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根癌农杆菌atu0526基因及其所编码的甲基受体趋化蛋白功能的研究

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根癌农杆菌atu0526基因及其所编码的甲基受体趋化蛋白功能的研究

作者：徐宇娟扬州大学

学位级别：硕士

根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种位于土壤中的革兰氏阴性植物病原菌,能够侵染植物的受伤部位使其致瘤。在自然条件下能够侵染双子叶植物,将其Ti质粒上的T-DNA导入到受伤宿主的基因组上,诱导宿主产生冠瘿瘤。根癌农杆菌侵... 详细信息

根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种位于土壤中的革兰氏阴性植物病原菌,能够侵染植物的受伤部位使其致瘤。在自然条件下能够侵染双子叶植物,将其Ti质粒上的T-DNA导入到受伤宿主的基因组上,诱导宿主产生冠瘿瘤。根癌农杆菌侵染宿主首先要感知植物受伤部位分泌的信号物质,常见的包括酚类化合物、有机酸、氨基酸、糖类,感知物质后方可进行下一步侵染。细菌对信号物质的识别并响应的行为称为细菌的趋化性。趋化性是细菌的一种定向的适应性行为,通过感知环境中的化学信号,帮助细菌向着更有利于生存的方向迁移。在趋化过程中,细菌中的甲基受体趋化蛋白(MCP)发挥着识别信号物质的重要作用。甲基受体趋化蛋白在细菌趋化性中承担着重要作用,大多数MCP能够通过其配体结合域(LBD)感知细胞内外的化学物质,并将信号传递给细胞质中的下游功能元件,使细菌产生相应的趋化或趋避行为。根癌农杆菌C58含有20个编码MCP的基因,atu0526就是其中一个,该基因编码的甲基受体趋化蛋白是一个典型的跨膜MCP,含有跨膜区(TM)、配体结合域(LBD)、HAMP和MA基本功能元件。由于甲基受体趋化蛋白在细菌趋化性中承担重要作用且趋化性与细菌生物膜的形成又存在重要联系,我们需要研究atu0526编码蛋白的功能,这对农杆菌趋化性研究具有重要的意义。本课题从以下方面来探究atu0526编码蛋白的功能,包括atu0526基因缺失突变株及回补株的构建、生长曲线的测定来探究基因缺失后对农杆菌的生长是否产生影响、游动平板法探究对叶片分泌物的趋化响应、趋化受体蛋白与偶联蛋白CheW的互作验证、蛋白原核表达及纯化体外筛选蛋白的配体物质、蛋白关键氨基酸的点突变的构建、毛细管法验证所确定配体物质的趋化,生物膜含量的测定。本课题的主要结果如下:(1)通过Overlap PCR连接atu0526基因上下游片段,与自杀质粒pEX18Km相连,电转至农杆菌C58感受态中,通过两次筛选(卡那霉素正向筛选、蔗糖敏感性反向筛选)得到该基因缺失突变株。回补株以质粒的形式构建。通过比较野生型、突变株及回补株的生长曲线,观察到缺失该基因并不影响根癌农杆菌的生长。(2)通过游动平板法比较野生型、突变株及回补株在含唯一碳源的半固体板子上菌圈的大小,发现突变株的菌圈小于回补株,远小于野生型,说明缺失该基因影响根癌农杆菌的趋化。由于农杆菌能够侵染受伤植物的叶片,故探究各菌对叶片分泌物的趋化响应,研究结果显示野生型对叶片的趋化响应最明显,基因缺失株趋化效果较野生型显著减弱但仍然高于CheA缺失株,基因回补后对叶片的趋化效果显著提升,说明基因缺失后虽然对叶片分泌物的趋化效果减弱但趋化响应并未完全消失。(3)MCP要发挥趋化作用必须要和CheA、CheW形成三元复合物,通过细菌双杂及pull down实验验证Atu0526与农杆菌体内的偶联蛋白CheW是否发生互作,在一定程度上验证了该基因是编码甲基受体趋化蛋白的基因。(4)通过构建原核表达菌株,将蛋白体外表达,运用差示荧光扫描实验(DSF)体外验证Atu0526的趋化功能区LBD区与化学配体的结合。差示荧光扫描的结果显示蛋白与甲酸、苹果酸结合的效果比较明显。通过构建蛋白点突变寻找蛋白与配体结合的关键氨基酸位点,构建了第46位、47位、115位、125位、154位、156位、166位、191位氨基酸的点突变,把它们突变成丙氨酸。差示荧光扫描的结果显示第115位、125位点突变后,蛋白与先前结合较明显的物质变得不再结合,说明第115位、125位点突变后影响蛋白与配体物质的结合。(5)用毛细管法验证单一物质,发现缺失该基因后,对甲酸、苹果酸的响应明显减少,说明该基因影响农杆菌对这些物质的趋化响应。(6)生物膜是附着于细菌表面,能够帮助细菌抵抗外界环境并收获营养物质。通过对野生型、突变株、回补株三种菌株生物膜的测定,发现突变株形成生物膜的能力明显高于野生型,说明该基因对生物膜的形成具有负调控作用。通过对atu0526基因的功能研究,可以为根癌农杆菌C58中的其他MCP的研究及农杆菌功能的改造提供基础。

