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重庆大学学报（自然科学版） 2000年第2期23卷 10-12页

作者：吴江红程西云韦云隆周银生朱永清重庆大学机械传动国家重点实验室重庆400044 浙江大学机械系杭州310027

通过试验研究了狗小肠粘液的流变特性。提出了狗小肠粘液Casson方程流变模型。试验结果表明 ,在低切变率下 ,狗小肠粘液的表观粘度随切变率升高而降低 ,具有剪切稀化的性质 ,属非牛顿流体。当切变率升高到一定程度后。

关键词：生物流变学摩擦学狗小肠粘液流变性能

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致病性溶藻弧菌对大黄鱼粘液的粘附研究

致病性溶藻弧菌对大黄鱼粘液的粘附研究

作者：陈强中国海洋大学

学位级别：硕士

本文测定了大黄鱼表皮、鳃、肠粘液的溶菌活性、IgM含量及蛋白质组成等生理生化特性,并研究了粘液对致病性溶藻弧菌的抗菌活性及溶藻弧菌对粘液的营养利用情况。采用放射性标记法、显微镜计数法研究了不同理化因子及饥饿条件下致病性溶... 详细信息

本文测定了大黄鱼表皮、鳃、肠粘液的溶菌活性、IgM含量及蛋白质组成等生理生化特性,并研究了粘液对致病性溶藻弧菌的抗菌活性及溶藻弧菌对粘液的营养利用情况。采用放射性标记法、显微镜计数法研究了不同理化因子及饥饿条件下致病性溶藻弧菌对大黄鱼粘液的粘附作用,同时比较了溶藻弧菌对大黄鱼不同部位的粘附动力学并初步探讨了溶藻弧菌对粘液的粘附特性,并研究了乳酸、单糖等制剂对溶藻弧菌粘附的抑制作用。主要结果如下:1.大黄鱼各部位粘液的生理生化特点大黄鱼鳃粘液对溶藻弧菌无抑菌作用,而表皮粘液及前后肠粘液有较弱的抑菌作用,随着菌浓度的升高,鳃粘液及肠粘液对溶藻弧菌表现明显的促生长作用;表皮粘液表现一定的溶菌活性(83 U·mL-1)而其它粘液无溶菌活性;大黄鱼表皮粘液、鳃粘液的IgM含量明显高于肠粘液;溶藻弧菌可以将大黄鱼粘液作为唯一碳源利用;通过SDS-PAGE电泳结果表明大黄鱼不同部位粘液的组成不同。2.溶藻弧菌对大黄鱼各部位粘液的粘附动力学研究溶藻弧菌对表皮粘液、鳃粘液及后肠粘液的粘附量趋于饱和的孵育时间为180min,粘附量分别为7.26×104、7.57×104、1.25×105个·mm-2而对前肠粘液的粘附量饱和时间为150min,粘附量为1.33×105个·mm-2。通过不同菌浓度条件下的溶藻弧菌对大黄鱼粘液的粘附情况表明,后肠粘液的粘附位点(em)最多而离散常数(kx)最大,对前肠粘液的亲和指数最大,而对表皮粘液的亲和指数最低。试验结果表明病原性溶藻弧菌能够较好地粘附于大黄鱼粘液尤其是肠粘液进而为它的进一步侵入创造有利条件。3.不同环境条件下的溶藻弧菌对大黄鱼的粘附情况溶藻弧菌的粘附作用与温度、盐度、pH等环境因子有着密切关系,这些因子的改变能显著影响其粘附作用。在温度为25～30℃、pH值5～6时溶藻弧菌对大黄鱼粘液有较强的粘附作用,在不同盐度下没有明显的梯度关系,但在盐度35时呈现较强粘附作用,并且溶藻弧菌的粘附依赖于Na+的存在,同时Ca2+、Mg2+等二价阳离子对其粘附有一定的促进作用。4.饥饿条件下的溶藻弧菌对大黄鱼粘液的粘附情况

