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日粮能量水平对绵羊睾丸发育和相关基因表达的影响

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草业学报 2024年第6期33卷 219-226页

作者：赵沛迪杨可蒋玉奇黄轲盼马明宇李开栋许辉李万宏兰州大学草业科学国家级实验教学示范中心兰州大学草地农业科技学院甘肃兰州730020 兰州大学草种创新与草地农业生态系统全国重点实验室农业农村部草牧业创新重点实验室甘肃兰州730020 民勤县畜牧技术推广站甘肃民勤733300 民勤县德福农业科技有限公司甘肃民勤733300

为探究日粮能量水平对初情期绵羊睾丸发育的影响,选取45只体重[(24.27±0.63) kg]相近的3月龄美利奴公羔,平均分成3组,每组15只,分别饲喂高(10.5 MJ·kg^(-1))、中(10.1 MJ·kg^(-1))、低(9.7 MJ·kg^(-1))3种能量水平日粮。经过104 d... 详细信息

为探究日粮能量水平对初情期绵羊睾丸发育的影响,选取45只体重[(24.27±0.63) kg]相近的3月龄美利奴公羔,平均分成3组,每组15只,分别饲喂高(10.5 MJ·kg^(-1))、中(10.1 MJ·kg^(-1))、低(9.7 MJ·kg^(-1))3种能量水平日粮。经过104 d的饲养试验后每组随机选择10只羔羊屠宰,测定其睾丸大小、睾丸组织总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶活性和睾酮水平,利用RT-qPCR方法检测与能量代谢和类固醇激素合成相关基因表达情况。结果表明不同能量水平日粮对羔羊体重[(51.73±0.56) kg,(50.69±0.55) kg,(51.51±1.03) kg]、睾丸重量[(253.60±19.69) g,(274.60±14.17) g,(262.40±19.91) g]、睾丸组织的总抗氧化能力[(10.59±1.13) U·mg^(-1)prot,(8.60±1.00) U·mg^(-1)prot,(7.86±1.73) U·mg^(-1)prot]、谷胱甘肽过氧化物酶活性[(0.28±0.08) U·mg^(-1)prot,(0.14±0.03) U·mg^(-1)prot,(0.23±0.03) U·mg^(-1)prot]和睾酮水平[(0.52±0.07) ng·mg^(-1)prot,(0.35±0.05)ng·mg^(-1)prot,(0.44±0.06) ng·mg^(-1)prot]均无显著影响(P>0.05),但是中能量水平组代谢相关基因IGF-1R和IGF-1以及类固醇激素合成相关基因CYP19A1和3βHSD的表达水平显著高于高能量水平组和低能量水平组(P睾丸能量代谢活动存在影响,中等能量水平日粮促进睾丸组织中代谢相关基因IGF-1R和IGF-1以及类固醇激素合成相关基因CYP19A1和3βHSD表达,但对睾丸发育无显著影响。

关键词：能量水平繁殖能力睾丸发育初情期

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基于Cx43研究产前应激对子代大鼠睾丸发育的影响及左归丸干预作用

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 197-207页

作者：萧闵曹继刚江晓翠王朝阳龚健陈思易周艳艳赵敏湖北中医药大学实验动物中心湖北武汉430065 湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430065

基于缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)研究产前应激大鼠影响子代睾丸发育的机制及左归丸的防治作用。制备SD孕鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、左归丸高剂量组(18.9 g·kg^(-1))、左归丸低剂量组(9.45 g·kg^(-1))、维生素E组(1.4... 详细信息

