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高效液相色谱紫外等吸收波长法快速测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素

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色谱 2023年第8期41卷 690-697页

作者：钱正明吴梦奇谭国英金李玲李宁谢菊英湘南学院医学影像检验与康复学院湖南郴州423000 东莞市东阳光冬虫夏草研发有限公司广东东莞523850 云南中医药大学中药学院云南昆明650500

研究建立了一种快速、环保和节约对照品的秦皮化学成分含量测定方法。秦皮样品采用25%(v/v)乙醇水溶液超声提取5 min。样品提取溶液采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 2.7μm)进行分析,0.1%甲酸水溶液-乙腈(94∶6, v/v)等... 详细信息

研究建立了一种快速、环保和节约对照品的秦皮化学成分含量测定方法。秦皮样品采用25%(v/v)乙醇水溶液超声提取5 min。样品提取溶液采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 2.7μm)进行分析,0.1%甲酸水溶液-乙腈(94∶6, v/v)等度洗脱,流速1.5 mL/min。采用紫外分光光度仪对等浓度的秦皮甲素和秦皮乙素进行紫外光谱扫描,初步筛选得到2个对照品的等吸收波长,并用高效液相色谱仪对筛选得到的等吸收波长进行确证,从而获得2个对照品的等吸收检测波长341 nm。新建立的高效液相色谱紫外等吸收波长法的方法验证结果显示,秦皮甲素和秦皮乙素在各自的浓度范围内具有良好的线性关系(r=1.000 0),检出限和定量限分别为1.5μmol/L和3.0μmol/L,平均加标回收率分别为99.0%(RSD=1.4%)和97.5%(RSD=0.9%)。通过比较高效液相色谱紫外等吸收波长法和传统高效液相色谱外标法对10批秦皮样品中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定结果,显示两种方法测定结果一致。此外还采用t检验对该方法与《中国药典》2020版方法的含量测定结果进行比较,对比结果表明两种测定方法无显著性差异(P>0.05)。该方法耗时10 min,有害溶剂消耗0.5 mL,只使用1个对照品,具有快速、简便、环保和对照品消耗少的特点,适用于秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定,为秦皮质量评价的技术提升提供了依据。

关键词：高效液相色谱等吸收波长核壳型色谱柱秦皮甲素秦皮乙素秦皮

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等吸收波长法测定水中铅的探讨

浙江预防医学 1995年第5期7卷 61-61页

作者：苏香媚松阳县卫生防疫站

传统的单波长双硫腙法,由于试剂空白光密度较高,影响测定的准确性。本文试用等吸收波长法测定水中铅,可以将双硫腙背景扣除,从而提高结果的准确性。方法如下。双硫腙铅络合物的最大吸收波长是510nm,从用水参比测得试剂空白的吸收光谱... 详细信息

传统的单波长双硫腙法,由于试剂空白光密度较高,影响测定的准确性。本文试用等吸收波长法测定水中铅,可以将双硫腙背景扣除,从而提高结果的准确性。方法如下。双硫腙铅络合物的最大吸收波长是510nm,从用水参比测得试剂空白的吸收光谱中（如图）得知在650nm处的吸收值与在510nm处的吸收值相同。本法根据待测物质在510nm处的光密度Aλ2与在650nm处的吸光度Aλ1的差值△A,它与双硫腙铅络合物的浓度成正比,即可进行定量。仪器与试剂:

关键词：等吸收波长铅络合物试剂空白双硫腙法光密度双硫腺准确性吸收值最大吸收波长变异系数

基于紫外光谱等吸收偏离校正的三波长法检测纸品中可迁移荧光增白剂的含量

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光谱学与光谱分析 2020年第6期40卷 1758-1762页

作者：何智恒徐嵘林君峰闫宁陈春霞陈润权柴欣生华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室广东广州510640 深圳海关工业品检测技术中心广东深圳518000 国家纸制品质量监督检验中心广东东莞523080

在现行GB/T 27741-2018的"纸和纸板可迁移性荧光增白剂的测定"对纸制品进行萃取时,其中的残余木素会部分析出,对可迁移性荧光增白剂含量的光谱检测造成了干扰。据此,提出了一种旨在消除未知光谱干扰影响的、基于紫外光谱等吸收偏离校正... 详细信息

在现行GB/T 27741-2018的"纸和纸板可迁移性荧光增白剂的测定"对纸制品进行萃取时,其中的残余木素会部分析出,对可迁移性荧光增白剂含量的光谱检测造成了干扰。据此,提出了一种旨在消除未知光谱干扰影响的、基于紫外光谱等吸收偏离校正的三波长法检测纸制品中荧光增白剂的新方法。因为未知干扰在321~374 nm处光谱近似为一条相似斜率的曲线,导致荧光增白剂最大吸收峰以及所对应的两个等吸收点的吸光度发生偏差。因此可通过三波长法和数学计算扣除未知干扰在最大吸收波长处对荧光增白剂吸光度检测的干扰,从而得到可迁移性荧光增白剂在最大吸收波长处的准确吸光度,以实现对可迁移性荧光增白剂的准确定量检测。结果表明:该方法的重复性检测的相对标准偏差为3.7%;定量检测限为19 mg·kg^-1;回收率在99.1%~107%之间。与现行可迁移性荧光增白剂检测方法相比,由于该方法具有分析简便、仪器易操作等优点,因此更适合于对各种纸制品(尤其是印刷品)中的可迁移荧光增白剂含量的快速、准确检测,并可以为纸制品质量安全的生产控制和市场监督提供保证。

关键词：等吸收波长三波长紫外光谱可迁移性荧光增白剂纸制品

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酸性络蓝K双波长信号系数光度法测定钙镁

理化检验（化学分册） 2009年第3期45卷 249-252,256页

作者：黄泽南周秀林周舟杨昌帆湖南科技大学化学化工学院湘潭411201 湖南工程学院化学系湘潭411104

基于在氢氧化钠溶液中,钙、镁均与酸性络蓝K(ACBK)形成暗红色配合物,提出了测定钙和镁的双波长信号系数光度法。该法不仅消除了钙、镁之间的吸收干扰,且消除了一定量的共存离子的干扰。利用褪色法与生色法的吸光度之和作为信号吸光度,... 详细信息

基于在氢氧化钠溶液中,钙、镁均与酸性络蓝K(ACBK)形成暗红色配合物,提出了测定钙和镁的双波长信号系数光度法。该法不仅消除了钙、镁之间的吸收干扰,且消除了一定量的共存离子的干扰。利用褪色法与生色法的吸光度之和作为信号吸光度,使方法的灵敏度大为提高。测定钙、镁总量时,分别用钙、镁吸收曲线正峰与负峰上的等吸收波长470.5 nm(aλP)及559.5 nm(aλN)处测定吸光度AaP和AaN,求得总量的信号系数fs为2.439。于aλP470.5 nm处测得任一浓度钙、镁试液的吸光度AaP′,其信号吸光度As=fsAaP′。测定镁时,以试剂ACBK褪色对钙配合物生色的完全相消干扰的波长539 nm(aPλ)作为测定波长,负峰波长583 nm为aλN。按相同方法测得镁的信号系数fs为4.148。

关键词：双波长信号系数光度法等吸收波长完全干扰相消波长酸性络蓝K 钙镁

双波长分光光度法测定复方氯霉素滴耳液的含量

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中国药业 1998年第1期7卷 25-26页

作者：张秀花何卫民姜喜安山东菏泽地区药检所 274014

复方氯霉素滴耳液为含氯霉素与氢化可的松的复方制剂，标准中未收载含量测定方法。笔者根据氯霉素、氯化可的松的紫外吸收特征采用了双波长分光光度法同时测二者含量的方法，样品不需特殊处理，操作简便、快速．有一定的实用性。1仪器... 详细信息

复方氯霉素滴耳液为含氯霉素与氢化可的松的复方制剂，标准中未收载含量测定方法。笔者根据氯霉素、氯化可的松的紫外吸收特征采用了双波长分光光度法同时测二者含量的方法，样品不需特殊处理，操作简便、快速．有一定的实用性。1仪器与试药UV－240型紫外分光光度计；氯霉素、氢化可的松标准品（中国药品生物制品检定所）；无水乙醇。1．1氯霉素标准液的配制：精密称取经105C干燥至恒重的氯霉素标准品约25mg，加无水乙醇制成1。g／nd的溶液1；精密量取溶液IO625nil置25。l量瓶中，加无水乙醇至刻度，即得25mg／nd之溶液。1．2氢化可的松标准液的配制：精密称取经105℃干燥至恒重的氢化可的松标准品约25。g，加无水乙醇制成1。g／ml之溶液1；精密量取溶液I25nd，量25ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，即得100Vg／nd之溶液！；再精密量取l液0．625ml，置25nd量瓶中，加无水乙醇至刻度，即得***／nd之溶液N。1．3复方氯霉素滴耳液之模拟液的配制：分别精密量取氯霉素标准液1与氢化可的松标准溶液B各0．625ml，置25nd量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得分别含氯霉素与氢化可的松25Vg／nd，2S...

关键词：氢化可的松复方氯霉素滴耳液光度法测定双波长无水乙醇含量测定等吸收波长吸收度相关系数

双波长分光光度法测定盐酸氯丙嗪注射液的含量

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中国药业 1997年第12期6卷 10-11页

作者：张裕民何卫民姜喜安毕言锋山东菏泽地区药检所

盐酸氯丙嗪注射液为盐酸氯丙嗪与维生素C、焦亚硫酸钠、无水亚硫酸钠及氯化钠的复方制剂，药典法操作繁琐。本文根据盐酸氢丙唤与维生素C在紫外区的吸收，维生素C干扰测定的特征，制定了双波长分光光度法测定盐酸氯丙嗪含量的方法。样... 详细信息

盐酸氯丙嗪注射液为盐酸氯丙嗪与维生素C、焦亚硫酸钠、无水亚硫酸钠及氯化钠的复方制剂，药典法操作繁琐。本文根据盐酸氢丙唤与维生素C在紫外区的吸收，维生素C干扰测定的特征，制定了双波长分光光度法测定盐酸氯丙嗪含量的方法。样品无需特殊处理，操作简便，有实用性。1仪器与试药UV-240型紫外分光光度计（日立岛津，波长经校正）、盐酸氯丙嗪、维生素C、焦亚硫酸钠、氯化钠（均符合药典规定）。1．1试液的配制：精密称取维生素C、焦亚硫酸钠、无水亚硫酸钠及氯化钠各适量。置适宜的容量瓶中，加盐酸液（0．1mol／L）稀释成含维生素C0．2mg／ml之溶液，作为抗氧剂溶液Ⅰ。再取一定量，加相同溶剂稀释成含维生素C0．02mg／ml之溶液作为抗氧剂溶液Ⅱ（维生素C以外的成分按处方比例加入）。1．2盐酸氯丙嗪溶液：精密称取105℃干燥至恒重的盐酸氯丙嗪约10mg，加盐酸液（0．1mol／L）制成含盐酸氯丙嗪1mg/ml之溶液，作为盐酸氯丙债溶液1。再取一定量，加相同溶剂制成含盐酸氯丙咦0．1。e／工之溶液，即盐酸氯丙喀液！。1．3盐酸氯丙嗓注射液之模拟液：取抗氧剂溶液1及盐酸氛丙咦溶液各回．oml，共置10M量瓶中，加盐酸液（011’...

