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白色念珠菌对口腔黏膜疾病恶性转化作用的研究进展

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华西口腔医学杂志 2020年第4期38卷 431-437页

作者：廖敏程磊周学东任彪口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科成都610041

口腔癌是头颈部最常见的恶性肿瘤,也是全世界十大最流行的恶性病损之一。口腔微生物感染是口腔癌重要的危险因素。白色念珠菌作为口腔最常见的机会性致病真菌,大量流行病学资料证实,白色念珠菌感染与口腔黏膜恶变存在密切联系,而相关动... 详细信息

口腔癌是头颈部最常见的恶性肿瘤,也是全世界十大最流行的恶性病损之一。口腔微生物感染是口腔癌重要的危险因素。白色念珠菌作为口腔最常见的机会性致病真菌,大量流行病学资料证实,白色念珠菌感染与口腔黏膜恶变存在密切联系,而相关动物实验也证实,白色念珠菌感染能促进上皮癌变。现有研究表明,白色念珠菌可能的促癌机制涉及破坏上皮屏障、产生致癌物质(包括亚硝胺、乙醛)、诱导慢性炎症反应、激活免疫反应等。然而,目前关于这些机制的深入研究还不够充分,一些假说尚存在一定的争议。因此,本文就目前白色念珠菌对口腔黏膜疾病恶性转化作用的相关研究成果作一综述,为进一步的研究和临床口腔癌的防治工作提供参考。

关键词：白色念珠菌口腔癌亚硝胺乙醛炎症反应白细胞介素-17

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白色念珠菌感染免疫应答的研究进展

中国免疫学杂志 2022年第24期38卷 3070-3072,F0003,F0004页

作者：羊玉林叶水文张楠(指导) 南昌大学第二附属医院检验科南昌330006

白色念珠菌是人体条件致病菌,当人体免疫力下降或病原菌侵入非正常寄居部位可引发严重感染。机体通过各种免疫应答机制防御与清除白色念珠菌感染,而后者的免疫逃避机制是临床上治疗白色念珠菌感染的重大挑战。本文就白色念珠菌感染免疫... 详细信息

白色念珠菌是人体条件致病菌,当人体免疫力下降或病原菌侵入非正常寄居部位可引发严重感染。机体通过各种免疫应答机制防御与清除白色念珠菌感染,而后者的免疫逃避机制是临床上治疗白色念珠菌感染的重大挑战。本文就白色念珠菌感染免疫应答的研究进展进行综述。

关键词：白色念珠菌先天性免疫免疫细胞细胞因子

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白色念珠菌胞外囊泡的组成及其功能研究进展

微生物学报 2022年第2期62卷 434-445页

作者：韦瑜程磊任彪口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科四川成都610000

念珠菌病指念珠菌属引起的急性、亚急性或慢性感染,通常累及皮肤、黏膜,也可累及内脏和各个系统器官,可造成严重后果,是目前发病率最高的深部真菌病。白色念珠菌是念珠菌种中最为常见的一种机会致病性真菌,近来,越来越多的研究证实了白... 详细信息

念珠菌病指念珠菌属引起的急性、亚急性或慢性感染,通常累及皮肤、黏膜,也可累及内脏和各个系统器官,可造成严重后果,是目前发病率最高的深部真菌病。白色念珠菌是念珠菌种中最为常见的一种机会致病性真菌,近来,越来越多的研究证实了白色念珠菌的细胞外囊泡对其致病性具有重要的作用,它参与重要蛋白、遗传物质的转运,影响白色念珠菌的耐药性,并与宿主细胞进行信息沟通,介导宿主的炎症、免疫反应;还有研究表明胞外囊泡具有免疫活性,可作为一种疫苗制剂使用。因此,本文就白色念珠菌胞外囊泡的组成及其功能总结综述,为未来进一步研究提供参考。

