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结膜上皮向角膜上皮转化的研究进展

中华眼外伤职业眼病杂志 1990年第1期 62-65页

作者：谢全锦中山医科大学眼科中心眼科研究所

临床上常见到化学药品或高温灼伤后的眼球表面,愈合后形成瘢痕和致密的新生血管。对此常用的一般外科处理,效果常不理想。较好的解决方法是移植其它组织重建正

关键词：角膜上皮转分化杯状细胞结膜上皮结膜移植

眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮ICAM-1和HLA-DR的表达和意义

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第4期27卷 450-451页

作者：范春梅高莹莹许锻炼戴炳发李静福建医科大学附属第二医院检验科福建泉州362000 福建医科大学附属第二医院眼科教研室福建泉州362000

目的:探讨眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮ICAM-1和HLA-DR的表达和意义。方法:选择痤疮、脂溢性皮炎以及类固醇皮炎眼部蠕形螨检查为阳性的患者共58例为蠕形螨寄居组,另选50例无面部疾病眼部蠕形螨检查阴性的健康成人,作为正常对照组。用流... 详细信息

目的:探讨眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮ICAM-1和HLA-DR的表达和意义。方法:选择痤疮、脂溢性皮炎以及类固醇皮炎眼部蠕形螨检查为阳性的患者共58例为蠕形螨寄居组,另选50例无面部疾病眼部蠕形螨检查阴性的健康成人,作为正常对照组。用流式细胞术联合印迹细胞学检测细胞表面分子的方法检测结膜上皮细胞ICAM-1和HLA-DR的表达阳性率及荧光强度。结果:与正常对照组相比,蠕形螨寄居组患者结膜上皮细胞中ICAM-1和HLA-DR的阳性率和荧光强度均明显提高,差异具有统计学意义(P结膜上皮中ICAM-1和HLA-DR的表达增强。

关键词：蠕形螨结膜上皮 ICAM-1 HLA-DR

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人眼结膜上皮细胞体外培养治疗睑球粘连

实用医学杂志 2009年第3期25卷 378-379页

作者：钟建光王雅娜张惠成杭州市第一人民医院眼科 310006

目的:探讨体外分离培养人眼结膜上皮细胞治疗睑球粘连的方法。方法:睑球粘连患者27例27眼,术前2周取其健眼穹窿部结膜1mm×1mm剪成0.5mm×0.5mm后种植于羊膜上体外培养,术中彻底切除粘连的瘢痕组织,将结膜上皮植片移植于结膜创口。观察... 详细信息

目的:探讨体外分离培养人眼结膜上皮细胞治疗睑球粘连的方法。方法:睑球粘连患者27例27眼,术前2周取其健眼穹窿部结膜1mm×1mm剪成0.5mm×0.5mm后种植于羊膜上体外培养,术中彻底切除粘连的瘢痕组织,将结膜上皮植片移植于结膜创口。观察结膜上皮细胞的生长特性。结果:接种在羊膜上的结膜组织,8d左右融合成膜状,细胞为复层上皮细胞。术后所有患者自觉症状明显好转,眼球活动自如,结膜移植片与周围组织完全融合,未发生排斥反应。结论:体外分离培养结膜上皮细胞治疗睑球粘连是一种理想的好方法。

关键词：眼睑疾病细胞培养技术羊膜结膜上皮

超声乳化术后结膜上皮细胞中核转录因子-_kB和转化生长因子-β1的表达变化

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眼科研究 2002年第2期20卷 142-145页

作者：罗丽辉刘祖国林健贤张振平刘奕志林振德郑丹莹陈伟蓉杨文辉张梅肖启国陈家祺中山大学中山眼科中心广州510060

目的研究超声乳化术后结膜上皮细胞中转化生长因子-β1（TGF-β1）和核转录因子-кB（NF-кB）的表达变化,探讨影响超声乳化术后泪膜变化的机制。方法对老年性白内障患者26例（26只眼）,分别于术前,术后14和30天采用印痕细胞学和免疫... 详细信息

目的研究超声乳化术后结膜上皮细胞中转化生长因子-β1（TGF-β1）和核转录因子-кB（NF-кB）的表达变化,探讨影响超声乳化术后泪膜变化的机制。方法对老年性白内障患者26例（26只眼）,分别于术前,术后14和30天采用印痕细胞学和免疫组织化学染色检测结膜上皮细胞中TGF-β1和NF-кBp65的表达,并行泪液分泌（Schirmer　Ⅰ）试验和泪膜破裂时间（BUT）检查,荧光素染色和泪河高度测量。结果术后14天,Schirmer　Ⅰ试验和泪河高度已与术前无明显差异,但BUT明显缩短（P上皮的炎症和增生,尤其是炎症水平的增强密切相关。

关键词：超声乳化术结膜上皮核转录因子转化生长因子

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兔眼结膜上皮标记保留细胞的研究

眼科研究 2007年第8期25卷 564-567页

作者：崔红平徐翀同济大学附属第十人民医院眼科上海200072

目的检测兔眼结膜上皮细胞对5’-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况,为进一步探索结膜上皮干细胞的定位提供依据。方法实验1组为短期标记保留实验,采用一次性兔腹腔注射BrdU50mg/kg,不同时间间隔免疫组织化学法分析兔眼各部位结膜组织B... 详细信息