关键词：趋化性甲基受体趋化蛋白化学配体配体结合域

铜绿假单胞菌甲基受体趋化蛋白PctA配体结合区的结构生物学研究

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铜绿假单胞菌甲基受体趋化蛋白PctA配体结合区的结构生物学研究

作者：胡伟华武汉大学

学位级别：硕士

铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)是一种常见的机会致病菌,人体免疫力低下时容易被感染,尤其会导致囊性纤维化患者的高致死率感染。目前铜绿假单胞菌对多种抗生素产生耐药性,且耐药性不断增大,因此对其做进一步的研究是非常必... 详细信息

铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)是一种常见的机会致病菌,人体免疫力低下时容易被感染,尤其会导致囊性纤维化患者的高致死率感染。目前铜绿假单胞菌对多种抗生素产生耐药性,且耐药性不断增大,因此对其做进一步的研究是非常必要的。细菌能够适应多种生活环境并定植到适合其生长繁殖的部位,这一过程主要依赖于细菌的趋化性。细菌感应检测到信号(如氨基酸,糖)后,经过趋化信号传导通路,使细菌运动来靠近或远离对其有利或有害的化学物质。这一通路的过程是:甲基受体趋化蛋白(methyl-accepting chemotaxis proteins,MCPs)识别并结合趋化物后蛋白构像改变产生信号,接着将信号传递给组氨酸激酶Che A,改变Che A自磷酸化的活性,然后Che Y接受由Che A传递的信号,并作用于鞭毛蛋白使鞭毛顺时针或逆时针旋转,Che Z可以调控Che Y的磷酸化,进而控制鞭毛旋转时间。MCPs中负责识别和结合趋化物的区域为配体结合区(ligand binding domin,LBD)。有研究表明,甲基受体趋化蛋白PctA的配体结合区LBD可以对18种天然氨基酸产生趋化作用,但是PctA-LBD发挥作用的具体机制还不清楚。本课题以PctA-LBD为研究对象,进行克隆、表达纯化、结晶、X射线衍射得到三维结构,并尝试得到PctA-LBD与小分子DPD(Dimethyl propanedioate)复合物的晶体结构,试图阐述PctA-LBD与小分子的结合模式与作用机制。本研究首先对PctA的30-278片段即PctA-LBD进行生物信息学分析,其理化性质和二级结构预测结果表明该蛋白性状较好。进行不同物种间的同源性蛋白的氨基酸序列比对,结果表明铜绿假单胞菌PctA与荧光假单胞菌Cta A,丁香假单胞菌Psc A的配体结合区具有较高同源性,也存在一定差异性,说明它们虽然可以识别相同类别的配体,但是PctA-LBD有其独特的功能。然后我们将目的基因PctA-LBD克隆至p ET28a载体上,利用大肠杆菌原核表达系统对目的蛋白进行表达。接着我们尝试不同的纯化条件,蛋白在不含甘油的缓冲液中有轻微的沉淀现象,当在缓冲液中加入5%甘油后,沉淀又被完全溶解,说明甘油对维持PctA-LBD蛋白的稳定性有一定帮助。在两种不同缓冲液纯化中得到的蛋白进行晶体初筛实验后都得到了晶体,但是纯化过程中含有5%甘油的蛋白进行重复试验时无法再次得到晶体,推测其初筛时获得的晶体为盐晶。纯化过程中不含甘油的蛋白进行晶体筛选后得到的晶体体积较小,通过改变沉淀剂浓度及种类,p H值,盐离子种类及浓度等对其结晶条件进行优化,仍然没有得到质量好的晶体,进行X射线衍射的分辨率较差。我们尝试不同的纯化方案来提高蛋白质纯度以期获得高质量的晶体,最终通过含有不同咪唑浓度的洗脱液进行亲和层析,离子交换层析以及凝胶过滤层析纯化得到高纯度和较为稳定的目的蛋白,进行晶体筛选以及优化,最终在2.0 M Ammonium sulfate,0.1 M MES p H5.0条件下得到高分辨率的晶体,通过结构解析得到PctA-LBD的三维结构。为研究PctA-LBD与配体的结合模式,我们将PctA-LBD与小分子化合物DPD(Dimethyl Propanedioate)通过浸泡法和共结晶法进行复合物晶体的尝试。虽然蛋白和小分子共孵育后得到了晶体,但是在晶体结构中均没有发现小分子。后期将会继续开展工作,力图获得复合物的结构。本研究通过各种纯化条件及步骤,得到了高质量的蛋白晶体,解析了PctA-LBD的三维结构。虽然没有获得PctA-LBD与小分子DPD复合物的晶体,但是我们尝试了多种共结晶方案,获得了稳定的复合物,为后期结构的解析提供了基础,也为进一步设计和开发治疗铜绿假单胞菌感染的药物提供了依据。

