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老年性痴呆症患者海马老年斑三维重构

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第5期35卷 449-453页

作者：叶伟周江宁胡祥友刘建武何军辉唐孝威浙江大学理学院物理系浙江大学生物医学工程与仪器科学学院临床工程研究所安徽医科大学第一附属医院安徽省老年病研究所浙江大学理学院物理系杭州310027 合肥230022

老年斑是老年性痴呆 (AD)的主要病理特征之一。β 淀粉样蛋白 (Aβ)在老年斑中的积聚与AD发病关系密切。因此 ,如何抑制老年斑内Aβ的积聚和促进Aβ纤维的解聚对于治疗和预防AD有十分重要的意义。通过免疫组织化学染色、MATLAB软件图像... 详细信息

老年斑是老年性痴呆 (AD)的主要病理特征之一。β 淀粉样蛋白 (Aβ)在老年斑中的积聚与AD发病关系密切。因此 ,如何抑制老年斑内Aβ的积聚和促进Aβ纤维的解聚对于治疗和预防AD有十分重要的意义。通过免疫组织化学染色、MATLAB软件图像处理、AVS重构等技术构建了老年斑三维结构。实验发现海马部位的弥散斑和经典斑具有孔状结构 ;弥散斑无明显核心结构 ,密度分布趋势由中心向周围递减 ;经典斑中心Aβ沉积最致密 ,周围Aβ沉积最少 ,而斑块外周Aβ沉积密度居中。老年斑三维结构重构方法的建立 ,有助于老年斑积聚动力学的研究 ,并对AD病理机制的探讨具有重要意义。

关键词：老年性痴呆症老年斑三维重构积聚动力学

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老年斑、神经元纤维缠结与硫酸多糖

中国药理学通报 2003年第1期19卷 12-16页

作者：胡金凤耿美玉张均田中国海洋大学海洋药物与食品研究所青岛266003 中国医学科学院协和医科大学药物研究所北京100050

老年斑 (senileplaques ,SP)、神经元纤维缠结 (neurofib rillarytangles,NFTs)是老年性痴呆最典型的病理特征 ,其中SP的主要成分为 β样淀粉蛋白 (Aβ) ,NFTs主要由异常修饰的tau蛋白组成。许多研究发现硫酸多糖与SP、NFTs的形成密切... 详细信息

老年斑 (senileplaques ,SP)、神经元纤维缠结 (neurofib rillarytangles,NFTs)是老年性痴呆最典型的病理特征 ,其中SP的主要成分为 β样淀粉蛋白 (Aβ) ,NFTs主要由异常修饰的tau蛋白组成。许多研究发现硫酸多糖与SP、NFTs的形成密切相关。大量文献报道硫酸多糖与淀粉样前体蛋白(APP)、Aβ以及tau蛋白具有高度亲和性 ,它不仅可以促进APP的异常代谢 ,导致Aβ的大量产生 ,诱导其形成纤丝并聚集、沉积于细胞外 ,而且还可促进tau蛋白发生高度磷酸化 ,形成成对螺旋丝 (PHF)并聚集成NFTs。但也有文献报道外源性硫酸多糖具有促进APP的神经营养作用 ,抑制Aβ纤丝的形成 ,并增强磷酸酯酶PP2B的活性 ,从而减少tau蛋白的磷酸化修饰。并且硫酸多糖的糖基组成、糖链长度、硫酸基的数目及位置不同 ,它在SP、NFTs的形成过程中扮演的作用也不同 ,所以可通过分子结构改造而使硫酸多糖表现抑制SP、NFTs形成的活性。

关键词：硫酸多糖老年斑神经元纤维缠结阿尔采末病 AD

电针刺激对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病模型小鼠皮质老年斑形成的影响及机制研究

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中国康复医学杂志 2018年第7期33卷 770-776页

作者：杨清华郭玲陈清邬开会伍艳君朱淑娟唐成林盛华均重庆医科大学神经科学研究中心 400016 重庆医科大学中医药学院

目的:研究电针刺激对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(AD)模型小鼠学习记忆和空间探索能力、皮质内老年斑(SP)的变化及形成机制的影响。方法:将3月龄雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、电针两疗程组和三疗程组,每组6只;对照组为野生型小... 详细信息

