检索结果-南通市图书馆

江苏农业科学 2004年第1期32卷 55-57页

作者：殷向东徐健刘琴朱锦磊江苏里下河地区农业科学研究所江苏扬州225007

分析、探讨了甜菜夜蛾和棉铃虫对苏云金杆菌 (Bt)的敏感性以及Bt对它们的直接作用、预处理作用和“Bt制剂 +化学农药”联合作用等情况下的特异性反应。

关键词：甜菜夜蛾棉铃虫苏云金芽孢杆菌特异性反应敏感性 Bt 化学农药

基于特异性反应的表面增强拉曼光散射方法检测抗菌剂/生物标志物

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基于特异性反应的表面增强拉曼光散射方法检测抗菌剂/生物标志物

作者：孙锐上海师范大学

学位级别：硕士

抗菌剂是一类在一段时间内,使一些微生物的生长或繁殖低于必要水平的化学物质;其多为疏水,水溶性较差,生物相容性较好。生物标志物是一类与机体疾病发生密切相关的化合物,包括生物体内的小分子及蛋白、酶、核酸分子等生物大分子。通过... 详细信息

抗菌剂是一类在一段时间内,使一些微生物的生长或繁殖低于必要水平的化学物质;其多为疏水,水溶性较差,生物相容性较好。生物标志物是一类与机体疾病发生密切相关的化合物,包括生物体内的小分子及蛋白、酶、核酸分子等生物大分子。通过测定机体生物标志物浓度的高低,可以对疾病发生进程进行一定程度的预判。抗菌剂的不当使用或者生物标志物含量异常可以直接或者间接影响或反映人类的健康。对于抗菌剂小分子化合物的检测多采用高效气/液相色谱法和质谱法等;而对于生物标志物,因其具有生物活性,通常能够发生特定的理化反应,因而可以采用荧光探针、酶联免疫反应等方法进行检测。尽管这些方法准确、可靠,但是涉及的实验过程十分复杂,耗时久,存在提高或改进的空间。表面增强拉曼散射（Surface-Enhanced Raman Scattering,SERS）是一种快速、无创、特异性高的光谱技术,在食品安全、环境监测和生物分子检测等方面具有非常好的应用前景。SERS作为分子指纹光谱,包含丰富的指纹信息,可以对复杂样品中特定物质进行无标记识别;SERS具有超高的灵敏度,可以实现单分子检测。常用的SERS基底多为亲水性金（Au）、银（Ag）纳米溶胶,对水溶性好的待测分子友好。但抗菌剂分子通常水溶性较差,很难靠近亲水性SERS基底,导致检测结果不理想。而对于生物标志物的SERS检测,存在的问题是生物标志物分子自身散射截面积小,因此无论是拉曼还是SERS信号都比较低。本论文拟通过引入分子间作用力或特异性生化反应,将待测分子主动拉近到SERS基底表面或通过特定的化学反应将待测物进行转化,从而实现对它们的直接或间接SERS测定。主要研究内容和成果如下:1.三氯卡班（TCC）是一种水溶性较差的抗菌剂小分子,其很难靠近亲水性的Au纳米粒子表面,因此SERS检测效果不佳。查阅文献发现,三氯卡班在酸性介质中溶解度较大,因此可以通过调整溶液p H改变三氯卡班的水溶性。本工作合成了亲水的、稳定性良好的Au纳米粒子,用酸来调控该Au纳米粒子溶胶介质的p H,以此增大三氯卡班在其中的溶解性,使更多的三氯卡班分子靠近基底表面;同时,使Au纳米粒子适当聚集,提高SERS增强效果,通过该措施,双方面增强三氯卡班的SERS响应,实现对其快速灵敏检测。2.研究发现,细胞内的硝基还原酶（NTR）含量过高与细胞内氧含量降低有关。由于NTR属于生物大分子,其自身拉曼散射截面积较小,无法直接用SERS检测NTR。不过NTR具有特定的生物酶活性,即在辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）存在时,NTR可以将芳香族化合物上的硝基催化还原成对应的氨基。本工作通过NTR对探针分子对硝基苯硫酚（4-NTP）的特异性识别和催化还原,生成产物对氨基苯硫酚（4-ATP）,再通过Ag-S键将4-ATP修饰在SERS增强性能良好的Au@Ag基底表面,通过定量反应的转化率来测定NTR活性。基于该SERS传感策略实现对NTR特异性灵敏检测,并对NTR的抑制剂进行有效筛选。该SERS传感有望应用于细胞内硝基还原酶的检测,为临床诊断提提供新的技术手段。3.白藜芦醇（RES）是一类具有较好的抗氧化活性的天然多酚,在预防癌症、保护心血管和抵抗衰老等方面有重要的作用,被广泛添加在一些护肤品中。因此,为了对护肤品功效进行有效评估,有必要对其中的RES进行定量测定。但RES的水溶性较差,利用普通的Au纳米溶胶基底对其进行SERS检测时,效果并不理想。本工作我们首先合成了SERS增强性能优异的爆米花状Au纳米粒子,然后在基底表面通过Au-S键固定上连接分子3-巯基丙酸（MPA）,利用MPA会与RES产生分子间作用力氢键,主动将RES拉近到基底表面,因此增强RES的SERS响应,实现对其的特异性快速灵敏检测。

