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NaCl胁迫对滨梅根际细菌群落多样性及优势菌群的影响

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南京林业大学学报（自然科学版） 2017年第4期41卷 49-54页

作者：朱泓王小敏黄涛吴文龙李维林江苏省.中国科学院植物研究所江苏南京210018

【目的】研究盐胁迫下耐盐植物根际微生物群落变化情况。【方法】基于温室盆栽试验,结合植株生长测定、土壤理化性质分析、PCR-DGGE图谱技术、香农多样性分析、主成分分析等方法,研究NaCl(0、2.9、8.8 g/L)溶液胁迫下,耐盐果树滨梅根际... 详细信息

【目的】研究盐胁迫下耐盐植物根际微生物群落变化情况。【方法】基于温室盆栽试验,结合植株生长测定、土壤理化性质分析、PCR-DGGE图谱技术、香农多样性分析、主成分分析等方法,研究NaCl(0、2.9、8.8 g/L)溶液胁迫下,耐盐果树滨梅根际和非根际土壤细菌多样性变化情况及变化规律,以及滨梅生长及土壤理化性质变化。【结果】盐胁迫60 d后,高浓度NaCl(8.8 g/L)溶液处理下滨梅根际土壤细菌16s rDNA序列变性梯度凝胶电泳(DGGE)图谱中的条带亮度、多样性指数、均匀度指数和丰富度指数最高,非根际土壤中的条带数明显减少,条带亮度变暗,丰富度指数最低。对DGGE谱带进行聚类分析发现,不同谱带间具有较高的相似性(>62%),其中根际盐处理试验组和根际对照组可聚为一类,非根际盐处理试验组可聚为一类,非根际对照组单独聚为一类。选择9条主要优势条带克隆测序,其中细菌类群为变形菌门、拟杆菌门、酸杆菌门和放线菌门。这些优势菌中除放线菌Candidatus属外,其他均对植物生长具有促进作用。对主要优势菌的变性梯度凝胶电泳(DGGE)图谱进行主成分(PCA)分析发现,非根际细菌与根际细菌在第一主成分上完全分离,非根际细菌均聚为一类,而根际细菌则按亲缘关系聚类。【结论】在耐盐果树滨梅正常生长时,一定程度的盐胁迫不但未能对根际土壤微生物群落造成伤害,反而起到一定的促进作用,这种促进作用体现为植株根系对有益细菌生长的保护和促进,以及对群落多样性的维持,而非根际土壤细菌的生长和群落多样性则受到了较为严重的伤害。

关键词：滨梅 NaCl胁迫 PCR-DGGE 土壤细菌细菌群落多样性

NaCl胁迫对滨梅扦插苗生物量和水分积累的影响

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西北植物学报 2015年第2期35卷 356-363页

作者：朱泓黄涛刘勇军王小敏吴文龙李维林江苏省中国科学院植物研究所南京210018 江苏省仪征市农业委员会江苏仪征211400

以1年生滨梅(Prunus maritima Marshall)扦插苗为实验材料,在盆栽条件下用质量浓度为0.15%、0.29%、0.58%、0.88%、1.17%、1.46%的NaCl溶液进行盐胁迫处理,测定胁迫后根、茎、叶Na+、K+含量以及全叶、一年生茎、二年生茎和根系生物量、... 详细信息

