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双链DNA直接测序法在环境诱变剂致突变分子机制研究中的应用Ⅰ.非突变质粒抗性基因片段的序列测定

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癌变．畸变．突变 1991年第3期3卷 15-16,77-82页

作者：高惠兰谢大英李忠生左瑾方福德中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所中国医学科学院基础医学研究所

本文报告了双链DNA直接测序法的建立,并以质粒pBR322为研究对象,选择其四环素抗性基因作为模板,合成了一个位于***位点逆时针方向紧邻处的寡核苷酸5′-GGCCCTTTCGTCTTC-3′作为引物。整个测序主要步骤包括:双链DNA碱变性、酶促合成反应... 详细信息

本文报告了双链DNA直接测序法的建立,并以质粒pBR322为研究对象,选择其四环素抗性基因作为模板,合成了一个位于***位点逆时针方向紧邻处的寡核苷酸5′-GGCCCTTTCGTCTTC-3′作为引物。整个测序主要步骤包括:双链DNA碱变性、酶促合成反应和双脱氧末端终止法。结果显示,在非梯度胶的情况下,可以清晰可靠地读出200多个核苷酸顺序。

关键词：环境诱变剂双链DNA 直接测序

双链DNA直接测序法在环境诱变剂致突变分子机制研究中的应用Ⅱ.甲基丙烯酸环氧丙酯诱导质粒抗性基因突变的测定

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癌变．畸变．突变 1993年第1期5卷 26-28页

作者：高惠兰谢大英左瑾方福德中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所北京100005

运用我所建立的双链DNA直接测序法测定了GMA诱导的质粒抗性基因片段(Tc^R)EcnRI/SaII片段(～0.3Kb)的序列,并与相应正常基因片段序列作一比较,所得结果具有一定意义。本实验表明:双链DNA直接测序法可应用于环境诱变剂研究。

关键词：双链DNA 直接测序环境诱变剂 GMA

DNA扩增法用于HBV DNA检测和直接测序

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国际检验医学杂志 1992年第5期 183-184页

作者：金晓明

应用引物P;,P;和P;扩增HBV DNA HBs 基因起始的301-559和447-559片段的核苷酸,反应产物与Alu I 消化的PBR 322分子量标记并排电泳,电泳后凝胶经EB 染色,在紫外灯下观察结果。Southern blot 杂交确定扩增产物中同源序列的存在。应用引物P... 详细信息

应用引物P;,P;和P;扩增HBV DNA HBs 基因起始的301-559和447-559片段的核苷酸,反应产物与Alu I 消化的PBR 322分子量标记并排电泳,电泳后凝胶经EB 染色,在紫外灯下观察结果。Southern blot 杂交确定扩增产物中同源序列的存在。应用引物P;和P;对克隆的（亚型adz 或adw）及血清中提取的DNA 进行聚合酶链式反应（PCR）,反应产物经微量离心后按Sanger 等改良法直接测定DNA 序列。结果:PCR 法在23名乙肝表面抗原（HBsAg）阳性慢肝者中的8名乙肝E 抗原（HBeAg）阳性者、2名HBeAg/抗HBe 阴性者均检出HBV DNA（100%）,13名抗HBe 阳性者检出12名（92%）。而用点杂交法分别检出7名（88%）,1名（50%）和3名

关键词： HBV DNA 扩增检出引物亚型 DNA 直接测序

戊型肝炎病毒 PCR 产物直接测序法的建立及应用

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中国公共卫生学报 1997年第2期16卷 71-73页

作者：李奎庄辉朱晓洁范金水朱万孚朱永红北京医科大学微生物学系

以γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记的ＰＣＲ引物为测序引物，ＴａｑＤＮＡ聚合酶为测序酶，ＰＣＲ产物为测序模板，建立了戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）ｃＤＮＡ序列分析方法。应用本法测定１株新疆流行性ＨＥＶ和４株散发性ＨＥＶｃＤＮＡ序列，呈清... 详细信息

以γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记的ＰＣＲ引物为测序引物，ＴａｑＤＮＡ聚合酶为测序酶，ＰＣＲ产物为测序模板，建立了戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）ｃＤＮＡ序列分析方法。应用本法测定１株新疆流行性ＨＥＶ和４株散发性ＨＥＶｃＤＮＡ序列，呈清晰的序列梯，其序列与用荧光法测定的另一株散发性ＨＥＶ序列有高度同源性。对同一样品两端测序，重叠部分序列完全一致。以上结果说明，ＰＣＲ产物直接测序法可用于ＨＥＶ核酸序列分析。

关键词：戊型肝炎病毒 PCR 直接测序

乙型肝炎病毒S基因直接测序分型方法的建立及应用

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中华检验医学杂志 2005年第2期28卷 191-191页

作者：戴晨阳朱理珉梁树人李顺天徐健姚智天津市传染病医院科研室 300192 天津医科大学基础医学院免疫室

HBV血清分型并不能真正反映病毒的异质性以及病毒真正的种系关系,通过对HBV全基因组的比较,HBV分为8个基因型,分型标准依据全基因序列测定,基因型间同源性>92%或基因型间异质性≥8%,S基因序列测定,基因型间同源性>96%或基因型间异质性≥... 详细信息

HBV血清分型并不能真正反映病毒的异质性以及病毒真正的种系关系,通过对HBV全基因组的比较,HBV分为8个基因型,分型标准依据全基因序列测定,基因型间同源性>92%或基因型间异质性≥8%,S基因序列测定,基因型间同源性>96%或基因型间异质性≥4%[1,2].本研究通过建立乙型肝炎病毒S基因直接测序分型方法,初步探讨HBV基因分型的意义。

关键词： HBV 乙型肝炎病毒S基因分型方法直接测序异质性基因型分型标准同源性全基因组序列测定

用PCR和直接测序方法分析胰腺的c-Ki-ras基因点突变

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中华消化杂志 1997年第3期17卷 143-143页

作者：徐永泉刘述信夏玉亭沈阳军区总医院中国医科大学第二医院

用ＰＣＲ和直接测序方法分析胰腺的ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ基因点突变徐永泉，刘述信，夏玉亭人类肿瘤中最常见的与转化活性有关的基因ｒａｓ家族癌基因（Ｎ－ｒａｓ，Ｋｉ－ｒａｓ，Ｈａ－ｒａｓ）。ｒａｓ基因的激活在肿瘤发生中起重要作用... 详细信息

用ＰＣＲ和直接测序方法分析胰腺的ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ基因点突变徐永泉，刘述信，夏玉亭人类肿瘤中最常见的与转化活性有关的基因ｒａｓ家族癌基因（Ｎ－ｒａｓ，Ｋｉ－ｒａｓ，Ｈａ－ｒａｓ）。ｒａｓ基因的激活在肿瘤发生中起重要作用。ｒａｓ基因激活的主要方式是点突变...

关键词：直接测序点突变基因突变胰腺癌 PCR c-Ki-ras 基因方法分析

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科学家首次实现对新冠病毒RNA直接测序

中华生物医学工程杂志 2020年第2期26卷 109-109页

中国科学报3月10日报道,澳大利亚墨尔本大学微生物和免疫学系的Lachlan Coin和Sebastian Duehene团队及合作者,提供了新冠病毒的第一个直接RNA序列,详细介绍了该冠状病毒亚基因组长度的mRNA结构,并描述了从共享数据中揭示的冠状病毒进... 详细信息

中国科学报3月10日报道,澳大利亚墨尔本大学微生物和免疫学系的Lachlan Coin和Sebastian Duehene团队及合作者,提供了新冠病毒的第一个直接RNA序列,详细介绍了该冠状病毒亚基因组长度的mRNA结构,并描述了从共享数据中揭示的冠状病毒进化遗传学的各个方面。相关论文3月7日发布于预印本服务器bioRxiv(bioRxiv所有论文未经同行评议)。

关键词：冠状病毒中国科学报病毒RNA RNA序列同行评议亚基因组直接测序进化遗传学