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组胺释放因子在慢性荨麻疹发病中的作用

中国皮肤性病学杂志 2023年第6期37卷 617-620页

作者：赵怡心雷霞黄显琼陆军特色医学中心皮肤科陆军军医大学重庆400042

慢性荨麻疹是一种主要由肥大细胞驱动的疾病,目前发病机制尚不完全清楚。近年来一种具有组胺释放活性的组胺释放因子(histamine-releasing factor,HRF)被证明与过敏性炎症有关,但其在慢性荨麻疹中的作用机制尚未完全阐明。本文就二聚体... 详细信息

慢性荨麻疹是一种主要由肥大细胞驱动的疾病,目前发病机制尚不完全清楚。近年来一种具有组胺释放活性的组胺释放因子(histamine-releasing factor,HRF)被证明与过敏性炎症有关,但其在慢性荨麻疹中的作用机制尚未完全阐明。本文就二聚体HRF通过诱导肥大细胞脱颗粒,从而诱发慢性荨麻疹及其他过敏反应的作用机制进行阐述,并为慢性荨麻疹的治疗提供了一个有希望的靶点。

关键词：慢性荨麻疹发病机制组胺释放因子肥大细胞

慢性荨麻疹血清中组胺释放因子(HRF)及HRF反应性IgE的检测

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中国皮肤性病学杂志 2014年第5期28卷 461-463页

作者：李朝阳孙仁山李菁宋君伍津津杨涛唐辉唐书谦李凤杨永强第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科重庆400042

目的研究组胺释放因子(histamine-releasing factor,HRF)及HRF反应性IgE在慢性荨麻疹患者发病中的作用。方法对40例慢性荨麻疹患者进行活动性评分(the urticaria activity score,UAS),分为重症组和轻症组,采用Elisa酶联免疫吸附试验检... 详细信息

目的研究组胺释放因子(histamine-releasing factor,HRF)及HRF反应性IgE在慢性荨麻疹患者发病中的作用。方法对40例慢性荨麻疹患者进行活动性评分(the urticaria activity score,UAS),分为重症组和轻症组,采用Elisa酶联免疫吸附试验检测荨麻疹患者发病时血清中HRF及HRF反应性IgE含量,并与40例正常人的检测结果作对照。结果患者组和正常对照组血清中HRF平均值分别为8.81ng/mL和4.30ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。轻症组和重症组的血清HRF平均值分别为4.65 ng/mL和11.06ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。患者组和正常对照组血清HRF反应性IgE抗体平均值分别为1.67IU/mL和0.55IU/mL,差异有统计学意义(P<0.05),重症组和轻症组均数分别为1.30IU/mL和0.91IU/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关性分析结果显示HRF及同一患者HRF反应性IgE抗体的含量,存在明显正相关性(P=0.006)。结论慢性荨麻疹患者发病时血清中HRF含量及HRF反应性IgE与病情有着显著正相关,说明HRF及HRF反应性IgE在慢性荨麻疹发病中发挥重要作用。

关键词：荨麻疹慢性组胺释放因子组胺释放因子反应性IgE 荨麻疹活动性评分

过敏性哮喘患者组胺释放因子水平与气道反应性

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上海医科大学学报 1993年第5期20卷 332-332,350页

作者：苏贻新郭履赒朱惠如章晓冬上海医科大学儿科研究所华山医院呼吸科

用组胺释放因子(HRF)检测试验和支气管组胺激发试验分别测定过敏性哮喘病人外周血单个核细胞(PBMC)分泌HRF水平和气道反应性,并与正常人进行比较,以便了解HRF与哮喘的关系,探讨HRF的临床意义。检测对象缓解期过敏性哮喘患者22例,男12... 详细信息

用组胺释放因子(HRF)检测试验和支气管组胺激发试验分别测定过敏性哮喘病人外周血单个核细胞(PBMC)分泌HRF水平和气道反应性,并与正常人进行比较,以便了解HRF与哮喘的关系,探讨HRF的临床意义。检测对象缓解期过敏性哮喘患者22例,男12例,女10例,年龄15～57岁。