关键词：溶藻弧菌粘附大黄鱼粘液

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艾灸对胃粘膜的保护作用及其与粘液的关系

针刺研究 1993年第4期18卷 300-304页

作者：陈演江曹友清肖德生储祥平镇江医学院生理教研室江苏212001

我们以前的工作已经揭示艾灸“神厥”穴,对大鼠溃疡模型有保护作用,在进一步的机制探讨中发现:模型鼠胃粘膜切片经PAS 染色,其胃腺 PAS 阳性层与胃腺总长的比值,艾灸鼠显著加大;胃的结合粘液量,艾灸鼠显著增多,两者 P<0.05,与溃疡面积... 详细信息

我们以前的工作已经揭示艾灸“神厥”穴,对大鼠溃疡模型有保护作用,在进一步的机制探讨中发现:模型鼠胃粘膜切片经PAS 染色,其胃腺 PAS 阳性层与胃腺总长的比值,艾灸鼠显著加大;胃的结合粘液量,艾灸鼠显著增多,两者 P粘液有关。

关键词：艾灸胃溃疡粘液

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短蛸体表及粘液性免疫机制的研究

短蛸体表及粘液性免疫机制的研究

作者：王宜艳山东师范大学

学位级别：硕士

自2004年3月至2007年2月,以我国南北沿海广泛分布的短蛸(Octopus ocellatus)为研究对象,采用组织学、组织化学和生物化学技术,对短蛸外套膜、足、鳃和消化系统等与外界海水密切接触的组织器官的免疫屏障机制进行了初步研究。以阿新兰... 详细信息