关键词：白色念珠菌胞外囊泡蛋白质脂质炎症反应免疫反应

白色念珠菌与口腔常见致病菌交互作用的研究进展

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华西口腔医学杂志 2019年第6期37卷 671-676页

作者：邓凌薛晶蒋丽邹玲李伟口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院全科门诊成都610041

越来越多的微生物组研究使人们能够更好地理解拮抗和协同的微生物相互作用是如何影响疾病结果的。白色念珠菌是人类口腔微生态系常见的机会性病原体。在健康口腔环境中白色念珠菌具有明显影响口腔细菌生态系与宿主之间平衡的潜力,从而... 详细信息

越来越多的微生物组研究使人们能够更好地理解拮抗和协同的微生物相互作用是如何影响疾病结果的。白色念珠菌是人类口腔微生态系常见的机会性病原体。在健康口腔环境中白色念珠菌具有明显影响口腔细菌生态系与宿主之间平衡的潜力,从而导致口腔疾病的发生、发展。本文对白色念珠菌与口腔主要常见致病菌交互作用的研究进行综述,以期更好地理解口腔感染性疾病的本质。

关键词：白色念珠菌细菌交互作用

白色念珠菌中几丁质合酶CHS3对菌丝生长及致病性的影响

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微生物学杂志 2023年第1期43卷 92-97页

作者：刘佳韩琦北京中医药大学生命科学学院北京102488

CHS3是催化白色念珠菌(Candida albicans)几丁质合成的关键酶,构建白色念珠菌几丁质合酶CHS3基因缺失菌株,确定CHS3的功能及对致病性的影响。以野生型白色念珠菌SC5314为母本菌株,通过SAT1-flipper技术构建chs3Δ/Δ突变体,对该突变体... 详细信息

CHS3是催化白色念珠菌(Candida albicans)几丁质合成的关键酶,构建白色念珠菌几丁质合酶CHS3基因缺失菌株,确定CHS3的功能及对致病性的影响。以野生型白色念珠菌SC5314为母本菌株,通过SAT1-flipper技术构建chs3Δ/Δ突变体,对该突变体在小鼠系统性感染模型中的毒力进行检测,并对该突变体的毒力相关表型进行分析。结果表明,chs3Δ/Δ突变体的细胞壁几丁质含量下降、菌丝生长缺陷以及在小鼠系统性感染模型中的毒力减弱。CHS3可能通过调控白色念珠菌的菌丝生长,从而影响白色念珠菌的致病性。

关键词：白色念珠菌几丁质几丁质合酶CHS3 菌丝生长致病性

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白色念珠菌的致病和耐药机制研究进展

中国现代应用药学 2021年第8期38卷 1021-1024页

作者：杨欣孙欣无锡市第二人民医院药剂科江苏无锡214002

白色念珠菌是临床念珠菌感染最常见的分离株,可引起浅表性感染甚至危及生命的深部感染。近年来,针对白色念珠菌感染药物治疗的相关研究不断开展,新的作用靶点被深入研究,一些新型抗真菌化合物被发现。本研究对白色念珠菌的致病和耐药机... 详细信息

白色念珠菌是临床念珠菌感染最常见的分离株,可引起浅表性感染甚至危及生命的深部感染。近年来,针对白色念珠菌感染药物治疗的相关研究不断开展,新的作用靶点被深入研究,一些新型抗真菌化合物被发现。本研究对白色念珠菌的致病和耐药机制等研究进行简要综述,旨在为临床白色念珠菌感染的治疗提供新的研究策略。

关键词：白色念珠菌致病机制耐药机制

白色念珠菌毒素通过促进细胞焦亡加重肠易激综合征的病理生理异常

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白色念珠菌毒素通过促进细胞焦亡加重肠易激综合征的病理生理异常

作者：刘澳华中科技大学

学位级别：硕士

目的:肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种很常见的功能性消化病,其患病率越来越高,但它的致病机制和临床治疗仍然不令人满意。目前肠道微生物的重要组分——真菌,与IBS的关系正逐渐引起大家的重视。细胞焦亡作为一种细... 详细信息

