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基于细胞膜脂质的脉冲电场致死鼠伤寒沙门氏菌的机理研究

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基于细胞膜脂质的脉冲电场致死鼠伤寒沙门氏菌的机理研究

作者：欧贇华南理工大学

学位级别：硕士

脉冲电场作为一种新型的食品非热杀菌技术,虽然针对其在食品杀菌领域的应用开展了大量研究,但有关脉冲电场对微生物细胞膜的作用机制及微生物细胞膜环境应激行为对脉冲电场杀菌效果影响机理仍然不甚明了。因此,本论文以鼠伤寒沙门氏菌... 详细信息

脉冲电场作为一种新型的食品非热杀菌技术,虽然针对其在食品杀菌领域的应用开展了大量研究,但有关脉冲电场对微生物细胞膜的作用机制及微生物细胞膜环境应激行为对脉冲电场杀菌效果影响机理仍然不甚明了。因此,本论文以鼠伤寒沙门氏菌为研究对象,采用培养温度(10℃、20℃、30℃、37℃和45℃)修饰细胞膜磷脂,研究沙门氏菌的磷脂特性及其细胞膜流动性,探讨脉冲电场杀菌效率与微生物细胞膜结构、性质的关系。另外,本论文通过研究脉冲电场对沙门氏菌的磷脂特性及氧化损伤的影响,为脉冲电场致死微生物的机制研究提供依据。1.基于不同培养温度下不同生长周期的沙门氏菌对脉冲电场的耐受性研究。结果表明,稳定期沙门氏菌比对数期沙门氏菌对脉冲电场的耐受性大,随着培养温度升高,稳定期沙门氏菌对脉冲电场处理耐受性增大。另外,采用三种数学模型(线性、Weibull和Log-logistic模型)拟合脉冲电场对沙门氏菌的灭活曲线,发现Weibull模型在三种模型中表现出最好的拟合度。2.采用气相色谱法结合荧光偏振法,测定培养温度对稳定期沙门氏菌细胞的脂肪酸组成及其膜流动性的影响,并利用差示扫描量热法测定不同培养温度下沙门氏菌磷脂的相转变温度。结果发现,随着培养温度的升高,沙门氏菌不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值降低,细胞膜流动性降低,磷脂的相转变温度增大,表明细胞膜流动性是决定稳定期沙门氏菌对脉冲电场耐受性的主导因素。3.利用荧光定量PCR的方法测定不同培养温度下稳定期沙门氏菌脂肪酸合成酶基因及σ因子的表达水平,从基因层面上阐述脉冲电场对沙门氏菌的灭活机制。结果表明,在相对较低的培养温度下沙门氏菌通过调控脂肪酸合成酶基因的表达水平(cfa基因相对表达水平下调,fabA基因相对表达水平上调,fabD基因相对表达水平下调),修饰其脂肪酸组成,使细胞膜流动性增加,导致沙门氏菌对脉冲电场更敏感。此外,虽然培养温度会修饰沙门氏菌的σ因子(rpoS、rpoE及rpoH)的相对表达量,但是这些基因的调控作用对脉冲电场杀菌效率没有直接影响。4.以脉冲电场处理前后的沙门氏菌对研究对象,研究发现脉冲电场会降低沙门氏菌的细胞膜流动性,主要表现为脉冲电场处理后的沙门氏菌通过调控脂肪酸合成酶基因的表达(cfa下调,fabA下调,fabD上调),修饰脂肪酸组成(UFA合成减少,SFA合成增多);基于磷脂的拉曼光谱表明,经脉冲电场处理后,I1139/I1082增大,I2874/I2962增大,表明沙门氏菌需要降低其细胞膜流动性来应激脉冲电场的压力环境。另外,经脉冲电场处理的沙门氏菌的MDA含量增多,表明脉冲电场引起细胞膜氧化损伤;cyoA、cyoB和cyoC基因表达水平表现为极显著上调,表明细胞膜是脉冲电场的主要作用位点,并推测与脉冲电场引起的氧化损伤的缓解作用有关。

关键词：脉冲电场鼠伤寒沙门氏菌细胞膜脂质细胞膜流动性基因表达

超极化停搏对体外循环中心肌细胞膜脂质成分变化影响的实验研究

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心肺血管病杂志 2005年第3期24卷 171-173页

作者：曾志勇陈龙王志农杨胜生庄聪文程先进徐志云张宝仁福州南京军区福州总医院心胸外科 350025 上海第二军医大学附属长海医院胸心外科

目的:观察超极化停搏对体外循环(CPB)中缺血再灌注损伤所致心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量变化的影响,评价其对心肌的保护作用。方法:将75只健康家猫随机均分为3组。应用猫体外循环模型。并行循环组:CPB建立后不阻断上、下腔静脉和主动脉... 详细信息

