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二陈汤通过抑制mTORC1/SREBP1/CAV1通路改善高脂饮食小鼠肝脏线粒体功能的作用研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 763-769页

作者：丁珊珊庄妍廖颖康洁张凌媛沈建英廖凌虹福建中医药大学福建福州350122

研究二陈汤对高脂饮食小鼠肝脏线粒体功能的影响及可能的作用机制。将60只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、高脂组、二陈汤组、mTORC1激活剂(MHY)组、二陈汤+MHY组、多烯磷脂酰胆碱(PPC)组,每组10只。正常组给予普通饲料,其余各组给予高脂... 详细信息

研究二陈汤对高脂饮食小鼠肝脏线粒体功能的影响及可能的作用机制。将60只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、高脂组、二陈汤组、mTORC1激活剂(MHY)组、二陈汤+MHY组、多烯磷脂酰胆碱(PPC)组,每组10只。正常组给予普通饲料,其余各组给予高脂饲料,喂养20周。第17周,二陈汤组和二陈汤+MHY组小鼠每日灌胃二陈汤(8.7 g·kg^(-1)),PPC组小鼠灌胃PPC(0.18 g·kg^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(0.01 mL·g^(-1)),持续4周。第19周,MHY组和二陈汤+MHY组小鼠隔日腹腔注射MHY(5 mg·kg^(-1)),持续2周。观察小鼠一般情况,检测小鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,HE染色和油红O染色观察肝组织形态变化,化学发光法检测三磷酸腺苷(ATP)含量,荧光探针(JC-1)法检测线粒体膜电位,免疫印迹法检测雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、小窝蛋白1(CAV1)的表达。结果显示,与正常组比较,高脂组小鼠体质量和腹围显著增加(P线粒体膜电位显著降低(P线粒体膜电位显著升高(P线粒体膜电位显著升高(P线粒体功能,可能是其化痰调脂的部分内在机制。

关键词：二陈汤痰证脂质代谢线粒体功能 mTORC1/SREBP1/CAV1

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氧化应激对线粒体功能及椎间盘细胞的影响

四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 249-255页

作者：周豪陈涛吴爱悯温州医科大学附属第二医院浙江省骨科学重点实验室温州325000

椎间盘退变被广泛认为是引起腰痛的主要原因之一,椎间盘细胞是椎间盘的主要细胞组成部分,其功能包括合成和分泌胶原蛋白和蛋白多糖,维持椎间盘的结构和功能稳定。此外,椎间盘细胞还参与维持椎间盘的营养代谢平衡、抗氧化和抗炎作用等生... 详细信息

椎间盘退变被广泛认为是引起腰痛的主要原因之一,椎间盘细胞是椎间盘的主要细胞组成部分,其功能包括合成和分泌胶原蛋白和蛋白多糖,维持椎间盘的结构和功能稳定。此外,椎间盘细胞还参与维持椎间盘的营养代谢平衡、抗氧化和抗炎作用等生理过程,因此椎间盘细胞在椎间盘退变中发挥重要作用。当椎间盘细胞受到氧化应激影响时,线粒体可能会受损,影响细胞的正常功能并加速退行性改变。线粒体是细胞的动力源,细胞内主要的能量生产机构,可以控制细胞内的几个重要过程,如细胞死亡。相反地,线粒体的紊乱可能与多种退行性病变的病理生理学有关。同时线粒体也是氧化还原反应的关键场所,过量的氧化应激和活性氧物质可对线粒体功能造成负面影响,这些因素可能导致线粒体的损伤和功能受损,进而引发炎症反应、线粒体DNA损伤和细胞凋亡,从而在椎间盘细胞病变过程中起到重要作用。本综述将突出探讨氧化应激与活性氧对线粒体的影响,并研究它们在椎间盘细胞的病理过程中的关键作用。同时介绍在目前的前沿治疗中,线粒体抗氧化剂和保护剂作为减缓氧化应激治疗椎间盘退变的一种潜在方法。

关键词：氧化应激活性氧线粒体功能椎间盘细胞综述

线粒体功能障碍在青光眼视网膜神经节细胞凋亡中的作用

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眼科新进展 2024年第8期 602-606页

作者：张曦董春琼张勇进王历阳张云袁非戴锦晖上海市老年医学中心眼科复旦大学附属中山医院眼科

目的探讨青光眼视神经损伤中线粒体功能改变及其在视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡中的作用。方法在标准大气压环境(100 kPa; 1 kPa=7.5 mmHg)下，利用压力装置额外予以70 mmHg的气体压力培养RGC-5细胞，按照不同培养时间将RGC-5细胞分为1... 详细信息

