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滑液囊支原体NADH氧化酶单克隆抗体的制备

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中国动物传染病学报 2023年第6期31卷 20-27页

作者：刘晓涵祁晶晶胡增金李浩然宋翠萍尚原冰王少辉田明星李涛丁铲蔡玉梅于圣青山东农业大学动物科技学院泰安271000 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株... 详细信息

为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG2b亚类,间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2048000。经Westernblot和悬浮免疫荧光试验鉴定,该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应,与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析,该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体,符合杂交瘤细胞染色体的数目,证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体,为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。

关键词：滑液支原体 NADH氧化酶单克隆抗体

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猪滑液支原体关节炎的病机、诊断和治疗

畜禽业 2019年第6期30卷 74-74,77页

作者：黄祥良庞盛堃郑子胜潘冰冰广西来宾市畜牧站广西来宾546100 广西来宾市动物疫病预防控制中心广西来宾546100

猪滑液支原体关节炎是由滑液支原体感染后引起猪的关节炎,病猪感染发病后表现为跛行和关节肿胀等症状。该病的发病率较高,死亡率较低,但会影响猪正常的生长发育和生产性能,给养猪场造成较大的经济损失。针对猪滑液支原体关节炎进行详细... 详细信息

猪滑液支原体关节炎是由滑液支原体感染后引起猪的关节炎,病猪感染发病后表现为跛行和关节肿胀等症状。该病的发病率较高,死亡率较低,但会影响猪正常的生长发育和生产性能,给养猪场造成较大的经济损失。针对猪滑液支原体关节炎进行详细分析,旨在为猪场防控该病提供参考。

关键词：滑液支原体关节炎诊断

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猪滑液支原体关节炎的诊断与防治

养殖技术顾问 2014年第3期 181-181页

作者：张秀丽辽宁省黑山县动物疫病预防控制中心 1214000

猪滑液支原体关节炎是以猪急性关节僵直和跛行为特征的临床综合征。猪滑液支原体长期持续存在于母猪的鼻腔和咽喉分泌物中，一般是由这样的成年带菌猪传染给仔猪，但只有仔猪达到4~8周龄时才能感染。经鼻咽感染先发生在4~8周龄的猪，是... 详细信息

猪滑液支原体关节炎是以猪急性关节僵直和跛行为特征的临床综合征。猪滑液支原体长期持续存在于母猪的鼻腔和咽喉分泌物中，一般是由这样的成年带菌猪传染给仔猪，但只有仔猪达到4~8周龄时才能感染。经鼻咽感染先发生在4~8周龄的猪，是否能在同窝猪之间发生传染尚不清楚，但在某些猪群多数猪在12周龄时都曾出现过鼻或咽喉感染。传播速度和猪群密度与环境因素有关。

关键词：滑液支原体关节炎母猪防治诊断行为特征环境因素传播速度

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鸡毒支原体病的预防控制

中国家禽 2007年第11期29卷 6-8页

作者：宁宜宝中国兽医药品监察所北京100081

鸡毒支原体病对家禽业的危害有目共睹,文章就该病的诊断、治疗、疫苗接种进行阐述,为有效控制该病提供积极的指导。

关键词：鸡毒支原体病控制预防滑液支原体鸡支原体呼吸困难经济损失传染性

鸡滑液囊支原体JS1株的分离鉴定及禽支原体、大肠杆菌、沙门菌多重PCR检测方法的建立

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鸡滑液囊支原体JS1株的分离鉴定及禽支原体、大肠杆菌、沙门菌多...

作者：刘婷山东农业大学

学位级别：硕士

鸡滑液囊支原体感染是由滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的,鸡和火鸡的一种急慢性传染病,其临床以病鸡关节或足垫肿大、滑液囊和腱鞘发炎为主要特征,也可引起呼吸道疾病及气囊炎,严重的引起全身性感染,也可导致新城疫病毒、传... 详细信息

