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水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺研究

中国油脂 2015年第2期40卷 81-84页

作者：张薇薇纵伟张康逸郑州轻工业学院食品与生物工程学院郑州450002 河南省农业科学院农副产品加工研究所郑州450002

探索了磷脂酶A1在水相体系中酶解制备溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的可行性,并进行了酶解条件对LPE相对含量的影响研究。得到最佳酶解条件为:磷脂酰乙醇胺(PE)的纯度为80%,液料比10∶1,酶解温度35℃,酶添加量0.04 m L/g,Ca Cl2添加量0.010 g/m... 详细信息

探索了磷脂酶A1在水相体系中酶解制备溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的可行性,并进行了酶解条件对LPE相对含量的影响研究。得到最佳酶解条件为:磷脂酰乙醇胺(PE)的纯度为80%,液料比10∶1,酶解温度35℃,酶添加量0.04 m L/g,Ca Cl2添加量0.010 g/m L,酶解时间30 min。在最佳酶解条件下,得到酶解产物中的LPE相对含量为42.0%。

关键词：磷脂酰乙醇胺溶血磷脂酰乙醇胺磷脂酶A1 酶解反应

HPLC-ELSD法同时测定丙泊酚注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量

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药物分析杂志 2014年第3期34卷 442-446页

作者：陈华于海洲彭创业广东省食品药品检验所广州510180 烟台市食品药品检验所 264000 广东嘉博制药有限公司清远511517

目的：建立HPLC—ELSD法同时测定丙泊酚注射液中溶血磷脂酰胆碱（LPC）和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）的含量。方法：采用UltimateDiol色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-水-冰醋酸一三乙胺（85：15：0．5：0．05）为流动相A，以正己烷... 详细信息

目的：建立HPLC—ELSD法同时测定丙泊酚注射液中溶血磷脂酰胆碱（LPC）和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）的含量。方法：采用UltimateDiol色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-水-冰醋酸一三乙胺（85：15：0．5：0．05）为流动相A，以正己烷-异丙醇-流动相A（20：48：32）为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，柱温为40℃。使用蒸发光散射检测器，雾化气为N2，载气压力为172kPa，漂移管温度为70℃。结果：溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的浓度分别在0．02192-0．2192mg·mL^-1（r=0．9997）和0．01056～0．1mg·mL^-1（r=0．9980），呈良好的线性关系；检测下限分别为0．4μg和0．2μg；定量下限分别为0．8μg和0．6μg；平均回收率（n=9）分别为95．0％（RSD=1．3％）和94．0％（RSD％=1．1）。结论：本方法经方法学验证，可同时测定丙泊酚注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量。

关键词： HPLC-ELSD法丙泊酚注射液溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺有关物质测定杂质控制方法学验证

HPLC法同时测定尼莫地平脂肪乳中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量

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中国药房 2016年第24期27卷 3413-3416页

作者：范凯燕谢依侨夏自花杨帆广东药科大学药学院广州510006

目的：建立同时测定尼莫地平脂肪乳中溶血磷脂酰胆碱（LPC）和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为LichrosherDiol，检测器为蒸发光散射检测器，流动相A为正庚烷-异丙醇溶液（43∶57，V/V），流动相... 详细信息

目的：建立同时测定尼莫地平脂肪乳中溶血磷脂酰胆碱（LPC）和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为LichrosherDiol，检测器为蒸发光散射检测器，流动相A为正庚烷-异丙醇溶液（43∶57，V/V），流动相B为正庚烷-异丙醇-水（29.5∶59∶11.5，V/V/V）（梯度洗脱），流速为1.5ml/min，柱温为40℃，进样量为20μl。结果：LPC和LPE的检测质量浓度线性范围为0.0200～0.4000mg/ml（r＝0.9990）、0.0100～0.2000mg/ml（r＝0.9996），LPC和LPE质量浓度的对数值与其峰面积的对数值线性关系良好；定量限分别为0.0134、0.0130mg/ml，检测限分别为0.0078、0.0076mg/ml；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2％；回收率分别为95.96％～100.63％（RSD＝1.83％，n＝9）、99.22％～101.76％（RSD＝0.80％，n＝9）。结论：该方法操作简便，可用于尼莫地平脂肪乳中有关物质的测定。

关键词：高效液相色谱法尼莫地平脂肪乳溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺含量测定

水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺及酰基转移机理研究

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水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺及酰基转移机理研究

作者：张薇薇郑州轻工业学院

学位级别：硕士

溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)是利用磷脂酶A1酶解磷脂酰乙醇胺(PE)失去一个分子脂肪酸后得到的酶解产物。LPE具有重要的医药应用价值,如抗艾滋病毒和肿瘤,脂质体可以作为药物载体,已经被广泛应用于医药行业。随着研究者对LPE药用功能性认识的... 详细信息

溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)是利用磷脂酶A1酶解磷脂酰乙醇胺(PE)失去一个分子脂肪酸后得到的酶解产物。LPE具有重要的医药应用价值,如抗艾滋病毒和肿瘤,脂质体可以作为药物载体,已经被广泛应用于医药行业。随着研究者对LPE药用功能性认识的增加,高纯度LPE产品的研发与应用也备受关注,这与天然LPE的量少相矛盾,目前尚没有高纯度LPE。本研究针对制备高纯LPE过程中存在的转化率低、纯度不高及环保等方面的问题,创建了磷脂酶制取技术和硅胶柱色谱技术相结合的联用技术,同时对其酰基转移机理进行研究。首先建立一种水相体系中磷脂酶A1酶解制备LPE的方法。通过液料比、酶解温度、酶添加量及Ca Cl2添加量等单因素酶解条件,研究对LPE相对含量的影响。利用正交实验对酶解反应条件进行优化,得出其最佳酶解条件为:液料比10:1、酶解温度为35℃、酶添加量为0.04 m L/g,Ca Cl2添加量为0.01 g/m L,最后得出LPE的相对含量达到42.0%。其次建立一种LPE的硅胶柱色谱纯化技术。通过对柱层析过程中混合洗脱液比例、上样浓度、上样量以及洗脱液流速等纯化工艺因素对溶血磷脂酰乙醇胺分离纯化效果的影响分析,确定了最佳纯化工艺参数:洗脱液配比为氯仿:甲醇=2:1、上样量为1:40 g/g、上样浓度为30 mg/m L,洗脱液流速为2.5 m L/min,最终LPE的纯度达到99.05%,回收率88.69%。研究LPE过程中的酰基转移机理。首先利用HPLC-ELSD对磷脂酶A1催化酶解PE的全过程进行分析检测,结果证实了酶解过程有酰基转移现象发生;然后利用HPLC-RID对磷脂酶A1、磷脂酶A2分别酶解磷脂酰乙醇胺的全过程进行分析检测,结果表明酶解过程中Sn-2-LPE发生了自动酰基转移,得到了Sn-1-LPE,并未发现Sn-1-LPE有自动酰基转移现象。同时通过单因素实验探讨了溶液的极性、p H值、酶解温度及Sn-2-LPE的浓度等因素对酰基转移的影响。

关键词：磷脂酰乙醇胺溶血磷脂酰乙醇胺磷脂酶A1 硅胶柱色谱酰基转移

高效液相色谱法测定7种肠外营养制剂脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺含量

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实验室检测

实验室检测 2023年第5期1卷 8-13页

作者：谭梦茹申兰慧王丽葛晓莹杨敏智无锡市药品安全检验检测中心无锡214000

目的建立高效液相色谱法测定7种肠外营养制剂脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(lysophosphatidylethanolamine,LPE)含量的方法。方法样品经色谱柱Xbridge BEH HILIC(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85:15:0.5:0.05,V:V:V:V)与正己烷-异丙醇(20:48,V:V)为流动相进行梯度洗脱,标准曲线法定量。结果在选定条件下,LPC和LPE与样品中其他组分分离良好;二者峰面积的对数与浓度的对数均呈良好的线性关系,LPC和LPE的线性范围分别为0.02~0.20 mg/mL(r=0.9998)和0.01~0.10 mg/mL(r=0.9997);LPC和LPE的定量限分别为5、10μg/mL;平均回收率分别99.77%~101.03%和102.30%~103.06%,相对标准偏差均小于2.0%。结论该方法效率高、准确性好,适用于7种肠外营养制剂脂肪乳注射液中LPC和LPE的测定。

关键词：肠外营养制剂脂肪乳注射液溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺高效液相色谱法

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的测定方法验证

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上海医药 2020年第11期41卷 98-102页

作者：丁丽燕郑娟朱晓晓上海乔源生物制药有限公司、上海脂肪乳剂工程技术研究中心上海201203

目的 :开展HPLC-ELSD法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的方法学验证。方法 :参照国家药典委员会颁布的丙泊酚乳状注射液征求意见稿项下LPC和LPE的分析方法进行验证。结果:LPC在20.56~411.1... 详细信息

