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硫熏对9种百合科中药材质量及安全性的影响

硫熏对9种百合科中药材质量及安全性的影响

作者：张蓉安徽中医药大学

学位级别：硕士

百合科（Liliaceae）中药材作为我国传统常用中药材,因含淀粉过高,本类药材具有不易干燥、贮运过程中易霉变的特点,常有使用硫磺熏蒸（以下简称“硫熏”）的乱象报道。再者,百合科大多为药食两用药材,故人们对其质量和用药安全的关注度... 详细信息

百合科（Liliaceae）中药材作为我国传统常用中药材,因含淀粉过高,本类药材具有不易干燥、贮运过程中易霉变的特点,常有使用硫磺熏蒸（以下简称“硫熏”）的乱象报道。再者,百合科大多为药食两用药材,故人们对其质量和用药安全的关注度更高。大量研究表明,硫熏往往会产生新化合物（以下简称“硫熏标志物”）,进而影响中药材质量,严重威胁用药安全。但目前研究多集中在对单一药材的质量影响研究。当下,从同科或同属角度开展硫熏百合科中药材质量评价,探明硫熏标志物及其共性转化规律,建立稳定可靠的硫熏中药材质量评价体系对于阐明硫熏是如何影响中药材质量具有重要实际意义。目的:本研究以9种常见百合科中药材浙贝母、川贝母、平贝母、湖北贝母、伊贝母、百合、麦冬、知母、土茯苓为百合科类药材代表,采用代谢组学相关知识,分析其硫熏前后化学成分的变化,找出差异成分,挖掘共有及特征硫熏标志物,并对其安全性开展研究,以期阐明硫熏对百合科类药材质量和安全的影响机制,为市场监管和质量控制提供依据。方法:1.利用UPLC-QTOF-MS/MS及数据分析软件对硫熏前后9种百合科中药材的差异成分进行分析,利用Masslynx质谱软件挖掘共有及特征硫熏标志物,通过文献查阅及与对照品比对,总结硫熏标志物的裂解和转化规律;2.利用广泛靶向代谢组学对硫熏前后9种百合科中药材的代谢产物进行测定,通过PCA、OPLS-DA等多元统计方法分析硫熏前后的不含硫差异成分;3.利用对照品反应及核磁共振技术对硫熏标志物进行结构验证及鉴定;4.采用体外细胞毒性实验及斑马鱼模型实验对硫熏百合科中药材水煎液及共有硫熏标志物开展安全性评价;5.参照药典方法和UPLC-MS方法分别对市场上123批百合科类药材二氧化硫残留量和百合科类硫熏标志物进行检测,验证通过百合科类硫熏标志物检测判断其是否硫熏的可行性,服务市场监管。结果:1.基于UPLC-QTOF-MS/MS代谢组学的数据分析,挖掘了5种贝母中20个硫熏标志物,其中包括1个共有硫熏标志物,主要分为异甾体生物碱和十八碳烯酸两大类;解析了百合中10个苯丙烯酸类和呋甾皂苷类硫熏标志物、麦冬和知母中7个呋甾皂苷类硫熏标志物和土茯苓中2个黄酮醇苷类硫熏标志物。基于此,总结了9种百合科中药材硫熏过程中可能的转化规律,即异甾体生物碱类、苯丙烯酸类成分能与亚硫酸发生加成发应,羟基十八碳烯酸类、黄酮醇苷类和呋甾皂苷类能与亚硫酸发生取代反应,生成对应的含硫衍生物。2.通过广泛靶向代谢组学分析,从1061种百合科化合物中筛选出差异化合物743种,其中硫熏后成分含量升高的有312种,降低的有431种,相对含量变化较大的以生物碱类、黄酮类、萜类和氨基酸类为主,化合物含量上调的大多为氨基酸等初生代谢产物,下调的多为生物碱类、黄酮类等次生代谢产物。进一步对百合科中药材进行不含硫共有标志物挖掘,解析获得5种贝母药材硫熏前后共有差异化合物5个,包括骆驼蓬碱、4-甲基-5-噻唑乙醇、脱乙基莠去津、鸟苷3’,5’-环一磷酸和二烯丙基二硫醚,9种百合科中药材硫熏前后共有差异化合物1个,为4-甲基-5-噻唑乙醇。3.结构验证结果表明,贝母辛、王百合苷A、王百合苷B与焦亚硫酸钠反应的部分产物存在于其对应的硫熏样品中。对贝母辛的部分磺化产物进行重点分离制备,获得了100 mg的单体,同时利用核磁共振技术对其结构进行了鉴定并命名为磺酸贝母辛。4.细胞毒性结果表明,与正常对照组相比,硫熏前后9种百合科中药材水煎液均可不同程度的抑制L-02、HK-2和PC-12细胞的生长,但在相同剂量下没有显著性差异。斑马鱼模型急性毒性结果表明,在10和20 ng/尾剂量下,贝母辛对心血管的毒性作用大于磺酸贝母辛。在625、1250和2500 mg·L浓度下,浙贝母水煎液与硫熏浙贝母水煎液对肝脏均有一定毒性,但硫熏前后没有显著性差异。抗炎结果表明,与模型对照组相比,贝母辛、磺酸贝母辛、浙贝母水煎液、硫熏浙贝母水煎液均具有抗肺炎功效。同一浓度下贝母辛的抗肺炎功效优于磺酸贝母辛,相同低浓度下浙贝母水煎液硫熏后的抗肺炎功效优于硫熏前,浓度升高后硫熏前后浙贝母水煎液的抗肺炎功效无显著性差异。5.以磺酸贝母辛（m/z 508.27）作为贝母属的判别离子,二氢水合王百合苷A磺酸（m/z 497.09）、二氢水合王百合苷B磺酸（m/z 539.10）、王百合苷A二磺酸（m/z 561.06）、王百合苷B二磺酸（m/z 603.06）作为百合的判别离子,麦冬皂苷B亚硫酸酯（m/z 981.43）和ophiofurospiside K亚硫酸酯（m/z 1127.49）作为麦冬的判别离子,提取离子色谱图。结果显示,89批贝母中有8批浙贝母、5批平贝母、4批川贝母、5批湖北贝母和4批伊贝母检测到共有硫熏标志物,检出率为29.21%;19批百合中

