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小鼠表皮角质形成细胞中Ca^(2+)对组织型纤溶酶原激活剂表达的调节

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中国医学科学院学报 2001年第3期23卷 262-265,I005页

作者：连小华杨恬曾益军第三军医大学细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2＋)对组织型纤溶酶原激活剂（tPA）表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2＋)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2＋)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA... 详细信息

目的探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2＋)对组织型纤溶酶原激活剂（tPA）表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2＋)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2＋)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA的表达及表皮KC分化的影响。结果与未经Ca^(2＋)处理的对照相比，低Ca^(2＋)浓度下培养的表皮KC中，tPA mRNA及tPA量均增加（P型的多角形。结论Ca^(2＋)浓度的增高促进了tPA mRNA及tPA的表达，并与KC分化有关。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂 Ca^2+ 表皮角质形成细胞表达调节皮肤疾病

表皮细胞中钙离子调节组织型纤溶酶原激活剂表达的机制

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中国临床康复 2003年第6期7卷 920-921,T002页

作者：连小华杨恬解放军第三军医大学细胞生物学教研室重庆市400038

目的:探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中,Ca2+对组织型纤溶酶原激活剂(tissueplasminogenactivator,tPA)表达的调节及其作用机制。方法利用免疫细胞化学及RT-PCR等方法,定性、定量检测在不同浓度Ca2及异博定、放线菌素D作用下,tPA蛋白质或... 详细信息

目的:探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中,Ca2+对组织型纤溶酶原激活剂(tissueplasminogenactivator,tPA)表达的调节及其作用机制。方法利用免疫细胞化学及RT-PCR等方法,定性、定量检测在不同浓度Ca2及异博定、放线菌素D作用下,tPA蛋白质或mRNA表达的变化情况。结果:与低Ca2+浓度相比,高Ca2+浓度下,表皮KC中tPA蛋白及mRNA的量均发生了非常显著的增加,而异博定及放线菌素D的加入,则可抑制高Ca2+浓度的这一作用。结论:在小鼠表皮KC中,胞外高浓度Ca2可通过细胞膜上的电位依赖性离子通道进入胞内,在转录水平上调节tPA的表达。

关键词：表皮细胞钙离子调节组织型纤溶酶原激活剂表达

组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(Reteplase)的克隆表达和分离纯化

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山东大学学报（工学版） 2003年第2期33卷 216-220页

作者：赵友春王革孔扬薛峰张长铠山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室山东济南250100 山东元隆生物技术有限公司济南留学生创业园山东济南250100

从人脑cDNA文库中经PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(reteplase,简称r PA,中文名称:瑞替普酶)的cDNA,经测序确证,克隆于表达载体pET22b,转化大肠肝菌BL21进行重组表达.表达的r PA占菌体总蛋白的40%,以包涵体形式存在.经过亲... 详细信息

从人脑cDNA文库中经PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(reteplase,简称r PA,中文名称:瑞替普酶)的cDNA,经测序确证,克隆于表达载体pET22b,转化大肠肝菌BL21进行重组表达.表达的r PA占菌体总蛋白的40%,以包涵体形式存在.经过亲和层析和离子交换层析等纯化步骤后,得到纯度高于99%,比活性高于5×105IU/mg的r PA.对纯化的r PA进行了westernblot,N端氨基酸序列、氨基酸组成、质谱分析等测定.动物血栓模型实验表明:r PA具有较好的溶血栓作用.

关键词：组织型纤溶酶原激活剂克隆表达分离纯化

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及其突变体的表达研究进展

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药物生物技术 2003年第4期10卷 251-255页

作者：冮洁路福平杜连祥天津科技大学

对组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)及其突变体在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌、昆虫细胞和转基因动物乳腺等表达系统中进行表达的研究工作情况进行了综述 ,并对各个表达系统的优缺点进行了比较。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂突变体表达系统基因工程药物 t-PA

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组织型纤溶酶原激活剂对血栓疾病的治疗效益

国外医学.药学分册 1986年第6期 339-341页

作者： Collen D 姚明辉

随着对体内调节纤维蛋白溶解机理的进一步了解,当前旨在寻找一些更为有效、且又对全身纤溶作用更小的纤维蛋白特异性溶解剂。在这方面,研究最多的是组织型纤溶酶原激活剂(Tissuetype plasminogen activator,t-PA)。最近,通过三组随机化... 详细信息

随着对体内调节纤维蛋白溶解机理的进一步了解,当前旨在寻找一些更为有效、且又对全身纤溶作用更小的纤维蛋白特异性溶解剂。在这方面,研究最多的是组织型纤溶酶原激活剂(Tissuetype plasminogen activator,t-PA)。最近,通过三组随机化多中心试验已明确,经DNA 重组技术获得的t-PA 的疗效及其对纤

关键词：组织型纤溶酶原激活剂 PA 静脉输注亲和力血栓溶解纤溶酶原纤维蛋白原球蛋白

组织型纤溶酶原激活剂联合丝裂酶素C在青光眼滤过手术中抗增殖作用的实验研究

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疑难病杂志 2010年第12期9卷 907-910,F0003页

作者：任彦新马景学卫玉彩王悉颖河北医科大学第二医院眼科石家庄050011

目的观察组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与丝裂酶素C(MMC)联合应用在动物青光眼滤过手术中的抗增殖作用。方法将40只新西兰大耳白兔随机分4组:A组为空白对照组,B组为标准对照组,将浸有0.2 mg/ml MMC棉片置于巩膜下5 min;C组为t-PA组,术毕... 详细信息

