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血清lncRNA ATP1A1-AS1对胰腺癌的诊断价值及其对细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响

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空军军医大学学报 2024年第5期45卷 567-571页

作者：崔巍周威刘智化刘成栋皖南医学院附属宣城医院安徽省宣城市人民医院安徽宣城242099

目的探讨血清长链非编码RNA Na+/K+ATP酶A1亚基的反义RNA1(ATP1A1-AS1)对胰腺癌的诊断价值及其对胰腺癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响。方法选取2020年4月至2023年10月在安徽省宣城市人民医院就诊的65例胰腺癌患者为研究对象,并选... 详细信息

目的探讨血清长链非编码RNA Na+/K+ATP酶A1亚基的反义RNA1(ATP1A1-AS1)对胰腺癌的诊断价值及其对胰腺癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响。方法选取2020年4月至2023年10月在安徽省宣城市人民医院就诊的65例胰腺癌患者为研究对象,并选取同时期60例健康体检者作为对照,qRT-PCR检测两组患者血清中ATP1A1-AS1表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ATP1A1-AS1对胰腺癌的诊断价值。体外培养胰腺癌细胞PANC-1,通过转染ATP1A1-AS1过表达载体上调PANC-1细胞中ATP1A1-AS1表达,MTT检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞增殖的影响,流式细胞术检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞凋亡的影响,Western blotting检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞增殖抗原Ki-67、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤2相关蛋白(Bax)蛋白表达的影响,端粒酶重复序列扩增法检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞端粒酶活性的影响。结果与对照组比较,胰腺癌患者血清中ATP1A1-AS1的表达水平显著降低(P端粒酶活性及细胞CyclinD1、Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平降低(P端粒酶活性有关。

关键词：胰腺癌 ATP1A1-AS1 细胞增殖细胞凋亡端粒酶活性

端粒酶活性在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用

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中国稀土学报 2009年第6期27卷 838-843页

作者：张子威徐世文东北农业大学动物医学系内科教研室黑龙江哈尔滨150030

探讨端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中细胞中的作用。肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3 mmol.L-1的LaCl3,继续培养12,24,36,48 h后,应用琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色检测细胞凋亡,以FITC-（C3TA2）3PNA... 详细信息

探讨端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中细胞中的作用。肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3 mmol.L-1的LaCl3,继续培养12,24,36,48 h后,应用琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色检测细胞凋亡,以FITC-（C3TA2）3PNA为荧光探针检测细胞内端粒长度,以TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性。LaCl3浓度为3 mmol.L-1,作用0~48 h,细胞的琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色法均观察到明显的细胞凋亡变化,细胞内端粒长度缩短,端粒酶活性下降,并呈时间-效应关系。LaCl3可通过抑制MDCC-MSB1细胞端粒酶活性而诱导其发生凋亡。

关键词：氯化镧 MDCC-MSB1 凋亡端粒酶活性稀土

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端粒酶活性检测研究进展

分析测试学报 2021年第12期40卷 1819-1826页

作者：郭玥吴霞夏帆娄筱叮中国地质大学(武汉)生物地质与环境地质国家重点实验室材料与化学学院纳米矿物材料及应用教育部工程研究中心湖北武汉430078

端粒酶活性检测方法经过近30年的不断改革与发展,取得了巨大突破。该文重点综述了近3年的端粒酶活性检测方法,其中包括化学反应发光法、电化学法、荧光分析法、比色法等,旨在更加全面地了解目前端粒酶活性检测的研究进展,为设计新的端... 详细信息

端粒酶活性检测方法经过近30年的不断改革与发展,取得了巨大突破。该文重点综述了近3年的端粒酶活性检测方法,其中包括化学反应发光法、电化学法、荧光分析法、比色法等,旨在更加全面地了解目前端粒酶活性检测的研究进展,为设计新的端粒酶活性检测方法和克服端粒酶活性检测方法在临床试验中的挑战提供思路。

关键词：端粒酶活性化学反应发光法电化学法荧光分析法比色法

Epstein-Barr病毒潜伏蛋白1通过核转录因子κB诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性

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生物化学与生物物理进展 2002年第4期29卷 556-561页

