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P25蛋白在重症肌无力患者中的低表达及组织和种属特异性的研究

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中华医学杂志 2004年第2期84卷 103-106页

作者：都爱莲任惠民吕传真黄俊复旦大学华山医院神经病学研究所上海200040 国家医学神经生物学重点实验室

目的　探讨重症肌无力 (MG)相关蛋白P2 5在MG患者骨骼肌中表达减少的特异性并探讨其组织及种属特异性。方法　用免疫组织化学检测P2 5在正常人和MG患者骨骼肌中的表达 ;用免疫印迹检测其在 2 8例MG患者、2 4名正常人和 10例其他肌肉疾病... 详细信息

目的　探讨重症肌无力 (MG)相关蛋白P2 5在MG患者骨骼肌中表达减少的特异性并探讨其组织及种属特异性。方法　用免疫组织化学检测P2 5在正常人和MG患者骨骼肌中的表达 ;用免疫印迹检测其在 2 8例MG患者、2 4名正常人和 10例其他肌肉疾病 (OMD)患者骨骼肌中的表达差异 ,及其在 8种不同人体组织和 8种不同动物骨骼肌中的表达。结果　P2 5蛋白在MG患者骨骼肌中免疫组织化学染色强度明显低于正常人 ;免疫印迹显示 ,MG患者、正常人和OMD患者骨骼肌中相对谱带密度分别为 1.0 4± 0 .18、1.2 7± 0 .2 1和 1.2 1± 0 .15 ;MG患者中P2 5蛋白水平明显低于正常人及OMD患者 ,正常人和OMD患者之间差异无显著意义 ;MG患者的不同临床类型和胸腺病理类型之间P2 5蛋白的表达差异无显著意义。P2 5蛋白在人体组织中仅表达于骨骼肌 ;在 8种动物中仅猪有表达。结论　P2 5蛋白在MG患者骨骼肌中表达降低并具有组织和种属特异性。

关键词： P25蛋白重症肌无力种属特异性免疫印迹法免疫组织化学乙酰胆碱受体发病机制

成都汉族D2S2944和D1S2134的遗传多态性和种属特异性研究

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四川大学学报（医学版） 2004年第6期35卷 812-814页

作者：周雪平李英碧张伟娟贾政军侯一平吴谨四川大学华西基础医学与法医学院物证学教研室成都610041

目的　获得中国成都地区汉族群体中短串连重复序列 (STR) D2 S2 94 4与 D1S2 134两个位点的多态性分布资料和评价它们在法医学上的应用。方法　用 PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术 ,对 12 0个成都汉族无血缘关系的个体进行分析 ,并... 详细信息

目的　获得中国成都地区汉族群体中短串连重复序列 (STR) D2 S2 94 4与 D1S2 134两个位点的多态性分布资料和评价它们在法医学上的应用。方法　用 PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术 ,对 12 0个成都汉族无血缘关系的个体进行分析 ,并选择猴、猪、狗、牛、羊、鸡、鸭、鱼、猫、兔、豚鼠、家鼠、鳝鱼、蛙 14种常见的动物作为种属特异性评价的对照样本 ,对这两个位点进行种属特异性评价。结果　发现 D2 S2 94 4有 8个等位基因 ,2 2种基因型 ,观察杂合度 (h)为 0 .82 4 ;个体识别率 (DP)为 0 .92 5 ;多态信息含量 (PIC)为 0 .78;非父排除率 (EP)为 0 .6 4 4 ;D1S2 134有 10个等位基因 ,2 6种基因型 ;h为 0 .76 9;DP值为 0 .92 0 ;PIC为 0 .79,EP值为 0 .5 4 3;基因型分布经过相关软件分析 ,符合 Hardy- Weinberg平衡定律。通过种属特异性的评价发现 D2 S2 94 4与 D1S2 134具有较好的人类种属特异性。结论　 D1S2 134和 D2 S2 94 4位点多态性好 ,非父排除率和个人识别率高 ,种属特异性好 ,可作为法医学亲子鉴定和个人识别的候选标记 ,且方法简便、可靠 ,重复性好。