目的观察组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与丝裂酶素C(MMC)联合应用在动物青光眼滤过手术中的抗增殖作用。方法将40只新西兰大耳白兔随机分4组:A组为空白对照组,B组为标准对照组,将浸有0.2 mg/ml MMC棉片置于巩膜下5 min;C组为t-PA组,术毕前房注射250μg/mlt-PA 0.1 ml,术后1、3天球结膜下各注射0.3 ml;D组为t-PA联合MMC组,术中将浸有0.1mg/ml MMC的棉片置于巩膜瓣下5min,术毕前房注射200μg/ml t-PA 0.1 ml,术后1、3天球结膜下各注射0.3 ml。术后观察滤过道开放、滤过道新生胶原纤维生成情况及增殖细胞数量。结果 HE染色显示,D组滤过道开放比率较A、B、C组高。Masson三色染色显示,D组滤过道处的胶原较A、B、C组少且疏松。免疫组织化学染色显示,术后观察各时间点,D组PCNA表达较A、B、C组弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 t-PA和较低浓度MMC在青光眼滤过手术中联合应用,其抗增殖能力较强,有望成为一种有效的抗青光眼术后瘢痕形成的新方法。

关键词：青光眼滤过手术丝裂霉素组织型纤溶酶原激活剂抗增殖

组织型纤溶酶原激活剂在移植血管桥再狭窄动物血管的差异表达

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中华生物医学工程杂志 2013年第3期19卷 216-219页

作者：李锐雄蓝斌朱天翔杨彦龙王沐廷马陈声蔡志雄王良玉广东汕头市中心医院中山大学附属汕头医院心胸外科 515000

目的研究组织型纤溶酶原激活剂（t—PA／PLAT）在移植血管桥再狭窄动物血管的差异表达。方法通过兔双侧颈动脉进行动脉桥和静脉桥的移植，形成双侧移植血管桥再狭窄动物模型。应用免疫组化检测t-PA在动物模型动脉桥、静脉桥的表达并进... 详细信息

目的研究组织型纤溶酶原激活剂（t—PA／PLAT）在移植血管桥再狭窄动物血管的差异表达。方法通过兔双侧颈动脉进行动脉桥和静脉桥的移植，形成双侧移植血管桥再狭窄动物模型。应用免疫组化检测t-PA在动物模型动脉桥、静脉桥的表达并进行比较。结果血管桥移植前，t-PA在实验动物颈动脉和颈静脉的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；血管桥移植后，t-PA在动脉桥的表达明显高于静脉桥（P〈0．05），于16周时达到高峰[（32．34±4．74）％比（16．74±3．14）％]，以后随时间延长而出现表达减少（P〈0．05）。结论t-PA在术后早期对血管桥具有保护作用，其表达的高低与术后血管桥再狭窄关系密切。

关键词：冠状动脉旁路移植术再狭窄组织型纤溶酶原激活剂免疫组化

蚓激酶抗凝、纤溶的机制及其与组织型纤溶酶原激活剂的关系

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中华老年医学杂志 1998年第6期17卷 47-50页

作者：张国平金惠铭张明曹翔钱睿哲杨诗春上海医科大学病理生理学教研室

目的探讨蚓激酶抗凝、纤溶机制及其与组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）的关系。方法给正常和高凝大鼠口服蚓激酶胶囊（２５ｍｇ·ｍｌ１·１００ｇ１体重，３天）后测白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）... 详细信息

目的探讨蚓激酶抗凝、纤溶机制及其与组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）的关系。方法给正常和高凝大鼠口服蚓激酶胶囊（２５ｍｇ·ｍｌ１·１００ｇ１体重，３天）后测白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、优球蛋白溶解时间（ＥＬＴ）、纤溶酶原含量和体外血栓形成的变化，以及体内血浆及体外培养的内皮细胞上清液中ｔＰＡ、ｔＰＡ抑制物（ＰＡＩ）活性的变化。结果正常和高凝大鼠口服蚓激酶后ＫＰＴＴ明显延长；ＥＬＴ明显缩短。体外血栓形成仪测定显示血栓长度、重量均明显减小。纤溶酶原含量明显降低。正常大鼠、高凝大鼠血浆ｔＰＡ活性升高（均为Ｐ＜００５），与纤溶酶原含量降低间呈明显负相关（ｒ＝－０８７２，Ｐ＜００５）。在大鼠肺微血管内皮细胞培养中加入蚓激酶（５０～２００ｍｇ／Ｌ）后，上清液中ｔＰＡ活性明显升高（Ｐ＜００１），呈量效依赖关系；但ＰＡＩ活性无明显变化。蚓激酶溶液中含有ｔＰＡ活性，其与药物浓度呈显著正相关（ｒ＝０８５８５，Ｐ＜００５）。结论蚓激酶能部分抑制内凝血途径，激活纤溶，后者又与ｔＰＡ活性升高有关

关键词：蚓激酶组织型纤溶酶原激活剂

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组织型纤溶酶原激活剂的纯化制备

生物技术通讯 1998年第2期9卷 148-152页

作者：吴本传陈昭烈军事医学科学院生物工程研究所北京100071

简述了用于大规模生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的重组动物细胞及其培养工艺。从重组tPA的大规模、快速纯化的角度考虑,对tPA的纯化制备方法进行了简要评述。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂纯化