其种群快速扩散机制。本研究用常规解剖观察法、称重法,针对滇池种群胚胎发育特点、干湿重变化及与母体营养联系问题开展研究。结果显示,滇池食蚊鱼胚胎发育过程依赖于卵黄营养供给,在产出前,卵黄仅微量残余,身体发育完善,基本保持了物种固有的卵胎生特点。胚胎湿重在胚胎发育过程中显著增加,但同时干重损失也十分明显(30.4%),营养指数(MI)为0.70,提示母体对胚胎没有受精后的特定营养供给,支持食蚊鱼是严格意义上的卵磷脂营养型(卵胎生)鱼类观点。其胚胎(仔鱼)出现小型化趋势,胚胎湿重、干重及初生体长等关键生态适应性性状明显低于已研究的其他低地种群,表现出对高原环境的适应性响应。这种响应是否有助于其向更高海拔的高原环境扩散值得进一步深入研究。

关键词：食蚊鱼卵胎生胚胎发育营养联系

外源基因对精子的影响及其在山羊早期胚胎中的表达

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遗传 2008年第11期30卷 1421-1426页

作者：叶华虎董罡袁菊芳隋丽华胡娟峰李瑞生刘彦马啸陈振文曾林军事医学科学院实验动物中心北京100071 北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097 首都医科大学实验动物部北京100069

在前期实验中发现,山羊精子可自发结合外源DNA,但结合能力在不同动物个体之间差异显著。挑选结合能力明显不同的3只公羊,进一步探讨了外源DNA对精子的影响及其在早期胚胎中的表达,结果发现:外源基因与精子共同孵育后,精子的活率、顶体... 详细信息

在前期实验中发现,山羊精子可自发结合外源DNA,但结合能力在不同动物个体之间差异显著。挑选结合能力明显不同的3只公羊,进一步探讨了外源DNA对精子的影响及其在早期胚胎中的表达,结果发现:外源基因与精子共同孵育后,精子的活率、顶体反应发生率和受精能力均呈下降态势,其降幅与精子的结合能力密切相关。利用与DNA共育后的精子进行体外受精,外源基因可被导入卵母细胞并在早期胚胎中获得表达,但胚胎阳性率因精子供体不同而差异显著(P胚胎,分别有16.2%(25/154)和5.3%(4/76)可检测到外源基因存在,但表达仅见于高结合能力供体生产的早期胚胎,表达率为6.5%(10/154);低结合能力供体生产的胚胎无外源基因。研究表明,在以精子载体方法生产转基因动物的实验过程中,筛选对DNA结合能力较强的精子供体是提高转基因效率的前提,但需要考虑外源DNA对精子受精能力的影响。

关键词：精子介导基因转移精子胚胎山羊

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抗冻蛋白对哺乳动物配子和胚胎的效应

中国病理生理杂志 2022年第2期38卷 350-357页

作者：李倩仪张欣宗朱伟杰国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室广东广州510600 广东省生殖科学研究所男科广东广州510600 广东省生殖医院人类精子库广东广州510600 暨南大学生命科学技术学院广东广州510632

细胞在冷冻-解冻过程不可避免遭受损伤,包括冷冻保护剂(cryoprotective agent,CPA)毒性、胞内外冰晶形成和重结晶产生的机械损伤、渗透压休克等负效应,导致细胞结构和功能损伤,甚至活力丧失[1-2]。故此,减少细胞冷冻损伤的相关研究一直... 详细信息

细胞在冷冻-解冻过程不可避免遭受损伤,包括冷冻保护剂(cryoprotective agent,CPA)毒性、胞内外冰晶形成和重结晶产生的机械损伤、渗透压休克等负效应,导致细胞结构和功能损伤,甚至活力丧失[1-2]。故此,减少细胞冷冻损伤的相关研究一直备受重视,其中CPA是减少细胞损伤的重要因素,改良CPA配方是一项重要内容。

