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人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨

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山东医药 2009年第52期49卷 9-11页

作者：牛新清王玉红李强王辉新乡医学院河南新乡453000 新乡医学院第一附属医院

目的探讨人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤的机制。方法以K562细胞为对照,应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同效靶比时体外培养的同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤SUME细胞的活性。用RT-PCR检测K562和SUME细胞MHC-Ⅰ类链相关分子A和B(MI... 详细信息

目的探讨人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤的机制。方法以K562细胞为对照,应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同效靶比时体外培养的同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤SUME细胞的活性。用RT-PCR检测K562和SUME细胞MHC-Ⅰ类链相关分子A和B(MICA/B)、人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白(ULBP)1～3基因,用流式细胞仪检测两组细胞MICA/B、ULBP1～3和HLA-Ⅰ分子的表达情况。结果同一效靶比时NK细胞杀伤SUME细胞的活性低于杀伤K562细胞的活性(P细胞均表达基因MI-CA/B和ULBP1～3,但SUME细胞低表达MICA、MICB和ULBP1～3分子。结论SUME细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的可能机制是SUME细胞高表达HLA-Ⅰ类分子,低表达NKG2D的配体MICA/B和ULBP1～3。

关键词：鼻咽肿瘤杀伤细胞受体,杀伤细胞细胞毒性试验 HLA-Ⅰ

包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸纳米粒子制备及体外释放行为考察

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中国实验方剂学杂志 2014年第1期20卷 1-4页

作者：李资玲熊向源龚妍春李玉萍江西科技师范大学生命科学学院南昌330013

目的:制备包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸(PLA-P85-PLA)纳米粒子并考察其形态及体外释放行为。方法:采用本体聚合法合成PLA-P85-PLA嵌段共聚物,透析法制备PLA-P85-PLA纳米粒子,UV测定包封率及载药量,HPLC测定紫杉醇的体外释放行为,MT... 详细信息

目的:制备包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸(PLA-P85-PLA)纳米粒子并考察其形态及体外释放行为。方法:采用本体聚合法合成PLA-P85-PLA嵌段共聚物,透析法制备PLA-P85-PLA纳米粒子,UV测定包封率及载药量,HPLC测定紫杉醇的体外释放行为,MTT测定纳米粒子的生物相容性。HPLC条件为流动相乙腈-PBS(50∶50),检测波长227 nm。结果:包埋紫杉醇的PLA-P85-PLA纳米粒子粒径140 nm,包封率56%,载药量9.4%,体外释放在前20 h呈快速释放形式,接着在长达近4 d的时间内呈现缓慢释放,且仅约12%被包埋的紫杉醇释放出来,包埋紫杉醇的PLA-P85-PLA纳米粒子处理的OVCAR-3细胞存活率(41%)明显低于空白紫杉醇(70%)。结论:PLA-P85-PLA嵌段共聚物是良好的药物载体,可用于包埋疏水性强的抗癌药物。

关键词：紫杉醇 Pluronic P85 纳米粒子体外释放行为高效液相色谱细胞存活率细胞毒性试验

金属粉末注射成型支架实验动物生物相容性研究(英文)

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Transactions of Nonferrous Metals Society of China 2021年

作者：舒畅何昊范博文李杰华王暾李东阳李益民何浩中南大学湘雅二医院血管外科中国医学科学院阜外医院血管外科中南大学粉末冶金国家重点实验室广西科技大学

本文旨在通过临床动物试验来评价金属注射成形（MIM）新型血管支架的可行性与安全性。通过粉末注射成形技术制备了血管支架，大幅提高了材料利用率；研究了MIM过程中碳杂质含量波动对316L不锈钢力学性能与耐腐蚀性能的影响；同时，开展... 详细信息

本文旨在通过临床动物试验来评价金属注射成形（MIM）新型血管支架的可行性与安全性。通过粉末注射成形技术制备了血管支架，大幅提高了材料利用率；研究了MIM过程中碳杂质含量波动对316L不锈钢力学性能与耐腐蚀性能的影响；同时，开展了MIM血管支架的体外毒性测试与动物试验。研究表明，316L不锈钢的性能对碳含量变化极为敏感，在MIM制备过程中应该对碳含量波动实施精准控制。所有的MIM血管支架都成功植入狗的主动脉血管，结果显示MIM 316L不锈钢支架并未出现明显毒性，能够稳定维持支架形状及结构，快速实现内皮化过程，展示出长期植入通畅性。研究证明了通过MIM技术制备的新型血管支架具备合适的结构、物理以及化学稳定性，在临床实践中具备广阔应用前景。

关键词：血管支架金属注射成型细胞毒性试验动物实验生物相容性

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雪卡毒素的提取鉴定及其细胞毒性与降解研究

雪卡毒素的提取鉴定及其细胞毒性与降解研究

作者：闫鸿鹏广东工业大学

学位级别：硕士

雪卡毒素是一种具有神经毒性的海洋藻类毒素。雪卡毒素主要由一种腰鞭毛藻-冈比尔盘藻产生,首先在食草鱼体内积累,然后通过食物链转移到大型食肉鱼类体内最终到人类体内。人们食用了含有雪卡毒素的鱼类会引起中毒,伴随着肠胃系统、神经... 详细信息