自2004年3月至2007年2月,以我国南北沿海广泛分布的短蛸(Octopus ocellatus)为研究对象,采用组织学、组织化学和生物化学技术,对短蛸外套膜、足、鳃和消化系统等与外界海水密切接触的组织器官的免疫屏障机制进行了初步研究。以阿新兰和过碘酸雪夫氏反应(AB-PAS)染色法显示了短蛸外套膜、足、鳃和消化系统各器官中的粘液细胞,并对粘液细胞的类型和分布规律进行研究。根据AB-PAS显色结果的不同,将其粘液细胞分为I-IV 4种类型,分别为PAS反应阳性、AB反应阴性、呈红色、主要含中性粘多糖的I型粘液细胞;AB反应阳性、PAS反应阴性、呈蓝色、主要含酸性粘多糖的Ⅱ型粘液细胞;AB和PAS反应均为阳性、分别呈紫红色和蓝紫色的Ⅲ型和Ⅳ型粘液细胞。短蛸外套膜外上皮、腕外上皮和漏斗内外上皮均含有丰富的粘液细胞,外套膜4种粘液细胞均有,以Ⅲ和Ⅳ型为主,背面粘液细胞的密度小于腹面的。腕上皮皱褶处粘液细胞密度较大,其它大部分区域密度较小,以Ⅱ型细胞为主,另有少量Ⅲ和Ⅳ型细胞;吸盘外上皮有大量粘液细胞,也以Ⅱ型为主;漏斗内外上皮粘液细胞密度较大,基部以Ⅱ型为主,其它部位以Ⅲ型为主。鳃丝上皮无粘液细胞,鳃轴上皮含少量Ⅰ型粘液细胞,但整个鳃丝和鳃轴上皮均含AB或PAS反应阳性物质。短蛸食道、嗉囊和胃无粘液细胞分布,但其中的护膜、粘膜层、粘膜下层及肌肉层中均含大量呈红色的中性粘多糖阳性物质,肝胰脏腺管上皮也无粘液细胞,但上皮中及腺管腔中也有大量中性粘多糖阳性物质。口膜、口球、胃盲囊、肠、直肠、肛门侧瓣、前唾液腺和后唾液腺均有粘液细胞分布,口膜外上皮内粘液细胞较多,多为Ⅱ型,胃盲囊侧褶基部粘液细胞较多,以Ⅰ型细胞最多;侧褶中部小褶上的粘液细胞全为Ⅱ型;侧褶游离端粘液细胞则全为Ⅰ型;肠、直肠和肛门侧瓣粘膜上皮内均有大量粘液细胞,多为Ⅱ型;前、后唾液腺内均存在大量粘液细胞,其中前唾液腺中多为Ⅰ型和Ⅲ型,后唾液腺中Ⅳ型最多。粘液细胞的类型和分布与其所在部位执行的功能有密切的联系。采用组织化学方法显示了短蛸外套膜、足、消化系统和鳃等组织器官中2种水解酶——酸性磷酸酶(ACP)和非特异性酯酶(NSE)及2种氧化酶——过氧化物酶(POD)和酚氧化酶(PO)。2种水解酶组化显示结果有许多共性,外套膜外上皮、腕外上皮、漏斗内外上皮、鳃丝和鳃轴上皮、整个消化管粘膜上皮、唾液腺、肝脏腺小管和输出管上皮均为ACP和NSE阳性或强阳性反应;各器官结缔组织阳性要弱一些,但其中均有阳性或强阳性物质分散分布;各器官的肌肉组织也为阳性反应。POD在各器官的阳性要弱一些,阳性物质的分布规律与2种水解酶相似。PO的分布规律明显不同,各器官的上皮几乎均为阴性反应,阳性物质只在结缔组织中存在。食道、嗉囊和胃的护膜4种酶显示结果也不同,食道和嗉囊的护膜为NSE极强阳性反应,胃护膜呈NSE阳性;食道和嗉囊的护膜呈POD强阳性,而胃护膜为极弱阳性,但胃粘膜上皮细胞外有厚度约为7-15μm的POD强阳性物质带;食道、嗉囊和胃的护膜为ACP和PO阴性反应。采用生化方法检测了短蛸体表分泌的粘液及部分器官(外套膜外上皮、鳃、食道、嗉囊、胃、胃盲囊、肠)匀浆液中的ACP、NSE和POD活力水平,在粘液和上述器官中均检测到了3种酶的活性,ACP活力以鳃为最强,POD和NSE活力水平以外套膜为最高;酶活力最弱的器官在ACP为胃盲囊、在NSE为食道,在POD为鳃;粘液中3种酶的活力水平在8种样品中均处于中等水平。本实验结果表明,短蛸体表粘液和皮肤可通过ACP和NSE的水解作用、POD-H2O2-卤化物杀菌体系的作用及粘多糖的作用等多种途径水解和杀灭入侵的病原微生物而起到很好的免疫屏障功能;与外界海水和病原微生物接触密切的鳃和消化系统各器官的上皮等组织也均有很好的免疫防御功能;在体表免疫防御功能中,PO应不起直接作用。

关键词：短蛸粘液外套膜鳃消化器官免疫头足类

河流弧菌对牙鲆粘液的趋化、粘附作用及牙鲆血清抗菌蛋白研究

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河流弧菌对牙鲆粘液的趋化、粘附作用及牙鲆血清抗菌蛋白研究

作者：邹文政集美大学

学位级别：硕士

随着近年来牙鲆(Paralichthys olivaceus)在福建的规模化养殖,由河流弧菌(Vibrio fluvialis)引起的疾病日益严重。病原菌对鱼类粘液的趋化、粘附作用是病原菌的毒力因子之一,了解病原菌对鱼类粘液的趋化、粘附特性不仅有助于了解病原菌... 详细信息

