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体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗多种大范围结膜病变的疗效观察

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中华眼科杂志 2017年第3期53卷 172-176页

作者：程钧王君怡段豪云王爽丛林谢立信山东省眼科研究所青岛眼科医院青岛266071

目的探讨结膜病灶切除联合体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗多种大范围结膜病变的治疗效果.方法回顾性分析自2013年1月至2015年12月在青岛眼科医院行体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗大范围结膜病变患者11例（12只... 详细信息

目的探讨结膜病灶切除联合体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗多种大范围结膜病变的治疗效果.方法回顾性分析自2013年1月至2015年12月在青岛眼科医院行体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗大范围结膜病变患者11例（12只眼）的治疗效果.患者平均年龄（46±23）岁,男性5例,女性6例.平均随访时间（24.8±12.4）个月.手术方法：取新鲜供体角膜缘上皮组织进行细胞消化分离,将细胞置于去上皮的羊膜上培养生长,使其形成3～5层复层的细胞膜片备用.切除结膜病灶,取与结膜缺损相应大小的角膜缘上皮细胞膜片覆盖于巩膜裸露处,对位缝合结膜与角膜缘上皮细胞膜片,术后7d拆线.记录所有患者的病变累计范围、手术效果、病理学检查结果、术后并发症等情况.结果 11例（12只眼）患者中合并睑球粘连的复发性翼状胬肉6例（6只眼）,结膜复合痣3例（3只眼）,结膜原发性获得性黑变病1例（1只眼）,巨大皮样脂肪瘤1例（2只眼）.所有患者的结膜病变累及范围均超过2个象限.所有患者均无术中、术后并发症发生.术后无明显的刺激症状.由于手术操作的损伤,手术结束时,角膜缘上皮细胞膜片上会有少量小片状上皮缺损,随着术后细胞的增殖修复,上皮会逐渐愈合并趋于牢固,且与自体结膜上皮的界限逐渐消失.术后上皮的愈合时间为3～7 d,平均（4.5±1.2）d.术后未观察到免疫排斥反应发生.所有患者末次随访时均未观察到原发病复发情况.结论体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞移植治疗大范围的结膜病变可使病变切除区域迅速上皮化,可降低原发病复发几率,有效避免术后睑球粘连的发生,术后炎性反应轻,可获得良好的效果.

关键词：结膜疾病移植,同种角膜移植细胞培养技术上皮细胞角膜缘

雷帕霉素-深共晶溶剂滴眼液对小鼠同种异体角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制

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精准医学杂志 2024年第2期39卷 101-107页

作者：杨洋黄慈欣曾繁星孙亚如韦超王红卫高华青岛大学医学部山东青岛266071 山东第一医科大学附属眼科研究所山东第一医科大学附属眼科医院

目的探讨雷帕霉素(RAPA)-深共晶溶剂(DES)滴眼液对小鼠同种异体角膜移植免疫排斥反应的抑制作用及其机制。方法采用CCK-8实验检测10种DES对人角膜上皮细胞系(HCECs)细胞活性的影响,选择细胞活性显著高于对照组的DES检测其表征,筛选最适... 详细信息

