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远隔缺血预适应血清外泌体对神经细胞DNA甲基化水平及缺血耐受相关基因表达的影响

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中国脑血管病杂志 2021年第2期18卷 107-114页

作者：邹明新崔钧贺刘娜张璞邵国内蒙古科技大学包头师范学院生物科学与技术学院 014030 包头医学院内蒙古自治区低氧转化医学重点实验室首都医科大学宣武医院低氧适应转化医学北京重点实验室内蒙古科技大学包头医学院第二附属医院消化疾病研究所检验科

目的研究人远隔缺血预适应(RIPC)后产生的血清外泌体对人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y神经细胞)DNA甲基化及氧糖剥夺(OGD)耐受的影响。方法6名男性在校大学生志愿者(身高:170~180 cm;体质量:60~80 kg;状态:上午、空腹)使用RIPC训练仪进... 详细信息

目的研究人远隔缺血预适应(RIPC)后产生的血清外泌体对人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y神经细胞)DNA甲基化及氧糖剥夺(OGD)耐受的影响。方法6名男性在校大学生志愿者(身高:170~180 cm;体质量:60~80 kg;状态:上午、空腹)使用RIPC训练仪进行缺血预适应并采集肘中静脉血和血清,使用透射电镜方法对外泌体形态进行检测和鉴定。构建神经细胞OGD模型,当正常细胞培养至70%细胞密度时,撤去1640培养基改用无糖培养基,将OGD处理的SH-SY5Y细胞与外泌体孵育后进行处理,分为正常对照组(C组)、氧糖剥夺组(OGD组)、OGD+HuE-C组(SH-SY5Y细胞经过OGD处理后与正常人血清外泌体共孵育)、OGD+HuE-RIPC组(SH-SY5Y细胞经过OGD处理后和RIPC人血清外泌体共孵育)。3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基喹啉)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑(MTS)法检测细胞对OGD的耐受,亚硫酸氢钠限制性内切酶试验(COBRA)分析神经细胞基因组甲基化程度,实时聚合酶链反应(PCR)和Western Blot分析血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)的基因及蛋白表达水平。结果透射电镜结果显示,超速离心法可以成功分离血清外泌体。显微镜下观察正常SH-SY5Y细胞胞体丰满,经历OGD后,大量细胞呈皱缩高亮的凋亡状态;加入HuE-C外泌体后细胞形态恢复有限;加入HuE-RIPC外泌体后,SH-SY5Y细胞形态有了较为明显的恢复。形态学分析结果显示,RIPC外泌体对缺血状态下神经细胞有保护作用。MTS结果显示,在OGD模型中,将人RIPC血清外泌体与SH-SY5Y细胞共孵育后,SH-SY5Y细胞活力较OGD组明显提高(P缺血耐受相关基因的表达,促进神经细胞缺血耐受。

关键词：远隔缺血预适应外泌体缺血耐受神经保护

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脑缺血耐受机制的研究进展

中国神经科学杂志 2003年第1期19卷 59-62页

作者：胡平高天明第一军医大学生理学教研室广东广州510515

2～ 3min的脑缺血对随后的严重脑缺血具有明显保护作用 ,即脑缺血耐受。目前发现蛋白合成、不同类型的离子通道的变化以及胶质细胞的支持参与了脑缺血耐受。研究缺血耐受机制能够为进一步研究脑损伤与保护机制提供新的视角。

关键词：研究进展脑缺血缺血耐受蛋白合成离子通道

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脑缺血预处理诱导大鼠脑缺血耐受的研究

中国康复医学杂志 2007年第7期22卷 599-601,I0001页

作者：程道宾王进罗杰峰曾丽秦超广西医科大学第一附属医院神经内科南宁530027

目的:探讨局灶性脑缺血预处理在大鼠脑缺血耐受中的作用及机制。方法:线栓法制作大鼠右大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血模型。在缺血预处理组脑缺血预处理15min;3d后,再次阻塞右大脑中动脉8h。评估神经功能缺失、脑梗死体积和右脑组织形态... 详细信息

目的:探讨局灶性脑缺血预处理在大鼠脑缺血耐受中的作用及机制。方法:线栓法制作大鼠右大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血模型。在缺血预处理组脑缺血预处理15min;3d后,再次阻塞右大脑中动脉8h。评估神经功能缺失、脑梗死体积和右脑组织形态学,免疫组化法检测右脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果:缺血预处理组大鼠神经功能缺失评分明显改善(P缺血损伤改变明显减轻,TNF-α和iNOS的表达也明显减少(P缺血预处理可诱导大鼠脑缺血耐受,其机制可能是抑制缺血脑组织表达TNF-α及iNOS而减轻炎症免疫损伤。