目的探讨青光眼视神经损伤中线粒体功能改变及其在视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡中的作用。方法在标准大气压环境(100 kPa; 1 kPa=7.5 mmHg)下，利用压力装置额外予以70 mmHg的气体压力培养RGC-5细胞，按照不同培养时间将RGC-5细胞分为12 h组、24 h组、48 h组。并将标准大气压下培养的RGC-5细胞设为空白组。通过Annexin V/PI染色检测细胞凋亡，JC-1染色及DCFH-DA荧光探针染色分别检测RGC-5细胞线粒体膜电位(MMP)及细胞内活性氧(ROS)水平。Western blot检测细胞内B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)蛋白、BCL-2相关X蛋白(BAX)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 (cleaved Caspase-3)及胞质内细胞色素C(Cyt C)蛋白的表达变化。结果与空白组相比，12 h组、24 h组、48 h组细胞内MMP均显著下降(均为P0.05)。与空白组相比，24 h组、48 h组细胞内cleaved Caspase-3及BAX蛋白相对表达量均显著增加，差异均有统计学意义(均为P0.05)。与空白组相比，12 h组、24 h组、48 h组细胞内BCL-2蛋白相对表达量均显著下降，差异均有统计学意义(均为P0.05)。结论 RGC-5细胞在70 mmHg压力下培养后，表现出细胞凋亡增加及线粒体功能障碍。压力损伤早期线粒体损伤机制可能与外源性细胞凋亡途径密切相关。

关键词：线粒体功能细胞凋亡线粒体膜电位活性氧眼压

孵化后期热处理对肉雏鸡骨骼肌和肝脏温敏TRP离子通道及线粒体功能的影响

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南京农业大学学报 2024年第3期47卷 530-538页

作者：李晓庆李盛周晓铧 Mohamed Ahmed Fathi 李春梅南京农业大学动物科技学院家畜环境控制与智慧生产研究中心江苏南京210095

[目的]孵化后期热处理能够在一定程度上提高肉鸡的耐热性,而骨骼肌和肝脏线粒体功能及温敏瞬时电位(transient receptor potential,TRP)离子通道与机体耐热性密切相关。因此,本试验旨在研究孵化后期热处理(thermal manipulation,TM)对... 详细信息

[目的]孵化后期热处理能够在一定程度上提高肉鸡的耐热性,而骨骼肌和肝脏线粒体功能及温敏瞬时电位(transient receptor potential,TRP)离子通道与机体耐热性密切相关。因此,本试验旨在研究孵化后期热处理(thermal manipulation,TM)对雏鸡骨骼肌和肝脏温敏TRP离子通道及线粒体功能的影响。[方法]选取240枚AA肉鸡种蛋随机分为3组(每组8个重复,每重复10枚种蛋):CON组,37.5℃孵化;TM1组,在孵化期第16~18天39.5℃热处理3 h·d^(-1);TM2组,在孵化期第16~18天41.5℃热处理3 h·d^(-1)。出雏后测定1日龄直肠温度,检测胸肌、腿肌和肝脏组织相关基因表达水平。[结果]与CON组相比,孵化后期热处理显著降低了1日龄雏鸡的直肠温度(P线粒体经典产热基因avUCP和avANT表达呈正相关关系,与线粒体氧化磷酸化功能相关基因表达水平呈负相关关系。[结论]孵化后期热处理可通过降低1日龄雏鸡胸肌的温敏TRP基因和线粒体产热相关基因表达水平水平,增加线粒体生物发生及氧化磷酸化功能相关基因表达水平,引起线粒体热适应性变化。

关键词：肉鸡孵化期热处理温敏TRP离子通道线粒体功能

ATP5J通过TOMM20调节线粒体功能并促进人肝细胞癌细胞转移

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 431-437页

作者：冷君志王根旺刘迪柳科军王琦惠永峰宁夏医科大学总医院肝胆外科宁夏银川750004

目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒... 详细信息

目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒体膜电位情况;利用DCFH-DA荧光探针检测Li-7细胞的活性氧(ROS)含量;线粒体ATP荧光探针检测线粒体功能;微丝绿色荧光探针(Actin-Tracker Green-488)检测细胞骨架重塑情况;Transwell检测细胞侵袭能力;Western blot检测ATP5J和线粒体外膜转位酶20(TOMM20)的表达水平。结果:过表达ATP5J可上调线粒体膜电位水平和线粒体ATP荧光强度、诱导细胞骨架重塑、促进细胞侵袭和TOMM20蛋白表达,抑制ROS生成(P线粒体膜电位和线粒体ATP荧光强度,显著降低细胞侵袭能力和TOMM20表达,促进ROS产生,阻断细胞骨架重塑(P线粒体能量转化,其通过TOMM20调节线粒体膜电位水平和线粒体ATP产生介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移。