关键词：短串联重复多态性种属特异性

TLR9在CpG寡脱氧核苷酸所致种属特异性免疫效应中的意义

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中南大学学报（医学版） 2005年第5期30卷 533-535页

作者：李宁范学工汤参娥朱才中南大学湘雅医院感染病科长沙410008 中南大学湘雅医院医学实验中心长沙410008

目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN... 详细信息

目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN-α,而对猕猴和小鼠却无明显的免疫刺激活性;TLR9在人PBMC中均有表达,并且在CpG-ODN介导激活的人PBMC中表达上调;TLR9在猕猴PBMC中不表达。结论:TLR9是构成CpG-ODN种属特异性的重要分子基础。

关键词： CpG寡脱氧核苷酸 α干扰素 Toll样受体9 种属特异性

小麦和水稻叶绿体基因组进化中核苷酸替代的种属特异性

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西北植物学报 2010年第7期30卷 1302-1308页

作者：唐萍彭程杨四海连云港师范高等专科学校连云港市应用生物技术重点实验室江苏连云港222006 南京大学生命科学学院南京210093

以玉米叶绿体基因组为参照序列,采用三序列比较法系统分析了小麦和水稻分化过程中叶绿体基因组核苷酸替代的发生方式.结果表明,小麦中存在(A+T)/(G+C)替代偏差,水稻则无,该差异对小麦和水稻分化后叶绿体基因组G+C含量产生不同的影响,替... 详细信息

以玉米叶绿体基因组为参照序列,采用三序列比较法系统分析了小麦和水稻分化过程中叶绿体基因组核苷酸替代的发生方式.结果表明,小麦中存在(A+T)/(G+C)替代偏差,水稻则无,该差异对小麦和水稻分化后叶绿体基因组G+C含量产生不同的影响,替代使小麦叶绿体基因组G+C含量降低、水稻叶绿体基因组G+C含量表现增加.无论在编码区、非编码区,还是不同功能基因区,小麦叶绿体基因组转换与颠换的比值都显著低于水稻.小麦和水稻叶绿体基因组进化中核苷酸替代呈现种属特异性.

关键词：叶绿体基因组转换颠换种属特异性

成都汉族群体五个短串联重复序列基因频率及其种属特异性研究

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中华医学遗传学杂志 2006年第6期23卷 685-688页

作者：张林李英碧颜静张霁廖淼朱振东候一平吴谨四川大学基础医学与法医学院物证教研室成都610041 四川大学基础医学与法医学院组织学与胚胎学教研室成都610041

目的对成都汉族群体5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值。方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色方法,对100名成都汉族无血缘关系健康个... 详细信息

目的对成都汉族群体5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值。方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色方法,对100名成都汉族无血缘关系健康个体的5个STR基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究。结果D18S979、D11S2014、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中等位基因个数分别为6、5、5、7、6;基因型个数分别为12、11、13、19、14;基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。通过种属特异性分析发现5个STR基因座中,猴在D18S979、D11S2014和D1S1667基因座均检测出扩增产物,但未在人类基因座分型区内;D18S979位点人类分型区内可检测到牛、狗、鳝鱼有扩增产物,猪、鸭、鼠、兔有微弱扩增产物;D18S548位点人类分型区内只检测到牛有微弱扩增产物;D1S1667位点人类分型区内检测到狗、羊、鳝鱼有扩增产物;GATA164F07位点人类分型区内只检测到狗有微弱扩增产物;泥鳅、鸡、豚鼠在5个基因座均未检测到扩增产物。结论5个短串联重复序列中D18S979、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中具有较好的遗传多态性,D11S2014、D18S548和GATA164F07具有较好的种属特异性,在法医学个人识别和亲子鉴定中有应用价值。

关键词：短串联重复序列等位基因频率种属特异性

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食用海藻种属特异性多重PCR鉴定

食品与发酵工业 2014年第2期40卷 184-187页

作者：白卫滨邹游曹春廷邱瑞霞孙建霞吴希阳暨南大学食品科学与工程系广东广州510632 广东工业大学轻工化工学院广东广州510090

为了对食用海藻进行种属特异性分子特征鉴定,采用试剂盒提取4种常见的食用海藻(石莼、龙须菜、海带、螺旋藻)样品DNA后,用常规PCR技术进行引物特异性验证,运用双重PCR技术检测引物的灵敏度。结果表明,4种食用海藻(石莼、龙须菜、海带、... 详细信息