随着近年来牙鲆(Paralichthys olivaceus)在福建的规模化养殖,由河流弧菌(Vibrio fluvialis)引起的疾病日益严重。病原菌对鱼类粘液的趋化、粘附作用是病原菌的毒力因子之一,了解病原菌对鱼类粘液的趋化、粘附特性不仅有助于了解病原菌的致病机理,对于疾病的防治也有重要的指导意义。鱼类血清中的抗菌蛋白在抗感染免疫中起着重要的作用。本文研究病原性河流弧菌对牙鲆粘液的趋化、粘附作用以及注射河流弧菌后牙鲆血清中的抗菌蛋白,以期进一步了解河流弧菌感染牙鲆的早期阶段的特性以及牙鲆抗感染免疫特性,为养殖牙鲆的河流弧菌病防治提供有价值的参考。本文首先测定了河流弧菌在牙鲆表皮、鳃和肠粘液中的生长情况及其对3种粘液的趋化和粘附作用。试验结果表明:河流弧菌在3种粘液中都能生长,生长前期符合Logistic模型,然后进入Gompertz模型,在鳃粘液中的生长量高于肠粘液和表皮粘液;河流弧菌对牙鲆3种粘液具有较强的趋化应答和粘附作用,在粘液总蛋白含量相同的情况下,河流弧菌对牙鲆鳃粘液的趋化应答显著强于对表皮粘液的趋化应答(P粘液的趋化应答极显著低于对鳃粘液和表皮粘液的趋化应答(P粘液和鳃粘液的粘附率较高,而对肠粘液的粘附率较低,特别是孵育30、60和90min时河流弧菌对牙鲆表皮粘液和鳃粘液的粘附率显著高于对肠粘液的粘附率(P粘液的趋化量随着菌浓度的升高而增大;在室温下河流弧菌的趋化量随着孵育时间的延长而增加,60 min趋于饱和;孵育温度在4～15℃范围内趋化作用随温度升高而增强,15℃时达最大值;pH值为8时细菌的趋化性最强;NaCl浓度超过0.8%,河流弧菌的趋化性随着浓度升高而显著减弱(P粘液的趋化作用(P粘液的影响。试验结果表明:河流弧菌能很好地粘附于牙鲆表皮粘液,粘附量随菌浓度升高而增大并符合饱和粘附动力学:y=417.89Ln(x)+691.57 (R=0.986);在30℃下粘附量随着孵育时间的延长而增加,180min趋于饱和;孵育温度在4～30℃范围内粘附量随温度升高而增多,30℃时粘附量最大;pH值酸性较碱性粘附作用明显,pH值5时最强;NaCl浓度在0.5～4.5%范围内,细菌粘附作用随着浓度升高而增强,较纯水存在显著性差异(P粘液,尤其是鳃粘液中生长和定植;牙鲆表皮粘液对河流弧菌有较强的趋化作用和粘附作用,且受环境因子的影响较大;这有利于进一步感染、致病。此外,牙鲆被河流弧菌感染后能很快产生大量抗菌物质释放到血清中;主要的抗菌物质是分子量比较大的物质,且热稳定性较好;这些抗菌物质对部分革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌有抗菌作用。

关键词：河流弧菌牙鲆粘液趋化作用粘附作用抗菌蛋白

抗胃肠粘液骨架蛋白单抗和裸鼠移植人胃癌体内示踪定位分布研究

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中国医科大学学报 1993年第2期22卷 85-88页

作者：杨广育曹学松刘晓东张荫昌中国医科大学肿廇研究所

应用人工合成人胃肠粘液骨架蛋白之序列七肽片段,评价系列抗胃肠癌单抗之抗原决定簇。结果,首次发现一个抗人胃肠粘液的单克隆抗体,其抗原决定簇为富含苏氨酸的粘液分子骨架蛋白的七肽片段ITTTTTV。并进一步采用两株组织类型不同的移植... 详细信息

应用人工合成人胃肠粘液骨架蛋白之序列七肽片段,评价系列抗胃肠癌单抗之抗原决定簇。结果,首次发现一个抗人胃肠粘液的单克隆抗体,其抗原决定簇为富含苏氨酸的粘液分子骨架蛋白的七肽片段ITTTTTV。并进一步采用两株组织类型不同的移植人胃癌组织裸鼠模型,经体外扫描方法,追踪观察了^(131)I标记该单抗GL-013在荷瘤裸鼠体内定位移植瘤能力。经腹腔注入^(131)I标记GL-013后第3天开始,两株移植瘤即能被清晰地显示出来,且在72h取出鼠内脏后的扫描图中仍可见扫描图中的高放射性浓聚区,而注入^(131)I标记正常鼠γ球蛋白,移植瘤则未被显示;第9天时两株荷瘤裸鼠的实验组与对照组的T/NT值均呈明显差异。表明抗胃肠粘液之单抗GL-013在荷瘤裸鼠体内是定位于两株人胃癌移植瘤组织的。提示GL-013单抗可能适于对不同组织类型胃癌的放射免疫显像。