目的:肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种很常见的功能性消化病,其患病率越来越高,但它的致病机制和临床治疗仍然不令人满意。目前肠道微生物的重要组分——真菌,与IBS的关系正逐渐引起大家的重视。细胞焦亡作为一种细胞发生程序性死亡的方式,与肠道的损伤和炎症等密切相关。本文主要研究人体肠道真菌的主要成员,白色念珠菌是否能够加重IBS,以及其重要的致病分子白色念珠菌毒素是否是通过细胞焦亡途径来加重IBS。方法:选用束缚应激小鼠模型,并给予PBS、野生型白色念珠菌和白色念珠菌毒素编码基因ece1敲除的菌株进行灌胃处理,观察不同处理下的小鼠的表现。(1)用q RT-PCR、Western blot和Ussing chamber评估小鼠的肠道屏障功能。(2)用腹壁回撤反射实验评估小鼠的内脏敏感性,用免疫荧光的方法检测肥大细胞数目变化。(3)用HE染色、q RT-PCR和ELISA(Enzyme-linked immune sorbent assay,酶联免疫吸附测定)方法观察小鼠肠道炎症情况、绒毛高度和炎性因子的表达。(4)用Western blot检测小鼠的细胞焦亡相关蛋白的表达。构建细胞焦亡关键基因Gsdmd敲除小鼠,检测在PBS、野生型菌株和ece1敲除菌株处理后,小鼠的肠道通透性、内脏敏感性和炎性状态的改变。最后研究毒素直接干预Gsdmd和Gsdmd小鼠类器官后,炎性因子TNF-α的表达和类器官存活率的变化。结果:在束缚情况下,相比于PBS和ece1敲除菌株,野生型白色念珠菌能通过白色念珠菌毒素来增加小鼠的肠道通透性和内脏敏感性,激活低度炎性状态。敲除细胞焦亡关键基因Gsdmd则阻止了白色念珠菌毒素的致病作用和对类器官的损伤。结论:白色念珠菌能够分泌白色念珠菌毒素,通过细胞焦亡通路来加重IBS的病理生理异常,这为进一步探讨IBS的发病机制和深入治疗提供了崭新的证据。

关键词：肠易激综合征真菌白色念珠菌白色念珠菌毒素细胞焦亡

白色念珠菌去乙酰化蛋白酶HDA1与抑制剂作用机制的结构生物学研究

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白色念珠菌去乙酰化蛋白酶HDA1与抑制剂作用机制的结构生物学研究

作者：杨惠西北大学

学位级别：硕士

侵袭性真菌感染已成为公共卫生领域的重大威胁,白色念珠菌感染在临床上表现十分严峻,感染而引起的死亡率高。目前,临床上常用的唑类药物治疗白色念珠菌,白色念珠菌对药物耐药性的出现使得现有治疗方案的治疗效果不断降低。降低白色念珠... 详细信息