关键词：哮喘组胺释放因子气道反应性

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组胺释放因子的检测方法及其影响因素的探讨

上海医学检验杂志 1994年第4期9卷 210-211页

作者：苏贻新郭履赒上海医科大学儿科研究所

随着组胺释放因子（ＨＲＦ）的发现，它在哮喘及过敏性疾病中的意义，受到人们的关注。本文采用含ＨＲＦ的单个核细胞培养上清，刺激大鼠肥大细胞释放组胺。然后分别测定肥大细胞悬液的上清和细胞内组胺含量，以上清组胺量／组胺总含量... 详细信息

随着组胺释放因子（ＨＲＦ）的发现，它在哮喘及过敏性疾病中的意义，受到人们的关注。本文采用含ＨＲＦ的单个核细胞培养上清，刺激大鼠肥大细胞释放组胺。然后分别测定肥大细胞悬液的上清和细胞内组胺含量，以上清组胺量／组胺总含量（上清＋细胞组胺量）的百分比表示ＨＲＦ的含量，据此建立了ＨＲＦ测定方法，并探讨了影响实验的因素。结果表明，本法具有良好的重复性和特异性，但需控制以下因素①干扰组胺测定的试剂质量与器材清洁度；②采用最适高氯酸量即３％高氯酸０．１ｍｌ；③选择对ＨＲＦ敏感性高的豚鼠、大鼠肥大细胞作靶细胞。

关键词：组胺释放因子过敏性哮喘检测

重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L250蛋白基因克隆及HRF活性鉴定

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重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L250蛋白基因克隆及HRF活性鉴定

作者：孙晶辽宁师范大学

学位级别：硕士

本实验对日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库1323条有效EST序列进行分析,得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框,据此设计引物,以日本七鳃鳗口腔腺总RNA为模板进行RT-PCR扩增,得长为519bp的目的基因,与pET23b载体连接后,在大... 详细信息

本实验对日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库1323条有效EST序列进行分析,得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框,据此设计引物,以日本七鳃鳗口腔腺总RNA为模板进行RT-PCR扩增,得长为519bp的目的基因,与pET23b载体连接后,在大肠杆菌BL21中成功表达,亲和层析纯化后得到浓度约为1.5mg/mL的L-250蛋白纯品。以获得的L-250蛋白纯品制备多克隆抗体,进行免疫印迹实验,分析抗体与目的蛋白结合的特异性,同时对表达的重组蛋白在日本七鳃鳗口腔腺中进行定位。活性实验表明L-250蛋白具有组胺释放因子(Histamine-releasing factor,HRF)生物学功能。首先,通过基因工程的手段从日本七鳃鳗口腔腺中获得了受翻译调节的肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)的目的基因,克隆至pET23b表达载体上,再转化入克隆菌DH5α后进行阳性转化子的筛选,之后将带有组氨酸标签的重组蛋白在*** BL21中进行了可溶性表达,经组氨酸亲和层析柱纯化后,获取了分子量为22.4kD的TCTP纯品,将其命名为L-250。以纯化的L-250蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备兔抗七鳃鳗血清L-250蛋白多克隆抗体,ELISA法检测多克隆抗体效价可达1:6400。以日本七鳃鳗口腔腺分泌物和表达的重组蛋白纯品行SDS-PAGE,采用免疫印迹法进行检测,发现制备的兔抗七鳃鳗血清L-250蛋白多克隆抗体能够与口腔腺分泌物和重组蛋白均发生明显的特异性结合,L-250蛋白是一种分泌蛋白。采用大鼠嗜碱性白血病细胞系RBL-2H3评价L-250蛋白的HFR活性。将L-250以不同的浓度梯度(0.3,4.8,10μg/mL)与RBL-2H3孵育,结果表明, L-250能够刺激RBL-2H3释放组胺,并且在痕量(0.3μg/mL)下就能够起作用。由此可以推测,组胺作为一种免疫介质,七鳃鳗这种寄生性生物可以通过L-250蛋白使宿主产生免疫反应,组胺还能够引起血管扩张效应,增强局部血流;另一方面,组胺还能够增强血管内皮细胞表面凝血酶调节素TM的表达,凝血酶调节素与凝血酶结合,可降低凝血酶的凝血活性,同时活化蛋白C,活化的蛋白C能够水解凝血因子Ⅴa和Ⅷa,并且阻碍凝血因子Ⅹa与血小板的结合,还能够促进纤维蛋白溶解,这三条通路最终都会抑制凝血反应。这为解释日本七鳃鳗的吸血生活习性提供了一定的理论依据,同时,提示L-250蛋白将在临床抗凝治疗方面具有潜在的应用价值。