作者：杨静邓锡云唐敏吴尚辉顾焕华易薇曹亚中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

利用已建立的原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1系统等良好的实验模型 ,采用荧光酶报道基因分析法和端粒酶TRAP ELISA技术 ,分别检测EB病毒潜伏蛋白 1(LMP1)诱导的核转录因子κB (NFκB)活性和端粒酶活性 ,从LMP1介导NFκB信号传导途... 详细信息

利用已建立的原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1系统等良好的实验模型 ,采用荧光酶报道基因分析法和端粒酶TRAP ELISA技术 ,分别检测EB病毒潜伏蛋白 1(LMP1)诱导的核转录因子κB (NFκB)活性和端粒酶活性 ,从LMP1介导NFκB信号传导途径角度 ,探讨LMP1诱导端粒酶表达的分子机制 .结果表明 ,LMP1可诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性 ,将LMP1羧基端胞浆区突变后 ,可同时下调NFκB活性和端粒酶活性 .在Doxycycline诱导LMP1表达状态下 ,NFκB反式激活活性增强 ,同时端粒酶活性升高 ;进一步应用硫代磷酸化修饰的反义NFκBp6 5寡脱氧核苷酸和IκBα的显性负性突变体分别阻断NFκB活性 ,可降低由LMP1诱导的端粒酶活性 .因此 ,NFκB作为LMP1信号传导途径上的枢纽 ,可能介导了LMP1对端粒酶的表达调控 .

关键词： Epstein-Barr病毒潜伏蛋白1 核转录因子κB 诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性

大蒜素对结肠癌Lovo细胞端粒酶活性、环氧化酶-2及核因子-κB的影响

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复旦学报（医学版） 2004年第6期31卷 597-599页

作者：关文明范钰林庚金钱立平许祖德黄富春河南省漯河市第二人民医院内科漯河462000 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 上海医学院病理学系上海200032

目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌Lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检... 详细信息

目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌Lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检测核因子 κB活性。结果　大蒜素对结肠癌Lovo细胞增殖具有较强的抑制作用。大蒜素能够抑制端粒酶活性 ,且这种作用呈浓度及时间依赖。同时发现 ,大蒜素能抑制环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达及抑制核因子 κB活性。结论　大蒜素能够抑制结肠癌细胞的恶性增殖 ,其机制与抑制端粒酶活性、抑制环氧化酶 2基因的表达及抑制核因子

关键词：核因子-kB Lovo细胞环氧化酶-2 端粒酶活性结肠癌抑制表达 RNA 基因微孔板杂交

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端粒酶活性与白血病细胞系的分化

中国肿瘤临床 1999年第3期26卷 178-181页

作者：张莉萍刘祥贵蒋纪恺张彦许湘儒刘北忠何渝军康格非刘小珊重庆医科大学第二临床学院重庆市400010 重庆医科大学临床生化教研室重庆医科大学第一临床学院

为了探讨白血病细胞的分化和端粒酶活性改变的关系。方法：采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测白血病细胞株Ｋ－５６２和ＨＬ－６０诱导分化前后的端粒酶活性。结果：未经药物处理的Ｋ－５６２和ＨＬ－６０细胞有高的端粒酶活性；用苦参碱... 详细信息

为了探讨白血病细胞的分化和端粒酶活性改变的关系。方法：采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测白血病细胞株Ｋ－５６２和ＨＬ－６０诱导分化前后的端粒酶活性。结果：未经药物处理的Ｋ－５６２和ＨＬ－６０细胞有高的端粒酶活性；用苦参碱作用Ｋ－５６２细胞和维甲酸处理ＨＬ－６０细胞一定时间后，端粒酶活性被明显抑制：分化诱导剂不能直接抑制端粒酶活性；端粒酶活性的高低与细胞所处的分化状态有关。结论：分化是细胞自身调控的过程，端粒酶活性的高低与细胞所处的分化状态密切相关。

