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阻断Kupffer细胞IRE1-XBP1通路对大鼠肝移植排斥反应的影响

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第三军医大学学报 2016年第22期38卷 2431-2437页

作者：王润芝吴皓刘一鸣曹丁吴涯昆李金政龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010

目的探讨阻断Kupffer细胞IRE-XBP1通路对大鼠原位肝移植排斥反应的作用。方法术前用Gd Cl3处理或未处理建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,未处理大鼠随机数字法分为XBP1-shRNA组(A组),Scrambled-shRNA组(B组),PBS组(C组);处理大鼠随... 详细信息

目的探讨阻断Kupffer细胞IRE-XBP1通路对大鼠原位肝移植排斥反应的作用。方法术前用Gd Cl3处理或未处理建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,未处理大鼠随机数字法分为XBP1-shRNA组(A组),Scrambled-shRNA组(B组),PBS组(C组);处理大鼠随机分为Gd Cl3+XBP1-shRNA组(D组),Gd Cl3+Scrambled-shRNA组(E组),Gd Cl3+PBS组(F组)。未处理组术后检测血清ALT、AST、IFN-γ、IL-10、IL-17的表达水平;RT-PCR检测T-bet、RORγt、IFN-γ、IL-17及IL-10mRNA水平;Western blot检测CD86、CD206、IFN-γ、IL-17及IL-10蛋白表达水平,HE染色观察肝组织结构,根据Banff方案进行RAI评分,各组剩余大鼠观察术后生存率。处理组术后检测IFN-γ、IL-17及IL-10 mRNA以及蛋白表达水平,HE染色观察肝组织结构。结果在未处理组中,与B、C组比较,A组各时间点肝功能指标ALT、AST明显下降(P10明显受到抑制(P10的表达水平则呈明显上升趋势(P0.05);A组RAI评分(3.83±0.14),明显低于B、C组RAI评分(9.13±0.20)、(8.95±0.26)(P17、IL-10 mRNA和蛋白表达情况以及病理组织AcR程度比较无统计学上的差异(P>0.05)。结论阻断IRE1-XBP1通路促进了KCs的M1型极化,引起Th1/Th17向Th2/Treg的免疫偏移,在一定程度上减轻了移植肝脏急性排斥反应的程度。

关键词：肌醇酶1 X盒蛋白连接蛋白1 Kupffer细胞肝移植急性排斥反应

茵陈蒿汤对梗阻性黄疸大鼠肝细胞中IRE1α蛋白表达的影响

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世界华人消化杂志 2016年第16期24卷 2520-2524页

作者：宋仕军李忠廉张西波天津医科大学研究生院天津市300070 天津市南开医院肝胆胰外科天津市300100

目的:研究茵陈蒿汤血清对梗阻性黄疸大鼠肝细胞中肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme-1-α,IRE1α)蛋白表达的影响.方法:通过结扎SD大鼠胆总管建立梗阻性黄疸模型,分离梗阻性黄疸大鼠原代肝细胞进行体外培养.通过喂食SD大鼠茵陈蒿汤... 详细信息

目的:研究茵陈蒿汤血清对梗阻性黄疸大鼠肝细胞中肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme-1-α,IRE1α)蛋白表达的影响.方法:通过结扎SD大鼠胆总管建立梗阻性黄疸模型,分离梗阻性黄疸大鼠原代肝细胞进行体外培养.通过喂食SD大鼠茵陈蒿汤制备相应的含药血清.处理组(B组)以含药血清培养基培养大鼠原代肝细胞,对照组(A组)以不含药的常规培养基培养大鼠原代肝细胞.分别测定细胞中IRE1α蛋白表达情况及培养液中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)含量.结果:通过比较对照组(A组)各时间点与处理组(B组)的蛋白和转氨酶含量,B组在I R E1α蛋白表达(I R E1α表达量:6 h 1.85±0.04 vs 1.58±0.04,24 h 1.95±0.02 vs 1.60±0.03,48 h 2.22±0.13 vs 1.99±0.10,P<0.05)及ALT、AST测定值均降低(AST测定值:6 h17.23 U/L±3.01 U/L vs 13.13 U/L±2.41 U/L,24 h 19.33 U/L±3.01 U/L vs 15.67 U/L±2.36U/L,48 h 24.40 U/L±3.93 U/L vs 19.18 U/L±1.65 U/L,P<0.05;ALT测定值:6 h 17.23U/L±3.01 U/L vs 13.13 U/L±2.41 U/L,24 h19.33 U/L±3.01 U/L vs 15.67 U/L±2.36 U/L,48 h 24.40 U/L±3.93 U/L vs 19.18 U/L±1.65U/L,P<0.05),差异有统计学意义.结论:血清药理学研究方法可以用于茵陈蒿汤的药效评价,经IRE1α介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)可能是茵陈蒿汤对梗阻性黄疸大鼠肝细胞保护作用的一条重要通路.

