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红三叶草异黄酮抗氧化活性的研究

食品与发酵工业 2009年第11期35卷 122-124页

作者：沈玥张永忠东北农业大学理学院黑龙江哈尔滨150030

以红三叶草为原料,采用超声波提取异黄酮类物质,选用NKA-9大孔吸附树脂来纯化红三叶草中异黄酮物质,并用紫外分光光度法测定红三叶草中异黄酮类化合物的含量。测定异黄酮提取物对羟自由基、超氧自由基清除实验及对猪油抗氧化实验表明:... 详细信息

以红三叶草为原料,采用超声波提取异黄酮类物质,选用NKA-9大孔吸附树脂来纯化红三叶草中异黄酮物质,并用紫外分光光度法测定红三叶草中异黄酮类化合物的含量。测定异黄酮提取物对羟自由基、超氧自由基清除实验及对猪油抗氧化实验表明:红三叶草异黄酮提取物对消除自由基和抑制脂质过氧化均有较强作用,能有效延缓油脂脂质过氧化,表现出一定的抗氧化活性。

关键词：红三叶草异黄酮类物质超声波抗氧化性

红三叶草异黄酮提取物对小鼠生长性能和免疫功能的影响

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沈阳农业大学学报 2008年第1期39卷 104-107页

作者：张勇朱宇旌任慧玲孙景霞王蕊沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161 辽宁职业学院动物科学系辽宁铁岭112001 大连老虎滩海洋公园乌语林辽宁大连116013 抚顺市动物疫病预防控制中心辽宁抚顺113006

为研究红三叶草异黄酮的营养免疫功能,选用80只小鼠,随机分成4组,分别给予对照(0mg·kg-1.d-1)和30mg·kg-1.d-1(A组)、90mg·kg-1.d-1(B组)、300mg·kg-1.d-1(C组)的红三叶草异黄酮灌胃处理。于试验期始末称量小鼠体重,试验期内的特定... 详细信息

为研究红三叶草异黄酮的营养免疫功能,选用80只小鼠,随机分成4组,分别给予对照(0mg·kg-1.d-1)和30mg·kg-1.d-1(A组)、90mg·kg-1.d-1(B组)、300mg·kg-1.d-1(C组)的红三叶草异黄酮灌胃处理。于试验期始末称量小鼠体重,试验期内的特定时间注射抗原诱导迟发性变态反应并测耳增厚;试验结束采血,取胸腺、脾脏、胃和小肠并称重,取腹腔液制片。结果表明:与对照组相比,30mg·kg-1.d-1处理组中雄性小鼠平均日增重提高55.56%(P红三叶草异黄酮对小鼠生长性能的影响与性别和剂量有关,30mg·kg-1.d-1处理可显著提高雄性小鼠的生长性能,较高剂量的红三叶草异黄酮对小鼠免疫功能的增强作用明显。

关键词：红三叶草异黄酮小鼠生长性能免疫功能

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红三叶草的硼营养研究

河北农业大学学报 1993年第4期16卷 30-33页

作者：马文奇张家口农业高等专科学校

以石灰性紫色土为供试土壤,在盆栽条件下研究了红三叶草在不同硼水平下硼的含量、吸收与分布。结果表明,红三叶草根部和地上部分各生育期的硼浓度、单株吸收量和平均吸收速度均随土壤有效硼的增加而提高。同一硼水平,各部位硼浓度随生... 详细信息

以石灰性紫色土为供试土壤,在盆栽条件下研究了红三叶草在不同硼水平下硼的含量、吸收与分布。结果表明,红三叶草根部和地上部分各生育期的硼浓度、单株吸收量和平均吸收速度均随土壤有效硼的增加而提高。同一硼水平,各部位硼浓度随生育期变化较小,硼平均吸收速度随生育期的变化与红三叶草平均生长速度的变化一致,表明硼的吸收与植株生长需求密切相关。对红三叶草10个部位含硼量测定表明,各部位含硼量均随土壤有效硼增加而提高,以根变幅最小、叶片最大;缺硼时,大部分硼积累在根中,而高硼时主要积累在叶片中,红三叶草硼诊断的最佳器官是叶片。红三叶草在缺硼时,植株表现“多头症”,叶片有“红叶型”和“皱缩型”2种类型;硼中毒时则表现典型的“金边症”。