为了对食用海藻进行种属特异性分子特征鉴定,采用试剂盒提取4种常见的食用海藻(石莼、龙须菜、海带、螺旋藻)样品DNA后,用常规PCR技术进行引物特异性验证,运用双重PCR技术检测引物的灵敏度。结果表明,4种食用海藻(石莼、龙须菜、海带、螺旋藻)得到相应的不同大小单一条带,说明引物具有特异性;在双重PCR体系螺旋藻、石莼以及龙须菜、海带组合,得到石莼的检测限为362 pg,龙须菜的检测限为100 pg。

关键词：食用海藻种属特异性多重PCR 鉴定

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干扰素临床前安全性评价中的种属特异性问题

卫生毒理学杂志 2002年第4期16卷 251-254页

作者：袁素波北京毒物药物研究所北京100850

干扰素（interferon，IFN）是人类发现的第1个细胞因子，因其具有较好的生物学活性和良好的市场前景，故近年来我国此类药物的研究和开发发展迅速，但其报审前的临床前安全性工作却受制于其严格的种属特异性而成为新药报审的瓶颈问题，... 详细信息

干扰素（interferon，IFN）是人类发现的第1个细胞因子，因其具有较好的生物学活性和良好的市场前景，故近年来我国此类药物的研究和开发发展迅速，但其报审前的临床前安全性工作却受制于其严格的种属特异性而成为新药报审的瓶颈问题，我们拟就种属特异性对安全性的限制和制约作一评述。

关键词：干扰素临床前安全性评价种属特异性生物学活性生殖毒性

蝙蝠和小鼠下丘对恒频—调频声信号加工模式的行为相关性和种属特异性研究

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蝙蝠和小鼠下丘对恒频—调频声信号加工模式的行为相关性和种属特...

作者：徐娜华中师范大学

学位级别：硕士

本实验室先前在大蹄蝠(Hipposideros armiger)的听觉中脑一下丘(inferior colliculus, IC)的研究显示,神经元对恒频-调频(constant frequency-frequency modulation, CF-FM)声刺激表现为单反应(single-on, SO)和双反应(double-on, DO)两种模式,但对于FM成分在这两类反应模式中的作用并不清楚。因此,本研究采用在体细胞外单细胞记录方法,研究了CF-FM声中的FM成分对CF成分反应的发放数和潜伏期的影响。另外,该种蝙蝠对CF-FM信号处理的方式是其种属特异性所致,还是为哺乳动物所共有?目前仍不清楚。故采用听觉诱发电位记录与计算机叠加平均技术相结合的方法,比较研究了回声定位蝙蝠-普氏蹄蝠(Hipposideros pratti)(一种恒频-调频蝙蝠)、普通伏翼蝠(Pipistrellus abramus)(一种调频蝙蝠)以及非回声定位动物-昆明小鼠(Mus musculus, Km) IC对CF、FM和CF-FM声刺激的诱发电位反应。获得了下列研究结果：1.在大蹄蝠IC做在体细胞外记录共获得116个SO神经元,37个DO神经元。通过对CF、CF-FM声刺激下两类神经元反应发放数和潜伏期的比较发现：CF后加上FM成分后显著的降低了SO和DO神经元对CF成分反应的发放数,缩短了DO神经元的潜伏期。2.诱发电位记录比较研究结果显示,普氏蹄蝠IC对CF声刺激表现为on-off反应(含2～7个波),且off-反应受记录位点深度、CF声时程、声强、声频率等因素的影响;而对FM声刺激仅产生on-反应(含2-4个波);对CF-FM声刺激表现为DO反应,且这种加工具有谐波相关性。普通伏翼蝠IC对CF、FM声亦同样仅产生on-反应(含2-5个波),而对CF-FM声则表现为DO反应,对FM声时程(或调制率)具有选择性,表现在反应幅度和潜伏期上。小鼠IC对CF、FM和CF-FM声均只产生on-反应(含2-4个波)。以上结果表明两类神经元可能在捕食的不同时相发挥着不同的作用,这些结果暗示在回声定位和非回声定位哺乳动物中,对声信号的加工处理方面存在种属差异性和特异性,这些特性的形成可能与其听觉行为的演化具有直接的相关性。