关键词：硫磺熏蒸百合科中药材代谢组学化学成分硫熏标志物安全性评价市场检测

老鸦瓣属(百合科)的恢复:以形态性状的分支分析为依据

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植物分类学报 2005年第3期43卷 262-270页

作者：谭敦炎张震李新蓉洪德元中国科学院植物研究所系统与进化植物学重点实验室新疆农业大学林学院乌鲁木齐 830052 新疆农业大学林学院

老鸦瓣群(Amana群)是百合科中的一个东亚特有类群,仅分布在中国中东部、日本和朝鲜半岛。该类群在形态上与广义郁金香属Tulipa L.相似,但也具有与子房近等长的花柱以及2-3(-4)个苞片等与郁金香属不同的形态特征。有关该类群是否应置于... 详细信息

老鸦瓣群(Amana群)是百合科中的一个东亚特有类群,仅分布在中国中东部、日本和朝鲜半岛。该类群在形态上与广义郁金香属Tulipa L.相似,但也具有与子房近等长的花柱以及2-3(-4)个苞片等与郁金香属不同的形态特征。有关该类群是否应置于郁金香属中或是否应独立为属的问题长期以来存在争议。为了澄清该问题,我们对产于中国的Amana群进行了广泛的标本室和野外形态观察,并采用分支系统学方法,对该类群3个种以及郁金香属的其他15种植物(包括土耳其的3个种)的28个形态性状数据进行了分支分析。结果表明广义郁金香属并非是一个单系类群。Amana群与广义郁金香属的其他4个组***、sect. Eriostemones、sect. Leiostemones、sect. Tulipanum以及Lloydia属的两个种共同构成一个大支的3个分支。我们对广义郁金香属5个组共19种植物的ITS以及trnL-F分子序列综合分析的结果也表明:sect. Tulipanum、sect. Leiostemones、sect. Eriostemones和sect. Orithyia构成一大支,Amana群和猪牙花属的Erythronium sibiricum构成另一大支。因此,我们认为Amana群应从广义郁金香属中独立出来,恢复其老鸦瓣属Amana Honda作为属的分类地位。

