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热休克蛋白60诱导小鼠皮肤移植耐受的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2008年第8期22卷 993-997页

作者：黄文鹏叶启发黄祖发杨定华彭民浩中南大学移植医学研究院卫生部移植医学工程技术研究中心中南大学湘雅三医院长沙410013 广西医科大学第一附属医院肝胆外科

目的探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制。方法选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8～12周龄近交系雌性小鼠。受体小鼠剪下1cm×1cm全层... 详细信息

目的探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制。方法选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8～12周龄近交系雌性小鼠。受体小鼠剪下1cm×1cm全层皮肤,干纱布清创,即为植床;随机分为4组,每组15只。A组:无菌取供体BALB/C(H-2d)小鼠背部1cm×1cm全层皮片,刮去皮下组织后移植至受体小鼠背部;B组:受体小鼠背部皮下注射0.1mL不完全弗氏佐剂(imcompleted Freund’s adjuvant,IFA),2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;C组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;D组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行CBA/N(H-2k)小鼠皮肤移植。B、C、D组供体皮肤移植方法同A组。术后观察移植皮片成活时间;移植术后7、25d行单向混合淋巴细胞反应及混合淋巴细胞培养上清液细胞因子检测;术后7d行迟发型超敏反应测定。结果A、B、C、D组移植皮片成活时间分别为(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)及(27.6±2.1)d;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组混合淋巴细胞反应每分钟放射脉冲数(counts of perminute impulse,cmp)值分别为12836±1357、11876±1265、6581±573及6843±612;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P0.05);术后25d,各组cpm值分别为13286±1498、12960±1376、11936±1265及12374±1269,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,C、D组混合淋巴细胞培养上清液IL-10高于A、B组,IL-2、干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)低于A、B组(P0.05);术后25d,各组IL-2、IL-10及IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组受体小鼠对供体小鼠脾细胞的迟发型超敏反应为(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)及(0.46±0.03)mm;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论HSP60对免疫耐受的诱导和维持有一定作用。

关键词：热休克蛋白60 皮肤移植免疫耐受小鼠

热休克蛋白60对小鼠树突状细胞功能影响体外研究

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中国免疫学杂志 2007年第3期23卷 208-211页

作者：吴伟李大主周游曾秋棠华中科技大学同济医学院协和医院心内科武汉430022

目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质——热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能影响。方法小鼠骨髓提取DC,体外培养成熟后与两种浓度mHSP60孵育,动态观察DC突起改变;流式细胞仪检测孵育前后mDC表面标志改变;MLR测定孵育前... 详细信息

目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质——热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能影响。方法小鼠骨髓提取DC,体外培养成熟后与两种浓度mHSP60孵育,动态观察DC突起改变;流式细胞仪检测孵育前后mDC表面标志改变;MLR测定孵育前后mDC刺激功能变化;ELISA法测定MLR上清液中细胞因子浓度。结果孵育后,mDC突起增加明显;CD11c+、CD80及CD86表型显著增加;淋巴细胞刺激功能明显增强;分泌细胞因子IL-12、IFN-γ增加(P0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。结论mHSP60体外可以促进mDC功能,作用呈剂量依赖性。

关键词：热休克蛋白60 树突状细胞动脉粥样硬化表型细胞因子

热休克蛋白60对小鼠树突状细胞成熟及免疫功能的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2006年第1期35卷 46-48,55页

作者：吴伟李大主周游曾秋棠华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科武汉430022

目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质———热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能的影响。方法从近交系C57BL/6J小鼠骨髓中提取mDC,体外培养成熟后分别与3、10μg/ml mHSP60或PBS孵育24 h,观察其形态改变;流式细胞仪检测mD... 详细信息

目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质———热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能的影响。方法从近交系C57BL/6J小鼠骨髓中提取mDC,体外培养成熟后分别与3、10μg/ml mHSP60或PBS孵育24 h,观察其形态改变;流式细胞仪检测mDC表面标志;混合淋巴细胞反应(MLR)测定mDC刺激功能;ELISA法测定MLR上清液中细胞因子浓度。结果mHSP60处理组较对照组,mDC突起增加明显;CD80及CD86表型显著增加;淋巴细胞刺激功能明显增强;上清液细胞因子IL-12、IFN-γ增加(P0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。以上变化mHSP60高剂量处理组较低剂量处理组更明显。结论mHSP60体外可以促进mDC功能,且作用呈剂量依赖性。

关键词：热休克蛋白60 树突状细胞动脉粥样硬化细胞表型细胞因子

热休克蛋白60在药物性聋大鼠模型中的表达变化

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中华耳科学杂志 2016年第2期14卷 251-254页

作者：田克勇宋勇莉孙菲王人凤岳波王敏邱建华第四军医大学西京医院耳鼻咽喉-头颈外科西安710032

目的探讨HSP60在大鼠耳蜗中的表达及硫酸卡那霉素损伤后的表达变化。方法正常成年雌性SD大鼠20只随机分为两组:对照组(生理盐水)和实验组(硫酸卡纳霉素),按500mg/kg剂量每天给药一次,连续腹腔注射21天。ABR检测听力变化;实时定量PCR和We... 详细信息

目的探讨HSP60在大鼠耳蜗中的表达及硫酸卡那霉素损伤后的表达变化。方法正常成年雌性SD大鼠20只随机分为两组:对照组(生理盐水)和实验组(硫酸卡纳霉素),按500mg/kg剂量每天给药一次,连续腹腔注射21天。ABR检测听力变化;实时定量PCR和Western Blot分别检测HSP60的m RNA和蛋白表达量的变化;免疫荧光染色观察HSP60在耳蜗中的表达变化及分布。结果 ABR检测显示实验组较对照组明显升高(P60表达量降低(P60表达于Corti器上的支持细胞内。结论 HSP60表达于支持细胞,正常生理情况下即表达,慢性药物中毒性耳聋模型中表达量降低,推测HSP60可能参与了药物性耳聋的发生过程。

关键词：热休克蛋白60 听力损失支持细胞

热休克蛋白60在子宫颈癌组织中的表达及其临床意义

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第三军医大学学报 2010年第6期32卷 554-557页

作者：冯骏王利娟韩晓兵王星烨苟文丽西安交通大学医学院第一附属医院周围血管科西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院妇产科西安710061

目的研究热休克蛋白60(heat shock protein,HSP60)在子宫颈癌中的表达及意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹分析法检测子宫颈癌手术切除组织57例,正常子宫颈组织57例,观察热休克蛋白60的表达与子宫颈癌发生发展... 详细信息

目的研究热休克蛋白60(heat shock protein,HSP60)在子宫颈癌中的表达及意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹分析法检测子宫颈癌手术切除组织57例,正常子宫颈组织57例,观察热休克蛋白60的表达与子宫颈癌发生发展的关系。结果①正常子宫颈组织HSP60 mRNA表达明显少于子宫颈癌组织(t=2.65,P60的表达阳性检出率分别为:82.5%、19.3%;HSP60的过表达率为57.9%、7.0%。③HSP60在子宫颈癌组织的不同分期中表达差异无显著性(P>0.05)。④子宫颈正常组织HSP60蛋白的表达水平明显低于子宫颈癌组织(t=3.132,P60的表达与子宫颈癌组织的发生密切相关。HSP60的表达与子宫颈癌组织的不同分期无关。

关键词：子宫颈癌热休克蛋白60 逆转录聚合酶链反应

热休克蛋白60表达和一氧化氮在鼻咽癌中的意义

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华中科技大学学报（医学版） 2003年第6期32卷 651-653页

作者：张明刘立思程磊华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻喉科武汉430030

目的　探讨鼻咽癌患者癌组织中热休克蛋白 60 (heatshockprotein 60 ,HSP60 )及血浆中一氧化氮 (nitricox ide ,NO)在鼻咽癌发生、发展和转移中的作用。方法　应用免疫组织化学方法检测鼻咽癌癌组织中HSP60的表达 ,采用硝酸还原酶法检... 详细信息

目的　探讨鼻咽癌患者癌组织中热休克蛋白 60 (heatshockprotein 60 ,HSP60 )及血浆中一氧化氮 (nitricox ide ,NO)在鼻咽癌发生、发展和转移中的作用。方法　应用免疫组织化学方法检测鼻咽癌癌组织中HSP60的表达 ,采用硝酸还原酶法检测鼻咽癌患者血浆中NO的水平。结果　① 18例慢性鼻咽炎和 40例鼻咽癌患者鼻咽粘膜组织中HSP60表达的阳性率分别为 3 3 3 %、 85 0 % ,过表达率分别为 11 1%、 67 5% ,两者间的差异有显著性意义 (P 60表达的阳性率分别为80 8%、 87 5%、 83 3 % ,过表达率分别为 69 2 %、 62 5%、 66 7% ,三者间的差异无显著性意义 (P >0 0 5)。③鼻咽癌患者血浆中NO水平 [(117 871± 3 1 92 0 ) μmol/L]高于慢性鼻咽炎患者 [(57 162± 2 2 0 3 7) μmol/L]及正常对照组[(40 93 8± 13 474) μmol/L] ,差异均有显著性意义 (均为P 60表达和血浆中NO水平均增高 ,可能与鼻咽癌的发生。

