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组织工程肌腱材料修复肌腱损伤

中国组织工程研究与临床康复 2010年第51期14卷 9647-9650页

作者：李昂戴艳涂相仁江西教育学院体育系江西省南昌市330029 江西师范大学体育运动技术学院江西省南昌市330006

目的:总结和分析组织工程肌腱研究进展,在此基础上进一步分析组织工程肌腱作为替代物对于肌腱损伤修复的可能性,以及对未来发展进行展望。方法:以"组织工程,种子细胞,肌腱,损伤修复,支架材料"为中文关键词,以"tissue engineering,seed c... 详细信息

目的:总结和分析组织工程肌腱研究进展,在此基础上进一步分析组织工程肌腱作为替代物对于肌腱损伤修复的可能性,以及对未来发展进行展望。方法:以"组织工程,种子细胞,肌腱,损伤修复,支架材料"为中文关键词,以"tissue engineering,seed cells,tendon,damage repair,scaffold"为英文关键词,应用计算机检索1994-01/2009-12Pubmed数据库(http://***/PubMed)及维普数据库(http://***/)有关运动性肌腱损伤与组织工程肌腱的文献,排除重复研究或Meta分析类文章。共纳入25篇文献,重点对以下4个问题进行讨论:①运动性肌腱工程生物力学研究进展。②肌腱组织工程种子细胞的分类与筛选。③肌腱组织工程支架材料应具备的特点。④组织工程肌腱面临的问题与研究方向。结果:目前,在肌腱组织工程中研究的种子细胞有肌腱细胞、皮肤成纤维细胞和骨髓基质干细胞。标准种子细胞的难以确立一直制约着组织工程的发展,如何获得大规模、再生性的种子细胞是当前组织工程化肌腱研究面临的最为关键的问题。组织工程化人工肌腱修复缺损肌腱,与其他传统方法相比,主要具有以下优点:①所形成的肌腱组织有活力和功能,可对肌腱缺损进行形态修复和功能重建,并达到永久性替代。②以相对少量的肌腱细胞经体外培养扩增后,修复严重的肌腱缺损。③按缺损肌腱形态任意塑形,达到形态修复。结论:组织工程肌腱要真正应用于临床,关键是如何模拟体内环境,在体外成功构建肌腱组织,因而在体外模拟体内环境进行组织工程的构建是未来的研究方向。

关键词：组织工程肌腱种子细胞支架材料损伤修复生物力学

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组织工程肌腱研究的中国之最

中国组织工程研究与临床康复 2011年第15期15卷 2798-2799页

作者：《中国组织工程研究与临床康复》杂志社学术部 <中国组织工程研究与临床康复>杂志社学术部

组织工程化肌腱研究在中国已有初步成绩,学者们的主要方向为肌腱细胞外基质替代物、肌腱细胞生物学性质、肌腱细胞与细胞外基质材料复合研究等。研制适合于肌腱细胞生长、黏附和发挥功能的细胞外基质材料、建立生长增殖可调控的肌腱细... 详细信息

组织工程化肌腱研究在中国已有初步成绩,学者们的主要方向为肌腱细胞外基质替代物、肌腱细胞生物学性质、肌腱细胞与细胞外基质材料复合研究等。研制适合于肌腱细胞生长、黏附和发挥功能的细胞外基质材料、建立生长增殖可调控的肌腱细胞系、肌腱细胞三维培养等,将是研究具有特定修复功能的组织工程化肌腱的重要问题。

关键词：组织工程肌腱人工肌腱肌腱细胞人发角蛋白肌腱损伤临床应用组织构建组织工程

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玻璃化冻存组织工程肌腱体内植入实验研究

中国修复重建外科杂志 2009年第10期23卷 1229-1234页

作者：廖梅旭刘程俊朱明华秦廷武四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041 四川省疾病预防控制中心毒理研究所

目的探讨玻璃化冻存组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损后不同时期,大鼠的免疫排斥反应及对肝、肾、心血管功能的影响。方法抽取1周龄SD大鼠尾腱,采用组织块法培养肌腱细胞。取第2～4代肌腱细胞,以5×106个/mL细胞密度接种至长1.5cm... 详细信息

