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12例新型冠状病毒感染儿童病毒核酸和细胞因子检测分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第8期40卷 574-578页

作者：李旭芳房春晓杨花梅陈敏霞佘兰辉龚余曾凡森叶家卫谭丽梅钟倩刘玲丽王艳玲徐翼广州市妇女儿童医疗中心感染性疾病科 510120

目的分析新型冠状病毒(2019-nCoV)感染儿童的病毒核酸和细胞因子检测情况。方法回顾性分析2020年1—4月期间,广州市妇女儿童医疗中心收治的2019-nCoV感染确诊儿童病例的临床和实验室资料。隔日采集咽拭子和肛拭子,荧光定量PCR法检测咽... 详细信息

目的分析新型冠状病毒(2019-nCoV)感染儿童的病毒核酸和细胞因子检测情况。方法回顾性分析2020年1—4月期间,广州市妇女儿童医疗中心收治的2019-nCoV感染确诊儿童病例的临床和实验室资料。隔日采集咽拭子和肛拭子,荧光定量PCR法检测咽拭子和肛拭子2019-nCoV核酸。流式细胞术检测病程早期(咽拭子和肛拭子病毒核酸检测均为阳性)、中期(咽拭子病毒核酸阴性而肛拭子核酸仍阳性)、恢复期(咽拭子和肛拭子病毒核酸检测均阴性)血清细胞因子IFN-γ/IL-1β/IL-2/IL-4/IL-5/IL-6/IL-8/IL-10/IL-12p70/IL-17A/IL-17F/IL-22/TNF-α/TNF-β水平。结果共12例患儿纳入本研究。男∶女=5∶1;平均年龄(7.0±4.3)岁;临床分型无症状感染2例,轻型5例,普通型5例,无重症及危重症患者。9例我院初诊患儿咽拭子和肛拭子病毒核酸最初呈平行阳性状态,肛拭子排毒中位数时间长于咽拭子排毒时间[32(4.5,45.0)d vs 3(2,9)d,Z=11.0,P=0.010];肛拭子较咽拭子排毒时间差值中位数长25.5(1.5,42.8)d。病程不同时期(早期、中期、恢复期)血清细胞因子IL-17A、IL-4和IL-5总体水平比较差异有统计学意义(Z或F,P值分别为8.33,0.016;5.36,0.010;6.56,0.004),但主要在病程中期明显升高。而IL-17F、IL-2、IL-22在病程的早、中、恢复期均有升高,但病程各组间比较差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论肠道排毒时间较长,尽管尚未确定感染性,但对防控提出了更高要求。Th2细胞和Th17细胞分泌的细胞因子参与了2019-nCoV感染后的非重症感染儿童的免疫应答过程,监测儿童患者的病毒排出情况和细胞因子变化,对于判断患者的病情有较好的参考价值。

关键词：新型冠状病毒细胞因子病毒核酸儿童

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医院污水中SARS冠状病毒核酸的检验

中华预防医学杂志 2004年第4期38卷 257-260页

作者：王新为李劲松郭侹凯甄蓓孔庆鑫易浜李忠宋农金敏肖文珺朱秀美古长庆尹静魏巍姚伟刘超李鉴峰欧国荣王民年房彤宇王贵杰邱耀辉吴海环晁福寰李君文军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津300050 军事医学科学院微生物流行病研究所北京小汤山医院军事医学科学院科技部中国人民解放军第309医院

目的　了解收治SARS病人的定点医院污水中是否含有病毒和病毒核酸。方法　采用载阳电荷滤材吸附浓集污水中的SARS冠状病毒 ,消毒前浓集污水 2 5L ,消毒后 2 5～ 5 0L ;采用VERO细胞培养及RT -PCR技术检测SARS冠状病毒。结果　建立的阳... 详细信息