目的:观察超极化停搏对体外循环(CPB)中缺血再灌注损伤所致心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量变化的影响,评价其对心肌的保护作用。方法:将75只健康家猫随机均分为3组。应用猫体外循环模型。并行循环组:CPB建立后不阻断上、下腔静脉和主动脉,仅行并行循环150min;去极化停搏组:阻断主动脉60min,再灌注60min,心脏停搏液使用高钾***液;超极化停搏组:心脏停搏液使用含吡那地尔的低钾***液,余处理与去极化停搏组相同。测定CPB过程中各时间点心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量并计算胆固醇磷脂比值(CP),同时测定心肌组织磷脂酶A2(PLA2)的活性。结果:主动脉阻断期间去极化停搏组心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量明显减少但CP无明显变化,再灌注期间心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量进一步降低,同时伴有CP升高;主动脉阻断及再灌注期间超极化停搏组心肌细胞膜总磷脂及胆固醇含量均明显高于去极化停搏组,且CP未发生明显变化。主动脉阻断及再灌注期间去极化停搏组心肌PLA2活性较主动脉阻断前明显上升,超极化停搏组心肌PLA2活性升高,但明显低于去极化停搏组。结论:超极化停搏可减少缺血再灌注期间心肌细胞膜磷脂和胆固醇的丢失,这可能与心肌PLA2活性受到抑制有关。

关键词：体外循环心肌再灌注损伤细胞膜磷脂胆固醇磷脂酶A2 体外循环模型超极化停搏心肌细胞膜细胞膜脂质

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振动和噪声对细胞膜脂质成分的影响

冶金劳动卫生 1981年第2期 106-106页

作者：李昌吉

实验选体重2.5～3.5公斤的家兔36只。在频率100赫兹,振幅0.5毫米的全身振动及伴有中频噪声90分贝,每天3小时连续3个月作用下,研究对细胞膜脂质的影响。全身振动及噪声作用使红细胞膜的游离胆固醇、磷脂胆碱及磷脂丝氨酸含量降低。同时... 详细信息

实验选体重2.5～3.5公斤的家兔36只。在频率100赫兹,振幅0.5毫米的全身振动及伴有中频噪声90分贝,每天3小时连续3个月作用下,研究对细胞膜脂质的影响。全身振动及噪声作用使红细胞膜的游离胆固醇、磷脂胆碱及磷脂丝氨酸含量降低。同时使肝线粒体中的脂结合胆固醇含量明显降低(39％),游离胆固醇轻度降低(19％),并使磷脂组分改变:心磷脂降低,磷脂乙醇胺增

关键词：细胞膜脂质磷脂胆碱三甲基烷基铵全身振动噪音噪声

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振动和噪声对细胞膜脂质成分的影响

现代预防医学 1980年第3期 68-68页

作者：李昌吉

实验选体重2.5～3.5公斤的家兔36只。在频率100赫,振幅0.5毫米的全身振动及伴有中频噪声90分贝,每天3小时连续3个月作用下,研究对细胞膜脂质的影响。

关键词：细胞膜脂质全身振动噪声噪音

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振动和噪声对细胞膜脂质成分的影响

国外医学(卫生学分册) 1981年第4期 223-223页

作者：李昌吉

实验选体重2.5～3.5 kg的家兔36只。在频率100赫,振幅0.5 mm的全身振动及伴有中频噪声90分贝,每天3小时连续3个月作用下,研究对细胞膜脂质的影响。全身振动及噪声作用使红细胞膜的游离胆固醇、磷脂胆碱及磷脂丝氨酸含量降低。同时使肝... 详细信息

实验选体重2.5～3.5 kg的家兔36只。在频率100赫,振幅0.5 mm的全身振动及伴有中频噪声90分贝,每天3小时连续3个月作用下,研究对细胞膜脂质的影响。全身振动及噪声作用使红细胞膜的游离胆固醇、磷脂胆碱及磷脂丝氨酸含量降低。同时使肝线粒体中的脂结合胆固醇含量明显降低(39%),游离胆固醇轻度降低(19%),并使磷脂组分改变:心磷脂降低,磷脂乙醇胺增加。

关键词：细胞膜脂质磷脂胆碱三甲基烷基铵全身振动噪音噪声

阿尔茨海默病中膜脂改变与Aβ异常相关的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2016年第12期36卷 1809-1811,1816页

作者：李沁洁钟远上海交通大学附属第六人民医院老年科上海200233

细胞膜脂质主要包括鞘脂类、甘油磷脂类以及固醇类3种,它们在大脑中含量丰富且广泛。目前已有许多研究发现了机体中膜脂质类的代谢紊乱参与了阿尔茨海默病(AD)的病理生理,尤其与β淀粉样蛋白(Aβ)及其相关代谢酶异常息息相关。该文针对A... 详细信息

