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内脏痛高敏感幼鼠的学习记忆能力变化和脊髓背角、海马ca1区脑源性神经营养因子表达变化及意义

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内脏痛高敏感幼鼠的学习记忆能力变化和脊髓背角、海马CA1区脑源...

作者：许淳福建医科大学

学位级别：硕士

目的:采用新生期母婴分离建立幼鼠内脏痛高敏感模型,探讨脊髓背角脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和幼鼠内脏痛敏感性增高的关系。方法:32只新生SD大鼠按2×2析因设计随机分成4组,每组8只。分别为M1C1组、M1C0组、M0C1组、M0C0组。M1C1... 详细信息

目的:采用新生期母婴分离建立幼鼠内脏痛高敏感模型,探讨脊髓背角脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和幼鼠内脏痛敏感性增高的关系。方法:32只新生SD大鼠按2×2析因设计随机分成4组,每组8只。分别为M1C1组、M1C0组、M0C1组、M0C0组。M1C1组:给予新生期母婴分离(NMS)建立幼鼠内脏痛高敏感模型,并在50日龄时接受结直肠扩张(CRD)刺激;M1C0组:同样给予NMS建立幼鼠内脏痛高敏感模型,但在50日龄时不接受CRD刺激;M0C1组:不给予NMS,但在50日龄时接受CRD刺激;M0C0组:既不给予NMS,50日龄时也不接受CRD刺激。M1C1组、M0C1组在接受CRD刺激后次日和M1C0组、M0C0组幼鼠一起处死,留取L62脊髓,采用SABC免疫组织化学方法检测各组幼鼠脊髓背角BDNF表达情况。采用SPSS 18.0软件包进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准结果:随着CRD压力的增加,腹外斜肌放电幅值增加;在CRD为15mm Hg、30mm Hg、45mm Hg低扩张压刺激下,M1C1组腹外斜肌放电幅值显著高于M0C1组,差异有统计学意义,当CRD为60mm Hg、75mm Hg高扩张压刺激时,两组幼鼠腹外斜肌放电幅值差异无统计学意义。M1C1组、M0C1组、M1C0组及M0C0组幼鼠脊髓背角BDNF阳性细胞数百分比(IHS值)分别为32.25%(5.79)、31.18%(5.21)、32.25%(5.64)、24.50%(4.64),析因方差分析显示:新生期母婴分离可以导致幼鼠脊髓背角BDNF阳性细胞数百分比(IHS值)明显增加,单次CRD不能影响幼鼠脊髓背角BDNF阳性细胞数百分比(IHS值)的表达,新生期MS和单次CRD刺激二者不存在交互作用。结论:新生期MS可建立幼鼠内脏痛高敏感模型,其原因可能与脊髓背角BDNF过度表达相关。目的:采用新生期母婴分离建立幼鼠内脏痛高敏感模型,探讨内脏痛敏感性增高幼鼠学习记忆能力和海马ca1区BDNF的表达变化。方法:32只新生SD大鼠随机分成两组,每组16只,分别为M1组和M0组。M1组给予新生期母婴分离(NMS)建立幼鼠内脏痛高敏感模型,M0组不给予NMS。在幼鼠35日龄时,两组同时接受Morris水迷宫检测。待幼鼠50日龄时,再根据是否接受结直肠扩张(CRD)刺激将SD大鼠分成4组,每组8只。分别为M1C1组、M1C0组、M0C1组、M0C0组。M1C1组:给予NMS建立幼鼠内脏痛高敏感模型,并在50日龄时接受结直肠扩张(CRD)刺激;M1C0组:同样给予NMS建立幼鼠内脏痛高敏感模型,但在50日龄时不予CRD刺激;M0C1组:不予NMS,在50日龄时接受CRD刺激;M0C0组:不予NMS,50日龄时不予CRD刺激。M1C1组、M0C1组在接受CRD刺激后次日和M1C0组、M0C0组幼鼠一起处死,留取海马,采用SABC免疫组织化学检测各组幼鼠海马ca1区BDNF表达情况。结果:随着Morris水迷宫训练次数的增加,定位航行试验的潜伏期和总路程明显减少,同一日期模型组幼鼠和对照组相比,潜伏期及总游泳路程差别无统计学意义(P>0.05);空间探索实验中,与对照组相比,模型组幼鼠“原平台象限游泳路程/总路程”和“原平台穿越时间/总时间”和“穿越平台次数”明显较少,分别为:2.29、25.60%、25.60%,3.53、29.30%、30.14,两组差别具有统计学意义(P海马ca1区BDNF阳性细胞数百分比(阳性细胞IHS值)分别为26.47%(5.50)、40.41%(3.58)、33.86%(5.57)、42.25%(7.28),新生期MS建立的内脏痛高敏感幼鼠海马ca1区BDNF阳性细胞数百分比和阳性细胞IHS值明显下降。结论:新生期母婴分离在导致幼鼠内脏痛敏感性增高的同时,出现海马依赖性的学习记忆能力下降,表现为Morris水迷宫实验成绩下降和海马BDFN表达降低。