关键词：老鸦瓣属百合科形态性状分支分析郁金香属

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万寿竹属(百合科)一新种——金佛山万寿竹

植物分类学报 2007年第4期45卷 583-586页

作者：李心正张大明洪德元系统与进化植物学国家重点实验室中国科学院植物研究所北京100093

描述了重庆市南川金佛山百合科Liliaceae一新种——金佛山万寿竹Disporum ***,***&***。该种与山东万寿竹*** ***相似,具卵形或椭圆形叶,顶生花序,花被片白色,开展,基部稍具浅囊;不同之处在于其茎高15–20cm,叶3–4片,集中于茎上部,叶... 详细信息

描述了重庆市南川金佛山百合科Liliaceae一新种——金佛山万寿竹Disporum ***,***&***。该种与山东万寿竹*** ***相似,具卵形或椭圆形叶,顶生花序,花被片白色,开展,基部稍具浅囊;不同之处在于其茎高15–20cm,叶3–4片,集中于茎上部,叶柄明显,长2–4mm,花被片内表面密布短柔毛。山东万寿竹只分布于山东半岛、朝鲜半岛以及日本。

关键词：万寿竹属金佛山万寿竹百合科新种重庆中国

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百合科药用植物种子发芽的研究

中草药 2000年第2期31卷 127-129页

作者：孙昌高方坚徐秀瑛浙江省中药研究所杭州310023

报道了不同温度对百合科药用植物种子萌发和休眠的影响 ,提出了不同种子发芽的温度范围、发芽适温、发芽所需天数及发芽率 ,对于中药材生产中掌握不同种子的发芽适温 ,确定合适的播种期具有指导意义。

关键词：百合科种子发芽温度药用植物

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蜘蛛抱蛋属(百合科)二新种

植物分类学报 2003年第4期41卷 381-386页

作者：李光照韦毅刚广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所桂林541006

报道了在广西发现的 2个百合科蜘蛛抱蛋属Aspidistra新种 ,即乳突蜘蛛抱蛋A .papillataG .Z .Li和环江蜘蛛抱蛋A .huanjiangensisG .Z .Li&Y .G .Wei。乳突蜘蛛抱蛋与大花蜘蛛抱蛋A .tonkinensis(Gagner.)F .T .Wang&K .Y .Lang近缘。... 详细信息

报道了在广西发现的 2个百合科蜘蛛抱蛋属Aspidistra新种 ,即乳突蜘蛛抱蛋A .papillataG .Z .Li和环江蜘蛛抱蛋A .huanjiangensisG .Z .Li&Y .G .Wei。乳突蜘蛛抱蛋与大花蜘蛛抱蛋A .tonkinensis(Gagner.)F .T .Wang&K .Y .Lang近缘。它们的共同特征是 :花单生 ;花被裂片两侧彼此覆盖 ;柱头盾状 ,边缘 3裂 ,上表面具 3条辐射状沟缝。不同点是 :乳突蜘蛛抱蛋植株较大花蜘蛛抱蛋的粗大 ;叶柄较粗 ;叶片椭圆形或长椭圆形 ;花被阔钟状 ,花被裂片外面淡紫色 ,内面紫色并具 7条沟纹 ;柱头表面灰白色 ,密布小乳状体。环江蜘蛛抱蛋与洞生蜘蛛抱蛋A .cavicolaD .Fang&K .C .Yen相似。这两种的共同特征是 :植株纤弱 ;叶片较小 ,长在 1 4cm以下 ,宽在 4.5cm以下。不同点是 :环江蜘蛛抱蛋的叶无锯齿 ;柱头平截 ,边缘三叉状深裂 ,裂片条形 ,上表面具 3条先端 2叉状的沟槽。

关键词：蜘蛛抱蛋属乳突蜘蛛抱蛋环江蜘蛛抱蛋新种广西中国百合科

贵州省39个县(区)百合科植物物种多样性及药用分析

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淮阴工学院学报 2022年第1期31卷 48-53页

作者：李伟忠梁春波梁彦涛檀龙颜贵州中医药大学药学院贵阳5500252

为研究贵州省39个县(区)百合科植物物种多样性,进而为贵州省百合科植物种质资源保护性开发及合理利用提供依据,基于贵州省第四次中药资源普查馆藏标本记录,获得贵州省39个县(区)百合科植物总目录,结合《中国药典》对百合科植物分布情况... 详细信息