关键词：日本七鳃鳗受翻译调节的肿瘤蛋白基因工程组胺释放因子

重组日本七鳃鳗TCTP的生物信息学分析，组织表达及活性初探

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重组日本七鳃鳗TCTP的生物信息学分析，组织表达及活性初探

作者：张楠楠辽宁师范大学

学位级别：硕士

翻译控制肿瘤蛋白(Translationally Controlled Tumor Protein,TCTP)属于一种高度保守并且大量表达的真核蛋白家族。其表达受转录和翻译水平的调节。TCTP具有多种生物学功能,例如影响细胞生长,细胞周期,恶性转化,细胞的抗逆性,凋亡。另... 详细信息

翻译控制肿瘤蛋白(Translationally Controlled Tumor Protein,TCTP)属于一种高度保守并且大量表达的真核蛋白家族。其表达受转录和翻译水平的调节。TCTP具有多种生物学功能,例如影响细胞生长,细胞周期,恶性转化,细胞的抗逆性,凋亡。另外,在细胞外起到细胞因子的作用,参与许多免疫反应。本项课题根据日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库中cDNA序列和部分EST预测功能基因片段,得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框,根据序列特异性和酶切位点设计特异性引物,调取全长基因,进行基因克隆,并将其原核表达,亲和层析纯化后得到蛋白纯品。对此蛋白进行了生物信息学分析,并研究了它在七鳃鳗其他组织中的表达情况,最后细胞外活性实验表明它有促进组胺释放及促凋亡功能。首先对日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库中1323条有效EST序列进行分析,得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框,设计引物,以日本七鳃鳗口腔腺总RNA为模板进行RT-PCR ,得长为519bp的目的基因,克隆至pET23b表达载体上,再转化至克隆菌DH5α后进行阳性转化子的筛选,然后将带有组氨酸标签的重组蛋白在*** BL21中进行了可溶性表达,经组氨酸亲和层析柱纯化后,获取分子量为22.4kD,浓度约为1.5mg/mL的TCTP纯品,将其命名为rLj-TCTP(recombinant Lampetra japonica TCTP)。采用生物信息学的方法和工具对rLj-TCTP相应的氨基酸序列的理化性质、结构特征、功能及系统演化关系等进行预测和分析,以期为该蛋白的进一步研究提供一定的理论依据。我们运用了RT-PCR的方法检测不同组织(心脏,肾,肠,腮,肌肉,肝脏,红细胞,白细胞)的特异性表达情况。结果表明该基因在各组织中都是不可或缺的重要基因。TCTP表达的稳定性表明其可能在细胞的生命周期中行使极其重要的生物学功能。采用大鼠腹腔肥大细胞评价rLj-TCTP的组胺释放因子的活性将以梯度浓度(0.2ml/ml,1ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,50ug/ml,100ug/ml)与大鼠腹腔肥大细胞孵育,用荧光测定法测定组胺含量。结果表明, rLj-TCTP能够刺激大鼠腹腔肥大细胞释放组胺,并且呈剂量依赖性。由此可以推测,组胺作为一种免疫介质,七鳃鳗可以通过rLj-TCTP蛋白使宿主产生免疫反应,组胺还能够引起血管扩张效应,增强局部血流;另一方面,组胺还能增强血管内皮细胞表面凝血酶调节素TM的表达,凝血酶与凝血酶调节素结合,可降低凝血酶的活性,同时活化蛋白C,活化的蛋白C能够水解凝血因子Ⅴa和Ⅷa ,并且阻碍凝血因子Ⅹa与血小板结合,还能够促进纤维蛋白的溶解,这三条通路都会最终抑制凝血反应。这为解释日本七鳃鳗的吸血生活习性提供了一定的理论依据,同时,提示rLj-TCTP将在临床抗凝治疗方面具有潜在的应用价值。采用人脐静脉内皮细胞系HUVEC,人宫颈癌细胞系Hela来评价rLj-TCTP蛋白对这两种细胞增殖及其凋亡的影响。本实验运用了CCK-8法,DNA ladder法,流式细胞仪分析,荧光显微镜分析。表明rLj-TCTP蛋白可以促进Hela细胞凋亡,而对HUVEC影响不大。