关键词：热休克蛋白60 表达一氧化氮鼻咽癌

热休克蛋白60口服耐受对小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

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中国免疫学杂志 2009年第3期25卷 206-208页

作者：李小林李大主王治校华中科技大学同济医学院协和医院心内科武汉430022

目的:探讨热休克蛋白60(HSP60)口服诱导的免疫耐受对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响。方法:8周龄ApoE-/-小鼠分别口服重组鼠HSP60 PBS溶液和单纯PBS,连续5天后高脂饲养12周。观察各组斑块面积;分析脾细胞中CD4+CD25+调节性T细胞百分... 详细信息

目的:探讨热休克蛋白60(HSP60)口服诱导的免疫耐受对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响。方法:8周龄ApoE-/-小鼠分别口服重组鼠HSP60 PBS溶液和单纯PBS,连续5天后高脂饲养12周。观察各组斑块面积;分析脾细胞中CD4+CD25+调节性T细胞百分比;脾细胞抗原特异性T细胞增殖反应,ELISA法检测上清液细胞因子浓度。结果:与对照组比较,口服HSP60组斑块面积显著减小,口服HSP60组脾细胞中CD4+CD25+调节性T细胞百分比显著升高(P60刺激脾细胞后,口服HSP60组T细胞增殖反应下降,上清液中TGF-β浓度显著升高,而IFN-γ显著下降。结论:口服HSP60可预防动脉粥样硬化形成;口服HSP60诱导调节性T细胞介导的抗原特异性免疫耐受可能是动脉粥样硬化的机制。

关键词：热休克蛋白60 动脉粥样硬化调节性T细胞免疫耐受

热休克蛋白60和Pan-钙黏蛋白在涎腺黏液表皮样癌中的表达

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中国老年学杂志 2005年第12期25卷 1466-1467页

作者：李峥王淑强李春智赵志江赵冰白美玲张家口市中心血站河北张家口075000 河北北方学院病理教研室解放军第251医院口腔科

目的研究HSP60和Pan-钙黏蛋白在涎腺黏液表皮样癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法,对46例涎腺黏液表皮样癌进行HSP60和Pan-cad检测。结果HSP60和Pan-cad在涎腺黏液表皮样癌中的表达强弱和癌组织的分化程度及淋巴结转移有关(P... 详细信息

目的研究HSP60和Pan-钙黏蛋白在涎腺黏液表皮样癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法,对46例涎腺黏液表皮样癌进行HSP60和Pan-cad检测。结果HSP60和Pan-cad在涎腺黏液表皮样癌中的表达强弱和癌组织的分化程度及淋巴结转移有关(P60和Pan-cad的异常表达与涎腺黏液表皮样癌的生物学行为密切相关,均可作为评估黏液表皮样癌预后的有效指标。

关键词：热休克蛋白60 Pan-钙黏蛋白黏液表皮样癌免疫组织化学

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热休克蛋白60与心房颤动的关系

中国心脏起搏与心电生理杂志 2011年第5期25卷 409-410页

作者：陈卓宏伍伟锋曾知恒黄凯广西医科大学第一附属医院心内科广西南宁530021

目的探索心房颤动(简称房颤)与氧化应激的关系。方法以住院行心脏换瓣手术的病人作为研究对象,按患者心律分为房颤组(n=22)和对照组(n=20),对照组为窦性心律。所有研究对象的心房肌组织样本,均作病理形态学观察,并用免疫组织化学法检测... 详细信息

目的探索心房颤动(简称房颤)与氧化应激的关系。方法以住院行心脏换瓣手术的病人作为研究对象,按患者心律分为房颤组(n=22)和对照组(n=20),对照组为窦性心律。所有研究对象的心房肌组织样本,均作病理形态学观察,并用免疫组织化学法检测其热休克蛋白60(HSP60)表达;用乳胶增强免疫比浊法测定其血清C-反应蛋白(CRP)水平。结果房颤病人的心肌细胞肥大与间质纤维化程度都比对照组明显。HSP60表达阳性率房颤组高于对照组(68.2%vs 25.0%),灰度值房颤组低于对照组(157.69±16.00 vs 178.69±28.63)。血清CRP含量房颤组高于对照组(20.72±17.92 mg/L vs 6.80±6.26 mg/L,P均<0.05)。结论氧化应激与房颤关系密切。

关键词：心血管病学心房颤动氧化应激 C-反应蛋白热休克蛋白60