鸡滑液囊支原体感染是由滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的,鸡和火鸡的一种急慢性传染病,其临床以病鸡关节或足垫肿大、滑液囊和腱鞘发炎为主要特征,也可引起呼吸道疾病及气囊炎,严重的引起全身性感染,也可导致新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、大肠杆菌等病原微生物的混合或继发感染。该病在世界范围内流行,多个国家的流行病学监测表明MS在商品代鸡群中有很高的流行率。近几年滑液支原体在中国的发病率有增多趋势,很多地区季节性发病相当严重。MS感染鸡群可导致跛行、产蛋量下降、生长发育迟缓及酮体降级等危害,严重影响鸡的生产性能,给世界商品养鸡产业造成巨大的经济损失。本研究从江苏某鸡场收集病鸡,对其进行支原体分离,获得一株疑似支原体的分离物,通过菌落观察、血清学实验、支原体16S r RNA通用引物测序鉴定及与实验室标准株MS WVU1853差异性鉴定,确定该分离物为滑液支原体,且不同于本实验室的MS标准株(MS WVU1853),因此将其命名为JS1株。本研究对滑液支原体SPF鸡攻毒模型进行了初步探索,将分离株MS JS1对21日龄SPF鸡进行攻毒,分别采用关节注射、肌肉注射、足垫注射和滴鼻四组不同攻毒方式,每组10只SPF鸡,攻毒剂量为每只1×109 CCU。结果表明攻毒方式不同,其发病率也不一致,其中关节攻毒组发病率最高,达9/10,其后依次是足垫攻毒组发病率为8/10,滴鼻攻毒组发病率为4/10,肌肉攻毒组发病率为0。除肌肉攻毒组无发病症状外,其余三种攻毒方式均能引起不同程度的特征性病变,即鸡关节囊肿、足垫肿大、胸部皮下囊肿、跛足以及鸡冠苍白等,对发病鸡部分剖检也能从关节、足垫或肺组织中分离到滑液支原体。针对滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的pdh A基因,鸡毒支原体(Mycopl asma gallisepticum,MG)的gap A基因,大肠杆菌(Escherichia coli,EC)的pho A基因,沙门菌(Salmonella,SA)的inv A基因分别设计2-3对特异性引物,通过筛选引物组合、优化体系条件,最后确定了一组最优引物组合和反应体系,建立了针对这四种禽常见致病菌的多重PCR检测方法。特异性实验证明该方法能特异性扩增出MS、MG、EC和SA的目的片段,其他非相关的禽致病菌则无扩增产物。敏感性检测发现MS和MG的检测灵敏度均达到1×102 CCU/反应,EC的检测灵敏度1×102 CFU/反应,SA的检测灵敏度1×103 CFU/反应。临床感染组织样本检测结果显示,多重PCR检测结果与分离鉴定结果一致,检测率可达83.8%。本实验对MS分离株JS1进行了分离鉴定,初步建立了滑液支原体对SPF鸡的攻毒模型,并成功建立能同时检测禽常见致病菌MS、MG、EC和SA的多重PCR检测方法,为滑液支原体感染流行病学调查研究以及进一步开展滑液支原体疫苗的研制奠定了基础。

关键词：滑液支原体分离鉴定攻毒模型多重PCR

改良Frey氏液体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究

同方学位论文库评论

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中国兽药杂志 2016年第1期50卷 14-18页

作者：朱真万建青杨挺英康凯中国兽医药品监察所北京100081

为探究改良Frey氏液体培养基质控菌CVCC2960滑液支原体（以下简称MS）生长规律，本试验首次同时采用CFU计数、CCU测定和pH值测定的方法，比较不同接种浓度、接种体积和不同代次MS生长情况。结果显示：5％与10％接种量的CCU测定结果峰值... 详细信息

为探究改良Frey氏液体培养基质控菌CVCC2960滑液支原体（以下简称MS）生长规律，本试验首次同时采用CFU计数、CCU测定和pH值测定的方法，比较不同接种浓度、接种体积和不同代次MS生长情况。结果显示：5％与10％接种量的CCU测定结果峰值差异不明显，但5％接种的CFU计数峰值更高，pH下降更慢；1～5代菌在生长曲线各阶段的测定结果均无明显差别；3种不同接种方式的测定结果显示，用0．5mL菌液接种9．5mL培养基的方式更利于MS生长。本试验为改良Frey氏液体培养基的质控标准化提供依据。