目的:研究电针刺激对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(AD)模型小鼠学习记忆和空间探索能力、皮质内老年斑(SP)的变化及形成机制的影响。方法:将3月龄雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、电针两疗程组和三疗程组,每组6只;对照组为野生型小鼠,其余三组为APP/PS1双转基因小鼠。通过电针刺激小鼠百会穴和肾俞穴,频率为2Hz,电流2m A,持续15min,每天1次,7天1疗程。应用水迷宫实验观察学习记忆和空间探索能力,Western Blot分析各组皮质区的顶叶和颞叶APP、IDE和BACE1蛋白的表达水平,免疫组化检测皮质区SP的表达。结果:行为学实验结果发现,与对照组相比,模型组小鼠的逃避潜伏期和搜索路径均明显增加(P<0.05),穿越平台的次数明显减少(P<0.0001);而与模型组相比,治疗组小鼠的逃避潜伏期和搜索路径均明显缩短(P<0.05),穿越平台的次数明显增加(P<0.01);与电针两疗程组相比,电针三疗程组的逃避潜伏期和搜索路径也明显缩短(P<0.05),穿越平台的次数明显增加(P<0.05)。免疫组化结果显示:对照组小鼠皮质区的顶叶和颞叶没有SP;与模型组相比,电针三疗程组的SP数目明显降低(P<0.01)。Western Blot检测结果显示,模型组小鼠皮质区的顶叶和颞叶APP、BACE1的水平明显高于对照组(P<0.0001),IDE的水平明显低于对照组(P<0.0001);而与模型组相比,两个治疗组APP、BACE1的表达明显下调(P<0.05;P<0.001),IDE的表达明显上调(P<0.05;P<0.01);电针三疗程组APP、BACE1的水平明显低于电针两疗程组(P<0.01)。结论:电针刺激能够改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆和空间探索能力;另外,电针刺激可能通过影响皮质区APP、BACE1以及IDE等蛋白表达来调节Aβ的浓度,从而减少SP的形成和沉积。

关键词：电针阿尔兹海默病老年斑皮质

电针联合二甲双胍对APP/PS1小鼠认知功能和老年斑的影响

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针刺研究 2021年第9期46卷 763-768页

作者：夏青倩张皓郭震蔡子凌沈自豪朱淑娟唐成林黄思琴盛华均重庆医科大学神经科学研究中心解剖学教研室重庆400010 重庆医科大学中医药学院重庆400010

目的:比较分析电针、二甲双胍和二者联合对APP/PS1小鼠认知功能的影响,探索一种更优的治疗方式。方法:将3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、药物组、电针组和针药联合组,每组6只;另选取6只同月龄雄性野生C57小鼠作为对照组。电针组选... 详细信息

目的:比较分析电针、二甲双胍和二者联合对APP/PS1小鼠认知功能的影响,探索一种更优的治疗方式。方法:将3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、药物组、电针组和针药联合组,每组6只;另选取6只同月龄雄性野生C57小鼠作为对照组。电针组选取"百会""肾俞"穴行电针干预,15 min/次,1次/d,每周休息1 d;药物组予二甲双胍300 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃治疗;针药联合组行药物和电针共同干预,均连续干预4周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠认知功能,HE染色观察大脑皮层及海马神经元形态,免疫组织化学法观察大脑皮层及海马老年斑(SPs),Western blot法检测大脑皮层及海马中与SPs形成密切相关的β-分泌酶(BACE1)和胰岛素降解酶(IDE)的表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越原平台次数减少(P<0.01),大脑皮层及海马神经元排列紊乱,形态不完整,SPs数量明显增加(P<0.01),BACE1蛋白表达明显升高(P<0.01),IDE蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组相比,药物组、电针组和针药联合组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越原平台次数增加(P<0.01),海马神经元形态、数量、排列改善,大脑皮层及海马区SPs数量减少(P<0.01),BACE1蛋白表达降低(P<0.01),IDE蛋白表达升高(P<0.01)。与药物组和电针组相比,针药联合组小鼠认知功能、大脑皮层及海马区SPs的数量、BACE1和IDE蛋白表达等的变化更显著(P<0.01)。结论:针药联合治疗改善AD小鼠的认知功能及SPs的效果更好,可能与调节BACE1和IDE生成过程有关。

