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成年心肌梗死小鼠心肌细胞去分化现象观察

山东医药 2016年第18期56卷 34-36页

作者：沈文艳陈瑶李军上海交通大学医学院附属仁济医院上海200217 上海交通大学Med-X临床干细胞研究中心

目的观察成年心肌梗死小鼠心肌细胞是否存在去分化现象。方法 20只成年小鼠随机分为观察组和对照组各10只,观察组制备心肌梗死模型,对照组仅行假手术处理。采用RT-PCR法检测两组心肌组织α-横纹肌肌动蛋白(α-SA)、横纹肌蛋白(α-actin... 详细信息

目的观察成年心肌梗死小鼠心肌细胞是否存在去分化现象。方法 20只成年小鼠随机分为观察组和对照组各10只,观察组制备心肌梗死模型,对照组仅行假手术处理。采用RT-PCR法检测两组心肌组织α-横纹肌肌动蛋白(α-SA)、横纹肌蛋白(α-actinin)、转录因子nkx2.5、肌细胞增强因子2(mef2)、细胞增殖核抗原(Ki67)、干细胞标记物血管内皮生长因子受体(flk-1)mRNA,采用免疫荧光染色法检测两组心肌组织磷酸化组蛋白(PH3)、连接蛋白43(cx43)。结果观察组心肌组织α-SA、α-actinin、nkx2.5、mef2 mRNA表达量均低于对照组,Ki67、flk-1、mRNA表达量及PH3、cx43均高于对照组,P均细胞存在去分化现象。

关键词：心肌梗死心肌细胞细胞去分化 α-横纹肌肌动蛋白横纹肌蛋白转录因子细胞增殖核抗原磷酸化组蛋白

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整合素与软骨细胞去分化

中国骨与关节杂志 2017年第3期6卷 232-236页

作者：张煜刘鑫成范宏斌第四军医大学西京医院全军骨科研究所西安710032

构建组织工程化软骨常常需要体外扩增软骨细胞。骨但是,软骨细胞在体外培养、扩增过程中常发生去分化（（dedifferentiation）而丧失细胞表型,导致再生软骨中1II型胶原、氨基葡萄糖（GAG）合成减少,易发生退变。区目前有关去分化的具体... 详细信息

构建组织工程化软骨常常需要体外扩增软骨细胞。骨但是,软骨细胞在体外培养、扩增过程中常发生去分化（（dedifferentiation）而丧失细胞表型,导致再生软骨中1II型胶原、氨基葡萄糖（GAG）合成减少,易发生退变。区目前有关去分化的具体机理尚未阐明,但以往的研究表短明去分化主要与体外扩增的软骨细胞缺乏细胞与细胞外结基质（extracellular matrix,ECM）之间有效的信号刺激有高关[2-3]。

关键词：整合素类软骨细胞细胞去分化软骨

RNA测序分析OCT4诱导人毛囊间充质干细胞去分化的作用机制

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青岛大学学报（医学版） 2022年第1期58卷 19-23页

作者：阮迎春彭森孙鹏鹏姜维娜刘志晶陈桦青岛大学医学部基础医学院病理学系山东青岛266071 青岛市市立医院病理科青岛市中心医院重症医学中心

目的检测转导Octamer转录因子4(OCT4)的人毛囊间充质干细胞(hHFMSC)衍生的贴壁和悬浮亚群转录组去分化差异,探讨OCT4诱导hHFMSC去分化的作用机制以及去分化程度对细胞形态及黏附性的影响。方法收集hHFMSC、贴壁亚群和悬浮亚群3组细胞并... 详细信息

目的检测转导Octamer转录因子4(OCT4)的人毛囊间充质干细胞(hHFMSC)衍生的贴壁和悬浮亚群转录组去分化差异,探讨OCT4诱导hHFMSC去分化的作用机制以及去分化程度对细胞形态及黏附性的影响。方法收集hHFMSC、贴壁亚群和悬浮亚群3组细胞并提取总RNA,进行转录组测序,分析差异基因的组织特异性生物功能,并检测组织特异性基因的表达变化。结果OCT4转导后hHFMSC中下调基因显著富集于毛囊、表皮及皮肤附属器发育的生物过程,且毛囊发育、皮肤分化相关基因(MYSM1、KRT15及RBPJ等)显著下调;与贴壁亚群相比,悬浮亚群中MYSM1及FZD6等毛囊发育基因进一步下调。结论过表达OCT4可能通过调控毛囊、表皮及皮肤附属器发育基因的表达诱导hHFMSC去分化,且细胞形态及黏附性可能与组织特异性基因表达谱有关。