关键词：内脏高敏脊髓背角脑源性神经营养因子幼鼠新生期母婴分离海马ca1区 Morris水迷宫

GLURK5在大鼠海马ca1区对称性及非对称性突触中分布的研究

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GLURK5在大鼠海马CA1区对称性及非对称性突触中分布的研究

作者：侯文婷中国医科大学

学位级别：硕士

目的谷氨酸是脑内最重要的兴奋性神经递质，其受体分两类：一类是与G蛋白偶联的代谢型受体，另一类是与离子通道有关的离子型受体。离子型的谷氨酸受体又分为NMDA(N-methyl-d-aspartate)受体、AMPA(α-amino-3-bydroxy-5-methyl-4-isox... 详细信息

目的谷氨酸是脑内最重要的兴奋性神经递质，其受体分两类：一类是与G蛋白偶联的代谢型受体，另一类是与离子通道有关的离子型受体。离子型的谷氨酸受体又分为NMDA(N-methyl-d-aspartate)受体、AMPA(α-amino-3-bydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid)受体和kainate受体三种。Kainate受体有五种亚型(GLURK1，GLURK2，GLURK5，GLURK6，GLURK7)，其中GLURK5具有十分重要的生理功能，可能与癫痫的发生有关。原位杂交技术证实，在海马ca1区，大量的中间神经元中有GLURK5 mRNA表达。电生理研究表明，在该区中间神经元中有突触后的kainate受体存在，但其亚型组成仍不清楚，推断有可能包含GLURK5，同时，电生理研究还表明，GLURK5有可能存在于海马ca1区兴奋性以及抑制性突触的前膜，分别参与调节兴奋性和抑制性神经递质的释放。但在海马ca1区兴奋性及抑制性突触中是否存在GLURK5，尚缺乏直接的形态学证据。本研究采用免疫组织化学方法在光、电镜下对GLURK5受体在大鼠海马ca1区神经元及对称性和非对称性突触中的分布进行了观察，为探讨GLURK5在该区对突触传递调节作用的机制提供形态学证据。方法采用免疫组织化学方法，在光学显微镜和电子显微镜下，对谷氨酸受体--GLURK5在大鼠海马ca1区神经元及对称性(抑制性)和非对称性(兴奋性)突触中的分布进行观察。结果光镜下，在大鼠海马ca1区可见散在分布的中间神经元显示为GLURK5阳性;锥体层中的部分锥体细胞显示为GLURK5阳性，棕黄色免疫反应阳性颗粒主要分布于胞膜及突起。 2.电镜下，在大鼠海马caI区可见较多CLURKS阳性反应颗粒附着于部分对称性突触的前膜、部分对称性突触的后膜、部分非对称性突触的前膜以及部分非对称性突触的后膜。结论 1 .GLURKS定位于大鼠海马C习似区对称性(抑制性)突触以及非对称性(兴奋性)突触的前膜，分别参与调节抑制性和兴奋性神经递质的释放。 ***定位于大鼠海马caI区对称性(抑制性)以及非对称性(兴奋性)突触的后膜，为进一步研究其功能意义提供了形态学依据。

关键词： GLURK5 对称性突触非对称性突触海马ca1区

丰富环境对快速老化小鼠海马ca1区神经元凋亡的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2015年第1期24卷 16-19页

作者：李建忠郝兴华崔慧先武志兵刘学敏李明吴海平李富德长治医学院人体解剖学教研室长治046000 长治医学院附属和平医院长治046000 河北医科大学解剖教研室

目的探讨丰富环境对快速老化小鼠海马cal区神经元凋亡的影响。方法选用健康雄性5月龄SAMP8和SAMRl小鼠各20只，将其均分别随机分为丰富环境组（EE）和标准环境组（SE）各2组，每组10只，分别在两种环境下饲养2个月。通过Nissl染色、TUNE... 详细信息

