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西伯利亚鲟海豚链球菌和鲟疱疹病毒Ⅱ型混合感染的诊断与病理损伤

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水产学报 2020年第9期44卷 1408-1415页

作者：程子瑄耿毅陈垚焱邓李霜汪开毓康振亚黄小丽陈德芳欧阳萍汪蕉四川农业大学动物医学院四川农业大学动物科技学院

2018年8月,四川彭州与邛崃的养殖西伯利亚鲟发生一种以出血为临床特征,高死亡率的传染病,为明确其病因,本研究对发病鲟的肝脏、肾脏进行病原菌分离、鉴定和鲟疱疹病毒Ⅱ型(AciHV-2)的PCR检测。从患病鲟体内分离到2株G+链状球菌,其16S r... 详细信息

2018年8月,四川彭州与邛崃的养殖西伯利亚鲟发生一种以出血为临床特征,高死亡率的传染病,为明确其病因,本研究对发病鲟的肝脏、肾脏进行病原菌分离、鉴定和鲟疱疹病毒Ⅱ型(AciHV-2)的PCR检测。从患病鲟体内分离到2株G+链状球菌,其16S rRNA序列(MN416231、MN416230)与GenBank中海豚链球菌16S rRNA序列同源性达99%,在以16S rRNA序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链球菌聚为一支;同时基于海豚链球菌lctO基因的特异性PCR检测为阳性,鉴定2株分离菌为海豚链球菌。提取患病鲟肝脏、肾脏组织DNA进行AciHV-2特异性PCR检测,扩增出501 bp的特异性条带,在以AciHV-2 polymerase基因序列构建的系统发育树上,检测样本与AciHV-2聚为一支。病理组织学上,患病鲟的多组织器官发生明显损伤,尤其是肝脏、肾脏、鳃、脾脏和肠的损伤较为严重,表现为明显的变性、坏死、出血以及炎症细胞浸润;电镜下,观察到肝脏、肾脏组织内大量直径200～220 nm的疱疹病毒样颗粒与0.7～0.8μm的链球菌入侵细胞,并导致细胞损伤。综上,诊断患病西伯利亚鲟的病因是海豚链球菌与AciHV-2混合感染。

关键词：西伯利亚鲟海豚链球菌鲟疱疹病毒Ⅱ型分离鉴定病理损伤

杂交鲟鲁氏耶尔森氏菌的分离鉴定及感染的病理损伤

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华南农业大学学报 2018年第4期39卷 13-19页

作者：曹师琪耿毅余泽辉郑李平雷雪平陈德芳欧阳萍黄小丽黄彦臻四川农业大学动物医学院四川温江611130 四川农业大学动物科技学院四川温江611130

【目的】探究四川省邛崃市某养殖场的杂交鲟Acipenser schrencki♀×***♂暴发的传染病病因。【方法】从病鱼的肝、脾和肾组织中进行病原菌的分离,结合理化特征和16S rRNA及gyrB基因序列分析对其进行鉴定,同时进行药敏试验及病理损伤观... 详细信息

【目的】探究四川省邛崃市某养殖场的杂交鲟Acipenser schrencki♀×***♂暴发的传染病病因。【方法】从病鱼的肝、脾和肾组织中进行病原菌的分离,结合理化特征和16S rRNA及gyrB基因序列分析对其进行鉴定,同时进行药敏试验及病理损伤观察。【结果】分离到1株G–优势菌(YC160412),通过理化特征分析,16S rRNA及gyr B基因序列分析鉴定分离菌为鲁氏耶尔森氏菌Yersinia ruckeri;药敏试验表明,该病原菌对头孢唑啉、氨苄西林、氟苯尼考等抗生素敏感,对阿莫西林、红霉素等耐药;病理组织学观察发现,鲁氏耶尔森氏菌感染杂交鲟对多组织器官都造成明显的损伤,尤其是肝、脾、肾、肠和鳃,表现为明显的变性、坏死、出血及炎症细胞的浸润,同时在肝、脾和肾组织内有大量病菌分布。【结论】证实了鲁氏耶尔森氏菌是本次疫情的病因,其感染引起杂交鲟多组织器官功能障碍而死亡。

关键词：杂交鲟鲁氏耶尔森氏菌分离鉴定病理损伤

锦鲤疱疹病毒感染鲤鱼的动态病理损伤及病原组织分布

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云南农业大学学报（自然科学版） 2018年第5期33卷 884-890页