目的探讨玻璃化冻存组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损后不同时期,大鼠的免疫排斥反应及对肝、肾、心血管功能的影响。方法抽取1周龄SD大鼠尾腱,采用组织块法培养肌腱细胞。取第2～4代肌腱细胞,以5×106个/mL细胞密度接种至长1.5cm生物衍生肌腱材料,复合培养构建组织工程肌腱。采用21%DMSO作为玻璃化冻存保护液,Eurocollins solution作为4℃条件下预冷液和洗脱液的基础液体,按自制的玻璃化冻存方法冻存。健康SD大鼠72只,雌雄不限,体重210～230g。随机分成A(n=32)、B(n=32)、C(n=8)3组。A、B组实验动物于跟腱中段制备长约0.5cm肌腱缺损模型,分别将玻璃化冻存后及未冻存的组织工程肌腱移植修复缺损肌腱;C组大鼠未手术,为正常对照。术后2、4、6、8周,行大体观察、肝、肾及心血管功能检测;术后2、4、6周行血清免疫学检测。结果A、B组植入部位均未见组织坏死、积液及化脓感染;术后2周,A、B组均出现粘连现象,4～6周逐渐好转,8周未见明显粘连,新生组织连续性完整,肌腱桥接部已愈合,与正常肌腱类似。术后2、4、6周,血清中IgG和IgM含量A、B、C组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肝功能检测:A组术后4周,B组术后4、6周,谷草转氨酶均低于C组,差异有统计学意义(P0.05)。各时间点A、B组谷丙转氨酶、ALP、直接胆红素和总胆红素与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肾功能检测:术后2周,A组血清白蛋白和B组肌酐明显下降,与C组比较差异均有统计学意义(P0.05)。心血管功能检测:A组各时间点血糖、甘油三酯、胆固醇与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05);B组术后8周甘油三酯与C组比较差异有统计学意义(P组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损,未引起明显免疫排斥反应,对肝、肾及心血管功能无明显影响。

关键词：组织工程肌腱玻璃化冻存体内植入免疫排斥反应大鼠

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组织工程肌腱低温贮存抗冻剂研究

组织工程肌腱低温贮存抗冻剂研究

作者：周政四川大学

学位级别：硕士

目的研究深低温冻存组织工程肌腱适宜的抗冻剂。方法将第54代转化人胚肌腱细胞与碳纤维和聚羟基乙酸混合编织带体外复合培养构建组织工程肌腱。组织工程肌腱制备完成后在四种抗冻剂保护下液氮冻存2月;快速复温后植入裸鼠以修复跟腱缺... 详细信息

目的研究深低温冻存组织工程肌腱适宜的抗冻剂。方法将第54代转化人胚肌腱细胞与碳纤维和聚羟基乙酸混合编织带体外复合培养构建组织工程肌腱。组织工程肌腱制备完成后在四种抗冻剂保护下液氮冻存2月;快速复温后植入裸鼠以修复跟腱缺损，2、4、6、8、12周后取出，观察形态学、组织学、电镜和免疫组织化学变化，短串联重复位点检测和生物力学变化。结果实验组组织工程肌腱体内植入12周后仍有肌腱细胞存活并分泌Ⅰ型胶原;随着时间延长,10％二甲基亚砜(DMSO)+棉子糖(30mmol／L)+KHPO(25mmol／L)组线粒体空泡减少，肌腱细胞排列整齐，胶原纤维增粗并连接，抗拉强度增高。结论 10％DMSO+棉子糖(30mmol／L)+KHPO(25mmol／L)可以在深低温下保护组织工程肌腱。

关键词：组织工程肌腱低温贮存抗冻剂

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复合胶原的组织工程肌腱力学性能的实验研究

中国修复重建外科杂志 2005年第4期19卷 318-321页

作者：方跃杨志明四川大学华西医院骨科成都610041

目的　探讨胶原在组织工程肌腱的构建中对力学强度的影响。　方法　裸鼠75只,制成跟腱缺损的动物模型,随机分为5组,分别将人发(hair,H)、碳纤维(carbon fiber,CF)、聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)、H +PGA和CF+PGA复合外源性型胶原... 详细信息