细胞膜脂质主要包括鞘脂类、甘油磷脂类以及固醇类3种,它们在大脑中含量丰富且广泛。目前已有许多研究发现了机体中膜脂质类的代谢紊乱参与了阿尔茨海默病(AD)的病理生理,尤其与β淀粉样蛋白(Aβ)及其相关代谢酶异常息息相关。该文针对AD病程中涉及的膜脂改变与Aβ异常相关的研究作一综述,从细胞膜脂质代谢的角度为AD相关发病机制的研究提供新的视角和思路。

关键词：细胞膜脂质鞘磷脂甘油磷脂胆固醇阿尔茨海默病

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蛋白质转导域在医学中的研究与应用

中风与神经疾病杂志 2005年第6期22卷 566-568页

作者：吴昊吴江吉林大学第一医院神经内科吉林长春130021

细胞膜脂质双分子层的非渗透特性阻止了一些肽类、蛋白质、核酸等生物活性物质进入细胞内,而血脑屏障也使大分子蛋白类药物难以到达中枢神经系统发挥疗效.这些天然屏障的存在为一些生物学机制研究和疾病基因治疗的应用带来了困难.而近... 详细信息

细胞膜脂质双分子层的非渗透特性阻止了一些肽类、蛋白质、核酸等生物活性物质进入细胞内,而血脑屏障也使大分子蛋白类药物难以到达中枢神经系统发挥疗效.这些天然屏障的存在为一些生物学机制研究和疾病基因治疗的应用带来了困难.而近来一种被称为蛋白质转导域(protein transduction domains,PTDS)的短肽由于其能携带生物活性物质有效的穿过细胞膜甚至血脑屏障,引起了众多学者的极大的关注.

关键词：蛋白质转导域生物活性物质细胞膜脂质医学中枢神经系统血脑屏障蛋白类药物基因治疗机制研究分子层

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抗精神病药物的细胞膜作用机理和筛选

中国医药工业杂志 1984年第6期 33-43页

作者：宋廷生蔡能上海市精神病防治院

自从五十年代氯丙嗪问世以来,对于抗精神病药物的研制、药物作用机理、精神病病理机制的探索,起了巨大的推动和促进作用。在受体分析方法出现之前,临床精神行为药理研究,已为抗精神病药物的多巴胺受体阻断假说提供了间接证据,明确了精... 详细信息

自从五十年代氯丙嗪问世以来,对于抗精神病药物的研制、药物作用机理、精神病病理机制的探索,起了巨大的推动和促进作用。在受体分析方法出现之前,临床精神行为药理研究,已为抗精神病药物的多巴胺受体阻断假说提供了间接证据,明确了精神分裂症和脑内多巴胺神经系统活动异常的关系。1974年,高放射活性的~3H-配体合成和放射受体分析法的发展,使脑内多巴胺受体的直接研究成为可能,并取得重要进展。这些研究主要集中在如下几个方面:脑内多巴胺受体实体的研究及其细胞学定位;脑内多巴胺神经通路系统探索;精神疾患和脑内多巴胺受体变化的关系;神经阻断剂对多巴胺受体

关键词：抗精神病药物细胞膜脂质精神病抗精神病药多巴胺激动剂多巴胺受体细胞膜质膜作用机理

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细胞表面免疫学

四川医学院学报 1978年第1期 87-94页

作者：丘迠春四川医学院肿瘤研究室

细胞表面亦即细胞膜,为细胞的重要组成部分。它既使细胞与外界隔开,又使细胞与外环境密切联系,使细胞与外环境进行各种物质交换,从而获得各种营养必需的物质,排出新陈代谢产生的废物,并维持细胞内一定的渗透压,酸硷度等等。生物电的产生... 详细信息

细胞表面亦即细胞膜,为细胞的重要组成部分。它既使细胞与外界隔开,又使细胞与外环境密切联系,使细胞与外环境进行各种物质交换,从而获得各种营养必需的物质,排出新陈代谢产生的废物,并维持细胞内一定的渗透压,酸硷度等等。生物电的产生,兴奋的传导等亦无一不是细胞膜的功能。近年来发现细胞膜对细胞的增殖和分化有调节和控制作用,癌细胞的无限制生长和增殖与细胞失去调控有密切的关系;癌细胞间相互作用的异常性和细胞间彼此之间粘合性降低,接触抑制降低,均与细胞膜功能的改

关键词：细胞膜脂质抗体分子微丝白质髓质肿瘤细胞细胞株巨噬细胞吞噬细胞胸腺淋巴组织组织相容性受体结合组织免疫绵羊红细胞小鼠小家鼠抗绵羊红细胞抗体卫分复合物特异受体决定簇