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三七总皂苷抑制大鼠全脑缺血后海马ca1区神经元凋亡及其机制研究

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中草药 2016年第8期47卷 1337-1344页

作者：贺旭葛金文邓长青郭太平潘爱华李志远中南大学基础医学院人体解剖与神经生物学系湖南长沙410013 益阳医学高等专科学校解剖教研室湖南益阳413000 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 云南中医学院针灸推拿康复学院云南昆明650500

目的探讨三七总皂苷(TSPN)抑制大鼠全脑缺血后海马ca1区神经元的凋亡作用及其相关机制。方法采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型,缺血后30 min再灌注;大鼠分成假手术组、模型组和TSPN组。TSPN组ip不同剂量(25、50、75、100 mg/kg)TSP... 详细信息

目的探讨三七总皂苷(TSPN)抑制大鼠全脑缺血后海马ca1区神经元的凋亡作用及其相关机制。方法采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型,缺血后30 min再灌注;大鼠分成假手术组、模型组和TSPN组。TSPN组ip不同剂量(25、50、75、100 mg/kg)TSPN。再灌注第14天,通过海马ca1区尼氏染色和大鼠的生存率确定TSPN发挥神经保护作用的最佳剂量。对模型组和最佳剂量TSPN组大鼠在不同再灌注时间点(1、3、7、14 d)进行神经功能评分,采用免疫组化法观察ca1区caspase-3、Bcl-2、Bax的阳性细胞密度,并采用免疫印迹技术检测caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白在海马的表达水平。结果 75 mg/kg TSPN组大鼠生存率为100%,ca1区神经元密度显著高于模型组和其他剂量TSPN组(P1);TSPN(75 mg/kg)组ca1区caspase-3阳性细胞密度在全脑缺血第7、14天显著低于模型组(P1);20 000的caspase-3第3、7、14天的蛋白水平及17 000的caspase-3在第7、14天蛋白水平均显著低于模型组(P1);TSPN(75 mg/kg)组ca1区Bcl-2阳性细胞密度及蛋白水平在第7、14天高于模型组(P1),而Bax阳性细胞密度第7、14天低于模型组(P1),TSPN组第3、7、14天海马Bax蛋白水平显著低于模型组(P1);TSPN组Bcl-2和Bax阳性细胞及蛋白水平的比值在第7、14天显著高于模型组(P1)。结论 TSPN可通过上调Bcl-2和Bax阳性细胞和蛋白水平的比值,减少caspase-3的活化而抑制全脑缺血后大鼠海马ca1区神经元的凋亡。

关键词：三七总皂苷 Bcl-2/Bax 凋亡 caspase-3 海马ca1区全脑缺血

大鼠海马ca1区神经元Na^+通道在出生后早期发育的变化

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生理学报 2013年第2期65卷 201-209页

作者：乔嘉琪刘爱丽刘迢迢田心天津医科大学生物医学工程学院天津300070 天津医科大学基础医学研究中心神经工程实验室天津300070

为了探索大鼠海马ca1区锥体神经元电压门控性Na+通道发育的关键期,本研究采用膜片钳技术,分别对急性分离的出生后0周、1周、2周、3周、4周的大鼠海马ca1区锥体神经元进行全细胞记录。结果显示,随着大鼠出生后周龄的增大,Na+通道的最大... 详细信息

为了探索大鼠海马ca1区锥体神经元电压门控性Na+通道发育的关键期,本研究采用膜片钳技术,分别对急性分离的出生后0周、1周、2周、3周、4周的大鼠海马ca1区锥体神经元进行全细胞记录。结果显示,随着大鼠出生后周龄的增大,Na+通道的最大电流密度逐渐增大,出生后1~4周相对于出生后0周的最大电流密度的增幅分别为(42.76±4.91)%、(146.80±7.63)%、(208.79±5.28)%、(253.72±5.74)%(n=10,P1周与2周之间的增幅最为显著;Na+通道的稳态激活曲线向左移动,出生后0~2周的半数激活电压逐渐减小,分别为39.06±0.65、43.41±0.52、48.29±0.45(mV,n=10,P1~2周斜率因子减小,分别为5.77±0.56、4.42±0.43(n=10,P1周、2~4周之间的斜率因子没有明显变化;Na+通道失活后恢复曲线左移,出生后1~3周的恢复时间常数逐渐减小,分别为8.30±0.24、7.15±0.21、6.18±0.25(ms,n=10,P1周、3~4周之间没有明显变化;随着出生后的发育,海马ca1区锥体神经元动作电位发生变化,超射值与最大上升速率增大,阈值降低,与Na+电流的变化一致。结果提示,出生后1~2周可能是电压门控性Na+通道发育的关键期,此期间Na+通道分布显著增加,激活曲线左移,失活速度变快,失活后恢复的时间缩短。

关键词：海马ca1区发育电压门控性Na^+通道动作电位

麦角甾醇预处理对丙泊酚麻醉大鼠海马ca1区神经元损伤的影响

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中华神经医学杂志 2022年第3期21卷 249-256页

