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猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用

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中国药理学与毒理学杂志 2010年第4期24卷 266-273页

作者：许文李心群温州医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035 温州医学院附属第一医院急诊科浙江温州325035

目的观察猪苓多糖(PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用,并研究Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法用PPS12.5,25,50及100mg·L-1刺激C3H/HeN小鼠和TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠脾细胞72h或腹腔巨噬细胞24h,以[3H]TdR掺入法检测脾细胞增殖反应;... 详细信息

目的观察猪苓多糖(PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用,并研究Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法用PPS12.5,25,50及100mg·L-1刺激C3H/HeN小鼠和TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠脾细胞72h或腹腔巨噬细胞24h,以[3H]TdR掺入法检测脾细胞增殖反应;以Griess法测定腹腔巨噬细胞培养上清一氧化氮(NO)水平,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;以溴化氰活化多糖的方法制备荧光胺(Flu)标记的PPS(Flu-PPS)及Flu-葡聚糖,应用流式细胞仪及激光共聚焦显微镜检测Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合。结果 PPS可明显促进C3H/HeN小鼠脾细胞增殖并诱导腹腔巨噬细胞分泌NO,IL-1β和TNF-α,且具有浓度依赖性(r=0.999,P<0.01)。用抗TLR4单抗20mg·L-1与C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞预孵育1h后加入PPS50mg·L-1,与单独PPS50mg·L-1孵育比较,巨噬细胞培养上清IL-1β和TNF-α浓度分别由(0.38±0.06)μg·L-1和(0.29±0.05)μg·L-1降至(0.18±0.01)μg·L-1和(0.12±0.02)μg·L-1,降幅达52.6%和58.6%(P<0.01)。PPS对C3H/HeN小鼠的脾细胞增殖、腹腔巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α的作用明显强于C3H/HeJ小鼠:PPS12.5～100mg·L-1组脾细胞增殖分别增加了2.4,1.7,1.5和22.2倍,IL-1β增加了0.9,1.3,1.2和1.1倍,TNF-α增加了1.3,0.9,0.6和0.6倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪及激光共聚焦显微镜分析结果表明,Flu-PPS1mg·L-1与小鼠腹腔巨噬细胞结合的荧光强度显著高于Flu-葡聚糖,增加Flu-PPS浓度至5mg·L-1,荧光强度并未相应增强,表明Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合具有饱和性;未标记的PPS100mg·L-1及抗TLR4单抗200mg·L-1可明显阻断Flu-PPS与巨噬细胞的结合。结论 PPS可能通过TLR4活化小鼠腹腔巨噬细胞。

关键词：猪苓多糖腹腔巨噬细胞 Toll样受体4

猪苓多糖对M1型巨噬细胞细胞因子表达的调节作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第10期30卷 1030-1033,1038页

作者：江泽波黄闰月张娴胡金萍赵晋曾星广州中医药大学第二附属医院广东广州510006

目的通过诱导构建M1型巨噬细胞模型研究猪苓多糖对白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和转化生长因子β(TGF-β)、IL-10 mRNA的表达影响,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节机制。方法实验分为... 详细信息

目的通过诱导构建M1型巨噬细胞模型研究猪苓多糖对白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和转化生长因子β(TGF-β)、IL-10 mRNA的表达影响,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节机制。方法实验分为空白对照组、γ干扰素(IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞模型组、猪苓多糖高中低剂量组,浓度分别为200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL。用IFN-γ诱导RAW264.7巨噬细胞,用流式细胞术检测M1型巨噬细胞特异性指标CD16/CD32、CD86的表达,实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-10、iNOS、TNF-α、TGF-β的mRNA表达,观察不同剂量猪苓多糖对M1型巨噬细胞的影响。结果与空白组比较,IFN-γ的诱导RAW264.7巨噬细胞分化M1型巨噬细胞的特异性标志物CD16/CD32、CD86的表达明显升高。100μg/mL猪苓多糖组在3、6、9、12、24 h,IL-1β、iNOS、IL-10、TGF-β、TNF-α的mRNA表达升高,不同剂量猪苓多糖给药6 h后各因子的表达量升高(P猪苓多糖促进M1型巨噬细胞IL-1β、iNOS、IL-10、TNF-α的mRNA表达。

关键词：猪苓多糖 M1型巨噬细胞细胞因子双向调节作用

猪苓多糖对S180细胞培养上清免疫抑制作用影响的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第2期20卷 234-237页

作者：杨丽娟王润田刘京生佟慧邓郁青李全海河北医科大学基础所免疫室河北石家庄050017 河北省医学科学院河北石家庄050021

目的 :研究猪苓多糖对肿瘤细胞系S180培养上清免疫抑制作用的影响。方法 :用MTT比色法检测有或无猪苓多糖作用的肿瘤细胞S180培养上清 (简称肿瘤上清 ) ,对ConA诱导的小鼠脾细胞增殖和IL 2产生 ,对小鼠脾细胞的杀伤活性 ,以及对CTLL 2... 详细信息

