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青檀内生真菌球毛壳的抗氧化活性和发酵产物的研究

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青檀内生真菌球毛壳的抗氧化活性和发酵产物的研究

作者：高强南京师范大学

学位级别：硕士

为寻找高效低毒的天然抗氧化剂的良好来源,本研究以药用植物青檀内生真菌为实验材料,采用抗氧化能力试剂盒对其菌种的发酵产物进行了筛选,选取其中抗氧化活性最高的菌株作为本研究的供试菌株并进行了形态学鉴定。我们测试了供试菌株发... 详细信息

为寻找高效低毒的天然抗氧化剂的良好来源,本研究以药用植物青檀内生真菌为实验材料,采用抗氧化能力试剂盒对其菌种的发酵产物进行了筛选,选取其中抗氧化活性最高的菌株作为本研究的供试菌株并进行了形态学鉴定。我们测试了供试菌株发酵产物的还原力、抗氧化活性稳定性、及其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力。此外还对其发酵产物中活性成分的分离、纯化、鉴定进行了初步研究。结果如下：1、采用总抗氧化试剂盒（T-AOC）对实验室保存的青檀内生真菌进行抗氧化活性菌株筛选,结果发现青檀内生真菌的活性次生代谢产物主要分布在发酵液中,其中分离自山东泰安的青檀Pterocektis. tatarinowii叶片中的菌株No.81表现出明显较高的抗氧化活性,总抗氧化能力为16.12U/mL,被选作为本研究的供试菌株,经形态学鉴定为球毛壳菌。2、对筛选所的青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物进行初步纯化,采用还原力、抗氧化活性稳定性、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基、羟基自由基清除能力清除作为指标具体检测青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物的抗氧化活性,以芦丁作为阳性对照。结果显示,青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物具有较好的还原力,还原力与浓度之间存在明显的正相关的量效关系;青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物的抗氧化活性稳定性良好,在实验结束时,各浓度处理组的POV值均低于阳性对照芦丁的POV,抑制抗氧化的效果明显优于芦丁。青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基具有较强的清除能力,结果显示青檀内生球毛壳菌株No.81发酵产物对DPPH自由基的IC50值为0.023mg/mL,而芦丁IC50为0.042mg/mL,在0-5 mg/mL处理浓度范围内,青檀内生球毛壳C. globosum菌株No.81发酵液提取物在低浓度时（0.02和0.04 mg/mL）要高于芦丁,在高浓度时则和芦丁对照品相当;青檀内生球毛壳Chaetomium. globosum菌株No.81发酵液提取物对超氧阴离子自由基（O2-·）的IC50值为0.478mg/mL,阳性对照芦丁的IC50值为0.447mg/mL,两者在超氧阴离子清除能力上相差不大。青檀内生球毛壳C. globosum菌株No.81发酵液提取物对羟基自由基（OH·）有一定的清除作用,且清除率随着浓度的增加而增大,但是对羟基自由基的清除能力要低于阳性对照物芦丁。3、颜色反应结果显示,青檀内生球毛壳C. globosum菌株No.81发酵液提取物中主要活性成分为多酚类物质,采用薄层层析和硅胶柱层析的方法对样品中的多酚类物质进行分离纯化。多酚类物质衍生后经GC-MS检测,结果得到四种物质,分别是1,2-Benzenedicarboxylic acid, butyl 2-methylpropyl ester（1,2-苯二甲酸丁基-2甲基酯）;Tributyl acetylcitrate（乙酰柠檬酸三丁酯）;9-Octadecenamide（油酸酰胺）;1,2-Benzenedicarboxylic acid, mono（2-ethylhexyl） ester（邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯）。

关键词：青檀内生真菌球毛壳抗氧化活性发酵液

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多菌灵抗性基因在球毛壳中的转化

高技术通讯 2002年第2期12卷 43-45页

作者：李梅杨谦宋金柱哈尔滨工业大学生命科学与工程系哈尔滨150001

利用PEG方法将多菌灵抗性基因通过质粒 pRB12 9转化到球毛壳原生质体 ,并在含 0 .5 μg/ml多菌灵浓度下筛选转化子 ,转化率可达 6～ 7个转化子 / μgDNA。转化子可在 10 0 0 μg/ml多菌灵处理条件下正常生长。将转化子在非选择压力下连... 详细信息

利用PEG方法将多菌灵抗性基因通过质粒 pRB12 9转化到球毛壳原生质体 ,并在含 0 .5 μg/ml多菌灵浓度下筛选转化子 ,转化率可达 6～ 7个转化子 / μgDNA。转化子可在 10 0 0 μg/ml多菌灵处理条件下正常生长。将转化子在非选择压力下连续培养 10代。

