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硫酸皮肤素的体外抗凝特性

中国药理学通报 1993年第1期9卷 29-32页

作者：孙红李学增樊绘曾中国医学科学院血液学研究所天津300050 天津医药科学研究所天津300050

应用***,TGT等方法观察了由猪皮分离的硫酸皮肤素(DS)对凝血的影响以及DS与肝素(UFH)的协同作用。结果显示,DS的抗凝作用比UFH弱;有较强的催化抑制凝血酶生成的作用;明显增强UFH的抗凝及抑制凝血酶生成作用;此外,DS引起血小板聚集作用... 详细信息

应用***,TGT等方法观察了由猪皮分离的硫酸皮肤素(DS)对凝血的影响以及DS与肝素(UFH)的协同作用。结果显示,DS的抗凝作用比UFH弱;有较强的催化抑制凝血酶生成的作用;明显增强UFH的抗凝及抑制凝血酶生成作用;此外,DS引起血小板聚集作用明显弱于UFH.提示:DS有较弱的抗凝作用.并与UFH有明显的协同抗凝作用,它是一种有希望的抗凝药。

关键词：硫酸皮肤素肝素抗凝

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不同分子量硫酸皮肤素的抗血栓活性

中国药学杂志 2004年第7期39卷 515-517页

作者：谢继青姬胜利王凤山曹吉超张天民山东大学生化与生物技术药物研究所山东济南250012

目的研究不同相对分子质量硫酸皮肤素(DS)的抗血栓活性。方法采用美国药典的羊血浆法测定不同相对分子质量的DS的抗凝血活性,电刺激大鼠动脉血栓形成法测定其体内抗血栓活性,以及生色底物法测定其激活肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗凝血酶活性... 详细信息

目的研究不同相对分子质量硫酸皮肤素(DS)的抗血栓活性。方法采用美国药典的羊血浆法测定不同相对分子质量的DS的抗凝血活性,电刺激大鼠动脉血栓形成法测定其体内抗血栓活性,以及生色底物法测定其激活肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗凝血酶活性。结果相对分子质量分别为27.5×103,8.0×103,5.3×103和4.0×103的DS和低分子硫酸皮肤素(LMWDS1,LMWDS2和LMWDS3)的抗凝效价分别为4.00,2.25,0.94和0.54 u·mg-1;体内抗血栓活性的血栓堵塞时间(OT)值分别为58.12,50.58,123.90和133.53 min,均较生理盐水组19.79 min显著延长;体外激活HCⅡ抗凝血酶活性分别为223.23,123.71,89.29和58.00 u·mg-1。结论随着LMWDS相对分子质量的降低,其抗凝血活性降低,体外激活HCⅡ抗凝血酶活性也降低,但体内抗血栓活性增强。

关键词：硫酸皮肤素低分子硫酸皮肤素抗血栓作用抗凝血活性肝素辅因子Ⅱ

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硫酸皮肤素的分光光度法测定

中国医药工业杂志 2008年第5期39卷 373-375页

作者：王祥洪张世娜长江师范学院化学及环境科学系重庆408003 第三军医大学大坪医院重庆400042

建立了分光光度法测定硫酸皮肤素。在Britton-Robinson缓冲液(pH6.1)中,硫酸皮肤素与吖啶橙形成离子缔合物,染料褪色,硫酸皮肤素浓度与体系在490nm处吸光度的降低(ΔD)成正比,在0.1～3.5μg/ml范围内符合朗伯-比尔定律。定量限为0.1μg... 详细信息

建立了分光光度法测定硫酸皮肤素。在Britton-Robinson缓冲液(pH6.1)中,硫酸皮肤素与吖啶橙形成离子缔合物,染料褪色,硫酸皮肤素浓度与体系在490nm处吸光度的降低(ΔD)成正比,在0.1～3.5μg/ml范围内符合朗伯-比尔定律。定量限为0.1μg/ml。

关键词：硫酸皮肤素吖啶橙分光光度法测定

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硫酸皮肤素的共振瑞利散射法测定

分析试验室 2009年第1期28卷 53-55页

作者：王祥洪长江师范学院化环系重庆408100

研究了硫酸皮肤素对十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)发生缔合反应的条件、共振瑞利散射特征。结果表明,在pH 5.8的BR缓冲溶液中,硫酸皮肤素能与CTMAB形成离子缔合物,使共振瑞利散射RRS急剧增强并产生新的RRS光谱。硫酸皮肤素浓度在0.04～4.... 详细信息

