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特异性蛋白1在原发性肝癌中的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2023年第11期40卷 2308-2311页

作者：颜俊伟周磊姜挺刘璟甘洪颖张姮华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院消化内科分子诊断湖北省重点实验室武汉430014

目的:探究特异性蛋白1(SP1)在肝癌组织中的表达及其与相关临床特征的关联,分析其在肝癌中的诊断和预后价值。方法:选取华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院2017年1月至2019年1月期间30例住院接受手术切除的肝细胞肝癌患者的癌和对... 详细信息

目的:探究特异性蛋白1(SP1)在肝癌组织中的表达及其与相关临床特征的关联,分析其在肝癌中的诊断和预后价值。方法:选取华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院2017年1月至2019年1月期间30例住院接受手术切除的肝细胞肝癌患者的癌和对应癌旁组织标本,其中男28例、女2例,年龄(48.0±7.3)岁。采用免疫组织化学方法(IHC)检测SP1的表达。从高通量基因表达数据库(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载肝癌患者的基因表达数据以及临床信息,以分析SP1在癌和癌旁组织中的差异表达。利用受试者工作特征曲线(ROC)评估SP1区分肝癌和正常组织的能力。根据SP1表达中位数,将患者分为高表达组(181例)和低表达组(181例),并进行Kaplan-Meier生存分析。利用基因集富集分析(GSEA)研究SP1调控的潜在分子机制。结果:IHC显示SP1在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织[80%(24/30)比40%(12/30),χ^(2)=8.403,P1]。对TCGA和GEO数据集分析显示SP1的表达水平与肝癌分化程度相关(r=0.197,P1);ROC分析表明,SP1诊断肝癌的ROC曲线下面积均大于0.7;Kaplan-Meier分析显示高表达SP1肝癌患者的总体生存期(OS)低于低表达SP1的肝癌患者(中位OS:3.83年比4.91年,χ^(2)=4.592,P1是影响肝癌预后的危险因素(风险比=1.463,95%可信区间:1.031~2.077,P1肝癌中Wnt、细胞周期等细胞通路显著富集。结论:SP1在肝癌中高表达。

关键词：肝癌特异性蛋白1 诊断预后基因集富集分析

原代大鼠海马神经元中Sema3F对特异性蛋白1的蛋白表达影响

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原代大鼠海马神经元中Sema3F对特异性蛋白1的蛋白表达影响

作者：辛国燕内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的通过体外建立原代大鼠海马神经元培养体系,探讨原代大鼠海马神经元中Sema3F对特异性蛋白1蛋白的表达影响,为探索Sema3F相关疾病提供理论依据。方法选取新生24小时内的Wistar大鼠,提取海马组织进行原代培养,将培养至72小时的细胞分... 详细信息

目的通过体外建立原代大鼠海马神经元培养体系,探讨原代大鼠海马神经元中Sema3F对特异性蛋白1蛋白的表达影响,为探索Sema3F相关疾病提供理论依据。方法选取新生24小时内的Wistar大鼠,提取海马组织进行原代培养,将培养至72小时的细胞分为实验组和对照组。实验组:加入终浓度为10ng/ml的Sema3F,分别取0分钟,5分钟,15分钟,30分钟。对照组:加入相同浓度的胎牛血清,分别取相同时间。应用Western Blot技术检测特异性蛋白1的蛋白表达含量。应用SPSS22.0统计软件进行统计学分析,P特异性蛋白1蛋白的表达量,对照组不同时间点特异性蛋白1的蛋白表达量无明显变化趋势。与对照组相比,实验组中不同时间段的特异性蛋白1的蛋白表达也无明显变化趋势。结论原代大鼠海马神经元中Sema3F对特异性蛋白1的蛋白表达量无影响。

关键词：神经元原代培养 Sema3F 特异性蛋白1

Krüppel样因子4、特异性蛋白1和细胞角蛋白19在分化型甲状腺癌中的表达关系及意义

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2021年第11期28卷 684-688页

作者：王志杰霍占江田亮张强董路玲郝敏丽张家口市第一医院耳鼻咽喉头颈外科河北张家口075000 张家口市第一医院内分泌科河北张家口075000 张家口市第一医院神经外科河北张家口075000

目的观察分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)患者血清中Krüppel样因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)、特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)和细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)的表达水平,并探讨其临床意义。方法选取2010年1月~2019年9月经张家口市第一医院耳鼻咽喉头颈外科确诊的DTC患者328例为观察组,术中留取DTC组织和癌旁正常甲状腺组织(距癌组织2 cm以上),同期健康人320名为对照组。结果观察组患者血清中KLF4 mRNA表达水平低于对照组[(1.13±0.34)vs(1.92±0.45)](P<0.05),SP1[(1.28±0.36)vs(0.79±0.18)]、CK19[(2.91±0.84)vs(1.82±0.40)]mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);DTC患者血清中KLF4、SP1、CK19 mRNA表达水平与TNM分期和淋巴结转移均有关(P<0.05)。结论KLF4 mRNA在DTC患者血清中呈低表达,SP1、CK19 mRNA均呈现高表达,三者存在一定相关性,与TNM分期和淋巴结转移有关,对DTC有一定诊断价值,且三者联合检测诊断价值更高。

