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冰穿膜剂的制备及对大鼠口腔溃疡的治疗作用

冰穿膜剂的制备及对大鼠口腔溃疡的治疗作用

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作者：颜璐璐河南大学

学位级别：硕士

口腔溃疡又称复发性口腔溃疡,是一种常见的发生于口腔黏膜的慢性炎症疾病,在人群中的发病率高达25%,溃疡发作时局部疼痛剧烈、灼痛明显。口腔溃疡的发病原因较复杂,临床上对其多采用对症治疗,且以局部治疗为主。临床证实,中药可有效的... 详细信息

口腔溃疡又称复发性口腔溃疡,是一种常见的发生于口腔黏膜的慢性炎症疾病,在人群中的发病率高达25%,溃疡发作时局部疼痛剧烈、灼痛明显。口腔溃疡的发病原因较复杂,临床上对其多采用对症治疗,且以局部治疗为主。临床证实,中药可有效的减轻疼痛、促进溃疡愈合,且具有较少的副反应。穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分,主要含有二萜内酯类和黄酮类等成分。课题组前期研究发现穿心莲提取物可通过AkT/NF-кB通路有效的抑制口腔溃疡的局部炎症反应,减轻疼痛,促进溃疡愈合。在前期研究基础上,本课题将穿心莲提取物制备成口腔溃疡膜剂,优化膜剂处方,评价两种膜剂对口腔溃疡的治疗效果,并对膜剂的质量标准进行研究建。冰穿膜剂的处方优化:本实验以穿心莲提取物为主药,冰片为收敛剂,聚乙烯醇17-88（PVA 17-88）、羟丙基甲基纤维素（HPMC）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为成膜材料,甘油为增塑剂,阿斯巴甜为矫味剂制备冰穿膜剂。固定溶液总体积为100 mL,水提物的浓度为16%、醇提物的浓度为12%,冰片的浓度为1.2%,羧甲基纤维素钠的浓度（CMC-Na）为1%,以膜剂的成膜性、脱膜性、柔韧性、均匀性为评价指标,通过正交实验考察PVA 17-88与HPMC的比例、成膜材料的总浓度、甘油的浓度,筛选出冰穿水提物膜剂的最优处方:PVA 17-88与HPMC的比例为120:1,成膜材料的总浓度为6%,甘油浓度为4%;冰穿醇提物膜剂的最优处方:PVA 17-88与HPMC的比例为60:1,成膜材料的总浓度为9%,甘油浓度为3%。冰穿膜剂对大鼠口腔溃疡的治疗作用研究:造模前随机选8只大鼠作为正常组,剩余大鼠采用化学灼烧法建立大鼠口腔溃疡模型,将造模大鼠随机分8组,共9组:正常组（生理盐水,0.2 mL/只）;阳性药组（5 mg西瓜霜/只）;模型组（不含药物的空白膜）;冰穿水提物膜剂组:低剂量组、中剂量组、高剂量组（水提物的给药量分别为2 mg、4 mg、8 mg,冰片的给药量分别为0.15 mg、0.3 mg、0.6 mg）;冰穿醇提物膜剂组:低剂量组、中剂量组、高剂量组（水提物的给药量分别为1.5 mg、3 mg、6 mg,冰片的给药量分别为0.15 mg、0.3 mg、0.6 mg）,给药前7%水合氯醛麻醉大鼠,药膜直接贴于大鼠溃疡处,每日给药两次,连续给药7天。给药期间记录大鼠的溃疡面积,给药结束后剪取溃疡处的口腔黏膜进行HE染色并在光学显微镜观察,ELISA检测溃疡局部组织中的炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。结果表明:与模型组相比,两种提取物膜剂均可促进溃疡愈合,减轻溃疡处的炎症反应,且具有剂量依赖性。与模型组相比,水提物膜剂中剂量组、醇提物膜剂高剂量组和阳性药组可显著减少大鼠的溃疡面积,降低口腔黏膜中IL-1β的水平（P膜剂中剂量组显著降低大鼠溃疡局部组织中TNF-α,IL-6的水平（P膜剂高剂量组、醇提物膜剂高剂量组和阳性药组具有极显性差异（P膜剂组均能显著减少溃疡组织的固有层内炎症细胞浸润,减轻红细胞外渗,黏膜组织结构变得完整清晰,随给药剂量的增加浸润程度逐渐缓解,水提物膜剂高剂量组减轻炎症细胞浸润作用最明显。冰穿水提物膜剂的质量标准研究:依据2015年版《中国药典》四部通则（0125膜剂）、（0931溶出度与释放度测定方法）,对膜剂的外观、重量差异、释放度进行评价;参照文献资料,对膜剂的厚度、表面pH、耐折度、释放度进行评价;采用薄层色谱法对制剂中穿心莲、冰片进行定性鉴别;高效液相法测定冰穿膜剂中穿心莲内酯（A）、新穿心莲内酯（NA）、14-去氧穿心莲内酯（DA）、脱水穿心莲内酯的含量（DDA）的含量;紫外分光光度法测定膜剂中总黄酮的含量。结果表明:冰穿水提物膜剂呈黑褐色,外观完整光洁、色泽均匀、无气泡;膜剂的重量差异（±10.0%）符合药典规定;在人工唾液中（pH=7.4,PPBS）,80 min累积释放率约为85%,体外释药较完全;冰穿水提物膜剂的厚度为470-490μm,表面pH值在6.4-6.8范围内,耐折度较好;薄层色谱鉴别中穿心莲、冰片与对照品相应位置上均显示相同颜色的斑点,阴性对照无干扰;水提物膜剂穿心莲内酯的含量不低于0.154 mg/cm,穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量的总含量不低于0.782 mg/cm,总黄酮的含量不低于1.26 mg/cm。综上所述,冰穿膜剂具有制备简单、给药方便、质量可控的特点,并对化学灼烧法致大鼠口腔溃疡模型有治疗作用,因此冰穿膜

关键词：穿心莲膜剂穿心莲提取物口腔溃疡质量控制药效学

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