目的　了解收治SARS病人的定点医院污水中是否含有病毒和病毒核酸。方法　采用载阳电荷滤材吸附浓集污水中的SARS冠状病毒 ,消毒前浓集污水 2 5L ,消毒后 2 5～ 5 0L ;采用VERO细胞培养及RT -PCR技术检测SARS冠状病毒。结果　建立的阳电荷浓集方法对污水中加标f2 噬菌体回收率平均 12 7% ,而SARS冠状病毒回收率只有 1 0 2 %。消毒前在 30 9医院和小汤山医院污水的6d监测中均检测出SARS冠状病毒核酸 ;消毒后 ,在 30 9医院只有 3d监测出病毒核酸 ,其余样品均未检出病毒核酸 ;两医院所有的污水回收液中均未检出活病毒或具有感染性的病毒。结论收治SARS病人医院污水中含有SARS冠状病毒核酸 ,但没有检出活病毒或具有感染性的病毒 ,因此 ,在当时条件下 ,医院污水 ,尤其是消毒后污水传播SARS冠状病毒可能性较小。

关键词：医院污水 SARS 冠状病毒病毒核酸检验

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甲型流感儿童病毒核酸持续时间及其影响因素

中国当代儿科杂志 2016年第12期18卷 1269-1271页

作者：周高枫王红梅张锐沐邓继岿深圳市儿童医院感染科广东深圳518038

目的分析甲型流感(甲流)患儿病毒核酸持续时间的规律和影响因素。方法收集90例鼻咽拭子甲流病毒核酸PCR检测阳性的甲流患儿临床资料,并将其分为单纯甲流组(10例)、甲流并发肺炎组(61例)、甲流并发神经系统损害组(10例)、基础疾病合并甲... 详细信息

目的分析甲型流感(甲流)患儿病毒核酸持续时间的规律和影响因素。方法收集90例鼻咽拭子甲流病毒核酸PCR检测阳性的甲流患儿临床资料,并将其分为单纯甲流组(10例)、甲流并发肺炎组(61例)、甲流并发神经系统损害组(10例)、基础疾病合并甲流组(9例),对其临床特点、治疗经过、病毒核酸持续时间和转归进行回顾性分析。结果 90例甲流患儿的前5位临床症状主要为发热(89/90,99%)、咳嗽(89/90,99%)、流涕(69/90,77%)、气促(26/90,29%)、肌痛(23/90,26%)。病毒核酸持续时间平均9.4±2.9 d。单纯甲流组病毒核酸持续时间短于甲流并发肺炎组、甲流并发神经系统损害组及基础疾病合并甲流组,差异均有统计学意义(P病毒核酸持续时间的差异均无统计学意义(P>0.05)。起病48 h内抗病毒治疗组的病毒核酸持续时间和体温恢复正常所需时间均短于48 h以后用药的患儿,差异有统计学意义(P病毒核酸仍呈阳性。结论并发症、基础性疾病和抗病毒治疗时机是影响甲流病毒核酸持续的主要因素,体温是否恢复正常不宜作为甲流患儿是否继续抗病毒治疗的参考。

关键词：甲型流感病毒核酸并发症抗病毒药物儿童

2000～2002年丙型肝炎病毒核酸逆转录聚合酶链反应测定室间质量评价

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中华检验医学杂志 2003年第12期26卷 777-780页

作者：王露楠李金明邓巍郑怀竞卫生部北京医院卫生部临床检验中心 100730

目的　评价 2 0 0 0年至 2 0 0 2年临床基因扩增检验实验室在丙型肝炎病毒 (HCV)RNA逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测中的质量。方法　从 2 0 0 2年至 2 0 0 3年每年进行质评两次 ,每次发放HCVRNA样本 5份 ,其中阳性样本 3～ 4份 ,含... 详细信息