侵袭性真菌感染已成为公共卫生领域的重大威胁,白色念珠菌感染在临床上表现十分严峻,感染而引起的死亡率高。目前,临床上常用的唑类药物治疗白色念珠菌,白色念珠菌对药物耐药性的出现使得现有治疗方案的治疗效果不断降低。降低白色念珠的耐药性以及寻找新的治疗策略是控制白色念珠菌感染的关键。研究表明,白色念珠菌HDA1蛋白是一个重要的药物靶点,HDA1与白念珠菌的菌丝形态转变,白色—不透明型过渡等毒力特征有关,hda1基因的缺失可以降低白念珠菌对唑类药物的耐药性。本文通过结构生物学的方法研究抑制剂对HDA1蛋白的抑制机制,为进一步通过结构基础设计和筛选出高选择性抑制剂提供有力支持。抑制剂对人源HDAC蛋白有副作用,需要验证抑制剂对白色念珠菌HDA1蛋白的选择性。将抑制剂与数据库中同源性高的人源HDAC6,HDAC7,HDAC8进行结合实验,筛选出选择性抑制剂,为抑制剂结构的进一步设计提供方向。论文通过分子生物学的方法构建了p ET21a-sumo-hdac6 cd2,p ET21a-sumo-hdac7a and p ET21a-sumo-hdac8重组质粒,并通过原核系统对真核生物蛋白进行表达。利用成熟的蛋白提纯技术,对蛋白进行柱层析分离,最终得到高纯度的HDA1-N蛋白,H DAC8蛋白以及HDAC7A蛋白,HDAC6 CD2蛋白由于易形成多聚,暂时未能得到单体。对HDA1-N蛋白与11种抑制剂进行结合实验分析,热漂移实验结果表明A0,C3,R1,E2,A3抑制剂均表现出对HDA1-N有较强的结合能力,结合能力最好的是R1。A2抑制剂使得对HDA1-N蛋白结构破坏,热力学不稳定。热漂移数据与IC数据吻合。同样,在HDAC8与11种抑制剂的结合实验中发现,A0,C3,C8,R1,A1,A2,E2表现出对HDAC8较强的结合能力。通过差值分析,A0,C3,R1对HDA1-N的结合能力较HDAC8高,选择性好。同时,A2,A3表现出对HDAC8的高选择性。A0,C3,R1对HDAC7A有结合,R1对HDA1-N较HDAC7A更具选择性。HDA1-N与抑制剂的共晶是通过浸泡法得到。在上海光源同步辐射中心得到了高分辨率数据并解析了HDA1-N Apo以及HDA1-N与五个抑制剂A0,C8,R1,D1,E2的复合结构。通过对HDA1-N与HDAC6 CD2,HDAC7A,HDAC8结构分析,HDA1-N的结合口袋开口面积较HDAC6 CD2,HDAC7A大,其口袋周围呈现疏水性。口袋外侧Loop1序列中HDA1-N多出4个氨基酸,这为设计选择性抑制剂提供了结构基础。通过对五个复合结构进行分析,抑制剂与HDA1-N的结合口袋中的His151,His152,Phe161,His193,Tyr222,Ser109有相互作用力,抑制了HDA1-N的去乙酰化能力,这为进一步设计突变验证抑制机制提供了重要参考。通过E2抑制剂与HDA1-N的Loop1结构的分析,E2可能与Loop1的Glu24形成类氢键相互作用,说明HDA1-N的Loop1与抑制剂的相互作用是提高选择性的关键。

关键词：白色念珠菌 HDA1 抑制剂蛋白质结晶复合晶体结

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白色念珠菌快速鉴定方法的临床应用研究

白色念珠菌快速鉴定方法的临床应用研究

作者：阳春丽大理大学

学位级别：硕士

目的随着有创操作、外科手术的广泛开展以及抗菌药物、免疫抑制剂的大范围使用,免疫低下人群不断增加,导致白色念珠菌血症发病率、病死率逐年升高。而传统的白色念珠菌血症病原学诊断方法耗时较长,较难满足临床及时救治患者的需求,亟需... 详细信息

