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应用原位缺口翻译检测细胞DNA链断裂

日本医学介绍 1990年第5期 224-225页

作者：陈继贵

临床上,对恶性肿瘤已广泛进行温热疗法,从分子水平搞清温热疗法所致的杀细胞效果尤为重要。关于温热疗法杀细胞的机理,有人认为,由温热引起癌细胞DNA结构的变化或直接损害DNA链。迄今,温热疗法所致DNA链的DNA损伤的测定均用碱裂解(alkal... 详细信息

临床上,对恶性肿瘤已广泛进行温热疗法,从分子水平搞清温热疗法所致的杀细胞效果尤为重要。关于温热疗法杀细胞的机理,有人认为,由温热引起癌细胞DNA结构的变化或直接损害DNA链。迄今,温热疗法所致DNA链的DNA损伤的测定均用碱裂解(alkali-elusion)法或荧光分析法。这种方法所需细胞数多,加之细胞的破坏,区别每个细胞的形态甚为困难。原位缺口翻译(in situ nick translation)法能保持细胞形态,用较少的细胞即可测定出细胞DNA链的损伤并在早期判定出DNA链损伤程度。这种方法是遗传工程学中制

关键词： DNA 缺口翻译细胞

电镜水平的原位缺口翻译:一种研究细胞内DNase Ⅰ 敏感区的方法

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医学分子生物学杂志 1992年第4期 199-199页

作者：马民慧

缺口翻译法景常用于标记离休提纯的DNA,但亦可用于原位标记活性染色喷区域。Levitt等用对活件染色质敏感的DNase I,选择性标记了分离细胞核中核酶敏感性序列。进而,此技术被成功地用于

关键词：细胞内缺口翻译染色质 DNase 电镜电子显微镜

产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素基因探针的研制及临床应用

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中国人兽共患病学报 1991年第4期 61-62页

作者：林万明李银太王津郭兆彪杨瑞馥朱庆义李连青黄元桐赵瑞珍续若兰黄兰兰军事医学科学院微生物流行病研究所山西省太原儿童医院

近几年来,应用基因探针检测产毒性大肠杆菌(ETEC)取得了很大进展。本文报告用含有LT-B基因和部分LT-A基因序列的800bpDNA片段作探针,从腹泻患儿粪便标本中检测ETBC LT。材料和方法一、菌种探针供体菌大肠杆菌C600(pMMO30),由军事医... 详细信息

近几年来,应用基因探针检测产毒性大肠杆菌(ETEC)取得了很大进展。本文报告用含有LT-B基因和部分LT-A基因序列的800bpDNA片段作探针,从腹泻患儿粪便标本中检测ETBC LT。材料和方法一、菌种探针供体菌大肠杆菌C600(pMMO30),由军事医科院生物工程研究所陈锦光惠赠。该pMMO30质粒中含编码LT-B亚单位590bpDNA序列和210bpLT-A亚单位基因片段,用作探针的序列全长800bp。实验所用的标准ETEC菌株和临床分离大肠杆

关键词：基因探针序列大肠杆菌质粒氯仿大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属基因载体三氯甲烷甲烷不凝集弧菌抽提法 DNA 探针法特异性色谱试剂琼脂糖凝胶缺口翻译甲酞胺敏感性洗脱法临床应用附表

制备^(35)S标记的氨甲酰磷酸合成酶I的cDNA探针用于原位分子杂交

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解剖学报 1989年第S1期20卷 5-8,104页

作者：杨一平李士谔丁濂中国协和医科大学基础部病理室

应用改进的缺口翻译方法,将α-^(35)S-dATP掺入CFS_1cDNA分子,获得了0.9～1.5×10~8cpm/μgDNA的高比度^(35)S标记探针.用其做RNA-DNA原位分子杂交探测正常和癌变肝组织中CPS_1基因的表达,放射自显影10～14天,能够获得满意的结果.

关键词： α-35S-dATP 缺口翻译原位分子杂交氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ(CPS1)

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酶法合成高比活度[α-^(32)P]dATP

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同位素 1989年第3期2卷 150-154页

作者：田桂英楼光辉中国原子能科学研究院

本文介绍了通过一系列连续的酶促反应制备高比活度[α-^(32)P]dATP的方法。该法简便、不需要中间产物的分离纯化、操作放射性步骤少、制备周期短,产品用高压液相制备色谱分离纯化,效率高、纯度在98%以上。用该法制备的[α-^(32)P]dATP... 详细信息

本文介绍了通过一系列连续的酶促反应制备高比活度[α-^(32)P]dATP的方法。该法简便、不需要中间产物的分离纯化、操作放射性步骤少、制备周期短,产品用高压液相制备色谱分离纯化,效率高、纯度在98%以上。用该法制备的[α-^(32)P]dATP比活度高,能够满足遗传工程研究中进行DNA缺口翻译标记及分子杂交等工作的需要。

关键词：磷32 dATP 缺口翻译分子杂交

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核酸探针的制备及其使用技术

中国预防兽医学报 1986年第4期 51-56页

作者：童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

由于限制性内切酶的发现以及重组DNA技术的新进展,使得可以合成核酸探针(Nucleic Acid Probe)进行疾病的诊断和病原的检测。因为标记的核酸探针可以通过相应的碱基配对原则和与其具有同源或部分同源性的核酸序列发生杂交反应,特异性相当... 详细信息

由于限制性内切酶的发现以及重组DNA技术的新进展,使得可以合成核酸探针(Nucleic Acid Probe)进行疾病的诊断和病原的检测。因为标记的核酸探针可以通过相应的碱基配对原则和与其具有同源或部分同源性的核酸序列发生杂交反应,特异性相当高,是一种重要的辅助性病毒诊断方法。

关键词： RNA 缺口翻译缓冲液 Poly 限制性离心管真空干燥 DNA 核酸探针

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溶血血清中病毒基因的核酸斑点杂交法检测

郑州大学学报（医学版） 1989年第4期34卷 311-313页

作者：张振生买凯河南省医学科学研究所

本文采用缺口翻译法对克隆化HBV DNA作α-^(32)P-dCTP标记,所标记的HBVDNA具有较高比放射活性(7×10~7cpm/μg DNA)。以其作为基因探针及家鹅血清和健康人血清作为样品,采用两种常用的核酸斑点杂交法及一种改良的方法对人为制造的溶血... 详细信息

本文采用缺口翻译法对克隆化HBV DNA作α-^(32)P-dCTP标记,所标记的HBVDNA具有较高比放射活性(7×10~7cpm/μg DNA)。以其作为基因探针及家鹅血清和健康人血清作为样品,采用两种常用的核酸斑点杂交法及一种改良的方法对人为制造的溶血血清中HBVDNA进行检测。结果显示,前两种方法会产生假阳性信号而后一种方法不会。出此,对血清进行预处理的改良方法适用于溶血血清中病毒基因的特异性检测。

关键词： HBV DNA 缺口翻译探针核酸斑点杂交溶血血清

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