目的 :研究猪苓多糖对肿瘤细胞系S180培养上清免疫抑制作用的影响。方法 :用MTT比色法检测有或无猪苓多糖作用的肿瘤细胞S180培养上清 (简称肿瘤上清 ) ,对ConA诱导的小鼠脾细胞增殖和IL 2产生 ,对小鼠脾细胞的杀伤活性 ,以及对CTLL 2细胞对IL 2反应性的影响。用流式细胞仪检测该培养上清对小鼠脾细胞表面IL 2Rα表达的影响。结果 :无猪苓多糖作用的肿瘤上清可强烈抑制上述 5项指标 ;而猪苓多糖作用的肿瘤上清则可明显上调上述方法中所测 5项指标。若先用含猪苓多糖培养液培养肿瘤细胞 2 4h或 48h ,而后洗去或不洗去猪苓多糖 ,再培养肿瘤细胞 2 4h ,所获肿瘤上清也可明显上调上述 5项指标。结论 :猪苓多糖可抵消肿瘤上清的免疫抑制作用 ,下调肿瘤细胞S180合成和

关键词：猪苓多糖肿瘤免疫抑制小鼠

猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠骨髓来源树突状细胞作用研究

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中草药 2011年第1期42卷 118-123页

作者：李心群许文温州医学院附属第一医院浙江温州325035 温州医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035

目的研究猪苓多糖(Polyporus umbellatus polysaccharides,PPS)活化小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow dendritic cells,BMDC)功能调节的作用机制,进一步阐明PPS的免疫学活性机制。方法以3H-TdR掺入法、ELISA及流式细胞术检测BMDC表型和功能的各项指标。结果 PPS刺激小鼠BMDC表达CD11c、CD86及白细胞介素-12、-10(IL-12、IL-10)产生,并且具有剂量依赖效应。另外,较阴性对照组,经PPS诱导成熟的BMDC其活化初始T细胞的能力显著提高而吞噬能力显著下降。抗小鼠Toll样受体4(TLR4)单抗可抑制PPS刺激BMDC产生IL-12 p40及阻断荧光标记猪苓多糖(fluorescence-labeled PPS,f-PPS)与BMDC的结合,而抗TLR2及补体受体3(CR3)单抗却无此效应。结论 PPS可经TLR4活化小鼠BMDC发挥免疫调节活性。

关键词：猪苓多糖树突状细胞 Toll样受体4(TLR4) 免疫调节荧光标记

猪苓多糖对毒激素-L诱导大鼠恶病质样表现的抑制作用

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中国中西医结合杂志 1997年第4期17卷 232-233页

作者：吴耕书张荔彦奥田拓道沈阳医学院日本国爰媛大学医学部

目的：探讨肿瘤恶病质的病因及猪苓多糖治疗作用机理。方法：观察猪谷多糖对毒激素－Ｌ诱导的恶病质样表现的作用。结果：从人原发性肝癌患者腹水中提取的毒激素－Ｌ可在体外显著诱导脂解，体内抑制摄入行为，降低血锌及升高血铜（Ｐ＜... 详细信息

目的：探讨肿瘤恶病质的病因及猪苓多糖治疗作用机理。方法：观察猪谷多糖对毒激素－Ｌ诱导的恶病质样表现的作用。结果：从人原发性肝癌患者腹水中提取的毒激素－Ｌ可在体外显著诱导脂解，体内抑制摄入行为，降低血锌及升高血铜（Ｐ＜０．０１）。结论：毒激素－Ｌ与肿瘤恶病质密切相．关，猪苓多糖可抑制毒激素－Ｌ在诱导肿瘤恶病质中的作用。

关键词：猪苓多糖毒激素-L 恶病质肿瘤

猪苓多糖通过HuR调节Cyclin D1表达抑制A549细胞增殖

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中草药 2016年第6期47卷 944-948页

作者：沈耿徐谦曾星广州中医药大学第二临床医学院广东广州510000 广中医药大学基础医学院广东广州510000

目的研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)抑制肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法设对照组和PPS低、中、高剂量组,用MTT实验、流式细胞术检测PPS对细胞增殖的影响,用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测PPS对A549细胞Cyclin D1 ... 详细信息

目的研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)抑制肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法设对照组和PPS低、中、高剂量组,用MTT实验、流式细胞术检测PPS对细胞增殖的影响,用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测PPS对A549细胞Cyclin D1 m RNA表达水平及其稳定性的影响,用Western blotting检测PPS对A549细胞Cyclin D1蛋白、人抗原R(human antigen R,Hu R)蛋白表达及对Hu R蛋白胞浆及胞核内分布的影响。结果与对照组比较,中、高剂量的PPS作用后,A549细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),Cyclin D1 m RNA稳定性降低(P<0.05),Cyclin D1 m RNA及蛋白表达减少(P<0.05),Hu R总蛋白没有明显变化,但胞浆Hu R蛋白表达下降(P<0.05),胞核Hu R蛋白表达升高(P<0.05)。结论 PPS可抑制A549细胞增殖,其作用机制可能与改变Hu R在细胞内定位,从而降低Cyclin D1 m RNA稳定性及Cyclin D1蛋白表达有关。