关键词：八聚体转录因子3 间质干细胞毛囊细胞重新编程细胞去分化

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伴炎性肌纤维母细胞肿瘤样特征的去分化脂肪肉瘤五例临床病理学观察

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中华病理学杂志 2019年第4期48卷 282-287页

作者：司海鹏王震范钦和章宜芬杨丹球张智弘贡其星南京中医药大学附属医院病理科 210029 南京医科大学第一附属医院病理科 210029 广西壮族自治区钦州市第一人民医院病理科 535000

目的探讨伴炎性肌纤维母细胞肿瘤(IMT)样特征的去分化脂肪肉瘤(DDLPS)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2013—2018年间就诊于南京医科大学第一附属医院、南京中医药大学附属医院及广西壮族自治区钦州市第一人民医院的5例伴IM... 详细信息

目的探讨伴炎性肌纤维母细胞肿瘤(IMT)样特征的去分化脂肪肉瘤(DDLPS)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2013—2018年间就诊于南京医科大学第一附属医院、南京中医药大学附属医院及广西壮族自治区钦州市第一人民医院的5例伴IMT样特征的DDLPS,采用EnVision法检测免疫组织化学表型,荧光原位杂交(FISH)法检测MDM2基因扩增情况。结果5例均为男性,年龄53~65岁(平均61岁)。临床表现主要为肿块占位症状,肿瘤位于肠系膜2例,肠壁、腹膜后、精索各1例。大体上肿瘤无完整包膜,直径约3~13 cm,平均6.7 cm,切面灰白灰黄质韧。组织学上,肿瘤的去分化区域类似于IMT形态,瘤细胞梭形、多边形或星芒状,席纹状、小片状或杂乱排列,间质有多少不等的炎性病变和胶原。IMT的组织学表现(黏液型、富细胞型及少细胞纤维化型)在伴IMT样特征的DDLPS均可出现,其中,以少细胞纤维化型形态最为多见。肿瘤周边均可寻找到高分化脂肪肉瘤的区域。有1例伴有高级别DDLPS成分。免疫表型上,4例强阳性表达MDM2及p16,2例表达平滑肌肌动蛋白,1例结蛋白及CD34局灶阳性。4例行间变性淋巴瘤激酶(ALK)-1基因检测者均阴性。5例行FISH检测,均见MDM2基因扩增。5例均获随访资料,随访时间3~66个月(平均23个月),2例复发,无疾病进展病例随访时间3~14个月。结论伴IMT样特征的DDLPS形态学类似IMT,但生物学行为更具有侵袭性,需要与IMT、炎症型或硬化型脂肪肉瘤、侵袭性纤维瘤病、孤立性纤维性肿瘤、低度恶性肌纤维母细胞肉瘤、低级别纤维肉瘤等其他中间型或低度恶性肿瘤鉴别。

关键词：软组织肿瘤脂肪肉瘤细胞去分化原癌基因蛋白质c-mdm2 炎性肌纤维母细胞肿瘤

碱性成纤维细胞生长因子对国产多孔钽-软骨细胞复合物软骨细胞表型维持及去分化的影响

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第二军医大学学报 2015年第3期36卷 248-255页

作者：张辉王茜赵阳甘洪全王辉毕成李琪佳王志强南方医科大学研究生院广州510515 唐山市第二医院关节一科唐山063000 河北联合大学基础医学院人体解剖学系唐山063000 河北联合大学附属医院骨科唐山063000 河北联合大学实验中心唐山063000

目的对比不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对国产多孔钽-软骨细胞复合物维持软骨细胞表型和去分化作用的影响。方法分离培养3周龄新西兰幼兔膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、番红O(Safra... 详细信息