关键词：肝细胞癌线粒体功能 ATP5J蛋白细胞骨架

加味孔圣枕中丹含药血清调控SIRT1/PGC-1α通路改善氧糖剥夺再灌注PC12细胞的线粒体功能

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中药新药与临床药理 2024年第7期 985-992页

作者：吴俏兰欧春雪武筱林高祖王嘉昀于华芸山东中医药大学中医学院山东省中医经典名方协同创新中心

目的基于SIRT1/PGC-1α通路探讨加味孔圣枕中丹含药血清对氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤PC12细胞的线粒体功能的改善作用及机制。方法采用大鼠PC12细胞构建体外OGD/R细胞模型。细胞分组：正常组（10%FBS）、模型组（10%FBS）、10%含药... 详细信息

目的基于SIRT1/PGC-1α通路探讨加味孔圣枕中丹含药血清对氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤PC12细胞的线粒体功能的改善作用及机制。方法采用大鼠PC12细胞构建体外OGD/R细胞模型。细胞分组：正常组（10%FBS）、模型组（10%FBS）、10%含药血清组、5%含药血清组（5%含药血清+5%空白血清）、10%空白血清组（对照组）。采用CCK-8法检测细胞存活率，筛选合适的氧糖剥夺时间（2、4、6、8 h）;MTT法检测细胞活性；线粒体压力测试（MST）法检测细胞氧气消耗速率（OCR）；流式细胞术（Annexin V-PE/7-AAD双染法）检测细胞凋亡情况；Western Blot法检测PC12细胞SIRT1、PGC-1α蛋白表达水平。结果与正常组比较，氧糖剥夺2、4、6、8 h后的PC12细胞活性均明显下降（P线粒体功能障碍，抑制神经元凋亡，促进神经元存活，其作用机制可能与激活SIRT1/PGC-1α信号通路有关。

关键词：加味孔圣枕中丹缺血性脑卒中脑缺血再灌注损伤大鼠含药血清 PC12细胞氧糖剥夺再灌注线粒体功能 SIRT1/PGC-1α通路

共生微生物对仔猪肠道发育、代谢和线粒体功能的影响

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生物技术通报 2024年第1期40卷 332-343页

作者：张进威吴元霞孙静李晓开陆路李周权葛良鹏重庆市畜牧科学院重庆402460 农业农村部养猪科学重点实验室养猪科学重庆市重点实验室重庆402460 国家生猪技术创新中心重庆402460 西南大学动物科学技术学院生物饲料与分子营养实验室重庆400715 四川农业大学动物科技学院成都611130

【目的】以猪为动物模型研究共生微生物对宿主肠道发育代谢的调控作用。【方法】经无菌剖腹产、无菌饲养等技术培育无菌(germ-free,GF)仔猪和无特定病原(specific pathogen-free,SPF)仔猪,通过形态学观察、液相色谱分析、RNA-seq等方法... 详细信息

【目的】以猪为动物模型研究共生微生物对宿主肠道发育代谢的调控作用。【方法】经无菌剖腹产、无菌饲养等技术培育无菌(germ-free,GF)仔猪和无特定病原(specific pathogen-free,SPF)仔猪,通过形态学观察、液相色谱分析、RNA-seq等方法研究共生微生物对仔猪肠道形态、代谢、基因表达及线粒体功能的影响。【结果】共生微生物对仔猪肠道的形态结构、短链脂肪酸含量、氨基酸代谢和肠道细胞线粒体含量等方面产生不同程度的影响;共生微生物影响仔猪肝脏、回肠和结肠组织的整体基因表达,调控线粒体氧化磷酸化、氨基酸代谢、脂质代谢等生物学过程相关基因表达,导致线粒体功能发生改变,从而影响仔猪肠道营养物质的吸收与代谢。【结论】共生微生物通过调控肠道细胞线粒体从而影响仔猪肠道发育和代谢,为“微生物-宿主互作”调控仔猪肠道健康相关研究奠定理论基础。

关键词：无菌猪无特定病原猪共生微生物能量代谢线粒体功能

跑台运动通过抑制小胶质细胞NAMPT表达并上调NAD+/SIRT1通路改善AD小鼠海马线粒体功能

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体育科学 2024年第3期44卷 66-77页

作者：赵娜徐波夏杰王璟张晨斐张宪亮山东体育学院运动与健康学院山东济南250102 华东师范大学体育与健康学院上海200241 上海交通大学体育学院上海200240 山东第一医科大学附属中心医院基础医学研究中心山东济南250013 山东大学体育学院山东济南250061