作者：朱于临董克军李智帅烟台市烟台山医院麻醉科烟台264001 日照市人民医院麻醉科日照276800 山东中医药大学附属医院麻醉科济南250011

目的探讨麦角甾醇对丙泊酚麻醉大鼠海马ca1区神经元的保护作用及机制。方法将45只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、丙泊酚组和丙泊酚+麦角甾醇组,每组15只。对照组大鼠腹腔注射100 mg/kg脂肪乳溶剂;丙泊酚组大鼠先腹腔注射50 mg/kg丙泊... 详细信息

目的探讨麦角甾醇对丙泊酚麻醉大鼠海马ca1区神经元的保护作用及机制。方法将45只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、丙泊酚组和丙泊酚+麦角甾醇组,每组15只。对照组大鼠腹腔注射100 mg/kg脂肪乳溶剂;丙泊酚组大鼠先腹腔注射50 mg/kg丙泊酚,待翻正反射恢复后再次注射50 mg/kg丙泊酚;丙泊酚+麦角甾醇组大鼠腹腔注射30 mg/kg麦角甾醇,随后给予丙泊酚注射(方法同上),均连续注射7 d。末次注射后大鼠均清醒2 h。采用透射电镜观察大鼠海马ca1区神经元的超微结构;采用HE染色、TUNEL和NeuN染色、免疫组化染色分别检测大鼠海马ca1区神经元的形态学变化、凋亡、突触后密度蛋白95(PSD95)的表达;采用Western blotting法检测大鼠海马ca1区凋亡相关蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路蛋白的表达。结果透射电镜、HE染色结果显示丙泊酚+麦角甾醇组大鼠海马ca1区神经元损伤程度较丙泊酚组减轻。与对照组比较,丙泊酚组大鼠海马ca1区神经元凋亡率升高,活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)、Bax蛋白的表达升高,Bcl-2蛋白、PSD95的表达降低,凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C(Cyt-C)蛋白的表达升高,而Sirt1蛋白表达、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt值降低,差异均有统计学意义(P海马ca1区神经元凋亡率降低[(27.33±1.37)%vs.(17.47±0.87)%],差异有统计学意义(P海马ca1区活化caspase 3、Bax蛋白的表达降低,Bcl-2蛋白、PSD95的表达升高,AIF、Cyt-C蛋白的表达降低,而Sirt1蛋白表达、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt值升高,差异均有统计学意义(P海马ca1区神经元凋亡并减轻神经元损伤,其机制可能由PI3K-Akt信号通路介导。

关键词：麦角甾醇丙泊酚海马ca1区神经元凋亡 PI3K-Akt信号通路

雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马ca1区神经元的影响

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解剖学报 2010年第4期41卷 519-523页

作者：崔慧先郭威李莎石葛明顾平河北医科大学解剖学教研室河北省脑老化与认知神经科学实验室石家庄050017

目的观察雌激素对SAMP8鼠学习记忆及海马神经元的影响。方法将6月龄SAMP8鼠45只分为假手术组(sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢+雌激素组(OVX+E组)3组,并用同龄正常老化SAMR1小鼠作为同源对照组。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记... 详细信息

目的观察雌激素对SAMP8鼠学习记忆及海马神经元的影响。方法将6月龄SAMP8鼠45只分为假手术组(sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢+雌激素组(OVX+E组)3组,并用同龄正常老化SAMR1小鼠作为同源对照组。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,苏木素-伊红染色和免疫组织化学显示海马ca1区神经元及神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的变化,流式细胞术检测其nNOS的表达量。结果 OVX组与sham组相比,逃避潜伏期明显延长(P0.05);OVX组海马ca1区神经元病变严重,且ca1区nNOS阳性神经元的数量、吸光度和海马nNOS荧光指数(FI)值均低于sham组(P0.05)。结论雌激素能够改善小鼠的学习记忆能力,有效保护海马ca1区的神经元,提高海马ca1区nNOS阳性神经元的表达。

关键词：雌激素海马ca1区 Morris水迷宫免疫组织化学流式细胞术 SAMP8小鼠

乙酰胆碱在大鼠海马ca1区痛觉调制中的作用

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中国药理学通报 2013年第9期29卷 1239-1243页

作者：肖宇贾伟伟李雪卢长柱王月飞霍红徐满英齐齐哈尔医学院生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 齐齐哈尔医学院机能学教研室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院黑龙江省医院循环内科黑龙江哈尔滨150036 哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究海马ca1区及其内分布的乙酰胆碱(ACh)受体在大鼠痛觉调制中的作用。方法以电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性电刺激,用玻璃微电极细胞外记录痛反应神经元的电活动。结果侧脑室微量注射ACh能使大鼠海马ca1区痛兴奋神经元(PEN)痛诱发... 详细信息