关键词：茵陈蒿汤血清药理学肌醇酶1 内质网应激梗阻性黄疸

阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织中自噬及血管新生的影响

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郑州大学学报（医学版） 2016年第1期51卷 114-118页

作者：王金兰乐婷闫莹莹刘海燕郑州大学第二附属医院神经内科郑州450014

目的:观察阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织中自噬及血管新生的影响。方法:雄性SD大鼠63只,随机分为假手术组、模型组、他汀组,每组21只。模型组和他汀组采用大脑中动脉栓塞法造模,假手术组不栓塞。术前1周,他汀组给予阿托伐他汀钙片... 详细信息

目的:观察阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织中自噬及血管新生的影响。方法:雄性SD大鼠63只,随机分为假手术组、模型组、他汀组,每组21只。模型组和他汀组采用大脑中动脉栓塞法造模,假手术组不栓塞。术前1周,他汀组给予阿托伐他汀钙片4 mg/(kg·d)灌胃,其余两组给予等量生理盐水灌胃。术后24 h处死大鼠,TTC染色观察脑梗死面积,免疫组化法检测脑组织中CD105、IRE1的表达,RT-PCR检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA,Western blot法检测自噬蛋白LC3-Ⅱ。结果:与假手术组相比,模型组及他汀组脑组织皮层及皮层下有明显梗死灶,缺血半暗带区CD105、IRE1、VEGF mRNA、LC3-Ⅱ表达升高(P<0.05);他汀组上述变化较模型组更显著(P<0.05)。模型组、他汀组脑组织中VEGF mRNA与LC3-Ⅱ表达有明显线性正相关关系(r=0.837、0.850,P均<0.05)。结论:阿托伐他汀可通过增强自噬,促进局灶性脑缺血血管新生。

关键词：阿托伐他汀局灶性脑缺血大鼠自噬肌醇酶1 LC3-Ⅱ 血管新生

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环境与职业医学 2015年第4期32卷 355-357页

作者：郭肖非王伟肖倩河北联合大学冀唐学院医学实验中心河北063000 河北联合大学曹妃甸医院河北063000 河北联合大学冀唐学院临床医学院第一部河北063000

[目的]通过抑制肿瘤坏死因子相关受体2(TNFR2)后观察纳米二氧化硅粉尘对肺泡巨噬细胞的损伤程度,并进一步探索由TNFR2参与的肌醇酶1(IRE1)-C-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路在介导肺泡巨噬细胞凋亡中的作用。[方法]将NR8383.1型大鼠肺泡巨... 详细信息

[目的]通过抑制肿瘤坏死因子相关受体2(TNFR2)后观察纳米二氧化硅粉尘对肺泡巨噬细胞的损伤程度,并进一步探索由TNFR2参与的肌醇酶1(IRE1)-C-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路在介导肺泡巨噬细胞凋亡中的作用。[方法]将NR8383.1型大鼠肺泡巨噬细胞分为空白对照组、二氧化硅组(50 mg/m L)和抗TNFR2组(在二氧化硅组基础上添加10μg/m L anti-TNFR2抗体),同时每组设立3个平行样,培养24 h后,检测各组肺泡巨噬细胞凋亡水平,IRE1-JNK信号通路相关蛋白(TNFR2、凋亡信号调控激酶1、JNK、激活蛋白1、Caspase12)含量。[结果]空白对照组肺泡巨噬细胞凋亡水平,TNFR2、凋亡信号调控激酶1、JNK、激活蛋白1及Caspase12含量均低于二氧化硅组,抗TNFR2处理后上述指标均较二氧化硅组降低,但仍较空白对照组高。[结论]TNFR2可能在JNK-IRE1信号通路介导的肺泡巨噬细胞凋亡中发挥着重要作用。

关键词：肿瘤坏死因子相关受体2 C-Jun氨基端激酶肌醇酶1 肺泡巨噬细胞凋亡大鼠