目的对比不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对国产多孔钽-软骨细胞复合物维持软骨细胞表型和去分化作用的影响。方法分离培养3周龄新西兰幼兔膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、番红O(Safranin O)染色鉴定软骨细胞;取第3代软骨细胞分为5组:A组(1ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞),B组(10ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞),C组(50ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞),D组(多孔钽-软骨细胞)及E组(软骨细胞);MTT法检测不同浓度bFGF对多孔钽-软骨细胞生长及增殖状态的影响;扫描电镜观察bFGF-多孔钽-软骨细胞复合物细胞形态及生长;Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ型胶原免疫细胞化学染色检测软骨细胞表型变化及去分化状态;real time-PCR检测软骨细胞Ⅱ、Ⅹ型胶原mRNA表达。结果Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色及Safranin O染色均呈阳性反应,证实所分离培养的细胞为软骨细胞;1、10、50ng/mL bFGF均可促进软骨细胞增殖,各实验组(A^D组)软骨细胞增殖与对照组(E组)相比,差异有统计学意义,其中10ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞增殖最为明显(P细胞在多孔钽表面及孔隙内生长、黏附,早期呈不等的球形,24h后胞质延展并向周围伸出多条突起,相互连接、延展向孔隙内部生长,细胞间相互融合并覆盖支架材料;Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ和Ⅹ型胶原免疫细胞化学染色显示10ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞组(B组)Ⅱ和Ⅸ型胶原表达高于对照组(E组,P细胞Ⅱ、Ⅹ型胶原mRNA表达显示:各实验组(A^D组)Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组(E组,P细胞复合物软骨细胞表型,抑制去分化,加强软骨细胞分泌功能。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子国产多孔钽表型细胞去分化软骨细胞

去分化脂肪细胞及其在口腔颌面部骨组织工程中应用的研究进展

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口腔疾病防治 2024年第3期32卷 223-228页

作者：沈荧怡曹希萌胥春上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

寻找合适的种子细胞是口腔颌面部骨组织再生领域亟需解决的重要科学问题。脂肪干细胞在组织与器官修复和再生中的应用已有较多研究,近年来,去分化脂肪细胞在骨组织工程领域也显露了广阔的应用前景。去分化脂肪细胞表达干细胞相关标志,... 详细信息

寻找合适的种子细胞是口腔颌面部骨组织再生领域亟需解决的重要科学问题。脂肪干细胞在组织与器官修复和再生中的应用已有较多研究,近年来,去分化脂肪细胞在骨组织工程领域也显露了广阔的应用前景。去分化脂肪细胞表达干细胞相关标志,且具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、心肌细胞和内皮细胞等多向分化的潜能,此外,去分化脂肪细胞还具有获取方式微创、增殖能力强、同质性高等优势。目前,去分化脂肪细胞在基于支架及无支架骨组织工程中应用的研究结果均能证实其促进骨再生的有效性,但其细胞学研究仍面临一些挑战,包括细胞培养纯度尚不够高、表型特性不完全明确和去分化机制不明晰等。相信随着分离、培养、鉴定以及定向诱导其成骨分化的方法不断发展完善,去分化脂肪细胞有望在未来成为口腔颌面部骨组织工程领域中优异的种子细胞。

关键词：再生医学组织工程学去分化脂肪细胞细胞去分化骨再生颌面修复术脂肪干细胞脂肪细胞

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去分化来源表皮干细胞的分离与鉴定

解放军医学杂志 2009年第3期34卷 293-296页

作者：孙晓艳卫勃付小兵刘惠玲解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院普通外科北京100853

目的分离培养和鉴定去分化来源的表皮干细胞。方法采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导表皮细胞去分化形成表皮干细胞,采用Ⅳ型胶原黏附法分离获得去分化来源的表皮干细胞。观察去分化来源表皮干细胞的形态及增殖特点,并通过免疫细胞... 详细信息