关键词：硼红三叶草营养

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红三叶草中硒的生理生化及其富集规律研究

红三叶草中硒的生理生化及其富集规律研究

作者：杨三东湖南农业大学

学位级别：硕士

硒是生态环境中重要的生命微量营养元素,在地球上分布广泛而又极不均匀,全世界有2/3的地区缺硒,我国缺硒地区也在2/3之上,其中1/3为世界公认的严重缺硒区。人畜硒营养水平取决于摄入食物的含硒量,植物在自然界硒循环生态链和无机硒转化... 详细信息

硒是生态环境中重要的生命微量营养元素,在地球上分布广泛而又极不均匀,全世界有2/3的地区缺硒,我国缺硒地区也在2/3之上,其中1/3为世界公认的严重缺硒区。人畜硒营养水平取决于摄入食物的含硒量,植物在自然界硒循环生态链和无机硒转化为有机硒中起着致关重要的作用,又是人畜摄入硒最重要的直接硒源。研究表明:世界范围内有数种人畜疾病可能与缺硒有关,缺硒严重威胁人类健康和畜牧业的发展。提高食物链硒水平,对保证人类健康具有重要意义。本文以红三叶草为实验材料,采用盆栽土培,通过多种研究方法,不同的分析手段和策略研究了硒的应用:运用原子吸收分光光度法作为硒含量的检测手段,研究了红三叶草对硒的吸收、积累、分布的动态,对环境硒的耐受能力,不同供硒水平对红三叶草生长发育、干物质和硒累积量及动态、产量、含硒量的影响;通过对根系氧化还原能力的测定,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性以及还原性谷胱甘肽、脂质过氧化产物丙二醛含量的测定,叶绿素、可溶性蛋白质、维生素C含量的分析,研究了硒的生理功能及机体内部生理生化功能和抗逆作用。运用分级盐析进行了从红三叶草中分离含硒蛋白的探索,对红三叶草中硒的赋存形态进行了探讨。结果表明:红三叶草能主动吸收环境即使是高硒环境中的硒,对环境中的硒有一定的生物富集作用,富集作用随着生长发育成熟而增强;根系吸收的硒经同化被运送到各个器官积累,各器官的含硒量亦随该器官的成熟而提高,成熟时各器官的含硒量依次为:根>叶>种子>茎;植株从环境中吸收的无机硒大部分被转化为有机态,红三叶草中硒的赋存形态有蛋白硒、核酸硒、多糖硒,其中接近总硒的3/5存在于蛋白质中,蛋白硒是红三叶草硒的主要赋存形态,多糖硒和核酸硒占总硒的1/4是红三叶草硒的重要存在形态;硒对植物的生物效应符合微量元素生物效应剂量规律,在适宜的浓度硒范围内,随着硒浓度的增加,根系氧化还原能力、叶绿素含量、可溶性蛋白质含量、维生素C含量提高,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶等抗氧化酶类的活性增强,同时脂质过氧化产物丙二醛的含量下降,促进红三叶草生长发育,维持旺盛的生命活力,增强抗逆性;高浓度的硒使上述诸项指标反向变化,对红三叶草生长产生毒害作

关键词：红三叶草硒生理生化富集规律

土壤不同供硼水平对红三叶草吸收其它营养元素的影响

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华中农业大学学报 1989年第3期8卷 236-241页

作者：马文奇刘武定皮美美华中农业大学微量元素研究室

用石灰性紫色土盆栽红三叶草,研究了土壤缺硼(0.13ppm)、适量硼(0.75ppm)和高硼(5.0ppm)对红三叶草吸收K、Ca、Mg、P、Mn、Zn、Cu和Mo等养分的影响。结果表明,随着供硼水平的提高,上述诸元素的单株吸收量相应增大,但其增加的幅度则因元... 详细信息

用石灰性紫色土盆栽红三叶草,研究了土壤缺硼(0.13ppm)、适量硼(0.75ppm)和高硼(5.0ppm)对红三叶草吸收K、Ca、Mg、P、Mn、Zn、Cu和Mo等养分的影响。结果表明,随着供硼水平的提高,上述诸元素的单株吸收量相应增大,但其增加的幅度则因元素种类、生育期不同而有差別。按红三叶草体内的元素浓度计,则有相反的趋势。缺硼明显抑制红三叶草对K等元素的吸收,高硼则无明显的影响。计算各种元素的平均吸收速度的变化规律,证明与红三叶草的平均生长速度的变化规律一致。根据上述结果,作者提出评价硼对养分吸收的影响,应综合考虑养分浓度、吸收量和吸收速度。