关键词：粘液单克隆抗体胃肿瘤肠肿瘤

大黄提取液对大鼠结肠粘液分泌的影响及机制研究

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大黄提取液对大鼠结肠粘液分泌的影响及机制研究

作者：吴迪首都医科大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:大黄为蓼科大黄属植物,其干燥根和块茎作为传统中药大黄(Rheum palmatum L.)被广泛使用,是中国最古老最常用的中药之一。药典中所使用的药用大黄为药用大黄(Rheum offcinale Baill.)、唐古特大黄(Rheum tanguticum *** B... 详细信息

研究背景和目的:大黄为蓼科大黄属植物,其干燥根和块茎作为传统中药大黄(Rheum palmatum L.)被广泛使用,是中国最古老最常用的中药之一。药典中所使用的药用大黄为药用大黄(Rheum offcinale Baill.)、唐古特大黄(Rheum tanguticum *** Balf.)和掌叶大黄(Rheum palmatum L.)。大黄的主要成分为蒽醌类化合物。有研究报道,大黄具有抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、消炎、治疗肾衰竭等作用。大黄可通过促进大肠蠕动、离子分泌和减少水分吸收的机制发挥泻下的功效。结肠上含有大量的杯状细胞,其通过分泌粘液发挥保护和润滑肠道的作用,粘液的分泌受神经和体液因素的调节。肠道分泌蛋白主要为粘蛋白和少量酶类。外界有病原体进入时,肠道作出应激反应,分泌粘液量会发生改变。当短期服用大黄诱发腹泻的同时,对粘液分泌的影响如何及其机制未见报道。本研究的目是探寻大黄促进粘液分泌和肠道屏障保护的作用及其机制。实验方法:采用免疫荧光组织化学的方法检测组胺受体及肥大细胞在结肠部位的分布,并运用DAB染色进一步确定肥大细胞在结肠部位的变化;应用Western blot定量检测肥大细胞中类糜蛋白酶在大黄作用下的含量变化;使用AB/PAB染色观察大黄对大鼠结肠粘液合成的影响;使用肠道灌流系统和Bradford方法测定离体结肠在大黄的作用下粘蛋白的分泌及酮替芬对粘液分泌的影响;使用HE染色观察嗜酸性粒细胞的分布与聚集;采用酶联免疫吸附(Elisa)的方法测定大黄对大鼠粪便内组胺(histamine)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、前列腺素2(prostaglandin E2,PGE2)及血浆中干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白介素-1(interleukin-1,IL-1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响;使用Elisa的方法观察大黄对孵育组织中乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)和粘蛋白-2(Mucin-2,MUC-2)的释放的影响。实验结果:(1)短期服用大黄会引起大鼠粪便颗粒数的增加及粪便内水含量的增加,酮替芬可部分降低这种改变;(2)大鼠结肠杯状细胞上含有大量组胺受体(HR1、HR2),主要分布在杯状细胞的基底侧;(3)对比正常大鼠,以3g/kg、6g/kg的剂量短期服用大黄会引起大鼠结肠部位肥大细胞的聚集,当给大鼠服用9g/kg的剂量时,结肠部位肥大细胞的聚集现象与3g/kg、6g/kg的剂量相比有下降;嗜酸性粒细胞的聚集现象与肥大细胞的聚集趋势相同;(4)运用Elisa的方法测定发现,以3g/kg、6g/kg的剂量短期服用大黄会引起TNF-α、IFN-γ的升高,其中IFN-γ的升高具有统计学意义、同时可引起抑炎因子IL-10的降低;当给大鼠服用9g/kg的剂量时,TNF-α及IFN-γ无明显变化,IL-10较正常比较稍有下降,但无统计学意义;大黄可以促进Ach的释放;(5)大黄会引起大鼠粪便内组织胺、5-HT剂量依赖性的升高,其中组织胺和PGE2的升高具有统计学意义;(6)通过AB/PAS染色可观察到,服用大黄后引起结肠粘液的合成明显增加;当给大鼠预先服用肥大细胞稳定剂酮替芬(ketotifen)后,大黄促进粘液合成的作用降低;(7)使用肠道灌流系统和Bradford方法在离体状态下观察大黄对粘液分泌的作用,发现大黄会引起肠道粘蛋白的大量分泌;使用酮替芬预处理后,粘蛋白的分泌水平降低;结论:(1)大黄可以促进组织胺、5-HT、PGE2、Ach的释放,组织胺通过结肠杯状细胞上的组胺受体参与调节粘液分泌的作用,是粘液分泌的主要调节因子;(2)不同剂量大黄对肥大细胞、嗜酸性粒细胞的聚集作用不同,并引起了血浆内炎症因子的改变,提示大黄可能对炎症反应具有影响;(3)大黄可引起肥大细胞脱颗粒释放组织胺,作用于杯状细胞的组胺受体,引起粘液的分泌,达到润肠通便的作用。