关键词：七鳃鳗翻译控制肿瘤蛋白组胺释放因子细胞凋亡

关于慢性自发性荨麻疹发病机制的几项血清学检测

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关于慢性自发性荨麻疹发病机制的几项血清学检测

作者：李朝阳第三军医大学

学位级别：硕士

目的与方法：荨麻疹临床症状主要表现为皮肤瘙痒、隆起性红斑、风团或斑块，人群发病率可高至20%。慢性荨麻疹病程达6周以上，临床症状反复发作，病程迁延，可分为慢性可诱发性荨麻疹(chronic inducible urticaria)和慢性自发性荨麻疹(... 详细信息

目的与方法：荨麻疹临床症状主要表现为皮肤瘙痒、隆起性红斑、风团或斑块，人群发病率可高至20%。慢性荨麻疹病程达6周以上，临床症状反复发作，病程迁延，可分为慢性可诱发性荨麻疹(chronic inducible urticaria)和慢性自发性荨麻疹(chronic spontaneousurticaria，CSU)。慢性自发性荨麻疹目前发病机制不明。在特应性皮炎患者血清中有140余种血清自身抗原可与血清自身反应性IgE(autoreactive serum IgE)发生反应，其中有5种重组抗原可激发嗜碱性粒细胞释放炎症介质，有3种自身抗原与环境抗原同源，证实了血清自身反应性IgE(autoreactive serum IgE)有可能对慢性过敏性皮炎具有致病意义，血清自身反应性IgE与这些抗原结合可以促发和加重皮肤炎症反应。组胺释放因子(histamine releasing factor，HRF)在哮喘、皮炎等多种过敏性疾病患者的血清中升高，且血清中有HRF反应性IgE的存在。慢性自发性荨麻疹发病机制中是否存在HRF与HRF反应性IgE的结合从而体内激活肥大细胞未见报道。幽门螺杆菌(helicobacterpylori，HP)感染阳性的患者较HP感染阴性患者临床症状更为严重，且严重程度随着胃粘膜感染的密度及程度增加而加重，约80%HP阳性的患者经抗HP治疗后，荨麻疹症状可得到很大程度的缓解，甚至痊愈。CSU患者发生甲状腺自身免疫的概率为6.5%-57%，同时伴有甲状腺自身免疫的CSU患者，其荨麻疹病情相对于不伴有甲状腺自身免疫的CSU患者更加严重，病程也明显增长。CSU患者体内是否存在针对HP及甲状腺的反应性IgE并参与肥大细胞的活化值得怀疑。三磷酸肌醇(inositoltriphosphate，IP3)是肥大细胞活化过程中的关键信号分子之一，参与细胞信号转导过程。IP3在慢性自发性荨麻疹发病中的表达水平是否与疾病程度存在相关性，尚未见报道。本文通过检测(1)慢性自发性荨麻疹患者的血清中组胺释放因子(HRF)及HRF反应性IgE含量，判断两者的血清含量与慢性自发性荨麻疹发病严重程度之间是否存在相关性;(2)慢性自发性荨麻疹患者血清中是否存在幽门螺杆菌及甲状腺反应性IgE，其在血清中的含量与正常人群相比是否存在差异性;(3)慢性自发性荨麻疹患者血清中三磷酸肌醇的含量，判断其是否随着病情变化而发生改变。结果： 1.慢性自发性荨麻疹患者组和正常对照组的血清HRF含量分别为8.81±6.03ng/mL和4.31±2.13ng/mL，两者差异显著(P0.05)。 3.慢性自发性荨麻疹患者组和正常对照组的血清甲状腺反应性IgE含量平均值分别为0.4780±0.0592IU/mL和0.3802±0.0631IU/mL，两组血清中甲状腺反应性IgE含量无明显差异(P>0.05)。两组血清中甲状腺反应性IgE与正常对照组的阳性率分别为70%和40%，两者差异显著(P<0.05)。 4.慢性自发性荨麻疹患者组在发病高峰期与恢复期的血清中IP3含量分别为：43.54±41.97pg/mL和18.40±17.53pg/mL，慢性自发性荨麻疹患者组血清中IP3在疾病恢复期明显下降，统计学分析显示两组间显著差异(P<0.05)。结论：血清HRF在慢性自发性荨麻疹患者组含量高于正常对照