关键词：铜绿假单胞菌甲基受体趋化蛋白 PctA DPD 结构生物学

根癌农杆菌趋化操纵子中甲基受体趋化蛋白编码基因atu0514的功能鉴定

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根癌农杆菌趋化操纵子中甲基受体趋化蛋白编码基因atu0514的功能...

作者：周清璇扬州大学

学位级别：硕士

根癌农杆菌属于革兰氏阴性菌,能够将自身Ti质粒上的一段T-DNA序列转移并整合到植物基因组中,从而引起多数双子叶植物产生冠瘿瘤。在自然环境中,根癌农杆菌通常位于植物的根际周围,趋化是其与宿主相互作用的重要的第一个过程。只有根癌... 详细信息

根癌农杆菌属于革兰氏阴性菌,能够将自身Ti质粒上的一段T-DNA序列转移并整合到植物基因组中,从而引起多数双子叶植物产生冠瘿瘤。在自然环境中,根癌农杆菌通常位于植物的根际周围,趋化是其与宿主相互作用的重要的第一个过程。只有根癌农杆菌对宿主释放的化学信号进行趋化响应,才能与植物宿主细胞发生接触,侵染和致瘤的过程。趋化是能动细菌的一种重要的适应性行为,它能促使细菌向引诱物方向运动或远离排斥物。这些化学效应物主要被甲基受体趋化蛋白(MCP)所感知。根癌农杆菌C58的基因组中有20个编码MCP同源蛋白的基因。只有atu0514基因位于编码根癌农杆菌趋化系统的操纵子内部。与大多数细菌中的MCP不同,atu0514编码的MCP没有胞外结构域,并且由配体结构域protoglobin、HAMP和胞质信号域MA组成。因此,需要研究atu0514基因编码蛋白的功能和定位。本实验以野生型的根癌农杆菌C58为实验材料,通过无标记反向筛选的方法,获得atu0514基因缺失株,并通过质粒回补,得到回补菌株。通过对野生型菌株、atu0514突变株和回补株的生长曲线测定,发现缺失atu0514基因不影响根癌农杆菌的生长;利用游动平板法测定atu0514基因缺失对根癌农杆菌趋化响应的影响,发现缺失atu0514基因会减弱根癌农杆菌的趋化性,但趋化性没有完全消失;通过毛细管法测定atu0514突变株对单一物质的趋化响应,实验结果表明,野生型C58对10-6 M葡萄糖、10-3 M銅氨酸、10-3M精氨酸、10-3M柠檬酸均具有趋化性,而缺失atu0514基因会削弱根癌农杆菌对这些物质的趋化响应,但是趋化并没有完全消失,说明atu0514基因编码蛋白可能与其他的MCP相互作用,共同响应葡萄糖、缬氨酸、精氨酸、柠檬酸等信号物质;通过细菌双杂交实验和半乳糖苷酶酶活测定验证atu0514编码蛋白的MA结构域能够和偶联蛋白CheW1、CheW2相互作用。为研究Atu0514的定位,首先需要将EGFP绿色荧光蛋白融合到Atu0514的C端,构建Atu0514-EGFP荧光融合蛋白。通过荧光显微镜观察发现,Atu0514定位在细胞的一端;在缺失CheW1和CheW2的突变体中发现,Atu0514依然定位在一端,不受CheW蛋白的影响;由于化学受体蛋白Atu0514具有三个结构域,配体结构域Protoglobin,信号转导域HAMP和胞质信号结构域MA,而MA结构域中包含能够和CheW相互作用的高度保守结构域HCD,甲基化结构域K1和R1,所以我们依据结构域构建了一系列含有不同长度截短的atu0514-egfp的表达载体,来初步分析影响Atu0514蛋白细胞定位的结构域。实验结果发现,缺失胞质信号域MA会影响Atu0514的定位,不再定位在一端,而是弥散在细胞中,进一步对MA结构域的各个部分深入分析发现,一起缺失掉MA结构域中的甲基化结构域R1和高度保守结构域HCD时,Atu0514蛋白同样不定位在细胞一端,弥散在细胞中,说明Atu0514蛋白通过MA结构域与其他跨膜甲基受体趋化蛋白互作,从而使Atu0514蛋白定位在细胞一端。atu0514编码蛋白具有3个结构域,MA结构域是大多数甲基受体趋化蛋白具有的胞质信号域,从分子水平分析atu0514基因对趋化的影响,从而构建一系列点突变菌株,并通过游动平板验证发现,第390位天冬酰胺是关键的氨基酸位点,突变后会影响根癌农杆菌的趋化响应。通过对Atu0514蛋白功能和细胞分布情况的研究,为研究其他MCP,更深入了解农杆菌的趋化信号传导机制,进一步改造农杆菌,拓展其利用途经打下基础。