研究了硫酸皮肤素对十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)发生缔合反应的条件、共振瑞利散射特征。结果表明,在pH 5.8的BR缓冲溶液中,硫酸皮肤素能与CTMAB形成离子缔合物,使共振瑞利散射RRS急剧增强并产生新的RRS光谱。硫酸皮肤素浓度在0.04～4.0μg/mL之间与散射强度呈线性关系,方法检出限(3σ)为13 ng/mL,并以CTMAB体系为例研究了共存物质的影响,表明方法选择性好。

关键词：硫酸皮肤素十六烷基三甲基溴化铵共振瑞利散射

硫酸皮肤素对大鼠血管纤溶酶原活化素释放的影响

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中国医学科学院学报 1988年第6期10卷 435-438页

作者：朱广瑾 Abbadini M Maggi A 中国医学科学院基础医学研究所意大利Mario Negri药理学研究所英国伦敦药理学院北京

用大鼠下肢血管床灌流模型,观察肝素样药物对纤维蛋白溶解系统的作用。结果表明,硫酸皮肤素(DS)能诱导大鼠肢体血管壁释放纤溶酶原活化素(PA)。DS浓度0.1～0.8mg/ml时,给药后1～2min内PA活性增高达最大值。DS在0.1～0.4mg/ml范围内时PA... 详细信息

用大鼠下肢血管床灌流模型,观察肝素样药物对纤维蛋白溶解系统的作用。结果表明,硫酸皮肤素(DS)能诱导大鼠肢体血管壁释放纤溶酶原活化素(PA)。DS浓度0.1～0.8mg/ml时,给药后1～2min内PA活性增高达最大值。DS在0.1～0.4mg/ml范围内时PA释放与DS浓度成正比,DS0.4mg/ml可诱导最大的PA释放反应。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和纤维蛋白自显影分析证实,DS诱导的是组织类型纤溶酶原活化素(t-PA),其分子量为67000。

关键词：硫酸皮肤素纤溶酶原活化素组织类型纤溶酶原活化素纤维蛋白自显影

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硫酸皮肤素寡糖的分离与制备

青岛海洋大学学报（自然科学版） 2001年第6期31卷 849-854页

作者：于广利管华诗 Robert J.Linhardt Wang Qun Hyun OK Yang Toshihiko Toida 青岛海洋大学海洋药物与食品研究所青岛266003 美国爱荷华大学药物与天然产物化学系日本千叶大学药物科学学院

利用软骨素酶 ABC (Chondroitinase ABC,EC4 .2 .2 .4 )对硫酸皮肤素 (Dermatan Sul-fate,DS)进行控制降解。对得到的混合寡糖首先采用低压凝胶渗透色谱 (L PGPC)进行分级 ,然后对每一组分再利用强阴离子交换高压液相色谱 (SAX- HPL C)... 详细信息

利用软骨素酶 ABC (Chondroitinase ABC,EC4 .2 .2 .4 )对硫酸皮肤素 (Dermatan Sul-fate,DS)进行控制降解。对得到的混合寡糖首先采用低压凝胶渗透色谱 (L PGPC)进行分级 ,然后对每一组分再利用强阴离子交换高压液相色谱 (SAX- HPL C)进行分离 ,最终制备出聚合度为 2 ,4 ,6 ,8,10 ,12的寡糖纯品。寡糖纯度采用 SAX- HPL C,毛细管电泳 (CE)以及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行检验 ,结构采用电喷雾离子化质谱 (ESI- MS)以及核磁共振波谱 (NMR)

关键词：硫酸皮肤素软骨素酶ABC 寡糖 SAX-HLC 分离抗栓剂肝素抗凝剂核磁共振波谱

罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白同时提取工艺优化及初步鉴定

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食品与发酵工业 2024年第3期50卷 141-148页

作者：王鑫贾学静汪卓陈建平刘晓菲宋兵兵李瑞钟赛意广东海洋大学食品科技学院广东省水产品加工与安全重点实验室广东省海洋生物制品工程实验室广东省海洋食品工程技术研究中心广东省亚热带果蔬加工科技创新中心广东湛江524008 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心大连工业大学辽宁大连116034