关键词：红三叶草硼营养元素吸收

红三叶草总异黄酮提取、纯化工艺研究及初步工业设计

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红三叶草总异黄酮提取、纯化工艺研究及初步工业设计

作者：蒲凌云兰州理工大学

学位级别：硕士

异黄酮类化合物是红三叶草中最为主要的化学成分，它在人与动物体内具有与雌二醇类似的功效，是一种极具有开发前景的天然保健食品添加剂、功能性食品添加剂和医用药品和饲料添加剂，被誉为纯天然植物雌激素。在异黄酮生产方面，红三叶... 详细信息

异黄酮类化合物是红三叶草中最为主要的化学成分，它在人与动物体内具有与雌二醇类似的功效，是一种极具有开发前景的天然保健食品添加剂、功能性食品添加剂和医用药品和饲料添加剂，被誉为纯天然植物雌激素。在异黄酮生产方面，红三叶草异黄酮以较高的含量，安全的品质保障，低廉的原料价格为绝对优势，有代替曾风靡全球的大豆异黄酮之势，具有很高的利用价值。本文以甘肃岷山红三叶草为原料，对红三叶草总异黄酮的提取、纯化工艺进行了研究，并对年产50吨50%的红三叶草总异黄酮的生产工艺进行了初步工业设计。第一，探索并筛选出红三叶草总异黄酮提取的最佳工艺及工艺参数，经中试放大实验验证其提取工艺稳定可靠。该提取最佳工艺参数为：乙醇浓度为75%，提取温度为80℃，料液比为1︰8，提取时间为1.5h，提取次数3次。在此条件下，红三叶草总异黄酮含量可达10.54%，总异黄酮得率可达1.12%。第二，以上述提取的红三叶草总异黄酮为原料，采用石油醚进行热回流脱脂实验，筛选出了石油醚脱脂的最优工艺及最佳工艺参数。经重复性实验验证其提取工艺稳定可靠，异黄酮脱脂效果较好，所得浸膏中总异黄酮含量平均为15.67%，总异黄酮收率平均可达88.72%。第三，根据黄酮类化合物自身的性质，对脱脂后红三叶草总异黄酮浸膏进行二次纯化。采用酸碱法及醇溶水沉法对红三叶草总异黄酮进行了纯化工艺的研究，分别考察碱溶pH、酸沉pH、水沉加水量对异黄酮含量及浸膏得率的影响，再通过正交实验得到最佳纯化工艺。该最佳工艺为碱溶的pH为8.5，酸沉的pH为2.5时，加水量为异黄酮醇溶液的6倍量时，红三叶草总异黄酮含量最高，可达50%以上。第四，采用大孔树脂分离技术对上述三所制得的50%的红三叶草总异黄酮进行三次纯化，筛选分离红三叶草总异黄酮的最佳树脂，并对影响树脂纯化程度的各种因素进行研究。得出最佳纯化条件为：上样液溶剂乙醇浓度为10%、上样液浓度1.5mg/ml、吸附流速2BV/h、上样液pH为5、洗脱剂乙醇浓度为80%，此时异黄酮含量由50%可提高到75%。第五，建设年产50吨，50%红三叶草总异黄酮制备的初步的工业设计，并绘制带控制点的工艺流程图。

关键词：红三叶草异黄酮提取纯化工艺设计

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红三叶草总异黄酮提取、分离、纯化工艺研究

红三叶草总异黄酮提取、分离、纯化工艺研究

作者：周振亚兰州大学

学位级别：硕士

红三叶草也称红车轴草(Trifolium pretense),为豆科三叶草属多年生草本植物。研究表明岷山红三叶不仅可以作为优良的牧草,而且是重要的药材,含有丰富的异黄酮类物质,如芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、红车轴草素、大豆素等,具有大豆异黄酮类似... 详细信息