目的　评价 2 0 0 0年至 2 0 0 2年临床基因扩增检验实验室在丙型肝炎病毒 (HCV)RNA逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测中的质量。方法　从 2 0 0 2年至 2 0 0 3年每年进行质评两次 ,每次发放HCVRNA样本 5份 ,其中阳性样本 3～ 4份 ,含量在 10 4 ～ 10 7拷贝数 /ml范围内。阴性样本1～ 2份 ,均为冻干品。要求各个实验室按规定时间检测并回报结果 ,然后统计分析。结果　对质评样本测定全部正确的比率从 2 0 0 0年的 0 0 1批的 53 3 % (2 4/ 45)、0 0 2批的 4 8% (2 / 42 )和 2 0 0 1年 0 11批的 73 8% (3 1/ 42 )、0 12批的 79 2 % (42 / 53 ) ,上升到 2 0 0 2年 0 2 1批的 89 7% (10 5/ 117)和 0 2 2批的91 6% (10 9/ 119)。假阳性率也从 2 0 0 0年和 2 0 0 1年的高至 2 6 7%和 14 3 %降至 2 0 0 2年的 8 0 %以下。对在 10 5 和 10 4 拷贝数 /ml数量级的质评样本 ,测定假阴性率从 2 0 0 0年的 15 6% (0 0 11)、19 0 %(0 0 2 5)和 81 0 % (0 0 2 3 )下降到 2 0 0 1年的 11 9% (0 112 )、11 3 % (0 12 5)和 9 5% (0 115) ,到 2 0 0 2年更是下降到了 4 6% (0 2 2 1)、3 7% (0 2 2 3 )和 3 8% (0 2 12 )。从试剂盒的临床使用评价来看 ,从 2 0 0 0年到 2 0 0 2年各厂家试剂的临床检测特异性。

关键词： 2000~2002年丙型肝炎病毒核酸逆转录聚合酶链反应测定室间质量评价

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机体识别病毒核酸的几种分子模式及途径

畜牧兽医学报 2011年第3期42卷 311-322页

作者：景志忠何小兵房永祥陈国华曾爽贾怀杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

近些年机体病原相关模式受体及其识别分子机制的研究,极大地促进了先天性分子免疫学的发展,并成为现代免疫学研究的重点和热点领域。作者通过机体识别病毒核酸的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、RIG-I样受体(RIG-I like receptor... 详细信息

近些年机体病原相关模式受体及其识别分子机制的研究,极大地促进了先天性分子免疫学的发展,并成为现代免疫学研究的重点和热点领域。作者通过机体识别病毒核酸的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、RIG-I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)、NOD样受体(NOD-like receptors,NLRs)和DAI(DNA-dependent activatorof interferon-regulatory factors,DAI)等模式识别分子的细胞定位、分子结构及其识别病毒核酸途径的介绍,系统、全面地探讨了宿主机体如何全方位识别和消除入侵病毒的分子免疫防御途径,为抗病毒药物和疫苗的设计以及抗病育种提供了理论依据。

关键词：病原相关分子模式模式识别受体病毒核酸先天性免疫

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应用逆转录套式PCR检测新城疫病毒核酸

中国预防兽医学报 2001年第4期23卷 295-299页

作者：黄庚明辛朝安华南农业大学动物医学系广州510642

选择NDV融合蛋白保守的编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测新城疫病毒核酸的逆转录套式PCR法 ,通过检测NDV感染的实验室病料和临床病料。结果表明 ,逆转录套式PCR法最低能鉴别出约 0 .3pg的NDVRNA ,攻毒后... 详细信息

选择NDV融合蛋白保守的编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测新城疫病毒核酸的逆转录套式PCR法 ,通过检测NDV感染的实验室病料和临床病料。结果表明 ,逆转录套式PCR法最低能鉴别出约 0 .3pg的NDVRNA ,攻毒后第 8天还能从非免疫鸡和SPF鸡泄殖腔拭子中检出NDV ,第 8天非免疫鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 5 / 10 ,第 8天SPF鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 6/ 10。对非免疫鸡和SPF鸡的泄殖腔中NDV最佳检出时间均在攻毒后第 5天。逆转录套式PCR方法对临床样品中NDV的最大检出率为 6/ 7。经核酸杂交验证 ,该法具有很高的特异性和敏感性 ,也比较简便快速 ,为从分子水平探讨NDV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。