关键词：表面增强拉曼散射特异性反应三氯卡班硝基还原酶白藜芦醇

基于特异性反应的SERS方法检测生物标志物

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基于特异性反应的SERS方法检测生物标志物

作者：卫程华上海师范大学

学位级别：硕士

经过几十年发展,表面增强拉曼散射(SERS)已经成为一种成熟的振动光谱技术,并且广泛应用于化学、材料和生命科学领域。SERS现象通常从一些纳米金属基底上观察到,例如吸收特殊分子的金、银、铜胶体,或者是由这些贵金属纳米粒子形成的组件... 详细信息

经过几十年发展,表面增强拉曼散射(SERS)已经成为一种成熟的振动光谱技术,并且广泛应用于化学、材料和生命科学领域。SERS现象通常从一些纳米金属基底上观察到,例如吸收特殊分子的金、银、铜胶体,或者是由这些贵金属纳米粒子形成的组件,如二聚体,四面体,卫星,链螺旋和纳米晶体,它们引起拉曼散射信号比普通拉曼信号强。SERS作为分子指纹谱,具有独特的优势,如无创探测,超灵敏,与水溶液相容,样品需求量小,通过指纹峰对复杂基质中特定分析物进行的无标记监测等,是一种非常有前途的分析技术。SERS技术已被广泛应用于食品安全,环境,生物诊断,医药,化学等各个领域。本工作基于三个特异性的生物化学反应,发展了对应的SERS方法,实现了对三种生物标志物的灵敏检测。工作内容如下:1.基于二硫键交换反应,利用2-(吡啶基二硫代)乙胺(PDEA)修饰的AgNPs@Si晶片发展表面增强拉曼光谱法(SERS)检测细胞内谷胱甘肽(GSH)。PDEA在该方法中发挥双重作用,包括参与巯基-二硫键交换反应和贡献SERS信号分子。随着GSH的加入,PDEA中的二硫键将被破坏,释放出其中有高SERS响应的吡啶环,导致信号下降。所开发的SERS方法可以检测低至2.5×10 M的GSH。之后,我们使用该方法评估了不同细胞内的GSH水平,发现癌细胞中GSH水平要远高于正常细胞。利用PDEA修饰的AgNPs@Si基底结合二硫键交换反应的SERS方法展示出良好的选择性、高灵敏度和稳定性,适用于评估细胞内GSH水平。2.基于蛋白糖基化反应结合SERS tag标签,开发了可用于测定N-乙酰葡糖胺糖基化转移酶(OGT)活性测定及其抑制剂筛查的SERS生物传感器。我们设计了含有糖蛋白酶识别位点的多肽,该多肽一末端修饰有生物素,通过生物素与亲和素间的作用将该多肽链接在磁珠上;另一末端带有半胱氨酸,利用半胱氨酸可以捕获负载有SERS探针的金纳米粒子;以非放射性的N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)作为糖供体,在糖基化酶的作用下多肽发生糖基化修饰,使其免除接下来蛋白酶K的切除,完整的多肽链通过半胱氨酸将金纳米粒子捕获到磁珠表面,产生较强的SERS信号。当糖基化酶活性较低时,发生糖基化修饰的多肽少,更多的多肽会被蛋白激K切断,导致无法有效捕获金纳米粒子,磁珠整体SERS信号较低。利用该策略建立糖基化酶活性与SERS强度间的相关性,实现对糖基化酶的定量测定。该策略不需要复杂的标记程序,结合磁增强SERS检测的效应,可以很好地实现对糖基化酶的特异性灵敏检测,对蛋白质糖基化的研究和OGT生物学作用的阐明具有重要意义,在药物发现和临床诊断存在巨大的应用潜能。此外,该方法可作为通用传感平台,通过设计合适的多肽底物实现对其他糖基转移酶的测定。3.基于信号放大策略发展SERS方法检测DNA甲基酶DNMT1活性。我们设计了一条一端有多聚腺苷酸(poly A)的和甲基化位点的DNA链S1,通过poly A与纳米粒子的作用,将S1连接到工作1中制备的AgNPs@Si基底表面。利用金-硫键在制备好的金纳米粒子表面连接末端修饰巯基的DNA链S2和S3,制得Au NP-DNA复合物。其中S2链较长,可以和S1末端碱基互补配对;S3链较短,起到空间位阻的作用,防止金纳米粒子上S2连接过于密集。通过AuNP-DNA复合物中S2和Ag NPs@Si基底表面S1碱基互补配对,形成SERS“热点”实现信号放大。亚甲基蓝(MB)可以与S3通过沟槽结合和静电吸附作用连接至基底表面,产生SERS活性。DNA甲基转移酶1(DNMT1)与有甲基化位点的S1的作用,使得双链甲基化,限制性内切酶BssHII不能识别剪切该位点,SERS信号保留。而当DNMT1活性较弱时,有甲基化位点的S1被限制性内切酶BssHII识别剪切,金纳米粒子离开AgNPs@Si基底表面,MB的SERS信号减弱。该方法对DNA甲基化的研究具有重要意义,显示出临床应用的潜在可能。