关键词：大黄肥大细胞粘液

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圈养大熊猫粘液水解氨基酸含量的初步研究

四川动物 2004年第1期23卷 8-11,20页

作者：刘选珍李明喜余建秋黄祥明成都大熊猫繁育研究基地成都610081

收集了成都大熊猫繁育研究基地的 8只圈养大熊猫的 12个粘液样品并测定了其中 17种水解氨基酸(AA)的含量。结果如下 :粘液干物质中Glu含量最高 ,为 9 2 4 %± 0 4 7% ,其次为Leu、Asn、Thr、Ser、Pro、Val、Lys、Ala、Tyr、Arg、Gly... 详细信息

收集了成都大熊猫繁育研究基地的 8只圈养大熊猫的 12个粘液样品并测定了其中 17种水解氨基酸(AA)的含量。结果如下 :粘液干物质中Glu含量最高 ,为 9 2 4 %± 0 4 7% ,其次为Leu、Asn、Thr、Ser、Pro、Val、Lys、Ala、Tyr、Arg、Gly、Ile、Phe、Cys、His,Met含量 (1 2 5 %± 0 18% )最低 ,不同样品中同一种AA的含量不同。样品中 9种非必需氨基酸 (NEAA)的总平均含量为 4 1 1%± 2 2 % ,8种必需氨基酸(EAA)的总平均含量为 2 9 8%± 1 8% ,NEAA/EAA的平均值为 1 38± 0 0 4 ,不同粘液样品的这些数值相近。不同样品中同一种EAA与该样品中Lys含量的比值存在不同程度的差异 ,样品中 (Tyr+Phe) /Lys值最高 ,为1 79± 0 31;其次为Leu/Lys和Thr/Lys;而Met/Lys值最低 ,为 0 31± 0 0 5。各种氨基酸相对于总氨基酸含量的高低顺序与各AA绝对含量高低顺序完全相同 ,Glu含量最高为 13 0 %± 0 30 % ,Met含量为 1 76 %±0 2 5 %。结果表明 ,大熊猫粘液样品各种AA特别是EAA含量丰富 ,不同样品含量存在不同程度的差异 ;认为对排粘频繁和每次排粘量大的大熊猫 ,必须补充适量的优质蛋白以弥补由粘液排泄而造成的损失 ,以促进其体况的尽快恢复。

关键词：大熊猫粘液水解氨基酸圈养繁育圈养含量

严重烧伤后肠粘液成分变化与肠源性感染的关系

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中华烧伤杂志 1996年第2期 90-92页

作者：白晓东粟永萍刘贤华第三军医大学防原教研室

为探讨烧伤后回肠粘膜的病理变化,肠粘液及其中 IgA 成分的变化及这些变化与肠源性感染的关系,我们利用小鼠制作 TBsA 25%Ⅲ度烧伤模型,分别于伤后0.5、1、6、12、24小时观察;①小肠末端的病理病变;②测定小肠粘液层厚度及粘液中蛋白、... 详细信息