关键词：根癌农杆菌趋化性甲基受体趋化蛋白细胞定位

一株盐单胞菌属(Halomonas)细菌趋化因子受体基因挖掘及相关蛋白序列分析

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大连海洋大学学报 2024年第2期39卷 203-214页

作者：徐爽李晨姜嘉琳谢晓晨王博霍忠明方蕾大连海洋大学海洋科技与环境学院辽宁大连116023 大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023

为了解一株长牡蛎(Crassostrea gigas)致病性盐单胞菌(Halomonas sp.)7T的趋化性,采用毛细管法研究其趋化行为,并基于全基因组数据,利用KEGG Pathway分析其趋化信号通路,通过与同源物种比对分析趋化因子受体种类,进一步挖掘甲基受体趋... 详细信息

为了解一株长牡蛎(Crassostrea gigas)致病性盐单胞菌(Halomonas sp.)7T的趋化性,采用毛细管法研究其趋化行为,并基于全基因组数据,利用KEGG Pathway分析其趋化信号通路,通过与同源物种比对分析趋化因子受体种类,进一步挖掘甲基受体趋化蛋白(methyl-accepting chemotaxis proteins,MCPs)序列,再结合MeMe数据库和TMHMM分析MCPs结构。结果表明:Halomonas sp.7T具备趋化行为,其全基因组含有完整趋化信号通路,共有22个基因编码MCPs,涵盖5种常见趋化因子受体;22个MCPs均含有信号转导结构域,其中,19个含有跨膜结构域,3个不含跨膜结构域;基于信号转导结构域内七肽单位保守序列和存在的对称插入缺失对这22个MCPs进行分类,发现17个为36H型,1个为40H型,其余4个与已知分类均不匹配;跨膜结构分布特征和疏水性分析发现,这22个MCPs中有20个符合拓扑结构,其中ClassⅠ型、ClassⅡ型、ClassⅢ型、ClassⅣ型分别为10、4、3、3个,另有2个MCPs不符合拓扑结构。研究表明,长牡蛎致病性盐单胞菌7T具备趋化性,其基因组存在完整趋化信号通路,有22个基因编码MCPs,这些MCPs具有独特的结构,可能参与介导与细菌生存和环境胁迫响应相关的趋化行为。