关键词：盐酸氯丙嗪注射液光度法测定维生素C 双波长抗氧剂盐酸液焦亚硫酸钠山东菏泽等吸收波长回归方程

分光光度法检测饲料添加剂β-胡萝卜素粉含量的研究

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中国畜牧杂志 2017年第11期53卷 113-116页

作者：虞哲高赵小阳帝斯曼营养产品部中国研发中心帝斯曼中国有限公司上海201203 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所国家饲料质量监督检验中心(北京)北京100081

依据β-胡萝卜素异构体的等吸收波长的特性,建立了用分光光度法测定饲料添加剂β-胡萝卜素粉的测定方法。试样经酶解后,用乙醇和二氯甲烷提取,用环己烷稀释后,在421.0 nm处测定。该方法的检测结果与AOAC2005.7液相色谱法测定的结果吻合... 详细信息

依据β-胡萝卜素异构体的等吸收波长的特性,建立了用分光光度法测定饲料添加剂β-胡萝卜素粉的测定方法。试样经酶解后,用乙醇和二氯甲烷提取,用环己烷稀释后,在421.0 nm处测定。该方法的检测结果与AOAC2005.7液相色谱法测定的结果吻合;该方法在0.6~6μg/mL浓度范围内有良好的线性,线性回归系数R2=0.999 8;样品测试的相对标准偏差为2.52%。该方法具有快速、准确、分析成本低等优点。

关键词：分光光度法等吸收波长 β-胡萝卜素饲料添加剂

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单通道双酶同步测定及其免疫分析应用

单通道双酶同步测定及其免疫分析应用

作者：刘红博重庆医科大学

学位级别：硕士

多酶同步分析可显著提高检测效率。已有的用两种酶标记的单通道测量两组分的ELISA技术，并没有实现单通道两种酶同步反应和同步检测。本实验室建立了基于等吸收波长原理的单通道双酶同步分析方法（简称SDESA），并将其成功应用于ELISA... 详细信息