关键词：甲状腺肿瘤逆转录聚合酶链反应免疫组织化学 Krüppel样因子4 特异性蛋白1 细胞角蛋白19 分化型甲状腺癌

环状RNA0005654与特异性蛋白1在甲状腺癌患者中表达水平及临床意义的研究

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齐齐哈尔医学院学报 2023年第1期44卷 13-17页

作者：杨翠曹志国韩圣瑾周正武皖西卫生职业学院临床医学系安徽六安237005 皖西卫生职业学院附属医院普外科安徽六安237005 安徽医科大学附属六安医院急诊外科安徽六安237005

目的探究环状RNA0005654(Circ0005654)、特异性蛋白1(SP1)在甲状腺癌患者中的表达情况及临床意义。方法选择2017年1月—2019年7月在皖西卫生职业学院附属医院及安徽医科大学附属六安医院行根治性手术的甲状腺癌患者76例作为研究对象,... 详细信息

目的探究环状RNA0005654(Circ0005654)、特异性蛋白1(SP1)在甲状腺癌患者中的表达情况及临床意义。方法选择2017年1月—2019年7月在皖西卫生职业学院附属医院及安徽医科大学附属六安医院行根治性手术的甲状腺癌患者76例作为研究对象,术中取甲状腺癌组织及配对癌旁组织,收集患者临床病理资料。甲状腺癌组织与癌旁组织中SP1蛋白表达情况采用免疫组织化学法(IHC)及Western Blot(WB)检测;Circ0005654表达水平利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法进行检测。通过比较癌组织及癌旁组织中Circ0005654、SP1表达的差异性,分析其与甲状腺癌患者临床病理特征之间的关系。统计患者术后3年生存率,分析Circ0005654、SP1水平对患者预后的影响。结果 WB检测显示癌旁组织中SP1表达水平低于癌组织,差异有统计学意义(t=2.795,P=0.019);IHC结果显示,SP1在癌旁组织中的表达阳性率低于癌组织(χ~2=159.61,P<0.001);qRT-PCR检测显示Circ0005654在甲状腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织[(2.13±0.59)vs(0.67±0.56)],两组比较,差异具有显著统计学意义(t=15.608,P<0.0001)。Circ0005654、SP1表达水平与TC患者肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期和包膜侵犯相关(P均<0.05)。根据甲状腺癌组织中Circ0005654表达水平的不同,高表达组3年生存率为77.5%,低于低表达组的94.4%,差异有统计学意义(χ~2=4.395,P=0.036);SP1高表达组和低表达组患者3年生存率分别为78.6%和100%,两组比较,差异有统计学意义(χ~2=4.973,P=0.049)。结论 Circ0005654与SP1在甲状腺癌组织中均存在高表达,与患者肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期和包膜侵犯相关,Circ0005654及SP1水平越高,生存率越低,可能具有促进甲状腺癌进展作用。

关键词：甲状腺癌环状RNA-0005654 特异性蛋白1 生存率

再生基因4蛋白、特异性蛋白1在卵巢癌组织中的表达及临床意义

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包头医学 2024年第1期48卷 21-23页

作者：秦彩云联勤保障部队第九八八医院妇产科河南郑州450007

目的:探讨再生基因4(REG4)蛋白、特异性蛋白1(SP1)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法:选取2019年7月~2022年7月期间收治的卵巢癌(OC)患者60例,术后提取卵巢癌变组织和癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测REG4和SP1蛋白的表达情况... 详细信息

目的:探讨再生基因4(REG4)蛋白、特异性蛋白1(SP1)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法:选取2019年7月~2022年7月期间收治的卵巢癌(OC)患者60例,术后提取卵巢癌变组织和癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测REG4和SP1蛋白的表达情况,对比卵巢癌变组织和癌旁组织中REG4蛋白和SP1蛋白阳性情况,分析REG4蛋白和SP1蛋白在卵巢癌组织中表达与临床病理参数的相关性。结果:卵巢癌变组织REG4蛋白、SP1蛋白的阳性表达率为86.67%、71.67%高于癌旁正常组织的31.67%、16.67%(P0.05);病理分类中REG4阳性表达率从高到低依次为浆液性腺癌、子宫内膜样腺癌、粘液性腺癌、透明细胞癌(P蛋白、SP1蛋白的阳性表达率均高于正常卵巢组织,并与病理分类、FIGO分期、分化程度、淋巴转移密切相关,对于OC的临床诊断及预后改善具有重要意义。