目的探讨雷帕霉素(RAPA)-深共晶溶剂(DES)滴眼液对小鼠同种异体角膜移植免疫排斥反应的抑制作用及其机制。方法采用CCK-8实验检测10种DES对人角膜上皮细胞系(HCECs)细胞活性的影响,选择细胞活性显著高于对照组的DES检测其表征,筛选最适宜DES,并通过BALB/c小鼠和新西兰大白兔对最适宜DES进行生物相容性评价。将小鼠随机分为正常组、磷酸盐溶液(PBS)组、DES组和RAPA-DES组。正常组正常饲养小鼠,PBS组、DES组和RAPA-DES组小鼠右眼行角膜移植术,术后小鼠右眼分别滴加PBS、DES和RAPA-DES溶液,隔天通过裂隙灯观察角膜移植物的存活状况,评估角膜移植物的生存百分比并绘制角膜移植物生存曲线。于移植术后第7、16天,取小鼠眼球,苏木素-伊红(HE)染色,于显微镜下观察角膜水肿和炎症浸润情况。于移植术后第16天,经实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠角膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12α和IL-17αmRNA的表达水平。并通过蛋白质免疫印迹试验(WB)检测各组小鼠角膜组织中IL-6和IL-17α蛋白表达水平。结果CCK-8实验显示,与对照组比较,DES-1和DES-2组细胞的细胞活性显著升高(P移植物的生存百分比显著升高(P移植物的中位生存时间分别为16、16和22 d。HE染色结果显示,PBS组和DES组小鼠角膜移植物明显水肿,有大量炎症细胞浸润。RAPA-DES组的角膜移植物中无明显水肿,只有少量炎症细胞积累。RT-qPCR结果显示,RAPA-DES组小鼠角膜组织中TNF-αmRNA表达水平与PBS组无明显差异(P>0.05),RAPA-DES组IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA表达水平明显低于PBS组和DES组(P移植物生存时间,其可以通过降低角膜组织中促炎因子水平,抑制术后角膜移植物炎症反应,从而起到抑制免疫排斥反应的作用。

关键词：角膜移植移植,同种免疫抑制疗法西罗莫司深共晶溶剂药物载体

去细胞同种异体神经移植修复周围神经缺损临床安全性研究

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中华外科杂志 2012年第1期50卷 74-76页

作者：杨润功衷鸿宾朱加亮左坦坦吴克俭侯树勋解放军总医院第一附属医院骨科北京100048

目的探讨化学去细胞同种异体神经移植修复人体周围神经缺损的临床安全性。方法从2002年3月至2011年1月，取成年遗体捐献者的周围神经，使用化学萃取法制备去细胞同种异体神经，将其消毒、储存，并用于临床治疗41例周围神经缺损患者。男... 详细信息

目的探讨化学去细胞同种异体神经移植修复人体周围神经缺损的临床安全性。方法从2002年3月至2011年1月，取成年遗体捐献者的周围神经，使用化学萃取法制备去细胞同种异体神经，将其消毒、储存，并用于临床治疗41例周围神经缺损患者。男性38例，女性3例，年龄10—55岁。受伤至神经修复时间10h至9个月，平均4．1个月。受损神经包括臂丛神经10例，上臂桡神经3例，前臂尺神经4例，指（趾）神经12例，坐骨神经2例，胫神经3例，腓总神经5例，股神经2例。合并骨折12例，合并软组织损伤或缺损20例。神经桥接长度2～10em，平均6．1cm。术后不使用免疫抑制药物。术后随访9～51个月，平均20．2个月。通过手术部位物理检查及血生化和免疫检测以评价移植的安全性。结果术后患者全部得到随访，39例伤口一期愈合，2例发生表浅感染，经换药后延迟愈合。所有患者均未发生免疫排斥反应、过敏性反应、深部感染、肝肾毒副作用等不良反应。术后1、12周血生化检测均正常，特种蛋白、淋巴细胞亚群等免疫检测指标术前、术后差异无统计学意义。结论临床上采用去细胞同种异体神经移植修复人体周围神经缺损是安全的。

关键词：去细胞神经移植,同种周围神经

新合成查尔酮类衍生物对大鼠同种异体移植术后急性排斥反应阶段CD4^＋／CD8^＋T细胞比值的影响

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中华手外科杂志 2017年第3期33卷 217-220页

作者：余方正温新丁伟力朱君毅杜胜虎张怀保卓高豹王健温州医科大学附属第一医院手外科周围神经外科浙江325000 玉环县人民医院骨科

目的探索新合成查尔酮类衍生物L6H21对大鼠同种异体肢体移植急性排斥反应阶段CD4^＋／CD8^＋T细胞比值的影响。方法取36只健康雄胜SD大鼠的后肢作为供体，取72只健康雄性Wistar大鼠作为受体，建立大鼠后肢异体移植模型。随机分为三组：... 详细信息