作者：何汶璐李根康慧敏何嘉乐杨壮志阳瑞雪汪开毓耿毅欧阳萍四川农业大学动物医学院四川成都611130 成都市农林科学院水产研究所四川成都611130

【目的】研究锦鲤疱疹病毒(CyHV-3)感染鲤鱼的侵染规律与动态病理损伤,为CyHV-3致病机理的研究奠定实验基础,同时为有效防控锦鲤疱疹病毒病提供参考。【方法】采用浸泡法对鲤鱼进行人工感染试验,于不同时间点剖检采样,进行动态病理学观... 详细信息

【目的】研究锦鲤疱疹病毒(CyHV-3)感染鲤鱼的侵染规律与动态病理损伤,为CyHV-3致病机理的研究奠定实验基础,同时为有效防控锦鲤疱疹病毒病提供参考。【方法】采用浸泡法对鲤鱼进行人工感染试验,于不同时间点剖检采样,进行动态病理学观察和荧光定量PCR检测,选择具有代表性的外部(鳃)和内部器官(肾脏)进行动态病理学观察。【结果】鳃小片呼吸上皮细胞增生严重并伴有大量炎症细胞浸润,肾脏主要表现为间质性肾炎,肾小管上皮细胞变性坏死。试验鱼在感染前期病毒含量最高的是鳃组织,肠道中未检测到病毒,随着感染时间的延长,各组织内的病毒含量逐步增加。病毒感染10 d后,鳃、肾脏以及脑组织的病毒含量达到最高值,随后病毒量保持稳定。脾脏、肝脏和肠道中病毒含量的最高值出现在感染第14天。【结论】CyHV-3在鲤鱼体内先入侵鳃组织,随后到达肾脏、脾脏等全身各组织器官中。

关键词：锦鲤疱疹病毒鲤鱼病理损伤病原组织分布

似鲶高原鳅温和气单胞菌的分离鉴定及其感染的病理损伤

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四川动物 2014年第5期33卷 708-714页

作者：徐敬钧耿毅汪开毓陈成周燕陈德芳黄小丽蒲云丹四川农业大学动物医学院四川雅安625014

2013年9月,四川雅安某似鲶高原鳅养殖场发生以体表出血、皮肤溃疡、内脏器官肿大、出血与坏死为特点的疾病。从自然发病的似鲶高原鳅肝与肾分离到1株G-短杆菌（XJJ130928）,其在BHI平板上28℃培养24 h,形成灰白色、表面光滑、边缘整齐... 详细信息

2013年9月,四川雅安某似鲶高原鳅养殖场发生以体表出血、皮肤溃疡、内脏器官肿大、出血与坏死为特点的疾病。从自然发病的似鲶高原鳅肝与肾分离到1株G-短杆菌（XJJ130928）,其在BHI平板上28℃培养24 h,形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、半透明状微隆的圆形菌落,人工感染证实其为本次似鲶高原鳅发病的病原菌。根据分离菌株的形态学和生理生化检测结果初步判定其为温和气单胞菌Aeromonas sobria;进一步的16S rRNA和gyrB基因序列分析表明,分离株的16S rRNA与gyrB基因序列（GenBank登录号：KF761305与KJ139988）在GenBank中进行Blast比对与***同源性最高。在以分离株16S rRNA和gyrB基因序列及GenBank中同源性较高的序列构建的系统发育树上,分离株与***聚为一族,其同源性分别为96.0%-99.0%与94.5%-98.0%,结合生理生化特性鉴定分离菌为***。该菌对头孢西丁、亚胺培南、强力霉素、氟苯尼考和氧氟沙星等敏感,对磺胺甲基异恶唑、洛美沙星、环丙沙星中度敏感,对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素耐药。组织病理学观察发现,***感染似鲶高原鳅对多组织器官都造成明显的病理损伤,尤其是肝、肾、脾、肠的损伤较为严重,表现为明显的淤血、出血,变性,坏死及炎症细胞浸润。

关键词：似鲶高原鳅温和气单胞菌 16S rRNA gyrB 病理损伤

杂交鲇恶臭假单胞菌的分离鉴定及其病理损伤研究

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水生生物学报 2017年第2期41卷 371-378页

作者：段亚佼黄小丽詹瑰然樊威段靖赵一璘邓永强耿毅陈德芳汪开毓四川农业大学动物科技学院水产系成都611130 云南省会泽县水产工作站曲靖654200 四川省内江市农业科学院内江641000 四川省动物疫病预防控制中心成都610041 四川农业大学动物医学院成都611130