关键词：再生基因4蛋白特异性蛋白1 卵巢癌临床病理参数

扶正化瘀胶囊调节特异性蛋白1相关通路抗心肌纤维化作用机制研究

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世界中医药 2020年第12期15卷 1714-1718页

作者：国倩倩吴丹丹高毅洁王曼曼朱珂贾冬冬杨睿王京刘丽张冬梅北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室北京100700

目的:观察扶正化瘀胶囊对心梗大鼠特异性蛋白1相关通路的影响,探讨其防治心肌纤维化的可能作用机制。方法:结扎左冠脉前降支建立大鼠急性心梗模型,分为模型组和扶正化瘀组。假手术组只穿线不结扎。扶正化瘀组按0.4 g/(kg·d)灌胃,模型... 详细信息

目的:观察扶正化瘀胶囊对心梗大鼠特异性蛋白1相关通路的影响,探讨其防治心肌纤维化的可能作用机制。方法:结扎左冠脉前降支建立大鼠急性心梗模型,分为模型组和扶正化瘀组。假手术组只穿线不结扎。扶正化瘀组按0.4 g/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组给予等体积去离子水,共8周。HE和Masson染色检测病理学变化;Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测特异性蛋白1(Sp1)、Gata4、转化生长因子(TGF)-β1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、血小板反应蛋白1(Tsp1)及其mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型大鼠心肌细胞破碎,纤维结缔组织大量增生,胶原容积分数(CVF)增加(P1),TGF-β1、ColⅠ、Tsp1 mRNA及Sp1、Gata4、TGF-β1、ColⅠ蛋白表达明显升高(P1),Tsp1蛋白表达降低(P1);与模型组比较,扶正化瘀组细胞膜相对完整,胶原相对减少,CVF下降(P1),Sp1、Gata4、TGF-β1、ColⅠ、Tsp1 mRNA及Gata4、ColⅠ蛋白表达明显降低(P1)。结论:扶正化瘀胶囊在一定程度上改善心梗后心肌纤维化的作用机制可能与Sp1-Gata4-ColⅠ-Tsp1轴有关。

关键词：扶正化瘀胶囊心肌梗死心肌纤维化特异性蛋白1 转化生长因子-β1 Ⅰ型胶原血小板反应蛋白1

miR-885-5p对人心肌成纤维细胞增殖和基质金属蛋白酶2和特异性蛋白1基因表达的影响

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中国心血管病研究 2019年第12期17卷 1084-1087页

作者：张新生刘超群刘梦瑶滕松许何丽窦文静王喜燕王玉华张越沈阳医学院公共卫生学院职业卫生教研室

目的探讨转染miR-885-5p 48 h后对人心肌成纤维细胞(HEH2)增殖的调控作用以及对基质金属蛋白酶2(MMP2)基因和特异性蛋白1(SP1)基因的表达的影响,为临床心血管疾病研究提供研究线索。方法培养HEH2细胞待细胞长到60%时通过脂质体转染方法... 详细信息

目的探讨转染miR-885-5p 48 h后对人心肌成纤维细胞(HEH2)增殖的调控作用以及对基质金属蛋白酶2(MMP2)基因和特异性蛋白1(SP1)基因的表达的影响,为临床心血管疾病研究提供研究线索。方法培养HEH2细胞待细胞长到60%时通过脂质体转染方法对细胞转染miR-885-5p和阴性对照(NC),48h后用CCK8细胞活力试剂盒来检查细胞增殖情况。实时荧光定量PCR法检查miR-885-5p对MMP2和SP1的RNA表达的影响。结果CCK8结果表明转染48 h后阴性对照组细胞活率为(100±8)%,miR-885-5p组细胞活率为(139±16)%,提示miR-885-5p促进HEH2细胞的增殖(n=6,P<0.05),HEH2细胞转染miR-885-5p后,心肌重构相关基因MMP2和SP1的miRNA表达增高(P<0.05)。结论miR-885-5p能够促进人心肌成纤维细胞的增殖,同时促进细胞中MMP2和SP1基因的表达,提示miR-885-5p抑制剂可能是心肌纤维化相关疾病的新策略。

关键词： miR-885-5p 增殖特异性蛋白1 基质金属蛋白酶2

转录因子SP1调控肝细胞癌中三元基序家族蛋白7基因表达的机制

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第9期39卷 1314-1321页

作者：樊昌宇丁涵徐乙冉咸蕊闫凤娟江苏师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室江苏徐州221116

三元基序家族蛋白7(tripartite motif-containing protein 7,TRIM7)作为E3泛素连接酶TRIM家族的成员,在免疫调控、代谢等生理过程中发挥重要调控作用。此外,TRIM7的异常表达与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展密切相... 详细信息

