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耐药金黄色葡萄球菌对食品加工相关压力的耐受能力及其机制研究

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耐药金黄色葡萄球菌对食品加工相关压力的耐受能力及其机制研究

作者：马焱娜浙江大学

学位级别：硕士

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,***）是常见的食源性致病菌之一,广泛存在于肉禽蛋奶等营养丰富的食品中,能够在适当的条件下产生肠毒素引发食物中毒。在临床上,感染金黄色葡萄球菌可能会引发肺炎、心包炎等多种炎症。为了治疗... 详细信息

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,***）是常见的食源性致病菌之一,广泛存在于肉禽蛋奶等营养丰富的食品中,能够在适当的条件下产生肠毒素引发食物中毒。在临床上,感染金黄色葡萄球菌可能会引发肺炎、心包炎等多种炎症。为了治疗此类由细菌感染所引发的疾病,各类抗生素被发明出来并且广泛地应用于人、动物甚至植物体之中。但是,随着抗生素在多个领域中大规模、不合理的使用,越来越多的细菌对现有的很多种抗生素产生了耐药性。耐药金黄色葡萄球菌是最重要的耐药细菌之一,从不同食品中检测出耐药金黄色葡萄球菌的报道也越来越多。有研究发现,耐药细菌可能会对食品加工过程中的一些常见的压力具有更高的耐受能力,这可能会使得食品加工过程中的杀菌不彻底,导致食物中有耐药细菌的残留。因此,本文以从食品中分离得到的金黄色葡萄球菌为研究对象,展开食源性耐药金黄色葡萄球菌对食品加工相关压力的耐受能力及其机制的探究,主要的研究内容和结果如下:1.食源性金黄色葡萄球菌的耐药性研究采用纸片扩散法（Kirby-Bauer disk diffusion method,K-B法）和微量肉汤稀释法来检测从鸡肉中分离得到的6株金黄色葡萄球菌的耐药表型。结果表明有3株金黄色葡萄球菌为敏感型细菌,对实验中所用的10种抗生素均没有表现出耐药性。而另外3株为耐药型细菌,对这10种抗生素中的大部分都具有耐药性。对比耐药基因的检测结果可以得出,这几株金黄色葡萄球菌的耐药表型和耐药基因型的结果并不完全匹配。表型敏感菌中可能检测出耐药基因,而耐药细菌中可能并没有携带与该种抗生素相对应的耐药基因。2.耐药型和敏感型金黄色葡萄球菌对食品加工相关压力耐受能力的比较在得到了金黄色葡萄球菌基本耐药信息的基础上,研究了敏感型和耐药型金黄色葡萄球菌对酸（HCl）、热和渗透压（Na Cl）这三种食品加工过程中的常见压力的耐受能力,分析了细菌的耐药性是否会诱导其产生对其他压力更高的耐受能力。实验结果表明,耐药型金黄色葡萄球菌在酸和渗透压的胁迫下的存活率高于敏感型细菌,并且存活率的差异在p H=2和氯化钠浓度为30%的条件下最为明显。但是在热胁迫下,两者的耐受能力并没有表现出明显的差异。3.耐药金黄色葡萄球菌对食品加工相关压力耐受机制的初步探究本研究从细胞的形态结构、细胞膜破损情况和细胞内酶活性水平这几个方面,针对耐药金黄色葡萄球菌对酸、热和渗透压的耐受机制进行了初步探究。研究发现在酸和渗透压胁迫下,耐药细菌中的TTC-脱氢酶相对活性明显高于敏感细菌,并且在扫描电镜和透射电镜下呈现的表面形态和内部结构也更完整和清晰。敏感菌的细胞膜破损情况更为严重,表现为激光扫描共聚焦显微镜视野下,发出红色荧光信号的膜破损细胞所占比例较大。而在热胁迫下,耐药菌和敏感菌的上述指标均没有明显差异。研究发现,在酸或者渗透压处理后,耐药金黄色葡萄球菌的菌体形态和细胞内部的结构都更为完整,细胞内的代谢活动比敏感细菌更为活跃,细胞膜破损情况也不如敏感细菌严重,因此可以帮助耐药细菌抵抗不良的环境。总体而言,本论文以从食品中分离得到的金黄色葡萄球菌为研究对象,检测其耐药表型和耐药基因型。在得到了金黄色葡萄球菌基本耐药信息的基础上,研究了敏感型和耐药型金黄色葡萄球菌对酸、热和渗透压这三种食品加工过程中的常见加工逆境的耐受能力,并且进一步对耐药金黄色葡萄球菌对食品加工相关逆境的耐受机制进行了初步探究。