关键词：多菌灵抗性基因球毛壳多菌灵基因转化植物生长病原菌病害防治

关于保留球毛壳与橄榄色毛壳作为不同种的见解

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真菌学报 1987年第2期 82-85页

作者： H.K.SETH 陈庆涛陈扬德英国格拉斯哥工艺学院生物系中国科学院微生物研究所中国科学院微生物研究所格拉斯哥北京

球毛壳(Chaetomium globosum Kze.)系 Kunze 于1817年报道见于丹麦石竹(Dianthus carthusianorum L.)茎上的毛壳菌属(Chaetomium)的第一个种(模式种)。Cooke and Ellis 在1878年描述了见于飞蓬属(Erigeron L.)腐茎上的橄榄色毛壳(*** *** E.)。在 Chivers(1915)、Skolko and Groves(1953)、Udagawa(1960)、Ames(1963)和 Seth(1972)关于毛壳菌属的专著都曾指出很难划分这两个种的界限。Skolk and Groves(1953)区分此两个种时以橄榄色毛壳具有较大的子囊壳、较宽的顶附属丝和较大的子囊孢子,而 Chivers(1915)则认为橄榄色毛壳是球毛壳的异名,Udagawa(1960)区分此两个种仅根据子囊孢子的长度和宽度,他认为橄榄色毛壳的子囊孢子大于球毛壳的子囊孢子。Seth(1972)在他的专著中虽保留此两个种作为独立种,但他指出限于他镜检过的标本材料及根据 Chivers 专著中的球毛壳的特征辑要概括了橄榄色毛壳的特征,对这两个种的区分界限确实是很难划分的。最近我们在北京采集和分离了来源于不同的植物和动物材料上的毛壳菌种类,以期进行北京地区毛壳菌种类调查研究。我们分离获得许多球毛壳——橄榄色毛壳类的毛壳菌菌株。参考了不同作者对这两个种的子囊壳、顶附属丝、侧附属丝、子囊及子囊孢子的特征记载,对北京的这一类型菌株进行了细致研究,认为球毛壳与橄榄色毛壳确有形态学特征区别,表现在橄榄色毛壳的子囊壳、顶附属丝和子囊孢子较球毛壳的更为粗壮,兼之球毛壳的顶附属丝较橄榄色毛壳的为窄且有分隔和微粗糙,球毛壳的子囊孢子呈浅橄榄褐色至暗橄榄褐色,含两个折光性油滴而橄榄色毛壳的子囊孢子呈暗橄榄褐色,量度亦较大,凭依经验即可鉴别此两个不同种。

关键词：球毛壳橄榄色毛壳子囊壳顶附属丝侧附属丝子囊孢子

利用三种梢栖真菌生物防治落叶松枯梢病的研究

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林业科学研究 2012年第6期25卷 685-690页

作者：刘秀嶶刘雪峰王鹏李成德东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040

从落叶松梢栖真菌筛选出对落叶松枯梢病病原菌有抑制作用的菌株,对落叶松枯梢病进行生物防治。将自落叶松梢部分离到的11种梢栖真菌与落叶松枯梢病病原菌进行对峙培养,根据被覆盖程度、抑菌率、拮抗系数和防治预试验的结果,综合评价后发... 详细信息

从落叶松梢栖真菌筛选出对落叶松枯梢病病原菌有抑制作用的菌株,对落叶松枯梢病进行生物防治。将自落叶松梢部分离到的11种梢栖真菌与落叶松枯梢病病原菌进行对峙培养,根据被覆盖程度、抑菌率、拮抗系数和防治预试验的结果,综合评价后发现:粪生粪壳、深绿木霉和球毛壳3种梢栖真菌对落叶松枯梢病有良好的拮抗作用。利用这3个菌株在黑龙江省勃利县通天一林场国富沟进行林间防治试验,结果表明:防治效果为粪生粪壳>代森锰锌400倍液>深绿木霉>球毛壳;深绿木霉和粪生粪壳喷洒浓度50%和球毛壳喷洒浓度75%时,真菌多样性最多,梢栖真菌系统较其他浓度更为稳定,与化学防治相比,既达到了防治目的又具有不污染环境的优势。

关键词：落叶松葡萄座腔菌球毛壳深绿木霉粪生粪壳

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故宫博物院库房的霉菌调查与研究

故宫博物院院刊 1997年第1期 86-91页

作者：王春蕾田金英马淑琴隗亚林

故宫博物院是以明清古建筑为基础建立起来的博物馆,无论是文物展览还是文物库房都要利用古建筑。对于有机质材料制成的文物来说,在温度、湿度比较高的情况下就未免会受到虫、霉的破坏(即使是无机材料制成的文物也会受到细菌的破坏),而... 详细信息