关键词：新城疫病毒融合蛋白基因逆转录套式PCR 检测病毒核酸

硅粉纯化水中病毒核酸在PCR方法中作用研究

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卫生研究 1996年第3期25卷 143-147页

作者：刘晶星 J.M.Seigneurin 上海第二医科大学微生物教研室上海200025 法国格勒诺布尔(Grenoble)第一大学医学院分子病毒室

利用纯腐殖酸制剂,人工制备了污染有脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、轮状病毒及3种病毒混合的水样品,研究了腐殖酸对反转录和 PCR(RT-PCR)的抑制作用及硅粉的去抑制作用。结果显示当水中腐殖酸浓度大干或等于1g/L 时,3种病毒的 RT-PCR ... 详细信息

利用纯腐殖酸制剂,人工制备了污染有脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、轮状病毒及3种病毒混合的水样品,研究了腐殖酸对反转录和 PCR(RT-PCR)的抑制作用及硅粉的去抑制作用。结果显示当水中腐殖酸浓度大干或等于1g/L 时,3种病毒的 RT-PCR 均被抑制,当浓度在10～100mg/L 之间,常规方法提取病毒 RNA、RT-PCR 阴性,而经硅粉纯化处理过的病毒 RNA、RT-PCR 阳性,硅粉能有效去除腐殖酸对 PCR 的抑制;当浓度等于或小于10mg/L RT-PCR 不受影响。结果还同时表明,用6-核苷酸代替病毒特异性引物成功地对混合病毒样品进行了反转录。

关键词：病毒核酸硅粉聚合酶链反应

38例甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转时限的观察

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中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1339-1341页

作者：崔文玉闫世明赵云虹杨光绪张智勇于关成长春市传染病医院长春130123

目的观察甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转时限。方法选择2009年9月16～27日我院收治的甲型H1N1流感确诊病例38例,经同一名医生进行咽拭子采集,采用RT-PCR方法检测甲型通用、甲1通用、季节性流感、甲型H1N1亚型4个病毒亚型,以甲型通用、甲... 详细信息

目的观察甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转时限。方法选择2009年9月16～27日我院收治的甲型H1N1流感确诊病例38例,经同一名医生进行咽拭子采集,采用RT-PCR方法检测甲型通用、甲1通用、季节性流感、甲型H1N1亚型4个病毒亚型,以甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型均阴转作为判定病毒核酸阴转的标准。结果 38例甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转的时限最短1 d,最长14 d,平均4.5 d;病毒核酸阴转时间主要集中在第3、4、5天,第5天与第4天相比,甲型通用、甲1通用和甲型H1N1的阴转比例均明显增加(P病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为4.1 d;37～72 h接受抗病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为5.2 d;有3例甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型病毒核酸未同时阴转。结论甲型H1N1流感抗病毒治疗1周,大部分患者病毒核酸阴转,不具有传染性;尽早(36 h内)接受抗病毒治疗,可以缩短病毒核酸阴转时间;甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型具有较好的一致性,对三者未同时阴转的情况,应注意是否同时合并其他甲型流感病毒亚型感染。

关键词：流感病毒A型 H1N1亚型病毒核酸阴转时限

湖北省首例人感染高致病性禽流感患者的病毒核酸特点

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中华检验医学杂志 2007年第9期30卷 1063-1064页

作者：彭劲松刘满清朱洪浩夏俊南余滨周玉周敦金武汉市疾病预防控制中心传染病防治所病毒检验科 430022

患者男，年龄21岁。2006年4月11日，因发热、咳嗽10d，呼吸困难伴腹痛，抗生素治疗无效后，住武汉医院，科院诊断为肺炎。4月11日上午，门诊胸透提示双肺感染，中午收入呼吸内科，14：30以“肺部感染”转ICU病房。入院时体温38、9℃，... 详细信息

患者男，年龄21岁。2006年4月11日，因发热、咳嗽10d，呼吸困难伴腹痛，抗生素治疗无效后，住武汉医院，科院诊断为肺炎。4月11日上午，门诊胸透提示双肺感染，中午收入呼吸内科，14：30以“肺部感染”转ICU病房。入院时体温38、9℃，急性面容，全身紫绀，呼吸急促，心率170-180次／min，双肺呼吸音粗，可闻及湿性哕音，腹软，压痛明显。

关键词：人感染高致病性禽流感病毒核酸湖北省抗生素治疗 ICU病房呼吸困难呼吸内科肺部感染