目的探讨丰富环境对快速老化小鼠海马cal区神经元凋亡的影响。方法选用健康雄性5月龄SAMP8和SAMRl小鼠各20只，将其均分别随机分为丰富环境组（EE）和标准环境组（SE）各2组，每组10只，分别在两种环境下饲养2个月。通过Nissl染色、TUNEL染色和免疫组织化学染色及图像分析系统检测海马ca1区神经元的数量、凋亡情况和A13的沉积。结果EE组SAMP8小鼠海马cal区神经元数量是（96．656±2．444）个、凋亡指数为36．275％、AB阳性神经元数量是（14．063±1．501）个，吸光度为（0．255±0．021），SE组SAMP8小鼠海马ca1区神经元数量是（88．938±3．583）个、凋亡指数为51．961％、A13阳性神经元数量是（17．844±1．648）个，吸光度为（0．291±O．032），两组之间所有指标差异都具有统计学意义（均P〈0．05）。EE组SAMR1小鼠与SE组SAMRl小鼠相比，两组之间所有指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论丰富环境可以有效减少SAMP8小鼠海马cal区At3沉积，降低细胞凋亡，防止了神经元的损坏和丢失，这可能是其改善小鼠学习记忆能力的作用机制之一。

关键词：丰富环境海马ca1区凋亡阿尔茨海默病

海马ca1区缺血再灌注损伤的形态学改变及三七总皂苷的影响

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湖南中医药导报 2004年第2期10卷 60-61页

作者：李花陈北阳熊艾君湖南中医学院湖南长沙410007

目的 :探讨大鼠海马ca1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷 (PNS)的影响。方法 :线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马ca1区组织学分级、海马ca1区神经元密度等为评价指标。结... 详细信息

目的 :探讨大鼠海马ca1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷 (PNS)的影响。方法 :线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马ca1区组织学分级、海马ca1区神经元密度等为评价指标。结果 :三七总皂苷组神经症状明显减轻 ,海马ca1区组织学分级降低、神经元密度增加 ,与模型组间差异有显著性意义。结论 :三七总皂苷能明显减轻脑缺血再灌注引起的神经损伤症状及海马ca1区神经元损伤的程度。

关键词：三七总皂苷海马ca1区缺血-再灌注损伤

纳络酮对小鼠海马ca1区神经元缺血再灌注损伤干预效果的观察

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纳络酮对小鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤干预效果的观察

作者：王雪红山西医科大学

学位级别：硕士

目的:进一步验证脑缺血再灌注损伤实验动物模型的可行性,初步探讨纳络酮再灌注后干预对脑缺血再灌注损伤的影响,探索脑缺血再灌注损伤时纳络酮后干预的最佳时机。方法:将小鼠随机分为3大组9个小组,每小组6只:假手术组(A组)、缺血再灌注... 详细信息

目的:进一步验证脑缺血再灌注损伤实验动物模型的可行性,初步探讨纳络酮再灌注后干预对脑缺血再灌注损伤的影响,探索脑缺血再灌注损伤时纳络酮后干预的最佳时机。方法:将小鼠随机分为3大组9个小组,每小组6只:假手术组(A组)、缺血再灌注对照组(B组)和纳络酮后干预组(C组),B组根据给药时间分为再灌注即刻(B1组)、再灌注30min(B2组)、再灌注1h(B3组)和再灌注1.5h(B4组),C组也根据给药时间分为再灌注即刻(C1组)、再灌注30min(C2组)、再灌注1h(C3组)和再灌注1.5h(C4组)。C组腹腔注射纳络酮5mg/kg,B组0.9%NaCl以相应等体积量腹腔注射。采用昆明小鼠结扎双侧颈总动脉脑缺血再灌注损伤模型,各组再灌注24h后迅速开颅取脑。标本置于4%多聚甲醛液中固定24h后,取视交叉后的脑组织,常规石蜡包埋,冠状切片,片厚5μm,苏木精-伊红染色(HE染色),分别观察纳络酮再灌注损伤后干预对海马ca1区神经元存活细胞数、变性细胞率和组织形态学改变的影响。结果:纳络酮治疗组小鼠海马ca1区存活细胞数明显高于缺血再灌注对照组(P＜0.05),变性细胞率明显低于缺血再灌注对照组(P＜0.05),而与假手术组无显著差别(P＞0.05),纳络酮治疗组各组内比较无显著差别。假手术组海马ca1区锥体细胞排列紧密,层次分明,核大而圆,核膜完整,核仁清晰,核染色质均匀;缺血再灌注对照组可见正常锥体细胞数明显减少,排列散乱,可见大量的变性坏死细胞,细胞肿胀,胞浆内有空泡形成,胞质嗜酸性增强,坏死细胞核呈梭形或三角形固缩,深染成蓝紫色,细胞间质水肿明显。纳络酮各组与缺血再灌注对照组比较变性坏死细胞明显减少,细胞形态接近正常,间质水肿得到改善。结论:从形态学的角度,纳络酮后干预确实能减轻脑缺血再灌注损伤,纳络酮不同时间点的应用,都具有减轻损伤的作用,这就为临床超长心肺复苏提供了实验依据,在1.5小时内不同时间给予纳络酮的干预效果没有明显差别。