针对鱼皮单独提取硫酸皮肤素造成资源利用率不高的问题,该研究以罗非鱼皮为原料,采用低温酶提酸促溶法同时提取硫酸皮肤素与胶原蛋白,通过单因素试验及响应面优化提取工艺,并利用醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红... 详细信息

针对鱼皮单独提取硫酸皮肤素造成资源利用率不高的问题,该研究以罗非鱼皮为原料,采用低温酶提酸促溶法同时提取硫酸皮肤素与胶原蛋白,通过单因素试验及响应面优化提取工艺,并利用醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱等对罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白进行初步鉴定。结果表明,最佳提取工艺为中性蛋白酶加酶量5930 U/g,提取时间25.8 h,提取温度28.5℃,料液比1∶40(g∶mL),在此条件下罗非鱼皮硫酸皮肤素得率为132.12 mg/100 g,胶原蛋白提取率为53.14%,二者分别具有典型的硫酸皮肤素及胶原蛋白特征。该研究为同时提取罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白提供了理论依据,为罗非鱼皮下脚料的高效利用提供了一种新途径。

关键词：罗非鱼皮同时提取胶原蛋白硫酸皮肤素响应面

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硫酸皮肤素——一种新型的抗血栓药

国外医学（输血及血液学分册） 1992年第1期15卷 7-9页

作者：孙红李家增中国医学科学院血液学研究所

硫酸皮肤素(dermatan sulfate,DS)是近几年国外研究日益重视的一种新的抗血栓药。它是一天然的糖胺聚糖,广泛分布于动物组织中,其分子量为30000左右,DS 的抗血栓作用特点不同于肝素,它不依赖血浆抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ),而是通过肝素辅因子Ⅱ... 详细信息

硫酸皮肤素(dermatan sulfate,DS)是近几年国外研究日益重视的一种新的抗血栓药。它是一天然的糖胺聚糖,广泛分布于动物组织中,其分子量为30000左右,DS 的抗血栓作用特点不同于肝素,它不依赖血浆抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ),而是通过肝素辅因子Ⅱ(Heparin Cofactor Ⅱ,HC-Ⅱ)催化抑制凝血酶。动物模型已证明,DS 能明显阻止静脉血栓形成,而且抑制已存在血栓上的纤维蛋白增长,诱导血管内皮细胞释放tPA 发挥纤溶作用,抑制胶原诱导的血小板聚集。DS 在体内不破代谢转化而以原形由尿排出,口服可被吸收,几乎无出血副作用,因此,DS 是一很有前途的抗栓药。

关键词：硫酸皮肤素抗血栓药

硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素的制备及其抗血栓相关活性协同作用研究

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硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素的制备及其抗血栓相关活性协同作用研究

作者：薛发刚山东大学

学位级别：硕士

血栓性疾病发病率逐年升高,严重危害人类健康,其导致的死亡和致残在全世界都是第一位的。各种原因引起的全身或局部血流缓慢、淤滞是血栓形成的重要因素,如高纤维蛋白原血症、高脂血症和循环障碍等。血栓栓塞性疾病一旦发生危害严重,应... 详细信息