故宫博物院是以明清古建筑为基础建立起来的博物馆,无论是文物展览还是文物库房都要利用古建筑。对于有机质材料制成的文物来说,在温度、湿度比较高的情况下就未免会受到虫、霉的破坏(即使是无机材料制成的文物也会受到细菌的破坏),而古建筑本身就是文物,不可能对其进行大的改造以适应文物展览及文物保管的要求。在这种情况下,只能依靠防虫防霉药物对文物进行保护。现在库房所用的樟脑由于用量大,使用年代久远,多数虫霉已对它产生抗药性。

关键词：调查与研究故宫博物院霉菌宛氏拟青霉文物展览杂色曲霉古建筑球毛壳构巢曲霉交链

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三种拮抗菌对苗木立枯病病原菌的影响

北方园艺 2011年第24期 167-169页

作者：周秀华崔磊武术杰刘菊秋长春大学生物科学技术学院吉林长春130012 哈尔滨工业大学食品科学与工程学院黑龙江哈尔滨150010 吉林上营森林经营局吉林舒兰132607

采用PDA综合培养基对3种拮抗菌和2种苗木立枯病病原菌进行对峙培养,研究3种拮抗菌对苗木立枯病病原菌的抑制效果。结果表明:绿色木霉(Trichoderma viride)、桔绿木霉(Trichoderm citrinoviridevs)、球毛壳(Chaetomiumg lobosum)3种拮抗... 详细信息

采用PDA综合培养基对3种拮抗菌和2种苗木立枯病病原菌进行对峙培养,研究3种拮抗菌对苗木立枯病病原菌的抑制效果。结果表明:绿色木霉(Trichoderma viride)、桔绿木霉(Trichoderm citrinoviridevs)、球毛壳(Chaetomiumg lobosum)3种拮抗菌对2种苗木立枯病病原菌尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)均有抑制作用,对Fusarium oxysporum的抑制效果最好的为Trichoderma citrinoviridevs,对Fusariums olani抑制效果最好的为Trichoderma viride。

关键词：木霉菌球毛壳尖镰孢菌腐皮镰刀菌拮抗作用

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三株深海真菌化学成分与生物活性研究

三株深海真菌化学成分与生物活性研究

作者：张智涵华南农业大学

学位级别：硕士

本论文由五节组成,第一节详细的论述了近10年来深海生境真菌次生代谢产物及生物活性的研究进展。第二节介绍一株深海来源的苏门达腊青霉菌(Penicillium sumatrense)化学成分及生物活性研究。第三节介绍一株深海来源的青霉菌(Penicillium... 详细信息

本论文由五节组成,第一节详细的论述了近10年来深海生境真菌次生代谢产物及生物活性的研究进展。第二节介绍一株深海来源的苏门达腊青霉菌(Penicillium sumatrense)化学成分及生物活性研究。第三节介绍一株深海来源的青霉菌(Penicillium biourgeianum)化学成分及生物活性研究。第四节介绍一株深海来源球毛壳真菌(Chaetomium globosum)的化学成分及生物活性研究。第五节为结论与讨论。我们运用多种波谱学分析方法与技术,包括手段IR(infrared spectra)、UV(ultra violet spectra)、NMR(Nuclear Magnetic Resonance)、MS(mass spectrum)、CD(circular dichroism)、Mosher’s反应等,从上述三株菌株苏门达腊青霉菌、青霉菌、球毛壳真菌中共分离鉴定了31个化合物,其中7个结构新颖化合物,24个已知化合物。化合物的主要结构类型包括大环内酯类(化合物1-6)、霉酚酸类(化合物7-13)、生物碱类(化合物15-23)、聚酮类(化合物26-31),其中化合物1-4、7、15-16为新化合物。我们对不同类型的化合物进行了不同类型的生物活性测试。我们对大环内酯类化合物进行抑制NO生成的生物活性实验,其中,化合物6具有显著的抑制LPS诱导巨噬细胞RAW264.7产生NO的活性(IC为0.91μM,强于阳性对照药)。我们对霉酚酸类化合物进行了抑制甘蔗鞭黑粉菌二态型转变的生物活性实验,化合物8-10,12和13能显著抑制甘蔗鞭黑粉菌(***)从酵母态向菌丝态的转化,但不直接杀死黑粉菌细胞。其中化合物8和化合物9活性最好,抑制黑粉二态型转变(dimorphic switch)的最低有效浓度分别为0.94μM和1.2μM。我们对吲哚大环生物碱类化合物进行细胞毒活性实验,其中,化合物20对乳腺癌细胞LNCaP和小鼠黑色素瘤高转移细胞B16F10有较强的细胞毒活性,其IC值分别为0.62μM和2.78μM。本文对三株深海来源的真菌中次生代谢产物及生物活性进行了的研究,从中分离鉴定了7个新结构化合物,部分化合显示出较强的生物活性。该研究结果表明了海洋天然产物化学结构及生物活性的多样性,为深入合理研发与利用海洋生物资源提供了科学基础。

关键词：深海真菌青霉菌苏门达腊青霉球毛壳生物活性