以1年生滨梅(Prunus maritima Marshall)扦插苗为实验材料,在盆栽条件下用质量浓度为0.15%、0.29%、0.58%、0.88%、1.17%、1.46%的NaCl溶液进行盐胁迫处理,测定胁迫后根、茎、叶Na+、K+含量以及全叶、一年生茎、二年生茎和根系生物量、含水率、根系活力变化,探讨滨梅的抗盐胁迫机制。结果显示:(1)盐胁迫80d后,随着盐胁迫强度提高,滨梅植株根、茎、叶Na+含量显著提高,而其根、茎K+含量显著降低,根、茎、叶K+/Na+值显著降低;根Na+含量在低于0.58%NaCl胁迫下显著高于茎、叶,而在高于0.58%NaCl胁迫下却表现为叶Na+含量显著高于根、茎。(2)滨梅根、茎、叶生物量均随盐胁迫强度的提高呈先增加后减少的趋势;随着盐胁迫时间的延长,茎、叶生物量在低于0.58%NaCl胁迫下均呈积累趋势,且茎生物量在0.58%NaCl胁迫下显著提高,而根、一年生茎、叶生物量在高于0.58%NaCl胁迫下均显著下降。(3)滨梅茎、叶含水率均随盐胁迫强度的增加呈先增加后减少的趋势,而随着胁迫时间的延长呈逐渐减少趋势;根系活力及根含水率均随盐胁迫强度的提高而增加,但根含水率随着胁迫时间的延长变化不明显。由此可见,滨梅能通过根系稀释并蓄积Na+,保护地上部分正常生长,当进入根系的Na+量超过吸收阈值时,Na+迅速在叶中积累储存,且叶中较高含量的K+对Na+形成了有效的缓冲。

关键词：滨梅扦插苗 NaCl胁迫生长水分积累根系稀盐

不同培养条件下滨梅幼苗对NaCl胁迫的响应

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年第11期44卷 70-76页

作者：朱泓胡淑英张春红王小敏吴文龙李维林江苏省中国科学院植物研究所江苏南京210014

【目的】比较不同培养条件下滨梅幼苗耐盐特性差异,并筛选出耐盐能力强的滨梅品种,从而为滨梅耐盐性评价提供依据。【方法】以不同种源滨梅组培试管苗为试验材料,分别在组培和水培条件下,以0,100,200mmol/L NaCl进行盐胁迫处理,通过观... 详细信息

【目的】比较不同培养条件下滨梅幼苗耐盐特性差异,并筛选出耐盐能力强的滨梅品种,从而为滨梅耐盐性评价提供依据。【方法】以不同种源滨梅组培试管苗为试验材料,分别在组培和水培条件下,以0,100,200mmol/L NaCl进行盐胁迫处理,通过观察测定不同种源滨梅叶片盐害及生理生化指标,分析不同培养条件下滨梅幼苗对NaCl胁迫的响应情况。【结果】盐胁迫7d后,组培和水培滨梅幼苗叶片中Na+、丙二醛(MDA)、可溶性蛋白(SP)含量、相对电导率(REC)及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性均随NaCl处理浓度的升高显著增加;5种不同来源滨梅幼苗材料盐胁迫生理指标差异显著,其耐盐性强度表现为MI滨梅幼苗耐盐生理指标变化规律一致,滨梅组培试管苗可直接用于耐盐生理指标的测定和耐盐性评价。

关键词：滨梅组织培养水培 NaCl胁迫耐盐性

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滨梅茎段组织培养研究

安徽农业大学学报 2012年第5期39卷 816-820页

作者：胡淑英王小敏张春红吴文龙李维林汤飞云江苏省中国科学院植物研究所南京210014

以滨梅(Prunus maritima Marshall)带腋芽茎段为外植体进行了组织培养技术的研究。结果表明,植物生长调节物质种类及浓度、碳源、光照度对滨梅不定芽增殖和生长均有显著影响。综合分析单因素试验和正交试验结果表明,在滨梅组织培养中,... 详细信息

以滨梅(Prunus maritima Marshall)带腋芽茎段为外植体进行了组织培养技术的研究。结果表明,植物生长调节物质种类及浓度、碳源、光照度对滨梅不定芽增殖和生长均有显著影响。综合分析单因素试验和正交试验结果表明,在滨梅组织培养中,最佳初代培养基为MS+0.5 mg·L-1TDZ;最佳继代增殖培养基为MS+0.3 mg·L-1TDZ+0.1 mg·L-12,4-D;最佳生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1NAA。培养基以质量浓度为30 mg·L-1的葡萄糖为碳源,光照度为3 000 lx。