关键词：阿尔茨海默病电针二甲双胍老年斑大脑皮层海马认知功能

雷公藤甲素抑制APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内Aβ沉积和老年斑形成

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解剖学报 2009年第3期40卷 369-373页

作者：雷德亮李明波熊鲲邓小华罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系

目的研究雷公藤甲素（T10）对APP/PS1双转基因AD模型小鼠（APP/PS1dtg）β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积与老年斑（SP）形成的影响。方法取18只4.5月龄健康雄性APP/PS1dtg,随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/（kg·d）（T10 H组）、1μg/（kg·... 详细信息

目的研究雷公藤甲素（T10）对APP/PS1双转基因AD模型小鼠（APP/PS1dtg）β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积与老年斑（SP）形成的影响。方法取18只4.5月龄健康雄性APP/PS1dtg,随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/（kg·d）（T10 H组）、1μg/（kg·d）（T10 L组）和等容量的溶媒灌胃（PLC组）,共计45d。45d后取材,左侧半大脑切片,6E10免疫组织化学方法染色和刚果红染色结合无偏性体视学定量分析,研究T10对海马Aβ沉积和SP形成的影响;分离右侧半海马,免疫印迹法分析海马Aβ蛋白水平的变化。结果与PLC组比较,T10 H组海马6E10阳性的Aβ沉积总面积减少了35%（P〈0.001）,SP总面积减少了32%（P〈0.001）;T10 L组海马Aβ斑总面积减少了18%（P〈0.05）,SP总面积减少了21%（P〈0.05）;T10呈剂量依赖性抑制Aβ在APP/PS1dtg海马的沉积和SP的形成,减少海马内Aβ蛋白水平;免疫印迹分析也显示,T10 H组海马Aβ蛋白水平最低,PLC组Aβ蛋白水平最高,T10L组Aβ蛋白水平介于两者之间。结论T10抑制Aβ的产生和SP形成,或可用于AD的治疗。

关键词：雷公藤甲素阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白老年斑免疫组织化学无偏性体视学转基因小鼠

“益肾调督”电针法对阿尔茨海默病小鼠大脑海马老年斑形成的影响

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针刺研究 2018年第4期43卷 215-220页

作者：杨清华郭玲陈清邬开会伍艳君贾岩朱淑娟唐成林盛华均重庆医科大学神经科学研究中心解剖学教研室重庆400016 重庆医科大学中医药学院重庆400016

目的:观察"益肾调督"电针法对APP/PS 1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马区老年斑(SP)及其相关蛋白表达的影响,探讨电针改善AD的机制。方法:APP/PS 1双转基因AD小鼠随机分为模型组、电针两疗程组和电针三疗程组,每组6只;6只雄性野生型... 详细信息

目的:观察"益肾调督"电针法对APP/PS 1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马区老年斑(SP)及其相关蛋白表达的影响,探讨电针改善AD的机制。方法:APP/PS 1双转基因AD小鼠随机分为模型组、电针两疗程组和电针三疗程组,每组6只;6只雄性野生型小鼠为对照组。给予各电针组小鼠"百会"和双侧"肾俞"电针治疗,每天1次,7d为1个疗程,分别进行2个或3个疗程。Morris水迷宫实验观察各组小鼠记忆和空间探索能力,免疫组化法检测海马区SP的表达情况,Western blot法检测海马区淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶1(BACE 1)和胰岛素降解酶(IDE)的表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠的逃避潜伏期和搜索路径均明显增加(P斑块;模型组SP数目较对照组明显增加(P<0.01);与模型组相比,两治疗组海马区的SP数目均明显减少(P<0.01);与电针两疗程组相比,电针三疗程组SP数目明显减少(P<0.01)。模型组小鼠海马区APP、BACE 1表达水平明显高于对照组(P<0.01),IDE表达水平明显低于对照组(P<0.01);两治疗组海马区APP、BACE 1表达水平明显低于模型组(P<0.01),IDE表达水平明显高于模型组(P<0.01);电针三疗程组海马区APP、BACE 1表达水平明显低于电针两疗程组(P<0.01,P<0.05),IDE表达水平明显高于电针两疗程组(P<0.05)。结论:"益肾调督"电针法可降低AD小鼠海马区APP、BACE 1表达,提高IDE的表达,从而减少海马区SP的沉积,改善其学习记忆和空间探索能力。