关键词：表面增强拉曼光谱特异性反应生物标志物谷胱甘肽酶

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基于主线式情境的“特异性反应”复习教学

生物学通报 2020年第5期55卷 45-47页

作者：王红梅浙江省嘉善高级中学浙江嘉兴314100

以“特异性反应”的复习教学为例,教师通过创设“人体感染结核杆菌后的免疫过程及预防治疗”这一主线式情境,提升学生将所学的学科知识和技能迁移至真实生活情境的能力和品格,也摆脱传统课堂复习低水平重复的现象。

关键词：主线式情境复习教学特异性反应结核病

比较气单胞菌在2种鉴定培养基上的特异性反应

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生物技术 2000年第2期10卷 45-46页

作者：张萍刘彤姜媛杨暑伏哈尔滨市道外区卫生防疫站黑龙江哈尔滨150026 哈尔滨市卫生防疫站黑龙江哈尔滨150020

气单胞菌(Aeromonas sp.)是人、动物的致病菌[1,2].对气单胞菌进行准确、快速鉴定,对该菌早期诊断有重要意义.国内外对该菌的初步鉴定都采用肠杆菌科细菌指定的三糖铁琼脂(TSI),该培养基对弧菌科中气单胞菌的特异性鉴别作用低,影响气单... 详细信息

气单胞菌(Aeromonas sp.)是人、动物的致病菌[1,2].对气单胞菌进行准确、快速鉴定,对该菌早期诊断有重要意义.国内外对该菌的初步鉴定都采用肠杆菌科细菌指定的三糖铁琼脂(TSI),该培养基对弧菌科中气单胞菌的特异性鉴别作用低,影响气单胞菌的检出率,我们参考有关文献[3]研制出气单胞菌初筛鉴定琼脂(APA),并用气单胞菌与相关菌对2种培养基作了特异性鉴别作用的比较,结果报告如下.

关键词：气单胞菌致病菌早期诊断 TSI APA 特异性反应

体外冲击波治疗神经根型颈椎病的经穴特异性反应研究

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中国医药指南 2020年第27期18卷 137-138页

作者：车旭东安照华梁哲瑞大连市中医医院辽宁大连116013

目的研究体外冲击波(ESW)技术在治疗神经根型颈椎病中列缺穴腧穴所发生的特异性反应。方法采集ESW对神经根型颈椎病患者手三阴经和手三阳经双侧各182个腧穴治疗前后的红外热成像数据及视觉模拟评分法(VAS)评定,通过统计分析列缺穴红外... 详细信息

目的研究体外冲击波(ESW)技术在治疗神经根型颈椎病中列缺穴腧穴所发生的特异性反应。方法采集ESW对神经根型颈椎病患者手三阴经和手三阳经双侧各182个腧穴治疗前后的红外热成像数据及视觉模拟评分法(VAS)评定,通过统计分析列缺穴红外热成像的反应变化,分析列缺穴的经穴特异性与神经根型颈椎病之间的相关性。结果神经根型颈椎病患者VAS评分比较,冲击波治疗组治疗后较治疗前显著降低,具有统计学意义(P0.05)。结论ESW对神经根型颈椎病患者进行治疗前后部分腧穴的体表温度存在变化,其中列缺穴的红外热成像反应最显著,提示列缺穴的经穴特异性反应与神经根型颈椎病之间存在相关性作用。

关键词：体外冲击波神经根型颈椎病列缺穴特异性反应

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腰俞穴麻醉中利多卡因致特异性反应1例

中国肛肠病杂志 2004年第12期24卷 26-26页

作者：刘永霞成都中医药大学附属医院四川成都610072

患者女，66岁。因反复便血20余年加重伴肛门肿物脱出半月，以Ⅲ期内痔、赘皮外痔于2000年3月28日入院。体检：肛门肿物脱出，肛门坠胀，便时带少量鲜血。精神尚可，体健，T36℃，P76次／min，R20次／min，BPl3．3／8．3kPa，体重62kg，... 详细信息

患者女，66岁。因反复便血20余年加重伴肛门肿物脱出半月，以Ⅲ期内痔、赘皮外痔于2000年3月28日入院。体检：肛门肿物脱出，肛门坠胀，便时带少量鲜血。精神尚可，体健，T36℃，P76次／min，R20次／min，BPl3．3／8．3kPa，体重62kg，舌质淡、苔薄白。血尿常规、肝肾功能、血糖、心电图均正常。

关键词：腰俞穴麻醉处理利多卡因特异性反应病例报告