关键词：慢性自发性荨麻疹血清自身反应性IgE 发病机制组胺释放因子组胺释放因子反应性IgE 甲状腺幽门螺杆菌三磷酸肌醇荨麻疹活动性评分

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呼吸系统疾病

中国中西医结合儿科学 1996年第1期 22-27页

中国医学文摘·儿科学1996年第巧卷第l期 960139小儿选择性支气管造影/周名秀…//实用医学杂志一1995,11(7)一435一436 介绍对4例肺部疾病患儿在纤维支气管镜直视下,注入非离子造影剂(omnipague)作选择性支气管造影,4例均明确病变,认为... 详细信息

中国医学文摘·儿科学1996年第巧卷第l期 960139小儿选择性支气管造影/周名秀…//实用医学杂志一1995,11(7)一435一436 介绍对4例肺部疾病患儿在纤维支气管镜直视下,注入非离子造影剂(omnipague)作选择性支气管造影,4例均明确病变,认为小儿在纤支镜直视下,应用非离子造影剂作选择性支气管造影具有安全、较简便、副作用小,

关键词：呼吸系统疾病选择性支气管造影中国医学文摘支原体肺炎卡介苗素疗效观察纤维支气管镜金黄色葡萄球菌组胺释放因子新生儿感染性肺炎

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食物过敏疾病

国外医学情报 1990年第2期11卷 12-13页

作者：田羽

普通人群中的食物过敏的流行尚不知晓。对480名儿童从出生到三岁的一项前瞻性研究表明约8％对特殊食物有不良反应,并且所有儿童的1％～2％其反应有免疫学基础。但随着时间的推移儿童常失去这种过敏性,特别是对牛奶。这表明对食物敏感的... 详细信息

普通人群中的食物过敏的流行尚不知晓。对480名儿童从出生到三岁的一项前瞻性研究表明约8％对特殊食物有不良反应,并且所有儿童的1％～2％其反应有免疫学基础。但随着时间的推移儿童常失去这种过敏性,特别是对牛奶。这表明对食物敏感的成人数少于2％。然而,由于食物过敏可能在成人期首次出现,故这种估计也许是错误的。

关键词：食物过敏食物蛋白肥大细胞嗜酸性细胞儿童湿疹组胺释放因子过敏性胃肠炎过敏反应