关键词：抗冻蛋白胚胎卵母细胞精子

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光裸星虫胚胎和幼体发育的显微和超微结构

中国水产科学 2018年第5期25卷 976-987页

作者：张家炜郝瑞娟王庆恒杨创业杜晓东陈振国广东海洋大学水产学院广东湛江524025 湛江市碧海湾水产科技有限公司广东湛江524382

为探究光裸星虫(Sipunculus nudus)发育形态学特征,利用光镜和扫描电镜技术观察了光裸星虫胚胎和幼体发育的结构变化。结果表明:(1)光裸星虫胚胎及幼体发育经历卵裂、囊胚、原肠胚、担轮幼虫、海球幼体、匍匐幼体等主要阶段,卵裂、囊胚... 详细信息

为探究光裸星虫(Sipunculus nudus)发育形态学特征,利用光镜和扫描电镜技术观察了光裸星虫胚胎和幼体发育的结构变化。结果表明:(1)光裸星虫胚胎及幼体发育经历卵裂、囊胚、原肠胚、担轮幼虫、海球幼体、匍匐幼体等主要阶段,卵裂、囊胚、原肠胚和担轮幼虫均在卵膜内发育;海球幼体出膜时,卵膜脱落,不发育为表皮。(2)水温为30~31.5℃条件下,卵子受精30 min后开始卵裂,2 h后形成原肠胚,4 h后发育为担轮幼虫,24 h后出膜成为海球幼体,8~9 d后附着变态为匍匐幼体。(3)光裸星虫为典型的螺旋式完全卵裂。担轮幼虫可做旋转式游动,胚体表面密布纤毛,其中,体前端具有一束较长的顶纤毛;纤毛通过卵膜孔中央伸出体外,分为普通纤毛和勺状纤毛两种类型。胚体形成眼点、肾管等器官。(4)海球幼体游动迅速,摄食浮游植物。口前纤毛环较短,头部具有眼点和神经节;口后纤毛环较长,纤毛类型也分为普通纤毛和勺状纤毛两种;随发育进行,体壁肌肉束不断增强,形成方格状纹理;胃部逐渐前移,肠道不断延长,发生螺旋,在躯干部前段形成肛门。(5)匍匐幼体在底质表面爬行,吞食砂砾;体表具有角质层,体壁肌肉发达;身体前端形成片状突起,将发育成触手;吻部具有规则排列的乳突;身体末端中央外凸形成球形尾器;收吻肌、腹神经索、固肠肌等器官或组织明显。研究结果可为光裸星虫生殖调控与人工繁育研究提供理论参考。

关键词：光裸星虫胚胎幼体发育形态结构

胚胎期脂多糖暴露可通过钟样受体4引起出生后多巴胺能神经元减少

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解剖学报 2012年第1期43卷 28-33页

作者：朱元贵陈晓春陈志哲林兆东福建医科大学附属协和医院福建省老年医学研究所福州350001 Department of Pharmacology Rush University Medical Center 福建省血液病研究所福州350001

目的观察钟样受体4(TLR-4)在胚胎期脂多糖(LPS)暴露引起的出生后个体脑内多巴胺(DA)能神经元减少中的作用。方法 TLR-4突变型C57BL/10ScNCr小鼠和野生型C57BL/10ScSn小鼠各15只,在妊娠期第10.5天给小鼠腹腔注射LPS或肽聚糖(PDG),出生后... 详细信息

目的观察钟样受体4(TLR-4)在胚胎期脂多糖(LPS)暴露引起的出生后个体脑内多巴胺(DA)能神经元减少中的作用。方法 TLR-4突变型C57BL/10ScNCr小鼠和野生型C57BL/10ScSn小鼠各15只,在妊娠期第10.5天给小鼠腹腔注射LPS或肽聚糖(PDG),出生后4月龄时收集大脑组织标本(n=5),通过免疫组织化学染色和体视学技术定量DA能神经元和小胶质细胞数量,高效液相色谱法测定DA及其代谢物水平,免疫荧光法结合流式细胞术测定TNF-α和IL-1β蛋白水平。结果出生前接触过LPS的4月龄C57BL/10ScSn小鼠,与注射生理盐水的对照小鼠比较,黑质DA能神经元减少(25.3±2.1)%,纹状体DA含量降低(33.5±5.0)%,黑质小胶质细胞数量增加(294±24)%,黑质和纹状体TNF-α和IL-1β蛋白水平也明显增高;但是出生前接触过LPS的TLR-4突变型C57BL/10ScNCr小鼠脑内无相应变化。出生前接触过TLR-2配体PDG的4月龄C57BL/10ScNCr和C57BL/10ScSn小鼠均出现脑内DA能神经元减少和免疫炎症改变。结论胚胎期接触LPS可通过TLR-4引起出生后个体脑内DA能神经元减少。