关键词：滨梅组织培养植物生长调节物质碳源光照度

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滨梅组培苗玻璃化成因及其克服技术研究

中国南方果树 2013年第5期42卷 37-41页

作者：胡淑英张春红王小敏吴文龙李维林江苏省/中国科学院植物研究所南京210014

以滨梅Prunus maritima Marshall茎段为外植体，研究了培养基和培养条件对滨梅组培苗玻璃化现象的影响，探索滨梅组培苗的最佳培养方法。结果表明，导致滨梅组培苗玻璃化的主要因素是培养基中的TDZ、蔗糖和琼脂浓度以及培养温度和光照... 详细信息

以滨梅Prunus maritima Marshall茎段为外植体，研究了培养基和培养条件对滨梅组培苗玻璃化现象的影响，探索滨梅组培苗的最佳培养方法。结果表明，导致滨梅组培苗玻璃化的主要因素是培养基中的TDZ、蔗糖和琼脂浓度以及培养温度和光照时间，其中由正交试验结果显示，影响滨梅组培苗玻璃化的因子由大到小依次是TDZ浓度〉培养温度〉蔗糖浓度〉光照时间〉琼脂浓度，综合各试验结果，最后筛选出克服滨梅组培苗玻璃化的最优培养条件为TDZ浓度为0．5mg／L，蔗糖浓度为3％，琼脂浓度为0．6％，培养温度为25℃，光照时间为12～16小时／天（3000lx），在此条件下滨梅组培苗的繁殖系数较高，玻璃化率较低，植株生长健壮。

关键词：滨梅组织培养玻璃化影响因素

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滨梅2个肌动蛋白cDNA片段的克隆与表达

生物技术 2012年第6期22卷 27-31页

作者：张春红胡淑英王小敏闾连飞吴文龙李维林江苏省中国科学院植物研究所江苏南京210014

目的:克隆耐盐碱果树滨梅的肌动蛋白基因actin,为该物种优异性状基因的功能鉴定提供内参。方法:利用一对actin简并引物克隆滨梅actin cDNA片段,对其进行序列和表达分析。结果:得到2条743 bp的cDNA片段,两条核苷酸序列相似性为82%,命名为... 详细信息

目的:克隆耐盐碱果树滨梅的肌动蛋白基因actin,为该物种优异性状基因的功能鉴定提供内参。方法:利用一对actin简并引物克隆滨梅actin cDNA片段,对其进行序列和表达分析。结果:得到2条743 bp的cDNA片段,两条核苷酸序列相似性为82%,命名为PmAct1和PmAct2并在GenBank登录(分别为JX855160和JX855161);序列比对发现2条actin片段氨基酸序列与其他植物同源性均在96%以上;根据不同果树Actin相似性构建进化树,表明2个滨梅actin明显分为两种类型,但均与蔷薇科果树亲缘关系较密切;半定量RT-PCR表达谱发现PmAct1可能为组成型表达类型,而PmAct2特异地在根和叶组织中表达量较高。结论:首次获得了2个滨梅actin基因,为该物种其他功能基因的挖掘和表达分析奠定了基础。

关键词：滨梅肌动蛋白基因克隆序列分析表达分析

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滨梅茎段组培污染率控制方法的研究

中国南方果树 2013年第6期42卷 9-13页

作者：燕志张焕仕王猛张浩钦佩南京大学连云港高新技术研究院连云港222000 南京野生植物研究院南京大学盐生植物实验室

以当年生滨梅茎段为试材,针对在组培过程中滨梅茎段易感染外生菌和内生菌的问题进行了污染率控制方法的探索。结果表明:(1)不同的消毒试剂中,0.1%升汞消毒效果最好;(2)不同消毒试剂最优组合为75%酒精+0.1%升汞,可以将外生菌染菌率控制在... 详细信息

以当年生滨梅茎段为试材,针对在组培过程中滨梅茎段易感染外生菌和内生菌的问题进行了污染率控制方法的探索。结果表明:(1)不同的消毒试剂中,0.1%升汞消毒效果最好;(2)不同消毒试剂最优组合为75%酒精+0.1%升汞,可以将外生菌染菌率控制在8.25%,死亡率在18.20%;(3)最优消毒试剂组合的最佳消毒时间为先用75%酒精消毒30秒,再用0.1%升汞消毒5分钟;(4)抗生素添加试验中,添加浓度为0.5%制霉菌素可使内生菌染菌率减少到3.2%,死亡率减少到9.2%,无菌苗获得率为81.3%。