关键词：脑梗死缺血预处理缺血耐受肿瘤坏死因子-α 诱导型一氧化氮合酶大鼠

脑缺血耐受大鼠缺氧诱导因子-1α和促红细胞生成素的表达

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中国康复医学杂志 2007年第10期22卷 881-884页

作者：赵仁亮王春霞孙忠玲青岛大学医学院附属医院神经内科 266003 青岛市精神卫生中心

目的:探讨脑缺血预处理诱导脑缺血耐受形成中促红细胞生成素(EPO)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达的变化。方法:将99只Wistar大鼠随机分成假手术对照组9只、假手术+再缺血组45只、预缺血+再缺血组45只,后两组再随机分成5个... 详细信息

目的:探讨脑缺血预处理诱导脑缺血耐受形成中促红细胞生成素(EPO)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达的变化。方法:将99只Wistar大鼠随机分成假手术对照组9只、假手术+再缺血组45只、预缺血+再缺血组45只,后两组再随机分成5个亚组。线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性缺血预处理模型(预缺血10min),分别在预缺血后1d、3d、7d、14d、21d进行再次缺血2h再灌注22h,然后取脑检查。应用免疫组化方法检测HIF-lα与EPO蛋白的表达,应用反转录聚合酶链式反应技术检测EPOmRNA和HIF-1αmRNA的表达。结果:①与假手术组各对应亚组相比,缺血预处理组中的1d、3d、7d亚组HIF-lα蛋白表达增高,3d、7d亚组中EPO蛋白表达增高,差异有显著性意义(P缺血预处理组3d、7d亚组中HIF-lαmRNA及EPOmRNA表达明显增高,差异有显著性意义(P缺血预处理诱导了脑缺血耐受,预缺血诱导的内源性HIF-lα及EPO表达增加参与脑缺血耐受形成的机制。

关键词：缺血耐受缺血预处理脑缺血大鼠缺氧诱导因子促红细胞生成素

星形胶质细胞在缺血后适应树鼩海马神经元缺血耐受中的机制研究

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中国病理生理杂志 2012年第11期 2106-2107页

作者：何亮李树清昆明医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的:探讨星形胶质细胞(AS)代谢对后适应(PC)海马神经元缺血耐受的影响及可能机制。方法:光化学建立脑缺血模型,氟代柠檬酸(FC)抑制AS代谢,在脑缺血成模后建立缺血PC模型;雄性树鼩随机分为对照组、缺血4 h组、缺血24 h组、

关键词：海马神经元 PC 星形胶质树鼩缺血耐受细胞

通过短时间预缺血改变肾小管上皮细胞命运诱导肾脏缺血耐受

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中华肾脏病杂志 2011年第3期27卷 198-202页

作者：蒋素华邹建洲刘红任丽许迅辉陈越丁小强复旦大学附属中山医院肾内科上海200032

目的探讨短时间缺血预处理在诱导肾脏缺血耐受中的作用，及其对肾小管上皮细胞坏死、凋亡、增殖等的影响。方法雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham），只分离两侧肾蒂，不进行夹闭；单纯缺血再灌注组（I／R），第0天假手术，第4天... 详细信息

目的探讨短时间缺血预处理在诱导肾脏缺血耐受中的作用，及其对肾小管上皮细胞坏死、凋亡、增殖等的影响。方法雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham），只分离两侧肾蒂，不进行夹闭；单纯缺血再灌注组（I／R），第0天假手术，第4天用无损伤动脉夹夹闭两侧肾蒂40min，然后恢复灌注；缺血预适应组（IPC），第0天预缺血20min，第4天再次缺血40min。PAS染色观察肾组织形态学，透射电镜观察小管上皮细胞超微结构，原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况，免疫组织化学法观察肾小管上皮细胞增殖核抗原（PCNA）的表达。结果与单纯缺血再灌注组相比，缺血预适应组。肾脏功能和病理性损伤显著减轻（P〈0．01）；大鼠死亡率从33％降低为0；肾小管上皮细胞凋亡和坏死显著减少（P〈0．05），细胞增殖（PCNA阳性）显著增多（P〈0．01）。结论短时间缺血预处理能诱导肾脏耐受长时间缺血，减少小管上皮细胞死亡和促进其及时增殖修复可能是预缺血发挥肾脏保护作用的机制之一。