目的　探讨胶原在组织工程肌腱的构建中对力学强度的影响。　方法　裸鼠75只,制成跟腱缺损的动物模型,随机分为5组,分别将人发(hair,H)、碳纤维(carbon fiber,CF)、聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)、H +PGA和CF+PGA复合外源性型胶原,与标准转化人胚腱细胞株联合培养制成组织工程肌腱。植入裸鼠右后肢修复跟腱缺损,为实验组(A组) ;将未复合胶原的上述各种材料植入裸鼠左后肢修复跟腱缺损,为对照组(B组)。术后于2、4、6、8和12周进行生物力学测定,观察并比较其变化。　结果　实验组2～4周力学强度高于对照组,差异有统计学意义(P0 .0 5 ) ;时间与力学强度呈正相关,差异有统计学意义(P肌腱修复的早期能增强组织工程肌腱的力学强度,对患肢功能的恢复有一定的作用。

关键词：组织工程肌腱实验研究力学性能复合力学强度跟腱缺损生物力学测定聚羟基乙酸统计学动物模型 acid Ⅰ型胶原联合培养肌腱修复患肢功能外源性实验组对照组 12周裸鼠碳纤维细胞株正相关 PGA 制成人发

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组织工程肌腱支架增强体的结构与性能研究

组织工程肌腱支架增强体的结构与性能研究

作者：龚泽东华大学

学位级别：硕士

肌腱损伤是存在于从事体育运动人群的常见损伤之一。组织工程技术的诞生和发展为临床肌腱修复提供了一种更为理想的、符合生理特点的方法。组织工程技术制备的肌腱不受来源限制、不传播疾病、无免疫反应,并且所形成的组织具有活力和功能... 详细信息

肌腱损伤是存在于从事体育运动人群的常见损伤之一。组织工程技术的诞生和发展为临床肌腱修复提供了一种更为理想的、符合生理特点的方法。组织工程技术制备的肌腱不受来源限制、不传播疾病、无免疫反应,并且所形成的组织具有活力和功能,能按缺损肌腱形态进行塑形,达到完美的形态修复的优点。组织工程肌腱支架的主要性能包括生物相容性、力学性能、结构稳定性以及孔隙率大小等。目前所研究的组织工程肌腱支架通常具有良好的生物相容性,但这些支架无法同时满足结构稳定、孔隙率大及力学性能好等要求。本文选用具有良好生物相容性的PGA复丝和PLA复丝作为原料,采用合股编织的方法将PGA复丝与PLA复丝制成编织线,分别采用小口径圆纬机、小口径经编机和手工编织的方法设计并制备了纬平、经平、方形和菱形4种不同网孔结构的新型组织工程肌腱支架增强体。对4种支架增强体的延伸性、孔隙率、孔径及力学性能进行了比较。研究表明,方形网孔结构支架增强体延伸性最小、结构最稳定,但力学性能较差;纬平针网孔结构支架增强体孔隙率和孔径最小,力学性能较好。本文研究了PGA复丝、PLA复丝降解性能,并探讨了不同比例PGA/PLA编织线及支架增强体在体外降解实验过程中性能变化规律。研究表明,PGA复丝的降解速度明显快于PLA复丝,在降解2星期后,因PGA纤维断裂其强力无法测量,5星期后失去绝大部分质量。而PLA复丝在整个降解过程中变化不明显。随着PGA/PLA编织线中PGA含量的增加,编织线及支架增强体的降解速度加快。编织线的细度对编织线降解性能影响不大,而对支架增强体的降解性能有一定影响。本文制备了纬平、经平、方形和菱形4种网孔结构支架增强体,并对其体外降解性能进行了研究。研究表明,4种支架增强体在降解过程中,前3星期断裂强力急剧下降,厚度有所增加;降解3-6星期质量损失率显著增大,支架增强体厚度迅速减小;孔隙率在降解过程中呈先减小后增大趋势,在降解3-4星期时孔隙率值最小;手工编织的支架增强体的口径在降解过程中无明显变化,而纬平针网孔结构支架增强体口径在降解前3星期逐渐减小,3星期后又逐渐增大。本文研究了热定型工艺(温度、时间、热定型方式)对PGA纤维及PGA编织线力学性能的影响,并将经过热定型(55℃、拉伸定型5min)和未经热定型的PGA肌腱支架增强体置于温度为37℃、pH值为7.4的磷酸盐缓冲液中进行4星期的体外降解试验。研究结果表明：热定型温度和时间对PGA纤维及PGA编织线力学性能影响较大。对于PGA纤维及PGA编织线,当热定型温度为40～60℃、时间为3-5min、采用拉伸定型方式时,其力学性能较好;在体外降解过程中,经过热定型的肌腱支架增强体的力学性能好于未经过热定型的肌腱支架增强体。