关键词：恒频-调频声信号单反应神经元双反应神经元起始-结束反应神经元行为相关性种属特异性下丘

CD81介导HCV入侵种属特异性分子基础研究

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CD81介导HCV入侵种属特异性分子基础研究

作者：张梦北京协和医学院

学位级别：硕士

丙型肝炎病毒(HCV)感染是慢性肝病的主要诱因,在全世界范围内感染人数已超过1.7亿。由于HCV感染具有高度严格的宿主特异性,只有人和黑猩猩可支持HCV感染,HCV小动物模型的研发成为了阻滞HCV相关研究,特别是疫苗研发的瓶颈之一。HCV宿主... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)感染是慢性肝病的主要诱因,在全世界范围内感染人数已超过1.7亿。由于HCV感染具有高度严格的宿主特异性,只有人和黑猩猩可支持HCV感染,HCV小动物模型的研发成为了阻滞HCV相关研究,特别是疫苗研发的瓶颈之一。HCV宿主特异性的基础来源于病毒入侵过程的复杂性。目前,已知HCV受体至少包括CD81, SR-B1, Claudin-1 和 Occludin等4种。其中CD81是HCV早期入侵所必须的。CD81直接与HCV-E2相结合,其介导HCV的入侵具有很强的种属特异性,只有人和黑猩猩的CD81以很高的亲和力结合HCV-E2并支持HCV入侵,但其分子机制至今尚不明确。为揭示CD81介导HCV入侵种属特异性分子机制,本课题利用结构生物学,生物物理学和病毒学的方法对人,小鼠,和非洲绿猴的,CD81 (hCD81, mCD81 和 agmCD81)进行了深入的研究。首先解析了hCD81-LEL, mCD81-LEL 和 agmCD81-LEL的高分辨率晶体结构,mCD81-LEL和agmCD81-LEL的全局结构与hCD81-LEL类似,均由五个α-螺旋组成“磨菇型”结构,螺旋-A/E构成了“磨菇茎”,螺旋-B/C/D构成了“蘑菇头”,其中D-helix是CD81直接与HCV-E2结合的区域。通过结构对比分析发现,在mCD81-LEL和agmCD81-LEL中188-196氨基酸残基之间形成了分子内氢键/盐键,而类似的分子内相互作用在hCD81-LEL中是不存在的。之前有研究报道,CD81D-helix构象的灵活性是与E2结合所必须的,而在mCD81-LEL 和 agmCD81-LEL结构中,分子内氢键或盐键通过把D-helix锚定在稳定的E-helix上,因此我们推测假分子内氢键/盐键对D-helix的构象灵活性产生了束缚作用,从而干扰了CD81与E2的相互作用,削弱了CD81介导HCV入侵效率。以往的研究表明F186是CD81与HCV-E2的结合所必须的,因此,我们在F186存在的基础上设计突变实验,验证188-196间氢键或盐键对E2结合以及HCV入侵效率的影响。结果表明,hCD81中,在F186存在的情况下,如果诱导188-196残基之间形成氢键/盐键,会削弱hCD81与HCV-E2之间的结合,同时会降低HCV的入侵效率。而对于mCD81 和 agmCD81,在具备L186F突变的前提下,破坏188-196残基之间的氢键/盐键,可以提升HCV的入侵效率。本课题结果证实,CD81中188-196间分子内氢键/盐键是决定其与HCV-E2的结合亲和力及其介导HCV入侵效率决定因素之一,此理论不但解释了CD81介导的HCV入侵种属特异性分子机制,同时为感染性动物模型的建立提供了筛选的理论依据。

关键词： HCV入侵 CD81 种属特异性小动物模型