关键词：纳络酮脑缺血再灌注损伤海马ca1区小鼠

复方多康宁（Co—DKL）对铅引起的发育大鼠海马ca1区长时程增强效应（LTP）损伤的修复作用

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世界元素医学 2005年第2期12卷 75-80页

作者：李秀芳马建元胡徽东阮迪云解放军105医院，合肥230031 中国科技大学，合肥230001

目的慢性铅暴露可以引起儿童学习记忆和认知功能的损伤。突触可塑性被认为是学习记忆的神经生物学基础，长时程增强(long—term potentiation LTP)是突触可塑性的一种重要形式。已有的研究表明慢性铅暴露损伤了大鼠海马ca1区和齿状回LT... 详细信息

目的慢性铅暴露可以引起儿童学习记忆和认知功能的损伤。突触可塑性被认为是学习记忆的神经生物学基础，长时程增强(long—term potentiation LTP)是突触可塑性的一种重要形式。已有的研究表明慢性铅暴露损伤了大鼠海马ca1区和齿状回LTP的诱导和表达过程。本文应用离体脑片电生理技术研究了复方多康宁(Co—DKL)对慢性铅暴露引起的发育中大鼠海马突触可塑性损伤的修复效应；方法新生Wistar幼鼠出生后经母乳摄入铅和在铅暴露的同时往食物中添加三种不同剂量的Co—DKL(0．8、1．6、3．2mg／kg／day)。在30～32天的大鼠海马ca1区记录EPSP；结果慢性铅暴露损伤了ca1区LTP的损伤，而高剂量Co-DKL的修复作用较小且稍有一点毒副作用。合适剂量的Co—DKL能有效逆转铅造成的神经系统损伤，可能具有一定的促智作用；结论低剂量的Co—DKL(正常剂量的二倍)对铅引起的损伤有显著的修复作用，对对照组大鼠有一定的促智作用，且没有副作用，中剂量(正常剂量的四倍)有一定的修复作用，但高剂量的修复作用较小，有一定的毒副作用。

关键词：海马ca1区修复作用长时程增强效应发育康宁复方突触可塑性神经生物学基础 Wistar 神经系统损伤学习记忆毒副作用促智作用正常剂量铅暴露电生理技术认知功能大鼠海马离体脑片不同剂量 EPSP 有效逆转 LTP

大鼠海马ca1区-杏仁核大麻素受体信号通路对糖尿病大鼠摄食及胃运动的影响

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中外医学研究 2019年第23期17卷 1-6页

作者：闫菲冷慧王茜孙向荣郭菲菲徐珞青岛大学基础医学院山东青岛266021 高密市人民医院

目的:本实验主要探究了大鼠海马ca1区-杏仁核(BMA)大麻素受体信号通路对糖尿病大鼠摄食及胃运动的影响。方法:通过免疫组织化学染色方法确定大鼠海马ca1区是否表达大麻素受体,以及海马ca1区-BMA是否存在纤维投射;通过向大鼠海马ca1区注... 详细信息

目的:本实验主要探究了大鼠海马ca1区-杏仁核(BMA)大麻素受体信号通路对糖尿病大鼠摄食及胃运动的影响。方法:通过免疫组织化学染色方法确定大鼠海马ca1区是否表达大麻素受体,以及海马ca1区-BMA是否存在纤维投射;通过向大鼠海马ca1区注射大麻素、大麻素受体拮抗剂利莫那班(Rimonabant)及GLP-1受体激动剂Exendix-4,测定大鼠0~4h及4~8h摄食量改变,以及对胃运动的影响;观察大麻素及GLP-1受体激动剂Exendix-4对糖尿病大鼠胃牵张(GD)敏感神经元放电活动的影响。结果:免疫组织化学染色结果证实了海马ca1区存在大麻素受体,且海马ca1区-BMA之间存在纤维投射;通过向大鼠海马ca1区注射大麻素、大麻素受体拮抗剂Rimonabant及GLP-1受体激动剂Exendix-4能够减少食物摄入并抑制大鼠胃运动;海马ca1区微量注射大麻素后,正常大鼠GD敏感神经元放电频率显著增加,该效应可被大麻素受体拮抗剂Rimonabant完全阻断,Exendix-4可部分阻断大麻素的促放电效应;与正常大鼠相比,海马ca1区微量注射大麻素后糖尿病大鼠GD敏感神经元放电频率均显著增加(P海马ca1区微量注射大麻素后,大鼠胃运动幅度和频率均显著增加,但糖尿病大鼠胃运动增加更加显著。结论:大鼠海马ca1区存在大麻素受体,且海马ca1区-BMA大麻素受体信号通路参与调节大鼠摄食及胃运动。