关键词：耐药金黄色葡萄球菌食品加工压力酸热渗透压耐受机制

黄连提取物对耐药金黄色葡萄球菌的耐药抑制机理初探

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中药材 2011年第10期34卷 1575-1579页

作者：谭榀新刘湘新李俊超贺建华湖南农业大学食品科技学院湖南长沙410128 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 湖南农业大学动物科技学院湖南长沙410128

目的:探讨黄连提取物对耐药金黄色葡萄球菌的耐药抑制机理。方法:采用荧光分光光度法、SDS-PAGE电泳法和半自动生化仪器分别测定了黄连提取物作用前后耐药性金黄色葡萄球菌体内的药物蓄积量、细菌蛋白电泳图谱及细菌胞外某些酶活性。结... 详细信息

目的:探讨黄连提取物对耐药金黄色葡萄球菌的耐药抑制机理。方法:采用荧光分光光度法、SDS-PAGE电泳法和半自动生化仪器分别测定了黄连提取物作用前后耐药性金黄色葡萄球菌体内的药物蓄积量、细菌蛋白电泳图谱及细菌胞外某些酶活性。结果:黄连提取物处理后菌体内诺氟沙星蓄积浓度显著高于空白对照组(P耐药金黄色葡萄球菌在35～38 kDa分子量范围内的某些蛋白质恢复表达;黄连提取物对细菌胞外酶活性无影响(P>0.05)。结论:黄连提取物对耐药金葡菌的耐药抑制作用是多种化学成分、多靶位共同作用的结果,但确切的分子水平机理还有待进一步的深入研究。

关键词：黄连提取物耐药金黄色葡萄球菌耐药抑制机理

耐药金黄色葡萄球菌医院感染的临床特征及危险因素分析

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微生物与感染 2023年第6期18卷 331-337页

作者：尚伟蔡丽娜代稳孙振威陈北方中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院检验输血医学科河南郑州450042 漯河医学高等专科学校基础医学部河南漯河462000

本研究旨在分析某医院两年来引起医院感染的耐药金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)体外药敏试验结果、耐药类型及感染危险因素,探讨其在临床控制耐药菌的发生、医院感染和合理应用抗菌药物方面的参考价值。分析2020—2021年度... 详细信息

本研究旨在分析某医院两年来引起医院感染的耐药金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)体外药敏试验结果、耐药类型及感染危险因素,探讨其在临床控制耐药菌的发生、医院感染和合理应用抗菌药物方面的参考价值。分析2020—2021年度从本院医院感染患者体内分离的耐药金黄色葡萄球菌的药敏试验结果,并采用单因素和Logistic回归分析探讨耐药金黄色葡萄球菌感染的独立危险因素。结果显示,多重耐药的金黄色葡萄球菌菌株占49.7%(69/139),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)菌株占41.0%(57/139),产β-内酰胺酶(BETA-LACT)菌株占72.7%(101/139),克林霉素诱导型(INDUC-CLI)耐药菌株占15.1%(21/139)。金黄色葡萄球菌主要分离自呼吸道和伤口感染部位(36.0%和48.9%),其对多种抗菌药物的耐药率较高,对万古霉素和替加环素敏感率达100%,对利奈唑胺和氯霉素敏感率分别为99.28%和93.85%。回归分析显示,侵入性操作的OR值为3.184,P金黄色葡萄球菌主要从伤口部位样本分离,临床多重耐药细菌占比较高,多数为耐甲氧西林和产β-内酰胺酶菌株,临床常用抗菌药物的耐药率较高;侵入性操作是耐药***感染的独立危险因素。

