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复方柴芩颗粒对实验性黄曲霉毒素慢性中毒鸭cyp450酶表达的影响

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浙江农业学报 2016年第2期28卷 211-220页

作者：李杨高祝荣茜杨晓敏张睿李英伦四川农业大学动物医学院四川成都611130

建立肉鸭黄曲霉毒素（AFB1）慢性中毒模型,设立正常组、AFB1模型组、亚硒酸钠组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组,采用荧光定量PCR（RT-PCR）法和免疫蛋白印迹（Western-bolt）法检测肝标本中cyp3a4,cyp1A2,cyp2E1的mRNA和... 详细信息

建立肉鸭黄曲霉毒素（AFB1）慢性中毒模型,设立正常组、AFB1模型组、亚硒酸钠组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组,采用荧光定量PCR（RT-PCR）法和免疫蛋白印迹（Western-bolt）法检测肝标本中cyp3a4,cyp1A2,cyp2E1的mRNA和蛋白表达来探讨复方柴芩颗粒对鸭黄曲霉毒素慢性中毒肝脏微粒体细胞色素P450（cytochrome P450,cyp450）酶系cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1表达的影响,并借此深入探讨其解毒机制。结果显示,与模型组相比,中药高、中、低3个剂量组用药7,14和21 d后肝脏微粒体细胞色素P450酶系cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1的mRNA相对表达量显著降低。与模型组相比,中药高、中、低3个剂量组用药7-14 d,则cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1蛋白表达量显著降低;用药21 d后高剂量组3种基因型蛋白表达量显著降低。研究表明,复方柴芩颗粒连续用药1-2周能有效地降低由鸭黄曲霉毒素慢性中毒引起的cyp1A2,cyp2E1,cyp3a4 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高的趋势,但随用药时间增加,各组的cyp1A2,cyp2E1,cyp3a4 mRNA相对表达量和蛋白表达量逐渐升高。

关键词：细胞色素cyp1A2 细胞色素cyp3a4 细胞色素cyp2E1 复方柴芩颗粒黄曲霉毒素B1 mRNA表达蛋白表达

复方柴芩颗粒对鸭黄曲霉毒素慢性中毒cyp450酶活性的影响

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浙江农业学报 2016年第1期28卷 33-37页

作者：李杨高祝荣茜杨晓敏张睿李英伦四川农业大学动物医学院四川成都611130

建立肉鸭aflatoxin B1(AFB1)慢性中毒模型,设立正常组、模型组、亚硒酸钠组、复方柴芩颗粒(中药)高、中、低剂量组。造模后第7,14和21天处死肉鸭取肝,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝标本中cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1活性。结果表明,... 详细信息

建立肉鸭aflatoxin B1(AFB1)慢性中毒模型,设立正常组、模型组、亚硒酸钠组、复方柴芩颗粒(中药)高、中、低剂量组。造模后第7,14和21天处死肉鸭取肝,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝标本中cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1活性。结果表明,与模型组相比,中药高、中、低剂量组用药7和14 d后肝脏微粒体细胞色素P450酶系cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1活性显著降低;用药21 d后cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1活性升高,但与模型组相比差异不明显。说明前期复方柴芩颗粒通过抑制cyp3a4,cyp1A2和cyp2E1活性,减少AFB1前体物质代谢激活,降低其化学性肝脏损伤达到保护肝脏的作用。而用药后21 d cyp450活性升高的原因可能是AFB1蓄积较多,需要更多的cyp450代谢AFB1。

关键词：细胞色素cyp1A2 细胞色素cyp3a4 细胞色素cyp2E1 复方柴芩颗粒黄曲霉毒素B1

银杏叶提取物对AFB1诱发大鼠肝癌过程中cyp3a4活性的影响

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时珍国医国药 2012年第7期23卷 1656-1658页

作者：郑海平欧超曹骥李瑗苏建家李国坚广西医科大学第一附属医院广西南宁530021 广西肿瘤防治研究所实验研究部广西南宁530021

目的动态观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb761)在黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发大鼠肝癌过程中对肝组织代谢酶cyp3a4活性的影响。方法将70只4周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组:AFB1组(25只),AFB1+EGb761组(25只)及对照组(20只)。在... 详细信息