关键词：脂多糖钟样受体4 帕金森病胚胎免疫组织化学高效液相色谱法小鼠

黏着斑激酶诱导小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化的作用及机制

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中国组织工程研究 2021年第2期25卷 165-171页

作者：李震黄永辉孙继芾孙海涛江苏大学附属医院江苏省镇江市212000

背景:黏着斑激酶被作为骨组织工程中“生物材料/支架”“种子细胞”“生长因子”3个要素的桥梁分子,研究其在相关种子细胞成骨分化过程中的作用及机制,对于骨组织工程的发展及应用尤为重要。目的:探讨黏着斑激酶在诱导永生化小鼠胚胎成... 详细信息

背景:黏着斑激酶被作为骨组织工程中“生物材料/支架”“种子细胞”“生长因子”3个要素的桥梁分子,研究其在相关种子细胞成骨分化过程中的作用及机制,对于骨组织工程的发展及应用尤为重要。目的:探讨黏着斑激酶在诱导永生化小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化过程中的作用及机制。方法:在相同的诱导条件下诱导野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化,在相同的诱导条件下诱导经磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂和细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化。在显微镜下观察不同诱导时期细胞形态改变,蛋白免疫印迹技术检测早期成骨相关蛋白表达水平及相应的磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶磷酸化水平,Real-time PCR检测成骨相关基因转录水平,最后在成骨诱导3周后对诱导细胞进行茜素红钙结节染色。结果与结论:①相同的诱导条件下黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞的成骨效应较保留斑激酶的小鼠胚胎成纤维细胞组明显下降;②加入磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;③加入细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;④提示静默黏着斑激酶表达可通过降低磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶(1/2)磷酸化水平,降低成骨相关蛋白表达水平,进而抑制小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化。

关键词：黏着斑激酶永生化小鼠胚胎成纤维细胞细胞外调节蛋白激酶成骨分化

艾美尔球虫防治高原鼠兔实验及对其胚胎发育的影响

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兽类学报 2012年第3期32卷 221-227页

作者：杜寅曹伊凡景增春何慧边疆晖中国科学院西北高原生物研究所高原生物适应与进化重点实验室中国科学院研究生院

高原鼠兔是青藏高原地区危害高寒草甸植被的主要有害小哺乳动物。生物控制为有害动物防治的主要发展方向,但存在防治效果见效慢的缺点。艾美尔球虫是高原鼠兔肠道内的主要寄生物,并对宿主具有专一性寄生的特点。为将艾美尔球虫研发成新... 详细信息

高原鼠兔是青藏高原地区危害高寒草甸植被的主要有害小哺乳动物。生物控制为有害动物防治的主要发展方向,但存在防治效果见效慢的缺点。艾美尔球虫是高原鼠兔肠道内的主要寄生物,并对宿主具有专一性寄生的特点。为将艾美尔球虫研发成新型的高原鼠兔无公害生物防治制剂,本文测定了球虫毒饵对高原鼠兔致死率并在野外进行了灭鼠实验。结果表明,添加增效剂的300万球虫毒饵在室内可导致63.6%的成年个体死亡,在野外可导致54.9%成体和71.0%幼体死亡。灭鼠后残存高原鼠兔的球虫感染率和感染强度显著大于对照个体,且妊娠雌体的胚胎重较对照显著降低。上述结果说明,艾美尔球虫防治高原鼠兔具有较好的速效性,并能影响残存妊娠雌体的胚胎发育。

关键词：艾美尔球虫生物防治胚胎高原鼠兔

类胰岛素生长因子(IGFs)在斜带石斑鱼胚胎及卵巢的表达

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中山大学学报（自然科学版） 2019年第5期58卷 94-103页