关键词：盐单胞菌趋化性趋化因子受体基因甲基受体趋化蛋白长牡蛎

新鞘氨醇杆菌US6-1趋化受体MCP18870功能研究

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新鞘氨醇杆菌US6-1趋化受体MCP18870功能研究

作者：周梦凯厦门大学

学位级别：硕士

多环芳烃(PAHs)是一类由两个或两个以上的苯环以线性、角状或簇状排列的稠环化合物,主要来源于人类活动或能源利用过程,是重要的食品与环境污染物。生物降解是一种去除环境中多环芳烃的有效方法。细菌趋化性是菌体对环境的响应,主要包... 详细信息

多环芳烃(PAHs)是一类由两个或两个以上的苯环以线性、角状或簇状排列的稠环化合物,主要来源于人类活动或能源利用过程,是重要的食品与环境污染物。生物降解是一种去除环境中多环芳烃的有效方法。细菌趋化性是菌体对环境的响应,主要包括对有利环境的趋附和对有害环境的避离。细菌趋化有利于细菌对底物的利用。研究表明,细菌的趋化性能够增强细菌在自然界中降解污染物的效果,已知一些种属的细菌对芳香族化合物有趋化能力。Novosphingobium pentaromativoransUS6-1能以多种多环芳烃作为唯一碳源和能源生长,是一株良好的芳烃污染环境的生物修复菌。而该属细菌对芳香族化合物的趋化性研究却鲜有报道。本论文主要以US6-1为研究对象,采用基因组学、转录组学、同源重组基因敲除等技术对其趋化基因、趋化蛋白及对不同底物的趋化现象等进行了研究,获得的主要结果如下:1.首先我们在基因组和转录组水平上对其趋化相关基因和蛋白进行了分析,发现有29个基因注释到KEGG的细菌趋化性通路上。其中绝大多数位于染色体上,少数位于质粒上,包括:6个甲基趋化受体蛋白MCP,1个组氨酸激酶CheA,1个偶联蛋白CheW,14个反应调节子CheY,2个MCP甲基化酶CheB,2个MCP甲基转移酶CheR,1个趋化受体谷氨酰胺脱酰胺酶CheD,1个鞭毛定子MotA和1个MotB。分析转录组数据发现,BaP诱导下MCP表达均有不同程度上调,其中 MCP2035(JI59S02035)和 MCP3030(JI59 RS03030)差异性表达显著。通过以上分析,我们获得了参与US6-1完整趋化通路的一系列基因和蛋白。2.为了确定在US6-1对PAHs趋化过程中起作用的MCP,我们分别运用SMART和Phyre2数据库对US6-1甲基受体趋化蛋白的高级结构进行预测,得到了 MCP3030(JI59S03030)和 MCP18870(JI59S18870)配体结合域(LBD)的三维结构,两者都为4个α螺旋束。MCP配体结合域的预测有助于趋化底物的确定。3.我们分别采用滴定法和游动平板法研究了 US6-1对简单化合物(TCA循环中间物及单环化合物)和多环芳烃(菲、芘、苯并芘等)的趋化性。US6-1对简单化合物的趋化现象3h内就能检测到,而其对多环芳烃的趋化4d后才能观察到。造成这种差异的原因可能是多环芳烃的难降解性,说明US6-1对多环芳烃的趋化可能是降解依赖的。4.定点敲除US6-1组氨酸激酶基因cheA,以此来探究US6-1对苯并芘趋化与降解之间的关系。结果表明,与野生型相比,cheA基因被敲除后,US6-1△cheA对苯并芘的降解能力明显下降,cheA基因的缺失极大地影响了菌体对苯并芘的降解。5.分别通过基因敲除和MCP配体结合域的体外表达研究MCP18870在菌体US6-1趋化过程中行使的功能。首先,通过同源重组获得了 MCP18870基因缺失株,趋化实验表明,US6-1△mcp18870失去了对邻苯二酚的趋化,其次利用蛋白的异源表达技术,在体外获得了 MCP18870的配体结合域,并通过荧光光谱实验证明该蛋白能与龙胆酸发生特异性结合。综上所述,MCP18870能触发菌体US6-1对邻苯二酚和龙胆酸的趋化。