目的动态观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb761)在黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发大鼠肝癌过程中对肝组织代谢酶cyp3a4活性的影响。方法将70只4周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组:AFB1组(25只),AFB1+EGb761组(25只)及对照组(20只)。在诱发肝癌过程中,分别于第13,23,33,43,53,63周对大鼠进行肝活检;实验至第73周处死全部动物取肝组织;利用大鼠肝组织微粒体混合酶体外代谢体系,采用荧光分光光度定量法动态检测肝标本中cyp3a4酶代谢活性。结果 AFB1+EGb761组肝癌发生率明显低于AFB1组(Pcyp3a4活性在第23周和第53周呈现双波峰变化;AFB1+EGb761组在第53周和第63周时cyp3a4酶活性低于AFB1组,差异有统计学意义(Pcyp3a4活性从而减少前致癌物的代谢,降低AFB1致癌性及其化学性肝损伤达到保护肝脏的作用。

关键词：黄曲霉毒素B1 原发性肝癌银杏叶提取物(EGb761) 细胞色素cyp3a4

羊耳菊活性部位对PXR高表达HepG2细胞中cyp3a4蛋白表达的影响

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贵州医科大学学报 2020年第10期45卷 1137-1142页

作者：杨畅宋菲何俊奇王永林李勇军兰燕宇陈一飞刘亭贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室&贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 上海药品评审核查中心上海201203

目的:探讨羊耳菊活性部位(IC-MAC)对孕烷X受体(PXR)高表达HepG2细胞中细胞色素P4503A4酶(cyp3a4)蛋白表达的影响。方法:将质粒pcDNA3.1-PXR转化至DH5α感受态大肠杆菌中扩增并提取质粒,采用FuGENE 6转染试剂,将pcDNA3.1-PXR质粒转染至... 详细信息

目的:探讨羊耳菊活性部位(IC-MAC)对孕烷X受体(PXR)高表达HepG2细胞中细胞色素P4503A4酶(cyp3a4)蛋白表达的影响。方法:将质粒pcDNA3.1-PXR转化至DH5α感受态大肠杆菌中扩增并提取质粒,采用FuGENE 6转染试剂,将pcDNA3.1-PXR质粒转染至人肝癌HepG2细胞,以重组PXR为对照,采用Western blot技术测定PXR-HepG2和HepG2细胞中PXR的表达,并筛选得到高表达PXR的PXR-HepG2细胞模型;将PXR-HepG2细胞和HepG2细胞分别分为阴性对照组(DMSO组,0.1%)、药物处理组(25、50、100 mg/L IC-MAC)和阳性药物组[PXR激动剂利福平(RIF)组,10μmol/L],分别处理24、48及72 h后,采用Western blot技术测定细胞中cyp3a4蛋白的表达。结果:Western blot结果显示,与HepG2细胞相比,转染pcDNA3.1-PXR质粒的PXR-HepG2细胞中PXR表达明显上调(P细胞模型构建成功;25、50及100 mg/L IC-MAC分别作用于PXR-HepG2和HepG2细胞24、48和72 h后,与DMSO组相比,25、50及100 mg/L IC-MAC均可上调PXR-HepG2和HepG2细胞中cyp3a4表达(P细胞上调幅度较HepG2细胞更大。结论:PXR高表达的PXR-HepG2细胞中IC-MAC上调cyp3a4蛋白表达的幅度大于HepG2细胞,提示IC-MAC可能通过PXR来调控cyp3a4蛋白的表达。

关键词：催化域羊耳菊活性部位瞬时转染细胞色素cyp3a4 孕烷X受体

cyp3a4和cyp1A2及cyp2E1快速免疫印迹检测方法的建立

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贵州医科大学学报 2020年第10期45卷 1117-1122页

作者：何俊奇杨畅陆定艳李靖刘欢王永林刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

目的:建立细胞色素P450酶3A4(cyp3a4)、1A2(cyp1A2)及2E1(cyp2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法。方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育... 详细信息