为研究贵州省39个县(区)百合科植物物种多样性,进而为贵州省百合科植物种质资源保护性开发及合理利用提供依据,基于贵州省第四次中药资源普查馆藏标本记录,获得贵州省39个县(区)百合科植物总目录,结合《中国药典》对百合科植物分布情况、物种多样性及药用价值等进行分析。结果表明,百合科植物共计32属130种,主要分布在海拔500~1500 m的区域;物种数量最多的是道真县;属数量最多的县区是贵阳市乌当区,且菝葜属数量最多;入药部位以根及根茎类入药居多,功效以补虚药为主;贵州省39个县(区)的百合科植物中,百合、黄精、菝葜、吉祥草、重楼等植物具有较大的开发利用潜力。

关键词：贵州 39县(区) 百合科多样性应用

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内蒙古顶冰花属(百合科)一新种

植物分类学报 2003年第4期41卷 393-394页

作者：赵一之赵利清内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021

报道了产于贺兰山的顶冰花属 (百合科 )一新种———贺兰山顶冰花GageaalashanicaY .Z .Zhao&L .Q .Zhao。该种因柱头头状 ,鳞茎外皮上端向上延伸成圆筒状 ,抱茎 ,无附属小鳞茎 ,植物除基生叶外 ,茎上具有 3- 4枚附生叶 ,无明显总苞片... 详细信息

报道了产于贺兰山的顶冰花属 (百合科 )一新种———贺兰山顶冰花GageaalashanicaY .Z .Zhao&L .Q .Zhao。该种因柱头头状 ,鳞茎外皮上端向上延伸成圆筒状 ,抱茎 ,无附属小鳞茎 ,植物除基生叶外 ,茎上具有 3- 4枚附生叶 ,无明显总苞片而与新疆顶冰花G .neopopoviiGoloskokov相似 ,但基生叶 2枚 ,半圆筒形 ;鳞茎外皮向上延伸较短 ,长约 2 5cm ,易于区别。

关键词：内蒙古顶冰花属百合科新种贺兰山顶冰花

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甘肃省百合科饲用植物资源调查

牡丹江师范学院学报（自然科学版） 2023年第1期49卷 47-52页

作者：李彪巩红冬刘汉成甘肃民族师范学院化学与生命科学系甘肃合作747000

调查甘肃省百合科饲用植物的区系、生境情况及饲用价值.调查结果显示,甘肃省百合科饲用植物共有7属41种,区系为温带性质;绝大多数生活型为多年生草本,生长在荒漠、草原地带,饲用价值极高.

关键词：百合科饲用植物饲用价值

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太白山百合科药用植物资源多样性研究

陕西农业科学 2022年第2期68卷 60-64页

作者：李璟琦杨兆晨燕鑫鑫郝凯乐孙若辉陕西学前师范学院陕西西安710101

经过野外调查、标本鉴定和查阅资料等方法,对太白山北坡百合科药用植物资源的种类及分布、应用价值等多样性进行研究。结果表明:太白山北坡百合科药用植物有23属55种3变种,占秦岭百合科植物总属数的79.3%、总种数的50.4%,94.8%为草本植... 详细信息

经过野外调查、标本鉴定和查阅资料等方法,对太白山北坡百合科药用植物资源的种类及分布、应用价值等多样性进行研究。结果表明:太白山北坡百合科药用植物有23属55种3变种,占秦岭百合科植物总属数的79.3%、总种数的50.4%,94.8%为草本植物。对药用植物药用部位、药用功效进行分析,以根入药的植物最多,具有补益、清热、止咳等功效。有部分植物还有观赏价值和食用价值,其中,有22属42种3变种可作为观赏植物资源进行开发;有9属21种3变种植物具有食用价值。该研究为秦岭百合科药用植物资源开发利用及保护提供依据。

关键词：秦岭百合科药用植物