血栓性疾病发病率逐年升高,严重危害人类健康,其导致的死亡和致残在全世界都是第一位的。各种原因引起的全身或局部血流缓慢、淤滞是血栓形成的重要因素,如高纤维蛋白原血症、高脂血症和循环障碍等。血栓栓塞性疾病一旦发生危害严重,应以预防为主,要预防和治疗血栓,需要长期保证血液的正常状态。因此,研发作用缓和、无出血副反应、可长期安全使用的抗栓药物就成为抗栓药物研发的一个方向。类肝素是指天然的、合成的和半合成的与肝素有类似作用的物质。猪肠黏膜类肝素作用缓和、副作用小、疗效肯定、费用较低,从分子量和化学性质方面更适于口服,而服用方便的类肝素制剂是抗栓药物重要的研发方向。目前,猪肠黏膜类肝素已经被开发成预防和治疗血栓的药物(如danaparoid, lomoparan, sulodexide, mesoglycan等)在国外市场上市多年。然而,我国生产精品肝素而得到的副产物猪肠黏膜类肝素则被低价出售,没有该类药物上市,这种类肝素产量大、成本低,亟待开发和利用。在国内开发新的、更安全有效的猪肠黏膜类肝素抗栓药物制剂,具有极大的实用价值,前景良好。猪肠黏膜类肝素(heparinoid, HPND)的主要组分是硫酸乙酰肝素(heparan sulfate, HS)、硫酸皮肤素(dermatan sulfate, DS)、少量的肝素(heparin,HP)和极少量的硫酸软骨素(chond roitin sulfate, CS)。国内外大量研究表明,猪肠黏膜类肝素的主要组分都具有抗血栓作用。HS和HP通过结合抗凝血酶Ⅲ(antithrombinⅢ, ATⅢ)加速凝血酶和各凝血因子的失活速度;DS主要通过结合肝素辅因子Ⅱ(heparin cofactorⅡ, HCIⅡ)抑制凝血酶活性,降低血小板聚集,而发挥抗血栓作用。在抗凝血过程中,有1/3的凝血酶是通过HCⅡ的结合而使活性受到抑制,另外2/3的凝血酶通过ATⅢ被抑制。并且,这两种凝血酶抑制方式在体内凝血过程中是分别独立进行的。当DS和HS同时存在时,两者起到协同增效作用。然而,这类药物(如sulodexide)的生物效价却是用脂蛋白酯酶释放活性(lipoprotein lipase release unit, LSU)来确定的。对该类药物的制备方法、组分组成详细信息、各组分对其生物效价影响的研究却报道甚少。因此,本实验以HP精制的副产物猪肠黏膜类肝素粗品为原料分离纯化制备猪肠黏膜类肝素(HPND);以sulodexide (SLDX)作为阳性对照药,对所制得的HPND用Benedict's沉淀法和强阴离子交换层析法分离纯化,得到各组分,并对其进行全面的结构确证和理化性质分析,包括双糖分析、核磁图谱分析、分子量测定、比旋光度分析、醋酸纤维素薄膜电泳分析、硫酸根/羧酸跟比值测定等;为了研究HPND的抗栓相关活性及其内在机理,本实验在体外检测了其各组分的抗FⅩa活性和抗FⅡa活性,得到各组分的抗FⅩa/抗FⅡa活性比值;用体内试验验证了HPND的促脂蛋白酯酶(LPL)释放活性和促组织纤溶酶原激活剂(t-PA)释放活性;为了进一步研究HPND的何种组分对促LPL释放活性和促t-PA释放活性发挥主要作用,本实验用体内实验分别进行了HS和DS促LPL释放活性以及促t-PA释放活性的协同作用研究。本研究取得的结果和结论有以下几个方面：***的制备及其各组分的分离纯化以粗品猪肠黏膜类肝素作为原料,经过胰蛋白酶(trypsin)和木瓜蛋白酶(papain)联用酶解,或链酶蛋白酶E(pronase E)酶解,水解掉糖胺聚糖链上的杂蛋白,然后用CaCI2沉淀法脱蛋白,最后将得到的无蛋白多糖用过氧化氢氧化脱色除杂质,经脱盐后冷冻干燥得到纯的HPND。用紫外全波长扫描检测,HPND的核酸和蛋白吸收符合美国药典对核酸和蛋白质杂质的要求。为了进一步的研究,HPND连同对照药SLDX用Benedict试剂沉淀法分为两大组分,DS组分和HS组分。DS和HS经过SP强阳离子交换层析脱铜,得到无铜纯品。火焰原子吸收分光光度法测定原料、DS和HS铜含量分别为2.83ppm、35.1 ppm和18.4 ppm。HS组分再经过QFF强阴离子交换层析二次分离,得到HS0,HS1和HS2三种亚组分。HPND和对照药SLDX的HS组分QFF强阴离子交换层析二次分离图谱显示,两者相应HS0,HS1和HS2三种亚组分的出峰位置一致。2. HPND和SLDX各组分结构确证和理化性质(1) HPND-DS, Mw为22,070 Da,主要双糖组成为α-△UA-[1→3]-GaINAc,比旋光度为-56°,硫酸根/羧酸根比值1.14±0.03,核磁图谱1H在1.940ppm有G

关键词：硫酸乙酰肝素硫酸皮肤素脂蛋白酯酶组织型纤溶酶原激活剂抗血栓