三元基序家族蛋白7(tripartite motif-containing protein 7,TRIM7)作为E3泛素连接酶TRIM家族的成员,在免疫调控、代谢等生理过程中发挥重要调控作用。此外,TRIM7的异常表达与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展密切相关并呈现出复杂的调控作用,但其在HCC中的表达调控机制尚不清楚。本研究首先利用多种在线数据库分析发现,TRIM7在HCC中高表达,并且TRIM7高表达的肝细胞癌患者预后较差;利用UCSC、JASPAR数据库分析预测TRIM7基因启动子区的转录因子结合位点。结果显示,TRIM7启动子上含有4个特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)转录因子结合位点。本研究利用双荧光素酶报告实验、ChIP-PCR方法检测发现,SP1通过直接结合在TRIM7启动子上的SP1结合位点,从而正调控TRIM7启动子驱动的转录活性。RT-qPCR、Western印迹检测结果进一步显示,过表达SP1在mRNA和蛋白质水平均上调TRIM7基因的表达(P<0.01),且利用SP1抑制剂Mithramycin A处理能够逆转SP1对TRIM7基因表达的调控作用(P<0.01)。总之,本研究初步揭示了TRIM7在肝细胞癌中高表达的调控机制,为深入研究该基因功能以及早期诊断、靶向治疗提供重要的理论依据。

关键词：肝细胞癌转录调控启动子三元基序家族蛋白7 特异性蛋白1

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载脂蛋白L1的转录调控机制的研究

载脂蛋白L1的转录调控机制的研究

作者：何宗存福建医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨载脂蛋白L1(Apolipoprotein L1,Apo L1)转录调控机制。方法:1.将构建好的Apo L1启动子重组载体通过瞬时转染导入不同细胞株,48h后提取蛋白,双荧光素酶报告基因法检测Apo L1 5’端上游调控区在不同细胞株间的转录活性大小。2.... 详细信息

目的:探讨载脂蛋白L1(Apolipoprotein L1,Apo L1)转录调控机制。方法:1.将构建好的Apo L1启动子重组载体通过瞬时转染导入不同细胞株,48h后提取蛋白,双荧光素酶报告基因法检测Apo L1 5’端上游调控区在不同细胞株间的转录活性大小。2.利用染色质免疫共沉淀方法(Ch IP)验证反式作用因子Sp1、IRF1、IRF2与Apo L1基因启动子-80nt265nt区域是否可特异性结合。3.将构建好的重组载体质粒p FLAG-Sp1、p FLAG-IRF1、p FLAG-IRF2转染细胞,蛋白质印迹法(western-blot)检测细胞内源性Sp1、IRF1、IRF2表达变化。4.将重组载体质粒p FLAG-Sp1、p FLAG-IRF1、p FLAG-IRF2转染细胞,利用实时反转录聚合酶链式反应(real time RT-PCR)技术和western-blot检测Sp1、IRF1、IRF2过表达对Apo L1表达的影响。5.将合成的Sp1-si RNA、IRF1-si RNA、IRF2-si RNA转染导入细胞,western-blot验证Sp1、IRF1、IRF2沉默对细胞内源性Sp1、IRF1、IRF2表达水平的影响。6.将合成的Sp1-si RNA、IRF1-si RNA、IRF2-si RNA转染导入细胞,real time RT-PCR和western-blot验证Sp1、IRF1、IRF2沉默对Apo L1表达的影响。结果:1.构建好的Apo L1启动子重组载体通过瞬时转染导入细胞后,双荧光素酶报告基因检测luciferase荧光值。与对照组相比,Hu H7(肝癌细胞株)组luciferase荧光值增加500倍,293A(肾癌细胞株)组增加200倍,Hep G2(肝癌细胞株)组增加75倍,AGS(胃腺瘤细胞)组增加65倍,Bxpc3(胰腺癌细胞株)组增加25倍。2.在体内反式作用因子Sp1、IRF1、IRF2和Apo L1启动子区上游-80nt265nt区域能够特异性结合。***1、IRF1、IRF2基因过表达分别促进细胞内源性Sp1、IRF1、IRF2蛋白水平表达。***1、IRF1、IRF2基因过表达促进Apo L1转录及表达。***1、IRF1、IRF2基因沉默分别抑制细胞内源性Sp1、IRF1、IRF2蛋白水平。***1、IRF1、IRF2基因沉默抑制Apo L1转录及表达。结论:*** L1启动子活性在肝肾细胞中最高。2.明确了Sp1、IRF1、IRF2转录因子直接结合Apo L1的启动子,调控Apo L1的转录。

关键词：载脂蛋白L1 转录调控特异性蛋白1 干扰素调节因子1 干扰素调节因子2