关键词：猪苓多糖人抗原R 肺癌细胞周期蛋白D1 细胞增殖

猪苓多糖对重组卡介苗在膀胱癌细胞株T24作用部位的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第11期23卷 1001-1003页

作者：曾星杨明王镓张娴孙景波段小军广州中医药大学第二附属医院中心实验室广东广州510120 广州中医药大学第二附属医院外科广东广州510120

目的:探讨猪苓多糖(PPS)对重组绿色荧光蛋白的卡介苗(rBCG)在人膀胱癌细胞株T24作用部位的影响。方法:将rBCG表达的绿色荧光蛋白作为报告基因,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析rBCG以及其与PPS协同rBCG刺激培养的T24细胞的变化。结果... 详细信息

目的:探讨猪苓多糖(PPS)对重组绿色荧光蛋白的卡介苗(rBCG)在人膀胱癌细胞株T24作用部位的影响。方法:将rBCG表达的绿色荧光蛋白作为报告基因,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析rBCG以及其与PPS协同rBCG刺激培养的T24细胞的变化。结果:T24细胞与rBCG相互作用24h以后,T24细胞质中发现明显的绿色荧光(86.335±5.856)。流式细胞术检测显示rBCG组24、48h细胞,SS&FS为参数的散点光信号强于对照组,T24细胞群向右上方偏移;FL1通道检测到GFP+T24细胞[(8.7±1.572)%、(13.8±2.31)%,P<0.01]。rBCG联合PPS用药组T24细胞细胞核内绿色荧光(72.603±1.165)增强,细胞质荧光(93.06±0.958)减弱,核/质荧光强度比(0.78±0.005)增大,与rBCG组(62.832±2.909,105.306±6.393,0.597±0.012)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rBCG能够直接进入T24细胞细胞质中。

关键词：重组卡介苗猪苓多糖膀胱肿瘤激光共聚焦显微镜流式细胞术

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猪苓多糖的提取及硫酸酯化研究

中药材 2007年第2期30卷 160-163页

作者：刘小平徐述明武汉理工大学化工学院制药工程系湖北武汉430070

目的:从中药猪苓中提取猪苓多糖,对其进行硫酸酯化,并比较是否加入分散剂对酯化结果的影响。方法:将纯化的多糖运用尺寸排除色谱和激光光散射联用仪(SEC-LLS)测定其分子量,氯磺酸-吡啶法进行硫酸酯化。通过傅立叶变红外光谱分析酯化前... 详细信息

目的:从中药猪苓中提取猪苓多糖,对其进行硫酸酯化,并比较是否加入分散剂对酯化结果的影响。方法:将纯化的多糖运用尺寸排除色谱和激光光散射联用仪(SEC-LLS)测定其分子量,氯磺酸-吡啶法进行硫酸酯化。通过傅立叶变红外光谱分析酯化前后的结构。结果:得到分子量分布较窄的多糖组分,是一种水溶性的粘多糖,其重均分子量在1.6×105Del左右;并通过硫酸酯化得到硫酸多糖。结论:得到分子量在1.6×105Del左右的β-D-葡萄吡喃糖苷,加入分散剂对酯化收率有很大提高,但会降低其分子量与硫酸基的含量。

关键词：猪苓多糖猪苓多糖硫酸酯硫酸酯化分析

灵芝多糖和猪苓多糖及其复方的免疫调节作用研究进展

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食品科学 2020年第17期41卷 275-282页

作者：黄青李丽媛刘晴晴王钊清华大学药学院蛋白质科学教育部重点实验室北京100084 清华大学天津高端装备研究院天津300300

多糖是由多个单糖聚合而成的一类天然高分子物质,食用菌多糖是多糖家族中的一员,作为天然化合物,食用菌多糖在食品、药品和保健品研发中具有良好的发展前景。灵芝和猪苓均是珍贵的食药用菌,有很高的营养价值。两者均有广泛的药理作用,... 详细信息

多糖是由多个单糖聚合而成的一类天然高分子物质,食用菌多糖是多糖家族中的一员,作为天然化合物,食用菌多糖在食品、药品和保健品研发中具有良好的发展前景。灵芝和猪苓均是珍贵的食药用菌,有很高的营养价值。两者均有广泛的药理作用,如抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等。灵芝和猪苓中含有多种活性成分,其中,多糖主要发挥免疫调节的作用,能够作用于多种免疫细胞,调节机体的免疫功能。据报道,灵芝多糖和猪苓多糖组成的复合制剂能增强小鼠先天性免疫功能。本文将对多糖的性质进行简要介绍,总结概括灵芝多糖和猪苓多糖的免疫调节功能及作用机制,为灵芝多糖和猪苓多糖在免疫功能调节方面的研发和应用提供指导。

关键词：灵芝多糖猪苓多糖免疫调节