雪卡毒素是一种具有神经毒性的海洋藻类毒素。雪卡毒素主要由一种腰鞭毛藻-冈比尔盘藻产生,首先在食草鱼体内积累,然后通过食物链转移到大型食肉鱼类体内最终到人类体内。人们食用了含有雪卡毒素的鱼类会引起中毒,伴随着肠胃系统、神经系统、心血管系统症状,个别严重者可能会瘫痪、昏迷和死亡,是目前世界上报道最多的海洋生物毒性疾病。全世界范围内每年因食用热带鱼而中毒的人数约有50000人。近年来广东、香港等地经常发生雪卡毒素中毒事件,严重威胁着人们食用海洋鱼类安全。为了给雪卡毒素中毒的预防及检测提供借鉴,本论文对雪卡毒素的提取鉴定,细胞毒性及降解进行了研究。方法：雪卡毒素在鱼体内含量甚微,主要存在鱼的内脏中。本文在国内外学者研究基础上,建立了一种从石斑鱼肝脏中快速提取雪卡毒素的方法,并经过Florisil柱、固相萃取柱和Sephadex LH-20柱纯化制得了高纯度的雪卡毒素提取物。用高效液相色谱(HPLC)法对太平洋雪卡毒素-1(P-CTX-1)与提取物进行对比分析;应用高效液相色谱/质谱(HPLC/MS)法对提取纯化的雪卡毒素进行扫描鉴定;接着以乌本苷/藜芦定为激活剂,验证了雪卡毒素提取物对人神经母细胞瘤(SK-N-SH)的细胞毒性作用。最后研究了不同初始溶液浓度,不同光源下TiO2-ZnO纳米复合胶片对雪卡毒素的光降解效果。实验结果：(1)本文成功建立了一种从鱼体内快速提取纯化雪卡毒素的方法;(2)以215nm为检测波长,HPLC检测分析雪卡毒素标准品与提取物在8.705min处有相同的保留时间;(3)HPLC/MS扫描雪卡毒素纯化物,检测出纯化样品在m/z=1111.3和m/z=1133处有雪卡毒素[M+H]+峰和[M+Na]+峰,与Lewis(?)报道的P-CTX-1分子离子峰完全吻合;(4)验证了雪卡毒素提取物不仅对在细胞形态,而且对细胞活力都有影响。利用MTT法分析了不同剂量雪卡毒素对SK-N-SH的毒性作用,毒素剂量与抑制率成线性关系,确定了雪卡毒素的检测限到·0.1ng/mL, IC50=200ng/mL。利用细胞毒性试验不仅能检测出提取物中有对神经细胞毒性作用的雪卡毒素存在,而且能定量检测雪卡毒素含量;(5)确定了TiO2-ZnO纳米复合胶片在紫外光照射下,雪卡毒素溶液浓度为2mg/L,光催化降解速率和效果均达到最好,40min内就能完全降解。结论：本课题成功地从石斑鱼鱼肝内提取纯化出高纯度的雪卡毒素,经HPLC/MS法与细胞毒性试验鉴定为P-CTX-1,同时研究了TiO2-ZnO纳米复合胶片对雪卡毒素的光降解条件及作用。本课题为我国雪卡毒素相关研究工作奠定了基础。

关键词：雪卡毒素高效液相色谱-质谱细胞毒性试验降解

壳聚糖-左氧氟沙星长效缓释敷料的体外细胞毒性和抗菌效果研究

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天津医药 2013年第6期41卷 587-589页

作者：王晓辉高萍黄姝杰关静陶遵威李毅敏天津市医药科学研究所 300020 军事医学科学院卫生装备研究所

目的研究壳聚糖-左氧氟沙星长效缓释敷料的体外细胞毒性、抗菌效果以及肿瘤坏死因子(TNF)-α作为评价抗菌效果指标的可行性。方法参照ISO10993-5:2009评价该敷料的细胞毒性;制作染菌创伤白兔模型15只并分为3组,空白对照组用凡士林油纱包... 详细信息

目的研究壳聚糖-左氧氟沙星长效缓释敷料的体外细胞毒性、抗菌效果以及肿瘤坏死因子(TNF)-α作为评价抗菌效果指标的可行性。方法参照ISO10993-5:2009评价该敷料的细胞毒性;制作染菌创伤白兔模型15只并分为3组,空白对照组用凡士林油纱包扎,阳性对照组用纳米银创伤贴包扎,实验样品组用壳聚糖-左氧氟沙星长效缓释敷料包扎,于6h、1d、4d、7d,采用活组织培养法检测3组的菌落数,用双抗体夹心法检测TNF-α含量,与菌落数实验结果进行比较。结果该敷料体外细胞毒性反应为0级;实验样品组4个时点的菌落数均低于空白对照组,在6h、1d、4d时,实验样品组均低于阳性对照组(P细胞毒性,具有长效抗菌能力,TNF-α不能作为评价抗菌效果的指标。