多酶同步分析可显著提高检测效率。已有的用两种酶标记的单通道测量两组分的ELISA技术，并没有实现单通道两种酶同步反应和同步检测。本实验室建立了基于等吸收波长原理的单通道双酶同步分析方法（简称SDESA），并将其成功应用于ELISA（简称SDESA-ELISA），该方法在同一体系中，同时启动并同步监测所有标记酶的反应。SDESA的技术关键在于选择一对合适的显色底物和一对合适的标记酶，并建立消除吸收重叠干扰和混合体系中物质干扰的数据处理方法，从而使SDESA-ELISA的检测限、灵敏度及线性范围与单组份ELISA相当。为解决上述问题，本实验室对SDESA进行了下列研究：1.复杂动力学体系双酶同步测定-建立消除干扰的数据处理方法用于单通道双酶同步测定的两种酶需满足以下要求：（a）酶A作用于底物A生成产物A，酶B作用于底物B生成产物B。产物A的最大差吸收峰（λA）远远大于产物B的最大差吸收峰（λB），且λB在产物A和底物A的最大等吸收波长（λ0）附近。（b）λA和λ0处的光吸收值通过快速变换检测波长进行定量，基于吸收的线性加和性消除吸收重叠干扰。（c）通过反应曲线动力学分析消除体系中物质对待测酶的干扰（抑制或激活）。（d）如果底物A的浓度低于其米氏常数，则选用本实验室建立的联用策略对酶A进行定量。分析γ-谷氨酰基转移酶（GGT）和乳酸脱氢酶（LDH）同步测定的复杂动力学过程，并以此作为SDESA的化学计量学模型。GGT作用于γ-谷氨酰基-对硝基苯胺（GGPNA），释放出对硝基苯胺（PNA），PNA最大差吸收峰λA在405nm附近，GGPNA和PNA的最大等吸收波长λ0在344nm;LDH消耗还原态尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH，还原型辅酶Ⅰ），NADH的最大差吸收峰λB在340nm。通过对反应过程的动力学分析，消除了PNA对LDH的抑制作用;通过联用策略测定的GGT初速度线性范围以及消除干扰后的LDH线性范围都与各自单独测定时的线性范围相当;当一种酶的活力相当于另一种酶的25倍时，活力较低的酶通过SDESA的定量限仍然与单独测定时相当。2.简单动力学体系的双酶同步测定及在免疫分析中的应用（一）为了探索SDESA的潜在应用价值，牛小肠碱性磷酸酶（ALP）和β-D-半乳糖苷酶（BGAL）被用作酶联免疫吸附分析（ELISA）的标记酶，用于小分子半抗原的单通道同步测定。ALP作用于4-硝基-1-萘酚磷酸酯（4NNPP），释放出4-硝基-1-萘酚（4NNP），4NNP最大差吸收峰λA在458nm，4NNPP和4NNP的最大等吸收波长λ0在405nm;BGAL作用于对硝基苯酚-β-D-半乳糖苷（PNPG），释放出4-硝基苯酚（4NP），4NP的最大差吸收峰λB在405nm。由于不存在底物或产物间的干扰，ALP和BGAL的组合可用于ELISA同步分析单通道内的青霉素G和克伦特罗。结果表明，任意一个半抗原同步测定时的定量限均与单独测定时基本相当，因此，SDESA具有广阔的应用前景;获得一对恰当的显色底物和一对适当的标记酶是其应用于ELISA的关键。3.简单动力学体系的双酶同步测定及在免疫分析中的应用（二）通常情况下，糖苷酶之间都具有良好的缓冲液兼容性，且几乎不存在底物或产物的相互干扰。BGAL水解4-硝基-1-萘酚-β-D-半乳糖苷（4NNPG），释放出4-硝基-1-萘酚（4NNP），4NNP最大差吸收峰λA在458nm左右，4NNPG和4NNP的最大等吸收波长λ0在400nm;α-D-葡萄糖苷酶（AGLU）作用于对硝基苯酚-α-D-葡萄糖苷（4NPG），释放出4-硝基苯酚（4NP），4NP的最大差吸收峰λB在400nm。这种特性使得BGAL和AGLU可作为同步分析ELISA的标记酶，通过快速变换检测波长，同时测定405nm和450nm的吸收。事实上，用青霉素G标记的BGAL和克伦特罗标记的AGLU作为示踪剂的竞争性ELISA，单通道内青霉素G和克伦特罗同步测定的结果都与单独测定的结果具有良好的一致性，对于任意一种半抗原，同步测定的精密度和回收率均与单独测定时相当。因此，对一个作用于底物产生4-硝基-1-萘酚的糖苷酶和另一个作用于底物产生4-硝基苯酚的糖苷酶进行分子工程改造以得到比活力足够高的酶作为一组标记酶，可使得同步分析ELISA成为一种可行的、新型的免疫分析平台，该平台不仅提高了分析效率，而且可获得令人满意的灵敏度。4.标记酶筛选我们通过以上两组SDESA-ELISA应用实例得出以下结论，为获得良好的检测效果，SDESA-ELISA的一对显色底物和一对标记酶的选择需遵循以下几点原则：（a）一个显色底物的最大等吸收波长应该等于或接近405nm，其产物最大吸收峰在450nm或

关键词：单通道双酶同步分析酶联免疫吸附分析显色底物显色产物等吸收波长

替硝唑葡萄糖注射液中5-HMF检测方法的建立

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齐齐哈尔医学院学报 2002年第7期23卷 723-724页

作者：韩翠艳卜向阳齐齐哈尔医学院第一附属医院药剂科黑龙江省克山县第一医院检验科 161041

目的　建立替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF检测方法。方法　用紫外分光光度法 ,根据其加和性 ,选择替硝唑在 2 84 .0nm的等吸收波长 ,测定替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF ,并根据葡萄糖注射液中 5 -HMF的要求确定其检测限度。结果　替硝唑... 详细信息

目的　建立替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF检测方法。方法　用紫外分光光度法 ,根据其加和性 ,选择替硝唑在 2 84 .0nm的等吸收波长 ,测定替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF ,并根据葡萄糖注射液中 5 -HMF的要求确定其检测限度。结果　替硝唑浓度为 4 0 μg/ml时 ,2 84 .0nm的等吸收波长为 347.5nm ,葡萄糖注射液在波长几无吸收 ,因此替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF的吸收度为A =A2 84.0 -A3 4 7.5,并不得超过 0 .0 32。结论　该法操作简单 ,结果准确 ,适用于该制剂的质量控制。

关键词：替硝唑葡萄糖注射液 5-HMF 检测方法等吸收波长紫外分光光度法