目的随着有创操作、外科手术的广泛开展以及抗菌药物、免疫抑制剂的大范围使用,免疫低下人群不断增加,导致白色念珠菌血症发病率、病死率逐年升高。而传统的白色念珠菌血症病原学诊断方法耗时较长,较难满足临床及时救治患者的需求,亟需快速方法来鉴定白色念珠菌。本研究采用模拟白色念珠菌血培养阳性样本,以Vitek2 Compact全自动细菌系统鉴定方法为参照,对比分析PNA-FISH技术、MALDI-TOF MS技术鉴定白色念珠菌的符合率、时效性与成本效益,以探讨上述两种快速方法的临床应用可行性。方法1、回顾性分析2017年1月至2021年12月昆明市第一人民医院门诊及住院部各临床科室念珠菌血症的病原菌分离情况,以及临床分布特征,以了解本院念珠菌感染现状。2、复苏白色念珠菌ATCC 14053、热带念珠菌ATCC 750、光滑念珠菌ATCC 15126,克柔念珠菌ATCC 14243、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、表皮葡萄球菌ATCC 12228、粪肠球菌ATCC 29212、大肠埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、铜绿假单胞菌ATCC 27853等10株标准菌株和临床分离白色念珠菌100株。用复苏菌株,通过BACT/ALENT3D-240全自动血培养系统,将其制备成模拟血培养阳性样本。3、用达安基因公司提供的PNA-FISH探针序列对模拟血培养阳性样本进行PNA-FISH方法直接检测目标念珠菌;同时先将模拟血培养阳性样本转种沙保弱平板培养18-24小时,分离出单个新鲜菌落,采用MALDI-TOF MS进行鉴定;比较PNA-FISH方法和MALDI-TOF MS方法与Vitek 2 Compact全自动细菌系统鉴定白色念珠菌的符合率,分析上述两种快速鉴定方法的的时间效益和鉴定成本。结果1、2017-2021年我院住院及门诊共送检血培养标本38338份,阳性标本2265份,剔除同一患者血培养中分离的重复菌株,检出真菌28株,血培养阳性率为5.91%,真菌分离率为0.07%。其中,2017年真菌分离率最高,占0.11%,2019年真菌分离率最低,占0.03%。2、2017-2021年阳性血培养中分离非重复真菌28株,其中念珠菌属25株(89.29%),新型隐球菌3株(10.71%)。血培养阳性分离念珠菌中,以白色念珠菌为主,检出12株(48%),其次是光滑念珠菌5株(20%)、都柏林念珠菌4株(16%)、近平滑念珠菌2株(8%)、热带念珠菌1株以及未鉴别到种水平的念珠菌属1株,均占4%。3、念珠菌血流感染患者年龄分布,以809岁高龄患者为主,有10例占40%;其次是609岁老年患者5例,占20%;409岁患者9例,占36%;09岁患者1例,占4%。4、念珠菌血症患者科室分布,重症监护室最多,有12例(48%),其次分别来自泌尿外科5例(20%)、老年病科3例(12%)、肾内科2例(8%),其余分布于消化内科、肝胆胰外科、心胸外科,均为1例(4%)。5、采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪YST卡鉴定念珠菌,25株念珠菌的平均鉴定时间为43.03±21.82小时,12株白色念珠菌的平均鉴定时间为40.98±14.81小时。6、念珠菌血症患者25例,以该病为首要病因的死亡患者12例,致死率达48%;白色念珠菌血流感染患者12例,以该病为首要病因的死亡患者6例,致死率达50%。7、100株白色念珠菌模拟血培养样本,PNA-FISH检测结果与Vitek2 Compact全自动细菌鉴定方法符合率为98%,平均鉴定时间为2.5±0.5小时,每个标本鉴定成本约为60元。8、100株白色念珠菌模拟血培养样本,转种沙保弱平板分离出单个新鲜菌落,采用MALDI-TOF MS鉴定。结果显示,MALDI-TOF MS鉴定100株白色念珠菌最低分值为2.008,平均分值为2.191,均能准确鉴定到白色念珠菌种水平及以上,和Vitek2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率达100%,从血培养报阳开始计算鉴定时间,平均鉴定时间为22±0.6小时,每个标本鉴定成本约为30元。结论1、本院念珠菌血症病原菌分布以白色念珠菌为主,致死率极高。2、PNA-FISH方法鉴定白色念珠菌,设备简单,鉴定结果可靠,相较于传统鉴定方法和MALDI-TOF MS方法,鉴定时间显著缩短,有较好的临床应用前景。

关键词：白色念珠菌鉴定 PNA-FISH技术 MALDI-TOF MS分析