目的分离培养和鉴定去分化来源的表皮干细胞。方法采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导表皮细胞去分化形成表皮干细胞,采用Ⅳ型胶原黏附法分离获得去分化来源的表皮干细胞。观察去分化来源表皮干细胞的形态及增殖特点,并通过免疫细胞化学、免疫荧光及流式细胞技术对其形态和表型进行鉴定。结果去分化来源的表皮干细胞能够表达表皮干细胞及其亚群特异性的表面标志蛋白,如β1整合素、CK19、CK14等,而CK10的表达为阴性。激光共聚焦检测显示α6整合素和CD71在去分化来源表皮干细胞及其亚群中的分布均存在着区域性差异。此外,流式细胞检测结果显示去分化来源的表皮干细胞中主要包含α6+CD71-和α6+CD71+的两种细胞群落,分别占被检测细胞总数的24.52%±7.88%及66.97%±5.04%。结论去分化来源的表皮干细胞与机体自身来源的表皮干细胞在形态和表型上具有相似性,可以作为表皮干细胞的替代细胞应用于皮肤重建与再生的相关研究。

关键词：表皮干细胞细胞去分化免疫组织化学流式细胞术

人脐带间充质干细胞神经向分化与去分化基因表达谱分析

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2017年第1期7卷 29-34页

作者：焦扬赵洪波刘平付旭锋陈国栋罗晓曦桑雄波郑冰蓉云南大学医学院昆明650091 昆明医科大学云南省干细胞与再生医学重点实验室 650500

目的用生物信息学方法从公共基因芯片数据库(GEO)中初步筛选出与人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)神经向分化和去分化相关的生物学功能和对应的信号通路,分析蛋白互作关系,为进一步开展h UC-MSCs神经向分化和去分化的实验研究提供指导信... 详细信息

目的用生物信息学方法从公共基因芯片数据库(GEO)中初步筛选出与人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)神经向分化和去分化相关的生物学功能和对应的信号通路,分析蛋白互作关系,为进一步开展h UC-MSCs神经向分化和去分化的实验研究提供指导信息。方法在公共基因芯片数据库GEO中搜寻h UC-MSCs神经向分化与去分化的基因芯片数据,用R和Bioconductor软件包进行统计学分析,筛选差异基因;用Gene Analytics在线分析工具进行GO分析和通路分析;用STRING数据库进行差异表达基因对应的蛋白互作关系分析。结果共筛选得到影响神经向分化和去分化过程的670个上调基因和1 458个下调基因;进一步对这些差异基因进行功能富集分析,发现上调过程的功能集中表现为促血管生成和细胞黏附,下调的生物学过程则主要和代谢相关;上调通路主要有与细胞增殖、分化、凋亡有关的ERK、血管生成和Akt等通路,下调通路主要有与细胞代谢和生物合成相关的萜类化合物骨架生物合成、Cholesterot Biosynthesis II和磷酸肌醇代谢等通路,其中特别的是,维持胚胎干细胞多能性的Nanog通路出现在下调通路中;蛋白互作网络分析发现,与血管生成、细胞黏附相关的蛋白VEGFA、IL-6、FGF2、MMP和IL-8有较高的degree值。结论影响h UC-MSCs神经向分化和去分化的因素很多,其中,促进血管生成、细胞黏附及细胞繁殖相关的基因、生物反应过程、信号通路及相关蛋白起着重要作用。上述基于生物信息学的筛查分析结果为进一步开展h UC-MSCs神经向分化与去分化实验研究提供了一定的参考信息。

关键词：计算生物学脐带间质干细胞细胞分化细胞去分化基因表达谱

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胰岛β细胞再生:糖尿病治疗学的机遇与挑战

中华内科杂志 2023年第9期62卷 1046-1051页

作者：李健魏蕊洪天配北京大学第三医院内分泌科北京100191

恢复功能性胰岛β细胞数量(β细胞再生)是治疗糖尿病的重要策略。诱导干细胞定向分化、促进体细胞重编程、修复原有β细胞表型和功能是促进β细胞再生的重要路径,有望改变糖尿病的自然病程。然而,目前大多数干预方案面临β细胞再生效率... 详细信息

恢复功能性胰岛β细胞数量(β细胞再生)是治疗糖尿病的重要策略。诱导干细胞定向分化、促进体细胞重编程、修复原有β细胞表型和功能是促进β细胞再生的重要路径,有望改变糖尿病的自然病程。然而,目前大多数干预方案面临β细胞再生效率低、难以获得功能完全成熟的β细胞、安全性尚待检验等挑战,未来需要进一步优化干预方案,并积累高质量的临床研究证据。

关键词：糖尿病胰岛素分泌细胞干细胞体细胞重编程细胞去分化