关键词：端粒酶活性白血病细胞系 PCR-ELISA

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端粒酶活性检测在膀胱肿瘤早期诊断中的应用

中国肿瘤临床 2006年第2期33卷 71-73页

作者：马鹏程张石生万江厚白进良朱俊芳赵丽兰州大学第一医院泌尿外科兰州市730000

目的:探讨检测端粒酶活性在膀胱癌早期诊断中的临床意义。方法:采用TRAP-PCR-ELISA法检测32例膀胱癌患者尿液和膀胱冲洗液中脱落细胞、膀胱癌组织、20例正常膀胱组织及14例非膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞中端粒酶活性,并行尿脱落细胞学检... 详细信息

目的:探讨检测端粒酶活性在膀胱癌早期诊断中的临床意义。方法:采用TRAP-PCR-ELISA法检测32例膀胱癌患者尿液和膀胱冲洗液中脱落细胞、膀胱癌组织、20例正常膀胱组织及14例非膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞中端粒酶活性,并行尿脱落细胞学检查。结果:32例膀胱癌患者尿液脱落细胞、膀胱冲洗液脱落细胞、膀胱癌组织中端粒酶活性阳性率分别为65.6%(21/32)、71.9%(23/32)和84.0%(27/32),20例正常膀胱组织端粒酶活性均为阴性,14例非膀胱肿瘤患者尿液中1例端粒酶活性阳性。端粒酶活性阳性表达与肿瘤的分级、分期之间差异无明显相关性(P>0.05),敏感性明显高于脱落细胞病理学检查。结论:尿液、膀胱冲洗液脱落细胞端粒酶活性测定敏感性较高,可用于膀胱癌的早期诊断。

关键词：膀胱肿瘤检测端粒酶活性诊断

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端粒酶活性与卵巢癌细胞系药物敏感性的关系

肿瘤 2004年第1期24卷 42-43页

作者：秦薇杨元先王泽华南阳理工大学医学院附属医院妇产科南阳473000 武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科武汉430022

目的　探讨端粒酶活性与上皮性卵巢癌细胞系药物敏感性的关系。方法　使用顺铂作用于敏感细胞株A2 780及耐药细胞株AD6 0。在四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定耐药倍数的基础上 ,应用聚合酶链反应聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PCR PAGE)方法测定端... 详细信息

目的　探讨端粒酶活性与上皮性卵巢癌细胞系药物敏感性的关系。方法　使用顺铂作用于敏感细胞株A2 780及耐药细胞株AD6 0。在四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定耐药倍数的基础上 ,应用聚合酶链反应聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PCR PAGE)方法测定端粒酶活性。结果　经MTT测定卵巢癌耐药细胞株AD6 0的耐药倍数为 2 .4。A2 780端粒酶活性随药物浓度的递增明显降低 ,而AD6 0降低不明显。结论　端粒酶活性与上皮性卵巢癌细胞对细胞毒性药物的敏感性相关。

关键词：端粒酶活性卵巢癌细胞系药物敏感性

基于杂交链式反应信号放大和磁分离技术荧光检测端粒酶活性

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化学学报 2016年第6期74卷 513-517页

作者：张佳玉周晓毓周曼贾红霞河北大学化学与环境科学学院保定071002

端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶,它一般在癌细胞中被激活.它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关.所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义.利用杂交链式... 详细信息

端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶,它一般在癌细胞中被激活.它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关.所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义.利用杂交链式反应（HCR）无酶放大检测信号,建立了一种简单、快速的端粒酶活性检测方法.端粒酶延伸产物是一条末端具有（ggttag）_n重复序列的DNA.在实验过程中,通过链霉亲合素与生物素的特异性作用将端粒酶延伸产物连接在磁性微球上.设计一条端粒酶延伸产物特异性的DNA探针I作为杂交链式反应的引发探针.DNA探针I的3′-端与端粒酶延伸产物的重复序列匹配,通过杂交,DNA探针I被固定在磁球上;DNA探针I的5′-端引发DNA探针II和探针III发生杂交链式反应.DNA探针II和探针III上都标记有荧光基团,可以利用荧光直接进行信号检测.在反应过程中,通过磁分离去除多余未反应的三种DNA探针.在优化条件下,可以检测到1.0×10~5个Hela细胞中的端粒酶活性.该方法简单、快速、检测成本低,分析全程无酶参与,在肿瘤或癌症的临床诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的筛选上具有广阔的应用前景.

关键词：端粒酶活性杂交链式反应无酶信号放大荧光检测磁分离