为探讨烧伤后回肠粘膜的病理变化,肠粘液及其中 IgA 成分的变化及这些变化与肠源性感染的关系,我们利用小鼠制作 TBsA 25%Ⅲ度烧伤模型,分别于伤后0.5、1、6、12、24小时观察;①小肠末端的病理病变;②测定小肠粘液层厚度及粘液中蛋白、己糖、唾液酸的含量;③检测粘液 IgA 血清 IgA及粘膜固有层中分泌 IgA 浆细胞数;④各时相小肠系膜淋巴结的细菌培养。结果表明:伤后小肠出现病理改变。粘液成分有变化,粘液中 IgA 含量持续下降且与肠源性感染发生关系密切。

关键词：肠源性感染粘液 IgA

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氨气刺激对仔猪呼吸道粘液分泌的影响

氨气刺激对仔猪呼吸道粘液分泌的影响

作者：黄龙辉华中农业大学

学位级别：硕士

呼吸道粘液可黏附吸入的有害气体、粉尘和病原体,通过上皮纤毛的摆动,将有害物质排出体外,对维持呼吸道的健康至关重要。粘液分泌过多是多种呼吸道疾病的共同特征。冬季猪舍内氨气浓度较高,不仅影响猪的生长性能,还可能诱发呼吸道疾病... 详细信息

呼吸道粘液可黏附吸入的有害气体、粉尘和病原体,通过上皮纤毛的摆动,将有害物质排出体外,对维持呼吸道的健康至关重要。粘液分泌过多是多种呼吸道疾病的共同特征。冬季猪舍内氨气浓度较高,不仅影响猪的生长性能,还可能诱发呼吸道疾病。本研究首先采集健康猪的气管及右肺上叶,通过组织切片染色观察了猪呼吸道上皮的主要细胞类型(杯状细胞、基细胞和克拉拉细胞)和粘液在气管和支气管的分布规律。在此基础上进行氨气刺激试验,选取7周龄健康仔猪12头,随机分为4组(NC组,D4组,D8组,D12组),每组3头,人工模拟浓度为56mg/m3的氨气环境,NC组为对照组,不刺激,D4、D8、D12组分别连续刺激4天、8天、12天,每天刺激8小时。刺激结束后采集各组仔猪的右肺上叶,进行切片染色,观察氨气刺激对仔猪呼吸道粘液分泌的影响;同时采集左肺下叶提取RNA,对与粘液分泌和炎症相关基因的表达量进行了检测。具体结果如下:1.猪呼吸道主要上皮细胞的分布规律分别对基细胞和克拉拉细胞的标记蛋白K14和SCGB1A1进行免疫组化,证明具有分化潜能的基细胞和克拉拉细胞分布在猪的呼吸道上皮,在气管上皮的含量比较丰富;对杯状细胞的标记蛋白MUC5AC进行免疫组化,证明分泌粘液的杯状细胞广泛分布在猪的呼吸道上皮。2.氨气刺激对仔猪呼吸道粘液分泌的影响AB-PAS染色发现随着呼吸道管径的变小,呼吸道粘液的含量逐渐减少至消失。对试验仔猪管径一致的呼吸道进行AB-PAS染色,发现呼吸道上皮粘液含量随氨气刺激时间的延长而增加,刺激12天后,呼吸道上皮粘液含量显著高于对照组(P粘液分泌相关基因S100A9、AQP5和EGFR进行Q-PCR检测,结果显示氨气刺激后仔猪肺组织中ABCA3的表达量显著高于对照组(P粘液分泌逐渐减少至消失。氨气刺激导致仔猪呼吸道上皮粘液增多,杯状细胞增生,具有分化潜能的基细胞、Ⅱ型肺泡细胞含量增多,克拉拉细胞含量下降,与炎症和粘液分泌相关因子的表达量发生变化。

关键词：氨气仔猪呼吸道粘液杯状细胞基细胞