基于缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)研究产前应激大鼠影响子代睾丸发育的机制及左归丸的防治作用。制备SD孕鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、左归丸高剂量组(18.9 g·kg^(-1))、左归丸低剂量组(9.45 g·kg^(-1))、维生素E组(1.44 mg·kg^(-1))。除空白对照组以外,其余各组通过慢性不可预测轻度应激法复制产前应激(prenatal stress, PS)孕鼠模型。采用糖水偏好实验、旷场实验、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测糖皮质激素(glucocorticoids, GC)含量评估PS孕鼠模型;ELISA法检测血清甲状腺素4(thyroxine 4, T4)、睾酮(testosterone, T)、促卵泡生长激素(follicle-stimulating hormone, FSH)评估肾虚状态及性激素水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色评估睾丸生殖细胞状况;全自动精子分析仪检测精子质量;免疫荧光双染检测子代大鼠睾丸Cx43蛋白、促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone receptor, FSHR)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(real-time fluorescent quantitative PCR, RT-PCR)检测Cx43、促卵泡生长激素受体(FSHR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)基因mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot, WB)法检测子代大鼠睾丸Cx43、PI3K、FSHR、Akt蛋白表达。PS诱发子代大鼠睾丸发育障碍,HE染色结果显示,出生当天子代雄鼠睾丸曲精小管数量减少,血清FSH升高,睾丸组织Cx43水平降低,60日龄子代雄鼠睾丸生精功能降低,精子质量下降,血清FSH升高,T降低,睾丸组织Cx43、FSHR、PI3K、Akt蛋白及mRNA水平均降低;而给予左归丸防治后对子代大鼠上述睾丸发育异常及功能障碍均有改善。综上,左归丸可能通过激活PI3K/Akt通路调节睾丸Cx43表达改善PS对子代大鼠睾丸发育及生精功能的影响。

关键词：产前应激连接蛋白43 子代左归丸睾丸发育

由二维到三维——睾丸发育及精子生成研究方法的新选择

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中华男科学杂志 2016年第3期22卷 258-263页

作者：张连栋李和程张同殿王子明西安交通大学医学院第二附属医院泌尿外科陕西西安710004

单一细胞成分的二维培养模型是研究睾丸发育及精子生成的重要方法,但由于相关细胞因子缺乏及生精小管三维构象的破坏,不能有效的模拟睾丸内环境,且较难完成完整的精子生成过程。近20年来,睾丸组织培养及睾丸移植等多种体外及体内培养模... 详细信息

单一细胞成分的二维培养模型是研究睾丸发育及精子生成的重要方法,但由于相关细胞因子缺乏及生精小管三维构象的破坏,不能有效的模拟睾丸内环境,且较难完成完整的精子生成过程。近20年来,睾丸组织培养及睾丸移植等多种体外及体内培养模型的发展及优化实现了由二维到三维的转变,睾丸内龛境结构的维持或重构及培养条件的优化可较好的模拟睾丸内微环境,睾丸间质细胞、支持细胞及生殖细胞发育过程与体内类似,其中体外模型可将细胞悬液或组织块悬浮于空气-培养基交界处,在体外即可以模拟睾丸体细胞及生殖细胞正常的发育过程;体内模型可建立供体睾丸组织与受体下丘脑-垂体的关联,为精子生成提供内分泌基础。这为研究睾丸形成及发育、睾丸功能调节等提供了重要方法,并极大的促进了男性不育症治疗理念的进展,虽然上述各种方法仍有各自的局限性,但随着细胞及组织处理、冻存、解冻、移植等技术的进步,必将促进其临床应用并有较好的转化医学前景。

关键词：睾丸发育精子生成睾丸组织培养睾丸移植二维模型三维模型

睾丸发育与精子发生相关miRNAs的研究进展

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中国畜牧杂志 2017年第6期53卷 4-10页

作者：白曼孙丽敏项露颉贾超李佳蓉姜怀志吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

miRNAs是一类广泛存在于真核生物中参与调节不同生物过程的非编码小RNA,可在转录后特异结合mRNAs 3'非翻译区降解靶mRNAs或抑制其翻译,调控其表达。miRNAs对精子发生的细胞特异性调控,对调节雄性生殖具有重要意义。本文概述了miRNAs的... 详细信息

miRNAs是一类广泛存在于真核生物中参与调节不同生物过程的非编码小RNA,可在转录后特异结合mRNAs 3'非翻译区降解靶mRNAs或抑制其翻译,调控其表达。miRNAs对精子发生的细胞特异性调控,对调节雄性生殖具有重要意义。本文概述了miRNAs的生物合成、作用机制,特别是miRNAs对睾丸组织发育及精子发生的表达调控,旨在为进一步深入研究miRNAs在雄性生殖中的作用及分子调控机制提供参考。

关键词： miRNAs 生物合成表达调控睾丸发育精子发生

PI3K-Akt/LKB1-AMPK-mTOR-p70S6K/4EBP1信号通路参与调节睾丸发育和精子发生的研究进展

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中华男科学杂志 2016年第11期22卷 1016-1020页