关键词：滑液支原体培养基质控菌种代次传代

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浅谈家禽支原体病的综合防治

河南畜牧兽医（市场版） 2013年第8期34卷 46-47页

作者：李晓华吉林省梅河口市海龙镇畜牧兽医站吉林梅河口135000

1病原学目前已从各种禽类分离到支原体近30种。其中具有明显致病性的有3种：鸡毒支原体（MG）、滑液支原体（MS）、火鸡支原体（MM）；鸡毒支原体感染引起慢性呼吸道病（CRD）；滑液支原体感染引起骨关节、滑膜和肌腱鞘炎；火鸡支原体... 详细信息

1病原学目前已从各种禽类分离到支原体近30种。其中具有明显致病性的有3种：鸡毒支原体（MG）、滑液支原体（MS）、火鸡支原体（MM）；鸡毒支原体感染引起慢性呼吸道病（CRD）；滑液支原体感染引起骨关节、滑膜和肌腱鞘炎；火鸡支原体感染引起骨骼异常和严重的气囊炎。鸡毒支原体感染鸡主要表现为呼吸道症状，病程较长，慢性经过，常呈隐性感染，故又称鸡慢性呼吸道病。所以，在治疗鸡毒支原体感染时用药疗程要长，诊断用药要确切。

关键词：支原体病鸡毒支原体感染综合防治鸡慢性呼吸道病滑液支原体家禽用药疗程呼吸道症状

维普期刊数据库评论

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猪的支原体病

养猪 2003年第6期 29-30页

作者：匡宝晓上海诺华动物保健有限公司上海200051

养猪生产者经常被支原体感染的复杂性所困扰.本文试图阐明目前有关本病的一些问题.猪场引起支原体病的病原有3种,分别是肺炎支原体、鼻炎支原体和滑液支原体.

关键词：猪支原体病肺炎支原体鼻炎支原体滑液支原体症状病理变化防制

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火鸡二种支原体病的诊断和治控措施

畜牧兽医科技信息 2020年第1期36卷 150-151页

作者：杨宇国河北省唐山市丰润区农业农村局河北唐山064000

火鸡的二种支原体疾病,包括艾奥瓦支原体感染和滑液支原体感染。艾奥瓦支原体可引起鸡和火鸡的气囊病变,也可使火鸡胚胎死亡和孵化率下降。滑液支原体最初被认为是鸡和火鸡的一种急性或慢性疾病,可引起渗出性肌腱炎和滑膜囊炎。目前,最... 详细信息

火鸡的二种支原体疾病,包括艾奥瓦支原体感染和滑液支原体感染。艾奥瓦支原体可引起鸡和火鸡的气囊病变,也可使火鸡胚胎死亡和孵化率下降。滑液支原体最初被认为是鸡和火鸡的一种急性或慢性疾病,可引起渗出性肌腱炎和滑膜囊炎。目前,最常发生的是上呼吸道的亚临床感染,因此做好防控工作是减少传染病发生的重要措施。1艾奥瓦支原体感染1.1病原和感染艾奥瓦支原体最初被认为是低致病性的,可引起鸡和火鸡的气囊病变,也可使火鸡胚胎死亡和孵化率下降,是一种潜在的重要病原体。艾奥瓦支原体的不同毒株在抗原性和致病力上有较大差异。对1%胆酸盐有抵抗力,其富集培养基与用于其他禽支原体的培养基很相似,也适用于培养与分离。在一些欧美国家,通过对种火鸡群进行全面净化,其感染率已明显下降。鸡感染艾奥瓦支原体相对较少,也有鹅感染的报道。火鸡可经蛋传播艾奥瓦支原体,常呈水平传播,但传播速度缓慢。许多艾奥瓦支原体毒株对火鸡种蛋是致死性的。试验性接种鸡和火鸡,可产生气囊炎、生长缓慢、羽毛蓬乱和腿部病变。野外感染未见此类病变,可能是由于大多数感染禽,在出壳前就已经死亡。老龄禽的抵抗力似乎较高。

关键词：鸡艾奥瓦支原体滑液支原体感染诊断治疗防控