目的:建立细胞色素P450酶3A4(cyp3a4)、1A2(cyp1A2)及2E1(cyp2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法。方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育时间和分离胶类型等常规Western blot条件设置A、B、C、D、E及F组用以考察cyp3a4的最佳检测条件;使用Western blot快速孵育仪,分别以不同的Western blot封闭和抗体孵育时间条件设置A、B、C和D、E、F及G、H、I组分别用以考察cyp3a4、cyp1A2及cyp2E1的最佳检测条件。结果:常规Western blot不同条件下,对cyp3a4的检测中C组检测灵敏度在HepG2、肝微粒体样品检测中高于A、B、D、E及F组(Pcyp3a4的检测C组灵敏度在HepG2、肝组织匀浆及S9样品检测中高于A、B组(Pcyp1A2的各组样品检测中,F组的检测背景干净、条带的均一性均优于D、E组;对cyp2E1检测显示,在肝组织匀浆、S9及肝微粒体样品中I组的检测灵敏度高于G、H组(Pcyp3a4、cyp1A2及cyp2E1进行快速检测,缩短了封闭孵育的时间。

关键词：印迹法,蛋白质细胞色素类细胞色素cyp3a4 细胞色素cyp2E1 细胞色素cyp1A2 Western blot快速孵育仪

阿奇霉素分散片对比卡鲁胺片在兔体内药动学的影响

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中国药师 2022年第2期25卷 264-266,272页

作者：王直滔何玲芳楼永海郑鹏鹏管咪咪浙江省台州医院浙江临海317000 浙江省临海市中医院温州医科大学

目的:研究阿奇霉素分散片对比卡鲁胺片在兔体内药动学的影响。方法:12只新西兰大白兔随机分为试验组和对照组,每组6只。试验组予以比卡鲁胺片50 mg灌胃,对照组予比卡鲁胺片50 mg+阿奇霉素分散片250 mg灌胃,于不同时间点采集血样。HPLC... 详细信息

目的:研究阿奇霉素分散片对比卡鲁胺片在兔体内药动学的影响。方法:12只新西兰大白兔随机分为试验组和对照组,每组6只。试验组予以比卡鲁胺片50 mg灌胃,对照组予比卡鲁胺片50 mg+阿奇霉素分散片250 mg灌胃,于不同时间点采集血样。HPLC检测比卡鲁胺血药浓度,计算药动学参数后进行统计分析。结果:试验组和对照组AUC_((0-∞))分别为(99.66±23.72)和(83.13±6.92)mg·h·L^(-1),MRT_((0-∞))分别为(56.94±5.55)和(44.91±4.97)h,t_(1/2)分别为(60.81±21.16)和(52.82±23.82)h,C_(max)分别为(2.40±0.56)和(2.15±0.35)mg·L^(-1),CLz/F分别为(0.51±0.12)和(0.61±0.05)L·h^(-1)。两组AUC_((0-∞))、t_(1/2)z、C_(max)和CLz/F比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组MRT_((0-∞))比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阿奇霉素会延长兔体内比卡鲁胺的平均驻留时间,在临床使用过程中应注意避免药物在体内蓄积而影响治疗质量。

关键词：阿奇霉素比卡鲁胺细胞色素cyp3a4 高效液相色谱法药代动力学

黄曲霉毒素B_1诱发大鼠肝癌过程中对cyp3a4活性的影响

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中国癌症防治杂志 2011年第2期3卷 110-113页

作者：欧超郑海平曹骥杨春李瑗唐艳萍杨芳李黄羿苏建家广西肿瘤防治研究所实验研究部南宁530021 广西医科大学第一附属医院肿瘤内科

目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发肝癌过程中对cyp3a4活性的影响。方法采用大鼠肝微粒体混合酶体外代谢体系,利用荧光定量法动态检测AFB1诱发肝癌过程中不同时期cyp3a4酶活性。结果 AFB1组cyp3a4含量从实验开始逐渐升高,至23周达顶峰,然... 详细信息

目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发肝癌过程中对cyp3a4活性的影响。方法采用大鼠肝微粒体混合酶体外代谢体系,利用荧光定量法动态检测AFB1诱发肝癌过程中不同时期cyp3a4酶活性。结果 AFB1组cyp3a4含量从实验开始逐渐升高,至23周达顶峰,然后逐渐降低,到43周又升高,出现双波峰变化,阶段性比较差异有统计学意义(P=0.000);对照组cyp3a4含量在整个实验过程中,除33周和63周出现明显降低外,其他各阶段变化不大;组间比较显示AFB1组在诱癌过程中有抑制cyp3a4的趋势,于63周抑制最明显,但尚未达统计学意义(P=0.638);结论AFB1在诱癌过程中有抑制cyp3a4的趋势,可能是与早期癌变的细胞减少对特定基因毒性物质的活化有关。

关键词：细胞色素cyp3a4 AFB1 肝癌