关键词： APP/PS 1双转基因阿尔茨海默病小鼠电针学习记忆能力老年斑淀粉样前体蛋白 β-分泌酶胰岛素降解酶海马

卵巢切除对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响

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解放军医学杂志 2015年第1期40卷 26-29页

作者：徐明亮龙志敏廖娥钟国超杜烨鸿骆世芳贺桂琼重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学解剖学教研室重庆400016

目的研究雌激素对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响,探讨雌激素缺乏导致阿尔茨海默病(AD)的病理机制。方法将3月龄雌性APP/PS1双转基因AD模型小鼠分为卵巢切除组与假手术组,术后2个月采用免疫组化染色及透射电镜观察两组小鼠... 详细信息

目的研究雌激素对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响,探讨雌激素缺乏导致阿尔茨海默病(AD)的病理机制。方法将3月龄雌性APP/PS1双转基因AD模型小鼠分为卵巢切除组与假手术组,术后2个月采用免疫组化染色及透射电镜观察两组小鼠脑内老年斑及自噬功能的变化,同时检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达情况。结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠脑内老年斑显著增加,分布更广,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1阳性神经元数量均显著下降。电镜观察可见,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠海马神经元及突起肿胀明显,暗神经元增加,神经元突起周围自噬小泡显著增多。结论雌激素缺乏可导致自噬泡成熟受阻、活性降低、自噬功能减弱,从而导致AD病理改变加重。

关键词：卵巢切除术阿尔茨海默病老年斑自噬小鼠,转基因

老年斑体外模型构建及几种天然抗氧化剂对其清除作用研究

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老年斑体外模型构建及几种天然抗氧化剂对其清除作用研究

作者：常秋冉西北农林科技大学

学位级别：硕士

老年斑是由脂褐素沉积于皮肤表面所形成的特殊的老年色素性皮肤病。老年斑是人体老化的重要标志,也是皮肤老化的显著特征,严重影响着人体的面部美容和机体健康。丰富的天然抗氧化物质不仅具有提高机体免疫力、维护机体健康的作用,更具... 详细信息