目的 :开展HPLC-ELSD法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的方法学验证。方法 :参照国家药典委员会颁布的丙泊酚乳状注射液征求意见稿项下LPC和LPE的分析方法进行验证。结果:LPC在20.56~411.12 mg/ml(R=0.999 8),LPE在5.79~115.71 mg/ml(R=0.999 4)范围内线性良好;他们的定量限浓度分别为23.1 mg/ml、10.3 mg/ml,检测限浓度分别为9.2 mg/ml、4.1 mg/ml。两者加样回收率RSD分别为0.7%、8%;方法重复性、耐用性好。结论 :本检测方法专属性强,结果可靠,重复性好,可用于丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的质量评价。

关键词：丙泊酚中/长链脂肪乳注射液溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺

HPLC-ELSD测定多西他赛注射用浓溶液中溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱的含量

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中国现代应用药学 2013年第11期30卷 1210-1214页

作者：杨俊谢俊金陵药业股份有限公司技术中心南京210009

目的建立同时测定多西他赛注射用浓溶液中的溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）、溶血磷脂酰胆碱（LPC）含量的HPLC-ELSD。方法采用YMC Pack PVA-Sil（150mm×2mm,5μm）色谱柱,以三氯甲烷为流动相A、甲醇-水（93.5∶6.5）为流动相B,梯度洗脱,... 详细信息

目的建立同时测定多西他赛注射用浓溶液中的溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）、溶血磷脂酰胆碱（LPC）含量的HPLC-ELSD。方法采用YMC Pack PVA-Sil（150mm×2mm,5μm）色谱柱,以三氯甲烷为流动相A、甲醇-水（93.5∶6.5）为流动相B,梯度洗脱,流速为0.4mL·min1,柱温为25℃,蒸发光散射检测器检测,检测器漂移管温度：100℃,雾化气：空气,气体流量为2.0L·min1。结果 LPE和LPC峰面积的对数与相应的浓度的对数呈良好的线性关系,线性范围分别为0.203~0.811μg（r=0.9990）和0.407~6.102μg（r=0.9996）,LPE3个浓度的平均加样回收率分别为104.1%,95.1%,101.6%,RSD分别为3.8%,0.3%,2.4%,LPC3个浓度的平均回收率分别为108.7%,104.5%,105.5%,RSD分别为1.0%,3.0%,2.6%。结论该法简单、准确、重复性好,可用于多西他赛注射用浓溶液中大豆磷脂分解产物的质量控制。

关键词：多西他赛注射用浓溶液溶血磷脂酰乙醇胺溶血磷脂酰胆碱高效液相色谱-蒸发光散射法含量测定

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定

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西北药学杂志 2020年第1期35卷 49-52页

作者：梁亚龙陈艳明倪成良王东凯沈阳药科大学药学院沈阳117004 云南龙海天然植物药业有限公司昆明650000

目的建立HPLC法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Lichrospher 100 DIOL(250 mm×4 mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,... 详细信息

目的建立HPLC法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Lichrospher 100 DIOL(250 mm×4 mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,正己烷-异丙醇(18∶30)溶液为流动相B;梯度洗脱;柱温:35℃。结果溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为0.03~0.25(r1=0.9997)和0.01~0.10(r2=0.9962)mg·mL^-1,定量限分别为0.72和0.31μg。结论该方法准确、可行,精密度高,可用于溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定。

关键词：丙泊酚溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺含量测定 HPLC法

HPLC-ELSD法同时测定氟比洛芬酯注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量

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中国药师 2020年第1期23卷 151-154页

作者：陈蓉苏静华郝刚苏州市药品检验检测研究中心

目的:建立同时测定氟比洛芬酯注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)含量的方法。方法:采用HPLC法,蒸发光散射检测器,色谱柱为Zorbax RX-SIL(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以流动相A:甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.0... 详细信息

目的:建立同时测定氟比洛芬酯注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)含量的方法。方法:采用HPLC法,蒸发光散射检测器,色谱柱为Zorbax RX-SIL(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以流动相A:甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05),流动相B:正己烷-异丙醇-流动相A(20∶48∶22)梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1,柱温为40℃,漂移管温度为75℃,雾化气流速为1.5 L·min^-1,进样量为20μl。结果:LPC和LPE分别在82.72~517.03μg·ml-1(r=0.9999)、19.19~119.93μg·ml-1(r=0.9990)范围内,浓度的对数值与其峰面积的对数值呈现良好线性关系;LPC和LPE的回收率分别为95.44%(RSD=1.10%,n=9),97.54%(RSD=1.52%,n=9)。36批制剂中均检出LPC和LPE,并且溶血磷脂含量随时间和温度增加而增加。结论:建议贮藏条件为25℃以下密闭储存,不可冷冻,有效期为12个月。该方法操作简便,可用于氟比洛芬酯注射液中有害杂质溶血磷脂的含量测定。

关键词：氟比洛芬酯注射液高效液相色谱法溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酰乙醇胺