目的探索新合成查尔酮类衍生物L6H21对大鼠同种异体肢体移植急性排斥反应阶段CD4^＋／CD8^＋T细胞比值的影响。方法取36只健康雄胜SD大鼠的后肢作为供体，取72只健康雄性Wistar大鼠作为受体，建立大鼠后肢异体移植模型。随机分为三组：对照组（A组），环孢素A组（B组），查尔酮类衍生物L6H21组（C组）。于移植术后1、3、5、7d观察各组大鼠移植后肢的外观变化、排斥反应出现时间。流式细胞仪分选CD4^＋、CD8^＋T细胞，观察急性排斥反应阶段CD4^＋／CD8^＋T细胞比值的变化。结果术后A组大鼠平均存活时间为（6．00±0．67）d，B组为f23．62±1．21）d，C组为（25．34±1．70）d。术后第1天，所有组中均未发现CD4^＋／CD8^＋T细胞比值差异。术后第3天，A组CD4^＋／CD8^＋T细胞比值明显升高，与其他两组相比差异有统计学意义（P〈0．05），B组和C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。术后第5天，虽然CD4^＋／CD8^＋T细胞比值在所有组中均降低，但B、C组降低更为显著，且C组较B组更为明显，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论新合成查尔酮类衍生物L6H21能抑制大鼠同种异体肢体移植术后急性排斥反应阶段CD4^＋／CD8^＋T细胞比值，并能够延长大鼠移植肢体的存活时间。

关键词：移植,同种动物实验查尔酮衍生物E6H21 CD4+/CD8+T细胞比值

第三方骨髓间充质干细胞对同种异体皮肤移植的影响

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中华整形外科杂志 2010年第2期26卷 120-125页

作者：孟宝玺郑岩杨阳刘蓓夏炜郭树忠王志军张晨遵义医学院遵义563003 第四军医大学西京医院全军整形外科研究所大连大学附属新华医院整形外科

目的探讨第三方骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）对同种异体皮肤移植的影响.方法 40只雌性C57BL/6和50只雄性BALB/C小鼠分别作为皮肤移植的供体和受体.将50只BALB/C小鼠随机分为5组,每组10只：... 详细信息

目的探讨第三方骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）对同种异体皮肤移植的影响.方法 40只雌性C57BL/6和50只雄性BALB/C小鼠分别作为皮肤移植的供体和受体.将50只BALB/C小鼠随机分为5组,每组10只：空白对照组,直接进行皮肤移植;给予受体环磷酰胺组（Cyelophosphamide,CP组）;给予受体SD大鼠BMSCs移植组（SD-BMSCs组）;给予受体CP＋SD-BMSCs移植组（CP＋SD-BMSCs组）;CM-DiI荧光标记组.CP＋SD-BMSCs组给予大剂量CP腹腔注射,200 mg/kg,2 d,移植当天自受体小鼠尾静脉注射1×10~6个SD-BMSCs.检测项目包括：观察皮片存活时间、单向混合淋巴反应、组织HE染色、组织荧光镜检,流式细胞仪检测受体外周血单核细胞中SD-BMSCs的含量等.结果 CP＋SD-BMSCs组皮肤移植物存活时间（14.5±1.9）d,空白对照组为（8.O±0.8）d,CP组为（11.1±1.4）d,SD-BMSCs组为（10.9±1.4）d,CP＋SD-BMSCs组皮肤移植物存活时间明显比后3组延长（P〈0.05）.混合淋巴反应结果显示,BMSCs对淋巴细胞的增殖抑制作用存在量效关系.HE染色发现CP＋SD-BMSCs组不但有血管生成,淋巴细胞浸润也较少.CM-DiI标记的SD-BMSCs能够在BALB/c小鼠体内存活30 d以上,SD-BMSCs组与CP＋SD-BMSCs组外周血流式细胞仪均检测到SD-BMSCs.结论 BMSCs能够在异种受体体内存活较长时间;第三方BMSCs能够延长同种异体移植物的存活时间;BMSCs能够抑制异种T淋巴细胞的活化增殖.