目的:探讨12周有氧跑台运动对APP/PS1小鼠海马小胶质细胞NAMPT表达的影响及其在调节NAD+/SIRT1/FOXO1/3a信号通路改善线粒体功能障碍中的作用。方法:3月龄野生型C57BL/6小鼠和APP/PS1小鼠随机分为野生型对照组(WT-sed)、野生型运动组(WT... 详细信息

目的:探讨12周有氧跑台运动对APP/PS1小鼠海马小胶质细胞NAMPT表达的影响及其在调节NAD+/SIRT1/FOXO1/3a信号通路改善线粒体功能障碍中的作用。方法:3月龄野生型C57BL/6小鼠和APP/PS1小鼠随机分为野生型对照组(WT-sed)、野生型运动组(WT-exe)和APP/PS1对照组(AD-sed)、APP/PS1运动组(AD-exe)。运动组进行为期12周的有氧跑台运动干预。干预结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,免疫荧光检测小鼠海马Iba-1表达水平及NAMPT与Iba-1共定位水平,透射电镜检测小鼠海马线粒体超微结构,Western blot检测海马SIRT1、Ace-FOXO1/3a、PARP1、CD38蛋白表达水平,RT-PCR检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)、PARP1、CD38 mRNA表达水平,ELISA和试剂盒检测NAD+、NADH、IL-1β、IL-6、TNF-α、ATP、H2O2的含量。结果:与WT-sed组相比,AD-sed组小鼠海马NAMPT与Iba-1共定位水平、PARP1、CD38、Ace-FOXO1/3a蛋白表达水平、IL-6、IL-1β、TNF-α、H2O2含量及受损线粒体数量均显著升高,NAD+含量、NAD+/NADH比值、SIRT1蛋白表达水平、mtDNA拷贝数、ATP含量及学习记忆能力均显著降低,而12周有氧跑台运动干预显著改善了APP/PS1小鼠海马上述异常变化。结论:12周有氧跑台运动可能通过抑制小胶质细胞NAMPT过度表达,降低神经炎症反应,减少PARP1、CD38对NAD+的消耗,上调NAD+/SIRT1/FOXO1/3a信号通路,改善线粒体功能障碍,最终起到缓解APP/PS1小鼠学习记忆衰退的作用。

关键词：阿尔茨海默病跑台运动线粒体功能烟酰胺磷酸核糖转移酶 NAD+/SIRT1

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生脉散干预心脏毒性大鼠线粒体功能的机制

中国实验方剂学杂志 2024年第16期 27-35页

作者：田晴晴康兰芳李霞田虹利郭文娟刘姣程杰河北中医药大学河北省中医院河北省中药制剂产业技术研究院

目的：评估生脉散对多柔比星（DOX）引发大鼠心脏毒性的保护作用，基于线粒体功能探讨其降低心脏毒性的作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、生脉散低、中、高剂量组(1.81、3.62、7.24 g·kg-1)和右雷佐生组(25 mg·kg... 详细信息

目的：评估生脉散对多柔比星（DOX）引发大鼠心脏毒性的保护作用，基于线粒体功能探讨其降低心脏毒性的作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、生脉散低、中、高剂量组(1.81、3.62、7.24 g·kg-1)和右雷佐生组(25 mg·kg-1)。空白组给予生理盐水，其他各组大鼠通过腹腔注射多柔比星单次2.5 mg·kg-1，连续6次，累积剂量达15 mg·kg-1建立心脏毒性模型。造模期间同时给予治疗药物，每天1次，连续3周。于每次注射多柔比星时记录大鼠的体质量变化，末次给药后进行中医证候评分，超声监测心功能；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）的含量水平，取心脏组织，苏木素-伊红（HE）染色观察心肌病理变化，马松（Masson）染色观察心肌纤维化，荧光染色检测线粒体膜电位，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测己糖激酶2（HK2）、乳酸脱氢酶（LDHA）、丙酮酸脱氢酶激酶（PDK1）的m RNA水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HK2、LDHA、PDK1蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组大鼠体质量显著减轻（P线粒体膜电位显著降低；心脏组织中HK2、PDK1、LDHA的m RNA和蛋白表达水平明显上升（P功能，生脉散中、高剂量组可缓解心肌损伤，减轻心肌组织纤维化，降低大鼠血清CK、LDH、AST、CK-MB水平，升高线粒体膜电位（P线粒体功能发挥对DOX诱导的心脏毒性保护作用。

关键词：生脉散多柔比星心脏毒性线粒体功能