关键词：组织工程肌腱支架增强体结构降解性能口径孔隙率

玻璃化冷冻保存组织工程肌腱修复跟腱缺损的超微结构影响研究

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生物医学工程学杂志 2010年第3期27卷 590-594页

作者：朱明华王林刘程俊曾怡秦廷武王睿朱锐杨军车茜四川省疾病预防控制中心成都610041 四川大学华西医院骨科成都610041

观察分析玻璃化冷冻保存组织工程化人工肌腱动物体内移植后的超微结构变化特征,为组织工程化人工肌腱的玻璃化冷冻保存和应用提供重要的理论和实验依据。将玻璃化冷冻保存后的组织工程化人工肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损,移植后2、4、6... 详细信息

观察分析玻璃化冷冻保存组织工程化人工肌腱动物体内移植后的超微结构变化特征,为组织工程化人工肌腱的玻璃化冷冻保存和应用提供重要的理论和实验依据。将玻璃化冷冻保存后的组织工程化人工肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损,移植后2、4、6、8周分别取出移植肌腱及周围组织。扫描电镜观察,2周时材料呈网状结构,材料间可见幼稚的肌腱细胞。6周时材料已被降解吸收,由新生的肌腱细胞和胶原纤维所替代。8周时已形成较致密的肌腱组织,肌腱细胞及胶原纤维排列均匀,胶原纤维密度随时间的延长明显增加。透射电镜观察,2周时肌腱细胞增生活跃,多数为幼稚细胞,核膜完整,核仁清晰,细胞器丰富,胶原纤维少。6周时肌腱细胞较成熟,细胞体积小,核染色深,周围可见大量胶原纤维,纤维结构较完整,横纹清晰。玻璃化冷冻和非冷冻保存两组超微结构观察结果基本一致,新生的肌腱细胞和胶原纤维组织生长良好,形态结构与正常肌腱组织相似。证明玻璃化冷冻保存人工肌腱的方法对肌腱细胞功能无明显影响,新生的肌腱组织具有良好的生长和修复功能。

关键词：组织工程肌腱玻璃化冷冻保存肌腱移植电镜观察

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皮肤成纤维细胞构建组织工程肌腱的实验研究

中华医学杂志 2006年第6期86卷 416-418页

作者：陈兵刘伟邓丹许锋崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心 200011

近年来,研究者们应用类似于骨髓基质干细胞的细胞作为组织工程肌腱的种子细胞[1-3],未获明显进展.皮肤成纤维细胞和肌腱细胞均来源于中胚层,细胞形态相似.如果成纤维细胞能取代肌腱细胞,作为种子细胞应用于肌腱组织工程则可望解决种子... 详细信息

近年来,研究者们应用类似于骨髓基质干细胞的细胞作为组织工程肌腱的种子细胞[1-3],未获明显进展.皮肤成纤维细胞和肌腱细胞均来源于中胚层,细胞形态相似.如果成纤维细胞能取代肌腱细胞,作为种子细胞应用于肌腱组织工程则可望解决种子细胞缺乏的难题.作者曾应用成纤维细胞作为种子细胞修复肌腱缺损取得初步成功[4],但缺乏长期观察结果.本研究旨在长期观察皮肤成纤维细胞构建的组织工程肌腱,并与肌腱细胞作为种子细胞的组织工程肌腱进行比较。

关键词：皮肤成纤维细胞组织工程肌腱细胞构建实验研骨髓基质干细胞种子细胞肌腱细胞肌腱组织工程细胞形态细胞修复

让昨天告诉今天:组织工程肌腱研究的学术与技术进展

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第46期13卷 9015-9016页

作者：《中国组织工程研究与临床康复》杂志社学术部 <中国组织工程研究与临床康复>杂志社学术部

组织工程肌腱研究成果按时间年限的导读：1909年，德国学者Lange等最早应用丝线制成人工肌腱材料。1977年，英国学者Jenkins等首次报道切除绵羊和兔的跟腱与膝关节外侧韧带后，植入碳纤维替代损伤组织，诱发了新腱和新韧带的形成。

关键词：组织工程组织工程肌腱人工肌腱碳纤维干细胞