作者：段鹏全超黄文婷杨克敌华中科技大学同济医学院公共卫生学院生殖与发育毒理学研究室湖北武汉430030

男性不育与睾丸组织基因表达异常或信号传导异常所致的生精障碍密切相关。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是细胞代谢的中枢调节器,在细胞增殖、分化、翻译、肌动蛋白聚合、细胞周期、能量代谢和自噬等细胞活动中起重要调控作用。PI3K-Akt... 详细信息

男性不育与睾丸组织基因表达异常或信号传导异常所致的生精障碍密切相关。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是细胞代谢的中枢调节器,在细胞增殖、分化、翻译、肌动蛋白聚合、细胞周期、能量代谢和自噬等细胞活动中起重要调控作用。PI3K-Akt和LKB1-AMPK这两条经典信号通路可通过不同分子路径调节mTOR信号及其下游靶蛋白p70S6K/4EBP1的表达。近来研究表明mTOR-p70S6K/4EBP1信号分子参与调节睾丸细胞增殖、分化和精子形成,本综述就PI3K-Akt/LKB1-AMPK-mTOR信号级联反应机制在睾丸发育和精子发生过程中的作用进行概述,为男性不育分子机制研究提供新观点及新思路。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路睾丸发育精子发生

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对大鼠睾丸发育及StAR、CYP19a1、CYP11a1基因表达的影响

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卫生研究 2010年第3期39卷 263-267页

作者：逯晓波于涛马明月靳翠红刘秋芳巫生文潘亮中国医科大学公共卫生学院卫生毒理教研室.沈阳110001 沈阳医学院公共卫生学院卫生毒理教研室

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)28天短期重复暴露,探讨DEHP对雄性大鼠生殖系统发育的影响及其作用机制。方法40只7～9周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(灌胃玉米油)和低、中、高剂量染毒组(每天灌胃DEHP10、100和1000mg/kg),每... 详细信息

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)28天短期重复暴露,探讨DEHP对雄性大鼠生殖系统发育的影响及其作用机制。方法40只7～9周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(灌胃玉米油)和低、中、高剂量染毒组(每天灌胃DEHP10、100和1000mg/kg),每组10只,动态观察动物一般状况、体重变化。28天后断头处死大鼠,测定睾丸组织脏器系数;对睾丸和附睾进行病理学观察。提取睾丸组织的总RNA,逆转录合成cDNA,通过PCR扩增产物比较DEHP不同剂量染毒对StAR、CYP19a1和CYP11a1基因表达的影响。结果随着DEHP剂量增加,大鼠体重增长受限(F=3.54,P睾丸重量及其脏器系数降低,且高剂量组与对照组相比差异有显著性(F=105.545,P睾丸和附睾组织结构发生病理性改变,在中、高剂量组尤为明显;RT-PCR检测表明,与对照组相比,CYP19a1及CYP11a1基因表达降低,而StAR基因表达在各组间差异无显著性。结论DEHP对青春期雄性大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用,导致睾丸重量降低,发育不全。DEHP及其代谢产物可能通过影响CYP19a1和CYP11a1等芳香化酶的基因表达,干扰内分泌平衡而使青春前期雄性大鼠产生生殖系统的发育障碍。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯睾丸发育 StAR CYP19a1 CYP11a1 基因表达

Islet1在小鼠睾丸发育过程中的表达研究

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上海交通大学学报(医学版) 2014年第3期34卷 263-267页

作者：陈麒屾王路于卓冯立新上海交通大学医学院医学科学院生殖干细胞研究室

目的探索Islet1在小鼠睾丸中表达情况及其可能参与的生殖细胞发育过程。方法采用RT-PCR技术检测不同发育阶段小鼠睾丸组织中Islet1 mRNA的表达,并对PCR产物进一步测序验证;Real-Time PCR检测不同发育阶段小鼠睾丸中Islet1 mRNA的相对表... 详细信息

目的探索Islet1在小鼠睾丸中表达情况及其可能参与的生殖细胞发育过程。方法采用RT-PCR技术检测不同发育阶段小鼠睾丸组织中Islet1 mRNA的表达,并对PCR产物进一步测序验证;Real-Time PCR检测不同发育阶段小鼠睾丸中Islet1 mRNA的相对表达量和时序性;免疫荧光染色法进一步检测不同时间点小鼠睾丸中Islet1表达的细胞种类;表面铺展实验检测Islet1在初级精母细胞核中的定位。结果 RT-PCR的结果显示Islet1 mRNA在小鼠睾丸发育整个阶段都有转录活性;Real-Time PCR检测结果发现,随着睾丸组织的发育,Islet1 mRNA的相对表达量逐渐上升;免疫荧光染色结果显示Islet1主要表达在生殖细胞中;表面铺展实验证明了在初级精母细胞的细胞核中,Islet1定位于XY body。结论首次发现胚胎发育中的保守转录因子Islet1在出生后小鼠睾丸的初级精母细胞中存在表达,并在初级精母细胞的细胞核中定位于XY body,这为精原细胞维持和分化的调控研究提供了新的基因。