作者：杨慧荣王庆李水生赵会宏何思美薛华艺吴沅沅杨炎张勇华南农业大学海洋学院广东广州510642 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

生殖和生长是生物体最基本的特征,两者既密切相关又相互区别,IGFs是生长轴和生殖轴相交联的关键因子。自IGFs在鱼类卵巢的表达被发现后,它们在卵巢的功能开始备受关注,大量的研究表明它们参与了鱼类的性腺发育和成熟进程。氨基酸序列同... 详细信息

生殖和生长是生物体最基本的特征,两者既密切相关又相互区别,IGFs是生长轴和生殖轴相交联的关键因子。自IGFs在鱼类卵巢的表达被发现后,它们在卵巢的功能开始备受关注,大量的研究表明它们参与了鱼类的性腺发育和成熟进程。氨基酸序列同源性比对表明:IGF-3具有IGF家族成员典型的结构特征,相对IGF-1和IGF-2基因的高保守性,IGF-3基因保守性差。本研究用半定量和荧光定量PCR技术检测了IGF-1、IGF-2和IGF-3mRNA在斜带石斑鱼胚胎发育及人工诱导性逆转过程中的表达模式。对胚胎发育的半定量结果显示:IGF-1在斜带石斑鱼胚胎发育过程中仅有微弱表达,IGF-2自桑椹期开始表达,在桑椹期后期呈现持续高水平的表达态势,预示IGF-2对胚胎发育有着重要作用;IGF-3自未受精卵开始,随着胚胎发育表达水平不断提高,但表达量不如IGF-2丰富,暗示了IGF-3可能在胚胎发育进程中扮演某种角色。利用甲基睾丸酮MT埋植鱼体腹腔,诱导性逆转,荧光定量PCR结果显示:IGF-1和IGF-3在斜带石斑鱼性逆转过程中的表达量都显著性降低,而IGF-2却没有显著变化,表明不同IGFs因子在雌性和雄性的生理功能存在性别差异。

关键词： IGF-1 IGF-2 IGF-3 斜带石斑鱼胚胎卵巢表达分析

CdSe/ZnS量子点对斑马鱼胚胎发育的毒性效应

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环境科学 2015年第2期36卷 719-726页

作者：陈幕飞黄承志蒲德永郑朝依袁开米金星星张耀光金丽西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室重庆400715 发光与实时分析教育部重点实验室重庆400715

本研究以模式生物斑马鱼(Danio rerio)为对象,观察在不同浓度Cd Se/Zn S量子点(Cd Se/Zn S QDs)暴露下,斑马鱼胚胎形态发育、氧化应激以及金属硫蛋白MT基因和应激蛋白Hsp70基因表达变化情况.结果表明,Cd Se/Zn S QDs对斑马鱼胚胎72 hpf(... 详细信息

本研究以模式生物斑马鱼(Danio rerio)为对象,观察在不同浓度Cd Se/Zn S量子点(Cd Se/Zn S QDs)暴露下,斑马鱼胚胎形态发育、氧化应激以及金属硫蛋白MT基因和应激蛋白Hsp70基因表达变化情况.结果表明,Cd Se/Zn S QDs对斑马鱼胚胎72 hpf(hours post fertilization)的半致畸效应浓度(EC50)为316.994 nmol·***暴露影响了斑马鱼胚胎的死亡率、畸形率、孵化率、自主运动频率和体长,以及引起胚胎卵凝集,心包囊肿,脊椎弯曲等多种毒性效应;同时导致斑马鱼体内超氧化物歧化酶(SOD)活性变化以及丙二醛(MDA)含量增加.QDs还诱导斑马鱼MT基因和Hsp70基因表达上调,斑马鱼机体产生一系列自我保护反应来减轻QDs所造成的伤害.这表明:Cd Se/Zn S QDs对斑马鱼胚胎产生了毒性效应,其毒性可能与其核心Cd2+的释放、粒径大小以及氧化应激有关.

关键词： CdSe/ZnS量子点斑马鱼胚胎氧化应激基因表达发育毒性