关键词：再灌注损伤肾小管上皮细胞细胞增殖缺血耐受坏死凋亡

大鼠局灶性脑缺血耐受胶质细胞源性神经营养因子的表达

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中国老年学杂志 2007年第21期27卷 2063-2065页

作者：李昕华赵晴钱加利莽靖王晓明徐忠信吉林大学中日联谊医院神经内科吉林长春130021 长春中医药大学生理教研室

目的探讨局灶脑缺血预处理对大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后神经功能的影响及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的表达。方法线栓法建立大鼠MCAO及预处理模型,Bederson神经功能评分观察大鼠神经功能,免疫组织化学和原位杂交技术检测GDNF表达... 详细信息

目的探讨局灶脑缺血预处理对大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后神经功能的影响及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的表达。方法线栓法建立大鼠MCAO及预处理模型,Bederson神经功能评分观察大鼠神经功能,免疫组织化学和原位杂交技术检测GDNF表达。结果缺血预处理(IPC)可提高大鼠局灶性脑缺血后神经功能,且梗死周边区GDNF蛋白及mRNA表达水平高于对照组(P缺血耐受,可能通过增加GDNF的表达而起脑保护作用。

关键词：脑缺血预处理缺血耐受胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)

脑缺血耐受大鼠EPO mRNA和HIF-1α mRNA表达的实验研究

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中国老年学杂志 2007年第12期27卷 1151-1154页

作者：孙忠玲赵仁亮董瑞剑青岛大学医学院附属医院神经内科山东青岛266003 淄博市中心医院

目的探讨缺血预处理诱导脑缺血耐受的机制。方法采用两次线栓制作大鼠局灶性脑缺血预处理及缺血再灌注模型,分别在预缺血10min后1、3、7、14、21d行再次缺血2h再灌注22h后处死,通过TTC染色测定脑梗死体积,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)... 详细信息

目的探讨缺血预处理诱导脑缺血耐受的机制。方法采用两次线栓制作大鼠局灶性脑缺血预处理及缺血再灌注模型,分别在预缺血10min后1、3、7、14、21d行再次缺血2h再灌注22h后处死,通过TTC染色测定脑梗死体积,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测缺血再灌注不同时间大鼠脑内促红细胞生成素(EPO)及缺氧诱导因子(HIF-1α)mRNA的表达。结果脑梗死体积缺血预处理组1、3、7d亚组的梗死体积较假手术组相应各亚组的梗死体积比较明显减小(P缺血预处理组3、7d亚组EPOmRNA、HIF-1α mRNA表达明显增多,与假手术相应亚组比较有显著差异(P缺血预处理诱导了脑缺血耐受;EPO及HIF-1α在一定时间窗内表达明显增多可能是脑缺血耐受形成的机制之一。

关键词：缺血预处理缺血耐受脑缺血促红细胞生成素缺氧诱导因子-1α

三七三醇皂苷增进大鼠脑缺血耐受的作用及对GFAP和bFGF表达的影响

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华西药学杂志 2005年第6期20卷 489-492页

作者：周俊英刘小利罗祖明四川大学华西医院神经内科四川成都610041

目的观察三七三醇皂苷(PTS)对预缺血诱导的脑缺血耐受作用及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法采用改进的二次线栓法制备SD大鼠缺血耐受模型,并随机分为大脑中动脉缺血(MCAO)组、预缺血组(IP+MCAO)... 详细信息

目的观察三七三醇皂苷(PTS)对预缺血诱导的脑缺血耐受作用及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法采用改进的二次线栓法制备SD大鼠缺血耐受模型,并随机分为大脑中动脉缺血(MCAO)组、预缺血组(IP+MCAO)和PTS组(IP+PTS+MCAO),分别给予10min的假手术、预缺血或预缺血加PTS,3d后使MCAO2h,再灌注22h后处死,比较各组神经功能评分、梗死体积、病理形态学变化及GFAP和bFGF的表达。结果PTS组神经功能缺损减轻、梗死体积缩小和病理形态学改变均较预缺血组更为明显,GFAP、bFGF表达均高于其余两组(P缺血诱导的脑缺血耐受作用,并上调GFAP、bFGF表达。

关键词：三七三醇皂苷缺血耐受胶质纤维酸性蛋白碱性成纤维细胞生长因子