关键词：壳聚糖氧氟沙星迟效制剂肿瘤坏死因子抗菌药细胞毒性试验

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基于U251细胞的急性毒性体外检测方法

毒理学杂志 2018年第4期32卷 286-291页

作者：曾丽海郑杰蔚殷霄蔡婷峰谢植伟赖关朝黄振烈广东省职业病防治院广东省职业病防治重点实验室广东广州510300 南方医科大学公共卫生学院食物安全与健康研究中心广东广州510515

目的建立基于人神经胶质瘤细胞系U251细胞的急性毒性体外检测方法,初步评估其预测化学品急性毒性的能力。方法体外培养U251细胞,对11种已知急性毒性的化学物质进行中性红摄取试验,获得不同浓度受试物与细胞共孵育24、48和72 h的细胞毒性... 详细信息

目的建立基于人神经胶质瘤细胞系U251细胞的急性毒性体外检测方法,初步评估其预测化学品急性毒性的能力。方法体外培养U251细胞,对11种已知急性毒性的化学物质进行中性红摄取试验,获得不同浓度受试物与细胞共孵育24、48和72 h的细胞毒性(IC50)与急性毒性(LD50)的关系,并与Registry Cytotoxicity(RC)模型曲线进行比较;对21种化学品进行中性红摄取试验,根据RC模型预测急性毒性LD50值,并对其进行急性毒性分级,将分级结果与体内急性经口毒性试验分级结果进行比较。结果与U251细胞共孵育24、48和72 h的细胞毒性IC50与相应的急性毒性LD50存在相关性(R224 h=0.857,R248 h=0.895,R272 h=0.929;P试验体系可应用RC模型预测急性毒性;21种化学品的急性毒性LD50预测值与体内急性毒性LD50值进行比较,分级一致率分别为76.2%(24 h,16/21)、66.7%(48 h,14/21)和71.4%(72 h,15/21)。结论在本试验体系下,U251细胞中性红摄取试验能够较好的预测化学品急性毒性。

关键词：急性毒性中性红摄取试验细胞毒性试验替代方法化学品

猪多杀性巴氏杆菌新疆株的分离鉴定及生物学特性研究

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黑龙江畜牧兽医 2015年第4期 155-157页

作者：郝成武何传雨贺笋何海李延涛新疆天康畜牧生物技术股份有限公司乌鲁木齐830032

猪萎缩性鼻炎（atrophic rhinitis,AR）是德国学者Franque等人于1830年首次发现的。我国于1964年在浙江省余姚市从英国进口的＂约克＂种猪中发现该病。近年来,已有20多个省市报道有此病的发生,在某些大型集约化猪场AR的阳性率达60%以上。

关键词：猪萎缩性鼻炎集约化猪场带菌猪浙江省余姚市多杀性巴氏杆菌 rhinitis atrophic 脑心浸液培养基生物学特性细胞毒性试验

通过在6—甲基嘌呤脱氧核苷中有限稀释消除细胞中感染的霉形体

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中国兽药杂志 1989年第1期 50-52页

作者： Kyoko Ishiguro 尚永丰

把污染了霉形体的细胞在含6—甲基嘌呤核苷的培养基中进行克隆。结果表明,如果细胞对0.6—1.2μm的6—甲基嘌呤敏感,则可在含6—甲基嘌呤脱氧核苷的培养基中有限稀释以消除霉形体的感染。引言霉形体的污染给用细胞进行的免疫学试

关键词：霉形体细胞毒性试验甲基磷酸化酶上清液细胞培养细胞诊断链烷基糖基转移酶培养(生物) 细胞有限稀释

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医用外科拉链生物相容性研究

中国兽医杂志 2004年第6期40卷 22-24页

作者：何明忠王胜赖国旗韩志刚潘永全谭毅重庆医科大学实验动物中心重庆渝中400016

生物相容性是指生命体组织对材料产生反应的一种性能,包括组织相容性和血液相容性,生物安全性和生物功能性原则,生物材料对宿主是异物,在体内必定会产生某种应答,或出现排异现象,生物材料要应用于机体,应使发生的反应被接受,不产生有害... 详细信息

生物相容性是指生命体组织对材料产生反应的一种性能,包括组织相容性和血液相容性,生物安全性和生物功能性原则,生物材料对宿主是异物,在体内必定会产生某种应答,或出现排异现象,生物材料要应用于机体,应使发生的反应被接受,不产生有害作用,因此,要对生物材料进行生物安全性评价,以保证临床应用的安全性.生物安全性评价方法目前形成了从细胞到整体动物较完整的评价方法[1],本研究根据医用拉链之用途参照国家标准医疗器械生物学评价(GB/T16886-1997)对其进行了L929细胞毒性试验、兔皮肤急性毒性试验、皮肤刺激试验、豚鼠局部皮肤致敏试验,观察该拉链对细胞的毒性作用、对动物的毒性、致敏、刺激作用,评价其生物相容性,为临床应用提供实验依据,以确保该拉链能合理的应用于临床.

关键词：医用外科拉链生物相容性细胞毒性试验皮肤急性毒性试验皮肤刺激试验