关键词：耐药金黄色葡萄球菌医院感染临床特征药敏试验危险因素

头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌抗菌作用研究

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中成药 2014年第9期36卷 1817-1821页

作者：刘瑜新宋晓勇康文艺张永州刘强王培卿河南大学淮河医院河南开封475001 河南大学中药研究所河南开封475004

目的研究头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法采用纸片扩散法测定抑菌圈直径,微量肉汤稀释法测定各实验菌株的最低抑菌质量浓度（MIC）和半数抑制质量浓度（IC50值）,液体转染法测定最低杀菌质量浓度（MBC）。结果头花蓼提... 详细信息

目的研究头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法采用纸片扩散法测定抑菌圈直径,微量肉汤稀释法测定各实验菌株的最低抑菌质量浓度（MIC）和半数抑制质量浓度（IC50值）,液体转染法测定最低杀菌质量浓度（MBC）。结果头花蓼提取物对各多重耐药金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,60%乙醇提取物对各耐药菌的抑菌圈明显大于水提物,并大于没食子酸。60%乙醇提取物与水提物对各耐药菌株的MIC值范围为0.78~3.12 mg/mL和IC50值范围为0.46~1.81 mg/mL,均小于没食子酸的MIC值和IC50值。60%乙醇提取物MBC值范围为1.56~6.25 mg/mL,小于水提物和没食子酸。结论头花蓼乙醇提取物体外抗多重耐药金黄色葡萄球菌作用优于没食子酸,提示头花蓼除了没食子酸外还存在其他抗菌成分。

关键词：头花蓼耐药金黄色葡萄球菌抗菌活性 MIC MBC IC50

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因的检测及其与肺炎的关系

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中华传染病杂志 2008年第8期26卷 495-498页

作者：王丽珍张天托黄静朱家馨南方医科大学珠江医院呼吸内科广州510230 中山大学第三附属医院呼吸内科

近40多年来，人类一直被甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）感染所困扰，MRSA不但在医院内流行，而且逐渐成为社区感染的重要病原菌之一。金黄色葡萄球菌能产生多种与化脓性感染相关的致病毒素，导致患者病情加重，其中杀白细胞素（PV... 详细信息

近40多年来，人类一直被甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）感染所困扰，MRSA不但在医院内流行，而且逐渐成为社区感染的重要病原菌之一。金黄色葡萄球菌能产生多种与化脓性感染相关的致病毒素，导致患者病情加重，其中杀白细胞素（PVL）是引起坏死的细胞毒素，可破坏WBC，引起组织坏死，与严重肺炎和脓肿形成有关，病死率极高。本研究分析近2年从肺炎患者下呼吸道标本中所分离的MRSA菌株携带PVL基因的检出情况，了解产PVL毒素的MRSA所致肺炎的危险因素和临床特点，以指导临床有效防治产PVL毒素的MRSA所致的肺部感染。

关键词：耐药金黄色葡萄球菌细胞素基因甲氧西林肺炎 MRSA菌株细胞毒素检测下呼吸道标本

浙贝母对呼吸系统耐药金黄色葡萄球菌逆转作用的临床研究

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北京中医药大学学报 2001年第5期24卷 51-52页

作者：李仝胡凯文陈信义孙颖立李英林北京中医药大学东直门医院血液科北京100700

细菌对抗生素的多重耐药性(MAR)已经成为临床治疗感染性疾病的巨大障碍,严重影响着感染性疾病的治疗效果.我们继往的实验研究证明,浙贝母有效成分贝母素甲的盐酸盐在一定浓度下,对耐药金黄色葡萄球菌(简称金葡球菌)具有较强的逆转作用,... 详细信息

细菌对抗生素的多重耐药性(MAR)已经成为临床治疗感染性疾病的巨大障碍,严重影响着感染性疾病的治疗效果.我们继往的实验研究证明,浙贝母有效成分贝母素甲的盐酸盐在一定浓度下,对耐药金黄色葡萄球菌(简称金葡球菌)具有较强的逆转作用,主要通过抑制细菌细胞膜上主动外排泵来发挥作用.为观察浙贝母对耐药金葡球菌逆转作用的临床疗效,我们自1997年 6月～1999年4月用环丙沙星加浙贝母散剂治疗慢性支气管炎急性发作期病例30例(均经细菌学检验证实为耐环丙沙星的金葡球菌感染所致),并与环丙沙星治疗组进行对比观察,收到较好疗效,现报告如下:

关键词：耐药金黄色葡萄球菌浙贝母增敏作用临床研究呼吸系统治疗

白藜芦醇、槲皮素异构体联用抗生素对耐药金黄色葡萄球菌的抑制作用

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食品工业科技 2019年

作者：魏星郑兰葛彬刘靳波西南医科大学附属医院检验科郫都区人民医院检验科

为探究联合用药对耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制作用,将白藜芦醇(RES)、槲皮素异构体(MOR)与不同抑菌机理的抗生素(红霉素、苯唑西林和环丙沙星)进行联合用药,并探究了联合用药的细胞毒性。结果表明,RES、MOR与红霉素联用不能增强对M... 详细信息

为探究联合用药对耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制作用,将白藜芦醇(RES)、槲皮素异构体(MOR)与不同抑菌机理的抗生素(红霉素、苯唑西林和环丙沙星)进行联合用药,并探究了联合用药的细胞毒性。结果表明,RES、MOR与红霉素联用不能增强对MRSA的抑制作用,表现为无关或药物拮抗效应;而与苯唑西林或环丙沙星联用时,对MRSA的抑制作用显著增强(p<0.05),抗生素用量减少50%～75%,其中最佳抑菌组合为环丙沙星联用MOR(25 mg/L+750 mg/L),抑菌指数(FIC)为0.5,表现为药物协同作用。细胞毒性实验结果表明,RES联用抗生素不会增加细胞毒性,而MOR联用苯唑西林或环丙沙星则呈现微弱细胞毒性增加,细胞存活率下降7.2%～8.9%。因此,RES、MOR可作为苯唑西林和环丙沙星的抗菌增强剂,为其细胞毒性和抑菌机理的进一步研究奠定了基础。

关键词：耐药金黄色葡萄球菌抗生素联合用药抑制作用

柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌抑菌作用机理的研究

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中国消毒学杂志 2008年第6期25卷 597-600页

作者：张纬徐建设孙晓明钟启平张清敏天津医科大学生化教研室天津300070 天津医科大学微生物教研室

目的观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其抑菌作用机理。方法采用纸片法和稀释法进行抑菌试验;采用电泳法和生化检验法观察抑菌作用机理。结果柠檬提取物原液对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环>30 ... 详细信息

目的观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其抑菌作用机理。方法采用纸片法和稀释法进行抑菌试验;采用电泳法和生化检验法观察抑菌作用机理。结果柠檬提取物原液对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环>30 mm,最小抑菌浓度为柠檬提取物1∶6400稀释度。在不同浓度凝胶电泳图谱中,耐药金黄色葡萄球菌经柠檬提取物作用后发生较明显变化的蛋白质条带共有5条,说明有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;没有观察到柠檬提取物作用后细菌酶活性的改变。结论柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,该提取物作用后的耐药金黄色葡萄球菌菌体蛋白合成量有明显改变。

关键词：柠檬提取物耐药金黄色葡萄球菌抑菌作用机理电泳法纸片法

神经外科重症监护室内耐药金黄色葡萄球菌感染16例临床分析

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中国临床神经外科杂志 2008年第1期13卷 45-46页

作者：周兆祥罗荣武彭虎邱山武田强刘苏鲁彩红浏阳市中医院神经外科湖南浏阳410300

目的探讨和总结神经外科重症监护室(NICU)内耐药金色葡萄球菌(MRSA)的预防和对感染患者的治疗措施。方法回顾性分析2006年11月至2007年3月我院对NICU内MRSA感染患者的处理经过。结果通过落实预防和治疗措施后,MRSA感染和交叉感染得到有... 详细信息

目的探讨和总结神经外科重症监护室(NICU)内耐药金色葡萄球菌(MRSA)的预防和对感染患者的治疗措施。方法回顾性分析2006年11月至2007年3月我院对NICU内MRSA感染患者的处理经过。结果通过落实预防和治疗措施后,MRSA感染和交叉感染得到有效控制,减少了患者的并发症,降低了医疗费用,提高了医疗护理质量。结论通过多种途径、多种方法的联合应用,MRSA感染可以得到有效控制的,但医护人员需格外重视。

关键词：耐药金黄色葡萄球菌交叉感染 NICU