关键词：海马ca1区杏仁核大麻素受体摄食胃运动

针刺对AD大鼠海马ca1区内质网应激及凋亡的影响

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海南医学院学报 2019年第16期25卷 1209-1214页

作者：毛旭孟晋毛军杨鸿飞张海龙黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 山西医科大学山西太原030001 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040

目的:探讨针刺对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元内质网应激及凋亡的影响。方法:36只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、假手术组和针刺组,模型组和针刺组通过双侧海马ca1区注射Aβ1-42建立AD模型,假手术组以等体积的无菌双氧水注射,... 详细信息

目的:探讨针刺对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元内质网应激及凋亡的影响。方法:36只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、假手术组和针刺组,模型组和针刺组通过双侧海马ca1区注射Aβ1-42建立AD模型,假手术组以等体积的无菌双氧水注射,空白组不做处置。针刺组于造模后2d起给予针刺干预,空白组、模型组和假手术组不予针刺仅背侧位捆绑固定,1次/d,连续治疗14d。疗程结束后通过HE染色观察大鼠海马ca1区神经元形态,Tunel法检测海马ca1区神经元凋亡水平,免疫组化法检测海马ca1区Aβ1-42、GRP78蛋白的表达,Westernblot法检测海马ca1区GRP78、caspase-12蛋白的水平。结果:与空白组大鼠相比,模型组大鼠海马ca1区神经元细胞明显减少,凋亡水平、Aβ1-42、GRP78和caspase-12蛋白表达水平明显增高,差异具有统计学义(P海马ca1区神经元形态较模型组明显改善,细胞数量明显增多,凋亡水平、Aβ1-42、GRP78和caspase-12蛋白的表达明显降低,差异具有统计学义(P海马ca1区神经元形态和抑制Aβ1-42的堆积。

关键词：针刺疗法阿尔茨海默病海马ca1区内质网应激凋亡

运动疲劳损害大鼠空间认知能力并导致海马ca1区L-LTP抑制

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神经解剖学杂志 2023年第2期39卷 172-178页

作者：金硕李鸿扬张晓晓祁金顺孙丽娜北京师范大学体育与运动学院北京100875 山西医科大学生理学系细胞生理学教育部重点实验室太原030001 北京师范大学认知神经科学与学习国家重点实验室北京100875

目的:探讨运动疲劳对空间认知能力的影响及海马突触可塑性调控机制。方法:采用随机数字法将雄性SD大鼠分为对照组(control)和疲劳组(fatigue),选用3级递增负荷跑台训练方案,建立慢性力竭运动疲劳模型。利用Y迷宫空间识别记忆实验评估大... 详细信息

目的:探讨运动疲劳对空间认知能力的影响及海马突触可塑性调控机制。方法:采用随机数字法将雄性SD大鼠分为对照组(control)和疲劳组(fatigue),选用3级递增负荷跑台训练方案,建立慢性力竭运动疲劳模型。利用Y迷宫空间识别记忆实验评估大鼠的空间识别和记忆变化,使用Western Blot测定海马组织caMP反应元件结合蛋白(CREB)表达及磷酸化水平,并利用在体电生理记录大鼠海马ca1区晚期时相长时程增强效应(L-LTP),随后通过免疫组织化学染色观察大鼠海马ca1区小清蛋白(PV)的表达。结果:疲劳组大鼠在新异臂的停留时间比和在各臂的总穿梭次数均明显低于对照组(P1)。高频刺激后30、60、120直至180 min,疲劳组大鼠海马ca1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率较对照组大鼠均显著降低(P1)。Western Blot结果表明,疲劳组大鼠海马组织磷酸化CREB(p-CREB)水平明显低于对照组(P海马ca1区PV表达下调(P海马L-LTP抑制、CREB磷酸化水平降低以及PV阳性神经元减少有关。

关键词：运动疲劳空间记忆 L-LTP 海马ca1区 caMP反应元件结合蛋白小清蛋白大鼠