老年斑是由脂褐素沉积于皮肤表面所形成的特殊的老年色素性皮肤病。老年斑是人体老化的重要标志,也是皮肤老化的显著特征,严重影响着人体的面部美容和机体健康。丰富的天然抗氧化物质不仅具有提高机体免疫力、维护机体健康的作用,更具有抗氧化与美容祛斑的功能。通过在体外构建抗老年斑化学模型,筛选出抗老年斑较强的抗氧化物质,为研发美白抗斑产品提供新的思路和方法,对促进美白抗斑产业的发展具有重要的现实意义。本课题在体外构建了老年斑模型,并利用该模型筛选了具有体外抗老年斑的天然抗氧化剂,且进行了天然抗氧化剂抑制酪氨酸酶活性的试验,筛选效果较优的天然抗氧化剂,主要研究结果如下:(1)在体外构建老年斑模型。以血清白蛋白和丙二醛发生羰-氨交联反应生成荧光性物质为基础,模型最适条件是在pH为7.0的0.1 mol/L的磷酸缓冲溶液中加入24nmol/mL的丙二醛(MDA)和400μg/mL的血清白蛋白,37℃孵育24 h。方法学验证表明,所构建的体外老年斑模型重现性和精确度良好。(2)研究了多种天然抗氧化剂在体外清除老年斑的效果。依据所建立的老年斑模型,芦丁、花青素、原花青素和茶多酚体外清除老年斑能力较强,其半抑制浓度(IC)分别为28.93μg/mL、30.01μg/mL、32.02μg/mL、59.24μg/mL。枸杞多糖、L-谷胱甘肽、白藜芦醇、姜黄素、Vc,β-熊果苷等由于作用机制不同,在体外对老年斑没有清除作用。(3)优化了多种天然抗氧化剂对酪氨酸酶活性的抑制体系。最佳的工艺条件为:在pH为6.8、0.1 mol/L的磷酸缓冲溶液体系中加入100 U/mL酪氨酸酶,30℃水浴10min。方法学验证表明,所优化的对酪氨酸酶活性的抑制体系的重现性和精确度良好。(4)研究了多种天然抗氧化剂对酪氨酸酶活性的抑制能力。结果表明:对酪氨酸酶抑制能力大小分别为光甘草定>姜黄素>白藜芦醇>V>曲酸>L-GSH等,其IC分别为6.8μg/mL、37.5μg/mL、39.1μg/mL、58.6μg/mL、88.5μg/mL、91.3μg/mL。枸杞多糖等由于作用机制不同,对酪氨酸酶活性无抑制作用。(5)天然抗氧化剂的复合作用。原花青素、花青素对老年斑有良好的清除作用,对酪氨酸酶活性也有较好的抑制作用。以不同比例的原花青素、花青素进行复合配比,研究其对老年斑的清除效果,结果显示为加和作用。

关键词：天然抗氧化剂老年斑丙二醛荧光酪氨酸酶

有氧运动通过增强PI3K/Akt信号通路活性抑制阿尔茨海默症小鼠大脑皮质和海马组织老年斑的形成

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中国体育科技 2019年第1期55卷 22-27,74页

作者：房国梁赵杰修张漓李良李鹏飞李茜国家体育总局体育科学研究所北京100061

目的:利用PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂GNE-317,探讨有氧运动是否通过增强PI3K/Akt信号通路活性抑制APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织中老年斑的形成,为阐明有氧运动防治阿尔茨海默症提供一定的理论依据。方法:雄性APP/PS1小鼠随机分为... 详细信息

目的:利用PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂GNE-317,探讨有氧运动是否通过增强PI3K/Akt信号通路活性抑制APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织中老年斑的形成,为阐明有氧运动防治阿尔茨海默症提供一定的理论依据。方法:雄性APP/PS1小鼠随机分为安静组(SE)、运动组(EX)、GNE-317处理安静组(SEG)和GNE-317处理运动组(EXG)。EX和EXG组小鼠进行为期8周的跑台训练,同时SEG和EXG组小鼠给予GNE-317处理8周。在第9周进行Morris水迷宫实验检测小鼠的认知能力。水迷宫实验结束后,分离所有小鼠的大脑皮质和海马组织。通过免疫组化实验观察各组小鼠大脑皮质和海马组织老年斑的数量;通过Western blot检测APP、Aβ42及BACE1的蛋白表达水平。结果:8周跑台训练后,EX组小鼠与SE组小鼠相比,大脑皮质和海马组织中老年斑的数量显著下降,APP蛋白含量并没有发生显著改变,而Aβ42及BACE1的蛋白含量均显著下降,并且Morris水迷宫实验其逃逸时间和逃逸距离均显著减少。但经GNE-317处理后,SEG组和EXG组小鼠分别与SE组和EX组小鼠相比,老年斑数量均显著上升,APP蛋白含量同样无显著改变,而Aβ42及BACE1的蛋白含量均显著上升,并且其逃逸时间和逃逸距离均显著增加。结论:有氧运动通过增强APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织中PI3K/Akt信号通路活性,降低了BACE1的含量,导致Aβ42蛋白含量降低,有效抑制老年斑的形成。

关键词：有氧运动老年斑 PI3K/Akt信号通路 β淀粉样蛋白 GNE-317 阿尔茨海默症