关键词：骨髓间充质干细胞移植,同种皮肤移植免疫耐受

脱细胞羊膜对兔同种异体跟腱移植后粘连的预防作用

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中华创伤骨科杂志 2013年第6期15卷 509-513页

作者：董瑞一赵红芳田德虎白江博于昆仑高鸣张国辉河北医科大学附属第三医院手外科石家庄050051

目的探讨脱细胞羊膜对兔同种异体跟腱移植后粘连的预防作用及其对跟腱愈合的影响。方法30只新西兰白兔随机分为2组（n=15）：实验组在移植跟腱处包裹羊膜，对照组在移植跟腱处不包裹羊膜。术后2、4周切取移植跟腱行组织学观察；术后2、4... 详细信息

目的探讨脱细胞羊膜对兔同种异体跟腱移植后粘连的预防作用及其对跟腱愈合的影响。方法30只新西兰白兔随机分为2组（n=15）：实验组在移植跟腱处包裹羊膜，对照组在移植跟腱处不包裹羊膜。术后2、4周切取移植跟腱行组织学观察；术后2、4、6周取外周血行流式细胞学检测，取移植跟腱行大体观察和生物力学检测，并测定羟脯氨酸含量。结果术后2、4周组织学观察显示实验组炎性反应和浸润范围均较对照组局限，胶原纤维排列较对照组致密且整齐。术后2、4、6周实验组CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞计数及CD4^＋淋巴细胞与CD8^＋T淋巴细胞比值均低于对照组，实验细托断粘连带功耗小于对照组，跟腱最大拉伸断裂强度及羟脯氨酸含量均大于对照组，以上指标比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论脱细胞羊膜可以有效颅防肌腱粘连，促进肌腱愈合，并有一定的抗免疫排斥作用。

关键词：羊膜跟腱移植,同种跟腱粘连兔

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同种异体半月板联合骨软骨移植的实验研究

中国骨伤 2012年第10期28卷 852-855页

作者：周预刘玉杰侯树勋解放军总医院第一附属医院骨科北京100048 解放军总医院骨科北京100048

目的:探讨新鲜同种异体半月板骨软骨联合移植治疗胫骨平台毁损伤后骨关节炎的疗效。方法:成年新西兰大白兔36只,随机分为A、B、C3组,各12只。A组行右膝内侧半月板连同胫骨平台骨软骨移植,克氏针交叉固定骨块。B组行右膝内侧半月板移植,... 详细信息

目的:探讨新鲜同种异体半月板骨软骨联合移植治疗胫骨平台毁损伤后骨关节炎的疗效。方法:成年新西兰大白兔36只,随机分为A、B、C3组,各12只。A组行右膝内侧半月板连同胫骨平台骨软骨移植,克氏针交叉固定骨块。B组行右膝内侧半月板移植,左膝内侧半月板取出制备新鲜冷冻半月板。C组行左膝内侧新鲜冷冻半月板移植。术后4、8、12周分批取材行大体观察、组织学检查和胫骨平台软骨氨基己糖(GAG)测定。结果:12周时A组移植胫骨平台软骨与B、C组半月板移植术后的内侧胫骨平台软骨氨基己糖含量差异无统计学意义;A、B组移植的半月板纤维软骨细胞数差异无统计学意义;A组半月板移植的纤维软骨细胞数多于C组。结论:新鲜同种异体半月板骨软骨联合移植能修复胫骨平台毁损伤。

关键词：移植,同种半月板,胫骨软骨骨关节炎兔

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经辐照的同种异体血管在肝移植中的应用

中华外科杂志 2007年第5期45卷 323-325页

作者：张业伟孟庆洋王学浩南京医科大学第一附属医院肝脏外科 210029

目的研究经辐照的同种异体大隐静脉在肝移植中替代门静脉移植后其形态学和免疫学的改变。方法研究分为经辐照的同种异体大隐静脉移植组(n=11)(A 组)、新鲜同种异体大隐静脉移植组(n=9)(B 组)和新鲜自体大隐静脉移植组(n=14)(C 组)进行... 详细信息