关键词： Islet1 睾丸发育生殖细胞减数分裂 XY body

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小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡

云南大学学报（自然科学版） 2011年第1期33卷 113-117,F0002页

作者：罗兰张彦张闻李京昆昆明医学院基础医学院细胞生物学及遗传学教研室云南昆明650500

以17组出生后不同发育阶段的昆明种正常小鼠睾丸组织为材料,采用TDT原位末端标记法在其石蜡组织切片上进行凋亡细胞原位检测,探讨小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡规律.结果发现:小鼠生精细胞从生后开始就存在自发性凋亡现象,... 详细信息

以17组出生后不同发育阶段的昆明种正常小鼠睾丸组织为材料,采用TDT原位末端标记法在其石蜡组织切片上进行凋亡细胞原位检测,探讨小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡规律.结果发现:小鼠生精细胞从生后开始就存在自发性凋亡现象,生后1～15 d,凋亡精原细胞数目不断增加;至生后第15天时达到峰值,且15 d起个别初级精母细胞也开始出现凋亡;至27 d时,极少数次级精母细胞和精子细胞出现凋亡;至30 d时凋亡细胞基本为精原细胞;而33 d时各类型生精细胞均存在凋亡现象;至36 d时凋亡细胞又重新集中于精原细胞,并延续于此后各期.上述结果表明:小鼠睾丸发育过程中凋亡细胞主要为精原细胞;自发性凋亡活跃期发生于生后1～33 d,与生精细胞的首次发育成熟过程同步.

关键词：睾丸发育小鼠生精细胞自发性凋亡

本交笼养对肉种公鸡睾丸发育及血浆生殖激素含量的影响

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西北农业学报 2019年第12期28卷 1913-1920页

作者：覃飞李富贵秦子越钟成麟刘嘉朱庆尹华东王彦李地艳田尧夫赵小玲四川农业大学动物科技学院

探究本交笼养模式下活动空间与母鸡群体对肉种公鸡睾丸发育及生殖激素含量的影响,为本交笼养种鸡的繁殖性能研究提供基础数据。以大恒肉鸡S07系种鸡为研究对象,从10周龄开始,试验组公鸡采用本交笼养,对照组公鸡采用单笼和大方笼养。在... 详细信息

探究本交笼养模式下活动空间与母鸡群体对肉种公鸡睾丸发育及生殖激素含量的影响,为本交笼养种鸡的繁殖性能研究提供基础数据。以大恒肉鸡S07系种鸡为研究对象,从10周龄开始,试验组公鸡采用本交笼养,对照组公鸡采用单笼和大方笼养。在育成期至性成熟高峰期10~30周龄时,进行3组公鸡的相对睾丸质量测定、睾丸HE染色、生精小管面积统计及血浆主要生殖激素含量的测定。结果表明:随着周龄的增加,各组公鸡的睾丸质量,血浆T、FSH、LH激素含量增加,并在30周龄时增至最大值,而血浆E2含量逐渐降低,在30周龄达到最低值;10周龄时各组公鸡的生精小管呈封闭状,15周龄时各组公鸡生精小管开始出现管腔,并开始有精子生成;在30周龄时,本交笼组公鸡的相对睾丸质量,生精小管面积,血浆T、FSH、LH含量均显著高于单笼组和大方笼组,后两组间无显著差异,而本交笼组公鸡的血浆E2激素含量显著低于单笼组和大方笼组,后两组间无显著差异。说明性成熟高峰期时,本交笼养公鸡的睾丸发育优于单笼养公鸡,造成此种差异的原因与本交笼内母鸡群体效应导致的公鸡生殖激素含量差异有关,而本交笼内活动空间对公鸡睾丸发育及生殖激素含量无影响。

关键词：本交笼肉种公鸡睾丸发育生殖激素