目的检测兔眼结膜上皮细胞对5’-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况,为进一步探索结膜上皮干细胞的定位提供依据。方法实验1组为短期标记保留实验,采用一次性兔腹腔注射BrdU50mg/kg,不同时间间隔免疫组织化学法分析兔眼各部位结膜组织BrdU标记保留细胞。实验2组为长期标记保留实验,连续7d每日注射BrdU50mg/kg,观察6周后兔结膜上皮的BrdU标记阳性细胞。结果实验1组于1、3、5、7d,BrdU标记阳性细胞数量的高峰位置从睑皮肤黏膜交界处向穹隆部移行,所有切片的睑皮肤黏膜交界处均可见较多的BrdU标记阳性细胞。实验2组的结膜上皮BrdU标记阳性细胞主要保留在睑皮肤黏膜交界处。结论短期和长期标记保留实验说明兔眼睑皮肤黏膜交界处可能含有兔结膜上皮干细胞。

关键词：结膜上皮免疫组织化学 BrdU

人、兔结膜上皮细胞的体外培养及兔眼结膜上皮标记保留细胞的研究

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人、兔结膜上皮细胞的体外培养及兔眼结膜上皮标记保留细胞的研究

作者：徐翀同济大学

学位级别：硕士

目的探索人、兔结膜上皮细胞体外培养的较好方法，观察其体外生长特性。检测兔结膜上皮细胞对5’—溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况，为进一步探索结膜上皮干细胞的定位以及培养的结膜上皮体外移植提供基础。方法分别采用二种方法(组... 详细信息

目的探索人、兔结膜上皮细胞体外培养的较好方法，观察其体外生长特性。检测兔结膜上皮细胞对5’—溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况，为进一步探索结膜上皮干细胞的定位以及培养的结膜上皮体外移植提供基础。方法分别采用二种方法(组织块培养法、混合消化法)，三种培养基(Ⅰ液为DMEM／F12加10％胎牛血清、Ⅱ液为DMEM／F12加5％胎牛血清及EGF等各种因子、Ⅲ液为不加任何血清的Ⅱ液)及不同换液频率培养人结膜上皮细胞，摸索较好的培养条件，观察不同时期细胞的贴壁率、形态、数量、并进行免疫荧光染色鉴定。尝试在羊膜、饲细胞层上培养人结膜上皮细胞。观察兔不同部位结膜上皮细胞的体外生长特性，通过BrdU标记及流式细胞仪测定其细胞周期，增殖细胞核心抗原染色的方法比较不同部位的兔结膜上皮细胞的增殖活性。兔活体注射BrdU后，不同时间间隔检测结膜上皮标记保留细胞。结果原代培养人结膜上皮细胞用混合消化培养法较好。细胞生长较快，获得细胞量大。组织块培养法细胞生长缓慢，需较长时间达到细胞的融合，获得的细胞数较混合消化培养法低。原代接种时用含10％胎牛血清的培养液，人结膜上皮细胞容易存活和贴壁，4天后改用低血清的培养液维持培养，有利于人结膜上皮细胞的生长传代。24h及48h的换液频率对细胞生长有利。在羊膜上培养的人结膜上皮细胞生长良好。来自兔睑结膜及穹窿部结膜上皮的细胞生长速度较快、位于S期的细胞较多，来自球结膜的细胞生长较慢、位于S期的细胞较少，兔结膜上皮细胞的增殖活性由高到低依次为：睑结膜、穹窿结膜、球结膜。应用间接免疫荧光染色，人结膜上皮细胞抗角蛋白13染色阳性;兔结膜上皮抗广谱角蛋白染色阳性。兔腹腔注射BrdU后短期观察1，2，3，5d，BrdU标记阳性细胞数量的高峰位置从睑皮肤粘膜交界处向穹窿部移行，所有切片的睑皮肤粘膜交界处内均可见较多的BrdU标记阳性细胞。连续注射BrdU7d后，追踪6wk后观察兔结膜上皮的BrdU标记阳性细胞主要保留在睑皮肤粘膜交界处。兔眼结膜上皮增殖细胞核心抗原阳性细胞主要位于睑皮肤粘膜交界处，散在阳性细胞位于穹窿部。结论(1)原代培养人结膜上皮细胞用混合消化培养法较好。(2)原代接种时用含10％胎牛血清的培养基保证上皮细胞的存活和贴壁，然后改用低血清加因子的培养基维持培养有利于人结膜上皮细胞的生长传代。羊膜是人结膜上皮细胞生长的良好载体。(3)体外培养兔结膜上皮细胞的增殖活性由高到低依次为睑结膜、穹窿部、球结膜。(4)短期和长期标记保留实验说明兔眼睑皮肤粘膜交界处可能含有兔结膜上皮干细胞。