红三叶草也称红车轴草(Trifolium pretense),为豆科三叶草属多年生草本植物。研究表明岷山红三叶不仅可以作为优良的牧草,而且是重要的药材,含有丰富的异黄酮类物质,如芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、红车轴草素、大豆素等,具有大豆异黄酮类似的药用与保健作用.。本试验以岷山红三叶为材料,通过红三叶草粉末的乙醇浸提,乙醇粗提物的乙酸乙酯萃取,以及乙酸乙酯提取物的大孔树脂分离纯化等步骤,结合HPLC的分析检测手段,最终得到杂质大为减少异黄酮产品,异黄酮纯度达到50%以上。通过正交试验分析确定,影响红三叶异黄酮浸提回收率的关键因素是乙醇的浓度,影响异黄酮纯化的关键因素是盐酸的浓度,并最终选用乙醇和乙酸乙酯分别作为浸提和纯化的溶剂。乙醇浸提选用L(3)正交实验,确定从红三叶草提取异黄酮的最佳工艺条件是:乙醇浓度75%,提取温度70℃,乙醇用量10倍(V/W),浸提时间1小时。乙酸乙酯萃取也选用L(3)正交实验,确定从乙醇浸膏得到异黄酮粗品的最佳工艺是:反应盐酸浓度3%,反应温度60℃,用于溶解浸膏的3%碱用量为4倍(V/W),反应时间为1小时。对于乙酸乙酯提取物的进一步纯化。研究表明,AB-8树脂对红车轴草异黄酮不仅吸附量大,而且解吸率高,适合红车轴草异黄酮的分离富集。AB-8树脂分离红车轴草异黄酮的工艺参数为:上柱液浓度0.8-4mg/mL,pH8.5,流速2BV/h。以4-6倍树脂床体积的70-80%乙醇以2BV/h流速进行洗脱,可基本上将红车轴草异黄酮从树脂上解吸下来,收集其中浓度最集中部分,经HPLC检测,其异黄酮浓度超过50%,杂质大为减少,通过冷冻干燥就能得到含量达50%以上的异黄酮干品。

关键词：红三叶草异黄酮正交实验大孔树脂分离纯化 HPLC

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微波辅助萃取红三叶草总异黄酮的研究

食品工业科技 2009年第2期30卷 226-229页

作者：杨薇薇张永忠王丽娟东北农业大学理学院应用化学系黑龙江哈尔滨150030

通过单因素及正交实验优化了微波法提取红三叶草总异黄酮的实验条件。正交实验结果显示,当微波功率为800W、微波时间为6min、微波温度为70℃、溶剂浓度为55%、液固比为10mL/g时,红三叶草总异黄酮得率和含量分别达27.78mg/g和7.72%。与... 详细信息

通过单因素及正交实验优化了微波法提取红三叶草总异黄酮的实验条件。正交实验结果显示,当微波功率为800W、微波时间为6min、微波温度为70℃、溶剂浓度为55%、液固比为10mL/g时,红三叶草总异黄酮得率和含量分别达27.78mg/g和7.72%。与醇提法、超声波法提取相比,微波法提取具有用时短、溶剂消耗少、选择性好及操作方便等特点。

关键词：微波辅助提取红三叶草总异黄酮

接种不同VA菌根真菌对红三叶草利用不同磷源的影响

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生态学报 2001年第9期21卷 1506-1511页

作者：宋勇春冯固李晓林中国农业大学植物营养系北京100094

以红三叶草为材料 ,利用三室隔网培养方法 ,研究了施用不同磷源条件下 ,接种 VA菌根真菌 (Glomus mosseae和Glomusversiforme)对外加有机磷源及土壤有机磷的利用效率。植物生长 1 0周后 ,测定植株干物重、含磷量、菌根侵染率及根系长度... 详细信息

以红三叶草为材料 ,利用三室隔网培养方法 ,研究了施用不同磷源条件下 ,接种 VA菌根真菌 (Glomus mosseae和Glomusversiforme)对外加有机磷源及土壤有机磷的利用效率。植物生长 1 0周后 ,测定植株干物重、含磷量、菌根侵染率及根系长度。结果表明 :接种菌根真菌能明显增加植株干物重和含磷量。接种条件下无机磷 (KH2 PO4 )对植株生长的促进作用大于有机磷 (Na-phytate)处理 ,接种 Glomusversoiforme的作用明显大于接种 Glomusmosseae。接种 Glomusmosseae,植株对磷酸二氢钾中磷的吸收量明显大于植酸钠 ,而接种 Glomusversiforme时则植株对植酸钠的磷吸收量明显高于磷酸二氢钾。上述结果说明接种两菌种对不同磷源的作用不同 ,接种 Glomusmosseae可提高磷酸二氢钾中磷的利用率。

关键词： VA菌根真菌红三叶草磷源有机磷磷吸收磷利用率接种