关键词：滨梅组织培养外生菌内生菌

滨梅幼苗耐盐相关基因差异表达的cDNA-AFLP初步分析

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北方园艺 2015年第20期 81-85页

作者：张春红胡淑英吴文龙李维林江苏省中国科学院植物研究所江苏南京210014

以生根的"滨梅5号"幼苗为试材,采用cDNA-AFLP差异显示方法研究200mmol/L NaCl处理对基因差异表达的影响,并采用半定量RT-PCR方法验证候选基因的盐胁迫和组织表达模式。结果表明:256对选择性引物组合可扩增出4 263条可分辨的条带,且47条... 详细信息

以生根的"滨梅5号"幼苗为试材,采用cDNA-AFLP差异显示方法研究200mmol/L NaCl处理对基因差异表达的影响,并采用半定量RT-PCR方法验证候选基因的盐胁迫和组织表达模式。结果表明:256对选择性引物组合可扩增出4 263条可分辨的条带,且47条具有明显差异;其中24条经测序后分析表明,14条与已知片段具有较高同源性,主要涉及代谢、转录因子、胁迫相关蛋白等;获取了2条耐逆相关差异基因片段,分别与蝴蝶草天冬酰胺合成酶同源性达92%、与野草莓硫转运蛋白基因同源性达81%;与硫转运蛋白基因同源的差异基因在盐处理3h时表达量最高,随处理时间增加而表达量逐渐下降,在各组织中以根中的表达量最高,推测其主要在根中行使功能。

关键词：滨梅 cDNA-AFLP 耐盐基因表达分析

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丛枝菌根化滨梅苗的根际微生态环境

林业科学 2014年第1期50卷 41-48页

作者：宰学明郝振萍赵辉钦佩金陵科技学院园艺学院南京210038 南京大学生命科学学院南京210093

以滨梅为供试植物,通过盆栽试验,研究接种AM真菌对滨梅苗根际土壤微生态环境的影响。试验中选用摩西球囊霉、幼套球囊霉、透光球囊霉3种AM真菌接种,测定滨梅苗菌根侵染率、生物量、根际微生物数量、土壤pH值、土壤酶活性及N,P等指标。... 详细信息

以滨梅为供试植物,通过盆栽试验,研究接种AM真菌对滨梅苗根际土壤微生态环境的影响。试验中选用摩西球囊霉、幼套球囊霉、透光球囊霉3种AM真菌接种,测定滨梅苗菌根侵染率、生物量、根际微生物数量、土壤pH值、土壤酶活性及N,P等指标。结果表明:3种AM真菌都与滨梅形成菌根共生体,其中摩西球囊霉、幼套球囊霉侵染效果较好,侵染率分别是50.4%,48.3%;受这2种菌侵染的苗木生物量分别是对照处理的1.74,1.73倍。AM菌根对根部微生物种群数量产生一定的影响,使根面上的细菌、放线菌、固氮菌的数量显著增加。AM菌根增加根际土壤磷酸酶、脲酶、蛋白酶的活性,各种酶活性增加量与苗木菌根侵染率呈显著正相关。AM菌根使根际土壤pH值降低,与菌根侵染率呈显著负相关。接种苗木的根际土壤中,可直接被植物吸收利用的N,P元素出现富集现象,与菌根侵染率呈极显著正相关。AM真菌的种类对根际微生态环境的影响存在差异性,3种AM真菌中,摩西球囊霉、幼套球囊霉根际效应较好。丛枝菌根的形成改善滨梅幼苗的微生态环境,提高根际土壤肥力,根际效应与AM真菌的种类有关。

关键词：丛枝菌根真菌滨梅根际土壤微生物土壤酶活性酸碱度土壤养分