为确定一起杂交鲇皮肤溃疡症的病原,实验从病鱼体内分离到几株优势菌(DYJ140914-DYJ140917),根据4株分离菌的形态、生理生化特性,结合16S rRNA和gyrB基因序列测定(Gen Bank登录号分别为KP693689和KP693690)与系统发育分析,将其鉴定为恶... 详细信息

为确定一起杂交鲇皮肤溃疡症的病原,实验从病鱼体内分离到几株优势菌(DYJ140914-DYJ140917),根据4株分离菌的形态、生理生化特性,结合16S rRNA和gyrB基因序列测定(Gen Bank登录号分别为KP693689和KP693690)与系统发育分析,将其鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。在此基础上以腹腔注射的方式进行人工感染试验,证实其为杂交鲇溃疡症的病原菌。病鱼组织器官具有典型的病理变化,其主要靶器官为肝脏、皮肤肌肉以及肾间质,分别引起多灶性坏死性肝炎、坏死性肌炎及坏死性间质性肾炎。此外,还可引起心外膜、心内膜炎及坏死性脾炎。药敏结果显示该菌对强力霉素、诺氟沙星和左氧氟沙星等药物敏感;对青霉素、氟苯尼考、磺胺甲基异恶唑、头孢西丁、阿奇霉素等药物耐药。

关键词：杂交鲇恶臭假单胞菌 16S rRNA gyrB 病理损伤

肉鸡热应激病理损伤与应激蛋白(HSP70)相关性研究

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中国农业科学 2004年第2期37卷 301-305页

作者：鲍恩东龚远英 J.Hartung 付旭彬王小军张海涛王志亮农业部青岛动物检疫所南京210095 南京农业大学动物医学院德国汉诺威兽医学院动物卫生和动物福利研究所青岛266032

通过血液临床病理学、组织学和免疫组织化学检测技术,对AA肉鸡进行了为期10 h的急性热应激,观察分析了高热应激状态下受试鸡组织损伤及其与HSP70的相关性。热应激受试鸡组织脏器在应激初期即开始出现较明显的组织病理学改变,表现为心肌... 详细信息

通过血液临床病理学、组织学和免疫组织化学检测技术,对AA肉鸡进行了为期10 h的急性热应激,观察分析了高热应激状态下受试鸡组织损伤及其与HSP70的相关性。热应激受试鸡组织脏器在应激初期即开始出现较明显的组织病理学改变,表现为心肌纤维、肾小管上皮细胞等呈现不同程度的变性、坏死等退行性变化;外周血液中反映受试鸡心肌等细胞组织损伤的肌酸激酶(对照)活性显著升高;反映鸡体基础代谢水平的甲状腺素T3和T4、胰岛素则呈现不同程度的下降趋势。应激持续较长时间(10 h)后受试鸡外周血液中对照含量下降的幅度明显趋缓的现象可能与持续应激状态下心肌纤维内产生大量HSP70而产生保护性反应有关,HSP70在各组织脏器血管壁上的强阳性分布提示HSP70与血管功能密切相关。

关键词：肉鸡应激蛋白病理损伤免疫组织化学热应激

板蓝根对流感病毒FM1所致肺炎小鼠病理损伤修复作用的研究

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中华中医药杂志 2017年第8期32卷 3684-3687页

作者：程淼曹鸿云王成祥徐红日北京中医药大学东直门医院呼吸科北京100700 北京王府中西医结合医院急诊科北京102209

目的:动态观察板蓝根对流感病毒感染所致小鼠炎性因子的变化及对气管、肺组织病理损伤的影响。方法:建立流感病毒肺适应株(FM1)感染的肺炎小鼠模型,在FM1株感染1、3、5、7d,采用免疫组化方法观察空白对照组、模型组和板蓝根组小鼠肺组织... 详细信息

目的:动态观察板蓝根对流感病毒感染所致小鼠炎性因子的变化及对气管、肺组织病理损伤的影响。方法:建立流感病毒肺适应株(FM1)感染的肺炎小鼠模型,在FM1株感染1、3、5、7d,采用免疫组化方法观察空白对照组、模型组和板蓝根组小鼠肺组织中TNF-α、IL-6、和IFN-γ抗原分布。并在光学显微镜和气管扫描电镜下观察各组动物肺组织病变情况。结果:FM1感染后第3、5天小鼠肺组织中TNF-α、IL-6和IFN-γ明显增加(P病理损伤。

关键词：板蓝根流感病毒FM1株病理损伤电镜

棘胸蛙脑膜炎败血伊丽莎白菌的分离鉴定及其感染的病理损伤

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浙江农业学报 2018年第3期30卷 371-377页

作者：雷雪平耿毅余泽辉郑李平曹师琪黄小丽陈德芳欧阳萍刘恺睿四川农业大学动物医学院四川成都611134 四川农业大学水产系四川成都611134

2016年4月四川雅安一棘胸蛙(Quasipaa spinosa)养殖场暴发一种临床特征表现为白内障、体表溃疡和神经症状的传染病。为明确此次流行病病因,本研究进行了病原菌分离、人工感染、分离菌理化特性与16S r DNA基因序列分析。结果从患病蛙肝... 详细信息

2016年4月四川雅安一棘胸蛙(Quasipaa spinosa)养殖场暴发一种临床特征表现为白内障、体表溃疡和神经症状的传染病。为明确此次流行病病因,本研究进行了病原菌分离、人工感染、分离菌理化特性与16S r DNA基因序列分析。结果从患病蛙肝、脾、肾中分离到一株G^-短杆菌(CM160701);将其腹腔注射感染健康棘胸蛙表现出与自然发病蛙相似症状。该菌的LD_(50)为1.19×10~6cfu·只^(-1);通过理化特性与16S r DNA基因序列分析鉴定分离菌为脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica);其对氟苯尼考敏感,对恩诺沙星、多西环素、阿莫西林等多种药物耐受。病理组织学观察发现,其感染对全身多组织器官造成损伤,表现出明显的变性、坏死和炎症反应,尤以脑、肝、脾、心和肾损伤严重。该研究证实了脑膜炎败血伊丽莎白菌是本次疫情的病因,其感染引起棘胸蛙全身性损伤导致多组织器官功能障碍而死亡。

关键词：棘胸蛙脑膜炎败血伊丽莎白菌生物学特性病理损伤

齐口裂腹鱼无乳链球菌的分离鉴定及其感染的病理损伤

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中国水产科学 2014年第6期21卷 1244-1252页

作者：余泽辉张佳耿毅邓梦玲汪开毓黄小丽陈德芳王均四川农业大学动物医学院

2012–2013年四川齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)养殖场流行一种临床特征为突眼、体表出血和神经症状的传染病,在肝、肾涂片检查中发现链状G+球菌。从自然发病齐口裂腹鱼分离到2株形态与涂片检查一致的G+球菌(DML120817,YZH130830)... 详细信息

2012–2013年四川齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)养殖场流行一种临床特征为突眼、体表出血和神经症状的传染病,在肝、肾涂片检查中发现链状G+球菌。从自然发病齐口裂腹鱼分离到2株形态与涂片检查一致的G+球菌(DML120817,YZH130830),其在脑心浸液培养基(BHI)平板上28℃培养48 h,形成白色圆形、表面光滑、边缘整齐的针尖大小菌落。经人工感染实验证实分离菌株为该病的病原菌。根据分离菌株的形态学和生理生化检测结果初步判定其为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);16S r RNA基因序列分析表明,2分离株(Gen Bank登录号分别为KF773744和KF761304)与Gen Bank中无乳链球菌(***)16S r DNA序列同源性达96.5%以上。在以分离菌16S r DNA序列(Gen Bank登录号分别为KF773744和KF761304)及其Gen Bank中同源性较高的链球菌16S r DNA序列构建的系统发育树上,分离菌与无乳链球菌聚为一族;同时在基于无乳链球菌cfb基因进行的特异性PCR检测中,分离菌均为阳性,进而鉴定2株分离菌为无乳链球菌。2株无乳链球菌对强力霉素、阿莫西林、先锋霉素V、氧氟沙星和左氧氟沙星等均敏感,但在新霉素与丁胺卡拉霉素上存在差异。病理学观察发现,无乳链球菌感染齐口裂腹鱼对多组织器官都造成明显的病理损伤,尤其是肝、肾、脑的损伤较为严重,表现为明显的变性、坏死以及炎症细胞浸润,且细菌侵入肝、肾、脾以及神经元细胞内,导致线粒体、内质网等细胞器损伤。

关键词：齐口裂腹鱼无乳链球菌 16S r DNA cfb基因病理损伤