磁纳米温度测量方法有望解决肿瘤热疗中无法实现实时准确的温度测量问题.针对磁纳米温度测量方法在实际应用过程中存在的交变磁场均匀性低、信噪比低、负载阻抗较大的问题展开分析.首先通过分析交变磁场激励系统信号链,提出采用亥姆霍兹线圈作为交变磁场发生装置并从理论分析、模拟仿真和实际测量等层面分析并验证其磁场均匀性;其次针对信噪比低的问题提出采用九阶椭圆无源滤波器,分别通过理论分析、数字模拟仿真和实际测量等方面验证信噪比达到100 d B;最后依据阻抗匹配理论,提出利用串联谐振电路解决负载阻抗较大的问题,通过实际测量发现激励磁场强度达到20 Gs;同时为了解决交变磁场激励系统稳定性问题,提出采用串联大功率电阻的方式实时监测激励电流以保证激励磁场的稳定性.
蛋白质的磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰,调节着包括细胞的增殖、分化、信号传导、翻译、蛋白降解、细胞动态平衡等生命活动[1]。异常的磷酸化调节会导致许多严重的人类疾病,如癌症、糖尿病、心脏病、老年痴呆症等[2]。然而,由于复杂生物样本中磷酸化肽段丰度低且离子化效率低,且存在大量非磷酸肽段干扰,使得磷酸化蛋白质组学的规模化鉴定存在一定困难。因此,发展快速高效的磷酸肽分离富集方法有着重要的意义。本研究制备了一种新型的植酸(PA)和Ti4+功能化的IMAC材料(Ti-PA-MNPs),并成功用于复杂样品中磷酸化肽段的选择性富集。首先通过one-pot共沉淀方法将植酸修饰在磁纳米粒子表面,然后利用植酸的强鳌合作用,通过孵育法在材料表面固定了大量的功能离子Ti4+;在一定的溶剂条件下,Ti4+能够选择性的结合磷酸化肽段,经过洗涤和洗脱步骤,将样品中的磷酸化肽段分离富集出来(见图1)。TiPA-MNPs对磷酸化肽段具有出良好的灵敏度和选择性,该材料能够从0.8fmol·L-1的□-casein酶解液中富集出磷酸化肽段;加入非磷酸化肽段的干扰,该材料能够将磷酸化肽段从1:2000的□-casein/BSA混合酶解液(□-casein:BSA,摩尔比)中富集出来。由于纳米粒子具有较高的比表面积,该材料对磷酸化肽段的吸附容量达到53.5 g mg-1,回收率高达90%。对于复杂的真实样本,该材料能够从500 g大鼠肝脏蛋白酶解液中富集到2145条磷酸化肽段,优于商业化的Ti O2小柱的富集效果(1568条)。综上所述,Ti-PA-MNPs对磷酸化肽段具有更高的选择性和灵敏度,能够用于复杂样品中磷酸化肽段的分离富集,为磷酸化蛋白质组学的研究提供了一种高效的富集策略。
暂无评论