关键词：结膜上皮细胞培养免疫组化 BrdU PCNA

养阴润目丸对干眼大鼠结膜上皮p53蛋白通路细胞凋亡的影响

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养阴润目丸对干眼大鼠结膜上皮p53蛋白通路细胞凋亡的影响

作者：金灿湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究养阴润目丸对干眼大鼠结膜上皮细胞中p53蛋白、p53磷酰化、p53乙酰化表达的影响。方法:将50只SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠随机分为5组:空白对照组(A)、假手术组(B)、模型组(C)、养阴润目丸组(D)、杞菊地黄丸组(E),每组10只。... 详细信息

目的:研究养阴润目丸对干眼大鼠结膜上皮细胞中p53蛋白、p53磷酰化、p53乙酰化表达的影响。方法:将50只SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠随机分为5组:空白对照组(A)、假手术组(B)、模型组(C)、养阴润目丸组(D)、杞菊地黄丸组(E),每组10只。对模型组、养阴润目丸组、杞菊地黄丸组采用去势法制造干眼模型。造模成功后1周开始予以分别灌胃给药治疗。用药前及1个月后,检测各组大鼠泪液分泌试验(SIT)及泪膜破裂时间(BUT),并在光镜下观察其结膜组织变化,用Western-Blot法测定大鼠结膜上皮中p53蛋白、p53磷酰化、p53乙酰化的表达。结果:与模型组对比,养阴润目丸组大鼠泪液分泌显著增多,泪膜破裂时间延长;与模型组对比,养阴润目丸组大鼠结膜上皮排列较整齐,细胞形态较规则,炎性及坏死细胞减少;养阴润目丸可有效减少干眼模型大鼠结膜上皮中p53蛋白、p53乙酰化、p53磷酰化的表达,差异有统计学意义(P结膜上皮组织、减少干眼模型大鼠结膜上皮细胞中p53蛋白、p53乙酰化、p53磷酰化的表达的作用。提示干眼的发病机制与p53信号通路调控的细胞凋亡密切相关,养阴润目丸用于干眼的治疗拥有广阔的前景。

关键词：干眼养阴润目丸结膜上皮 p53乙酰化 p53磷酰化

机械张力对结膜上皮细胞终末分化的影响及其机制的研究

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机械张力对结膜上皮细胞终末分化的影响及其机制的研究

作者：孙慧敏厦门大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过拉伸使结膜组织维持一定的张力状态,以此来探究机械张力对结膜上皮细胞终末分化的影响。方法:选取正常成年新西兰大白兔,以右眼作为实验组,选取上直肌与内眦之间约4mm×8mm大小的球结膜组织,拉紧并缝线使其固定于巩膜上... 详细信息

目的:本研究通过拉伸使结膜组织维持一定的张力状态,以此来探究机械张力对结膜上皮细胞终末分化的影响。方法:选取正常成年新西兰大白兔,以右眼作为实验组,选取上直肌与内眦之间约4mm×8mm大小的球结膜组织,拉紧并缝线使其固定于巩膜上,在左眼相同位置的球结膜上单纯缝线作为假手术组。缝线后第3、7、14天,进行裂隙灯照相,并取材行HE染色,PAS染色,TUNEL染色,免疫荧光染色,Real-Time PCR及蛋白印迹实验检测相关指标,观察结膜组织的结构和功能改变。同时取正常成年新西兰大白兔的结膜组织,在体外培养时给予一定张力,培养1、3和7天后检测结膜组织相关指标的变化情况。结果:实验动物手术区域内的结膜上皮完整,未见明显的炎症细胞浸润和细胞凋亡;相较于正常组及假手术组,手术组结膜上皮内杯状细胞数量及密度显著减少,结膜上皮MUC5AC和K7的表达量降低,而K3/K12(角膜上皮的特异性标记物)的表达量增高;RT-PCR显示手术组Hippo信号通路中YAP1和TAZ的表达量降低,同时TRP通道中部分基因表达也发生了改变。体外张力培养的结膜组织除了未明显表达K3/K12,以及YAP1/TAZ基因表达量增高外,其余结果和动物实验一致。结论:机械张力可以调节结膜上皮细胞的终末分化方向,使结膜上皮细胞失去杯状细胞分化,而向角膜上皮的方向分化。机械张力可能是调节眼表上皮细胞分化方向的重要调节因素。

关键词：机械张力结膜上皮杯状细胞

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结膜上皮干细胞的研究进展

国外医学（眼科学分册） 2004年第6期28卷 363-366页

作者：徐翀(综述) 崔红平(审校) 同济大学附属第十人民医院眼科上海市视觉复明临床医学中心

结膜上皮干细胞是结膜上皮中杯状细胞和非杯状细胞的共同祖细胞,对维持结膜上皮细胞的更新和正常眼表的生理功能有重要作用。本文综述结膜上皮干细胞的概念、存在的部位、鉴别、分化增殖特性、调控因素等的研究进展。

关键词：结膜上皮干细胞研究进展眼表正常眼增殖特性祖细胞杯状细胞分化生理功能