关键词：新鞘氨醇杆菌US6-1 趋化性基因敲除甲基受体趋化蛋白

铜绿假单胞菌DN1参与石油烃降解基因功能及趋化性研究

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铜绿假单胞菌DN1参与石油烃降解基因功能及趋化性研究

作者：李艳鹏西北大学

学位级别：硕士

石油烃化合物的污染治理是亟待解决的问题,微生物修复是一种理想的方法,而目前烃类污染物的成分复杂及疏水特性限制了降解菌对其摄取和降解。本研究以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)DN1作为出发菌株,对其参与石油烃化合物降解及... 详细信息

石油烃化合物的污染治理是亟待解决的问题,微生物修复是一种理想的方法,而目前烃类污染物的成分复杂及疏水特性限制了降解菌对其摄取和降解。本研究以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)DN1作为出发菌株,对其参与石油烃化合物降解及趋化性过程中的关键基因展开功能探索,以期揭示微生物如何摄取利用烃类污染物的分子转运机制,进而实现烃类污染物修复。前期的研究表明,铜绿假单胞菌DN1具有降解原油、烷烃和芳烃的能力。为进一步了解其降解机制,首先利用比较基因组学手段预测分析了6株石油烃降解菌株中烷烃羟化酶、环羟基化双加氧酶及趋化系统,比对结果显示:石油烃降解菌的降解酶系统呈现多样性,但这些基因的同源性及分布之间存在一定差异,在一定程度上影响并决定了菌株底物降解谱的多样性。其次,我们通过气相色谱技术检测了菌株DN1对原油和不同正构烷烃的降解情况,同时利用RT-qPCR技术监测了烷烃羟化酶基因的实时表达,并通过同源重组技术构建基因缺失突变株进一步研究其基因功能。实验结果表明:DN1能够利用原油和链长为8-40个碳原子的多种正构烷烃作为唯一碳源,降解率高达85%。RT-qPCR分析显示,五种烷烃羟化酶基因可以被C至C的正构烷烃诱导,且不同正构烷烃条件下基因表达量不同。而在所有的正构烷烃中,alkB基因表达基本上调,尤其是长链烷烃如C和C存在的条件下。同时,长链烷烃(C-C)诱导下cyp153表达水平显著提高,而两个almA基因仅在链长为C以上的烷烃存在时表达量上调。此外,基因敲除实验表明,alkB在广谱的烷烃生物降解中可能起关键作用,其它的羟化酶系统确保了链长为C-C的正构烷烃能被利用。将多株具有降解能力的铜绿假单胞菌的AlkB氨基酸序列进行比对分析发现其同源性约99.65%。甲基受体趋化蛋白(methyl-accepting chemotaxis proteins,MCPs)在细菌接收和感应外界化学信号刺激中发挥了重要作用。前期菌株DN1在荧蒽诱导下转录组学分析表明,部分mcp基因表达量上调,其中包括mcp04325,mcp10445,mcp28325,mcp29160等。在此基础上,我们研究了菌株DN1中部分mcp突变株对不同芳烃、烷烃及中间代谢产物的趋化特性,通过其趋化特性的改变,进一步利用蛋白外源表达及等温滴定热量技术(ITC)验证其结合能力。实验结果表明:菌株DN1对检测的不同中间产物、芳烃及烷烃基本上都具有趋化特性,推测趋化性可能与烃类化合物降解密切相关,其有助于烃类化合物的降解。同时部分mcp突变株趋化性表型显示mcp00975、mcp04325、mcp10445基因缺失导致菌株对原儿茶酸及部分长链烷烃的趋化性明显减弱;mcp04325基因缺失使菌株对荧蒽和芘的趋化性略微减弱,mcp00975和mcp04325的缺失使菌株对萘和菲的趋化性减弱。进一步通过构建双/三突变株,检测趋化表型,发现三突变株对原儿茶酸的趋化性影响最大,趋化性减弱率最高。比较而言,在这三个基因中mcp04325基因缺失对原儿茶酸趋化性影响最大,但对Mcp04325蛋白进行外源表达纯化,通过ITC未能检测到Mcp04325蛋白与原儿茶酸之间有明显的结合能力,推测mcp04325基因可以介导趋化性,但是不具有与原儿茶酸分子结合能力,其确切机制还有待于进一步研究。

关键词：铜绿假单胞菌株DN1 烃类污染物烷烃羟化酶趋化性甲基受体趋化蛋白