目的研究经辐照的同种异体大隐静脉在肝移植中替代门静脉移植后其形态学和免疫学的改变。方法研究分为经辐照的同种异体大隐静脉移植组(n=11)(A 组)、新鲜同种异体大隐静脉移植组(n=9)(B 组)和新鲜自体大隐静脉移植组(n=14)(C 组)进行大隐静脉移植。于移植后1周、2周、1个月、2个月、3个月5个时间点用彩色多普勒超声和免疫组织化学法观察移植大隐静脉的通畅情况及形态学变化,同时观察移植早期 CD_4^+、CD_8^+ T 细胞浸润情况。结果 A 组大隐静脉无组织学改变,肉眼观察外形无明显变化。移植后3个月3组移植大隐静脉的通畅例数分别为9例、3例和12例。A 组和 C 组移植后2周,移植的大隐静脉内膜出现内皮细胞,移植后2个月,血管内膜的内皮细胞覆盖完整;B 组移植早期有淋巴细胞和炎性细胞浸润及明显的大隐静脉结构破坏,移植大隐静脉内膜未见内皮细胞覆盖;A 组早期 CD_4^+、CD_8^+T 细胞比例明显低于 B 组,略高于 C 组。结论经辐照的同种异体大隐静脉符合理想的血管移植物的条件,同时具有较弱的抗原性,术后检测 CD_4^+、CD_8^+ T 细胞的变化可作为同种异体血管移植后急性免疫排斥反应的免疫学监测指标。

关键词：移植,同种肝脏大隐静脉辐射

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同种异体气管移植的研究及展望

中国组织工程研究与临床康复 2008年第5期12卷 929-932页

作者：梁志波李小飞刘锟解放军第二五二医院胸外科河北省保定市071051 解放军第四军医大学唐都医院胸外科陕西省西安市710038

学术背景:同种异体气管移植是气管移植研究的热点,新观点、新进展不断涌现。目的:总结分析近年来气管移植的现状及进展,介绍气管移植研究的新方法、新观点。检索策略:作者应用计算机检索,以网络数据库资源为主,查询Science Direct,Pubme... 详细信息

学术背景:同种异体气管移植是气管移植研究的热点,新观点、新进展不断涌现。目的:总结分析近年来气管移植的现状及进展,介绍气管移植研究的新方法、新观点。检索策略:作者应用计算机检索,以网络数据库资源为主,查询Science Direct,Pubmed,Springer等数据库1990-01/2007-07有关同种异体气管移植方面的文章,检索词为"tracheal,allotransplantation,allograft",并限定文章语言种类为English。同时应用计算机检索CNKI数据库1994-01/2007-07有关同种异体气管移植方面的文章,限定文章种类为中文,检索词"同种异体,气管,移植"。初检得到328篇文献,140篇符合纳入标准,取其中有关气管移植的30篇文献进行归纳总结。纳入标准:文章所述重点与气管移植相关。排除标准:重复性文章。文献评价:30篇文献中7个实验分析了移植气管的血运建立问题;17个实验分析了气管的免疫排斥问题;6个实验分析了移植气管组织细胞的再生与组织诱导因子问题。资料综合:通过文献回顾,发现决定同种异体气管移植成败的关键集中于以下3方面:①移植气管的血运建立。②移植气管的免疫原性及免疫反应强度。③移植气管组织细胞的再生。结论:在同种异体气管移植中各种相关因素的重要性及相互间的影响还需要进行深入分析。期望将来通过对各种组织诱导因子及局部应用的免疫抑制缓释剂的研究,在同种异体气管移植的研究领域中取得新突破。

关键词：气管/移植移植,同种综述文献