目的研究海马ca1区及其内分布的乙酰胆碱(ACh)受体在大鼠痛觉调制中的作用。方法以电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性电刺激,用玻璃微电极细胞外记录痛反应神经元的电活动。结果侧脑室微量注射ACh能使大鼠海马ca1区痛兴奋神经元(PEN)痛诱发放电频率降低、潜伏期延长,痛抑制神经元(PIN)痛诱发放电频率增加、完全抑制时程缩短;注入ACh的M受体拮抗剂阿托品能够阻断ACh的上述效应;注入M受体激动剂毛果芸香碱产生与ACh相似的效应。结论上述结果提示,ACh通过影响海马ca1区PEN和PIN的电活动,参与了海马ca1区的痛觉调制,其机制可能是通过M受体介导而实现的。

关键词：海马ca1区乙酰胆碱阿托品毛果芸香碱痛兴奋神经元痛抑制神经元

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海马ca1区神经元在体簇状放电模式

海马CA1区神经元在体簇状放电模式

作者：高红英华东师范大学

学位级别：硕士

簇状放电(brust)是中枢神经元的一种特殊放电模式,运用多通道在体记录技术,考察小鼠海马ca1区神经元在清醒探索和慢波睡眠两种行为状态下的簇状放电模式。结果显示,海马ca1区的锥体细胞和中间神经元均有簇状放电模式,但在簇状放电型式... 详细信息

簇状放电(brust)是中枢神经元的一种特殊放电模式,运用多通道在体记录技术,考察小鼠海马ca1区神经元在清醒探索和慢波睡眠两种行为状态下的簇状放电模式。结果显示,海马ca1区的锥体细胞和中间神经元均有簇状放电模式,但在簇状放电型式、以及与场电位相关性等方面,两者存在差异。海马ca1区锥体细胞的簇状放电在型式上较为单一,单个簇状放电由2-7个电位幅度逐渐衰减的动作电位组成。簇状放电的型式在动物处于不同行为状态下变化不大,在清醒探索和慢波睡眠时相,锥体细胞均具有明显的簇状放电。其中有些簇状放电在发放时间上分别与场电位的theta节律和高频ripple振荡节律有相关性。海马ca1区中间神经元的簇状放电型式较为复杂,根据单个簇状放电的动作电位数、相邻动作电位间隔以及电位幅度衰减等情况,可分为;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四种不同的模式。其中模式Ⅰ簇状放电与锥体细胞类似,单个簇状放电也包含有2-7个动作电位,但电位幅度不衰减。模式Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ簇状放电则与锥体细胞明显不同,单个簇状放电一般由更多的动作电位组成,电位幅度基本不衰减。与锥体细胞相比,中间神经元的簇状放电受动物行为状态的影响较大。其中模式Ⅱ、Ⅲ簇状放电主要出现在慢波睡眠时相,在发放时间上,它们与场电位的ripple高频振荡节律有高相关性,对应每个ripple高频振荡,都会有一个簇状放电。模式Ⅳ簇状放电则主要出现在清醒探索时相,并且与场电位的theta节律在时间上有高相关性,在每个theta周期均对应有一个含5-16个动作电位的簇状放电。海马ca1区锥体细胞和中间神经元簇状放电模式的差异,提示它们在大脑信息编码以及神经网络活动的调控中可能具有不同的作用。

关键词：海马ca1区锥体细胞中间神经元簇状放电 ripple节律 theta节律

海马ca1区和ca3区单个神经元放电的仿真研究

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海马CA1区和CA3区单个神经元放电的仿真研究

作者：解楠天津医科大学

学位级别：硕士

研究目的：海马属于边缘系统,海马区神经元的放电活动与学习记忆、情绪行为和癫痫发作是密切相关的[I-3]。目前对海马区的研究主要集中在ca1区和ca3区,海马区神经元不同的放电模式携带着不同的电信号,所以研究神经元的放电模式对研... 详细信息

研究目的：海马属于边缘系统,海马区神经元的放电活动与学习记忆、情绪行为和癫痫发作是密切相关的[I-3]。目前对海马区的研究主要集中在ca1区和ca3区,海马区神经元不同的放电模式携带着不同的电信号,所以研究神经元的放电模式对研究神经元信息编码具有非常重要的意义。动作电位的发放频率以及每个爆发放电中峰放电的个数都是衡量放电模式的重要指标。本论文的研究目的是：通过对海马ca1区和ca3区单个神经元的建模仿真,分析单个神经元放电模式的变化。研究方法： 1.海马ca1区单个锥体神经元建模：对Warmam等提出的模型进行改进,建立一个包括16个房室的海马ca1区单个锥体神经元的电缆模型。模型的胞体室含有五个离子通道（INa,INaP, IDR, IA,IM）,其中不包括钙电流和由钙浓度调节的钾电流（Ica,ICT, IAHP）,而包括一个持续钠电流（INap）;树突室不含有源通道。 2.海马ca3区单个锥体神经元建模：本论文应用简化的Traub模型[29],该模型只含有胞体室和树突室两个房室。模型的胞体室包括两类离子电流：内向的钠离子电流INa和外向的延迟整流钾离子电流IK-DR;树突室包括三类离子电流：内向的钙离子电流Ica和两类外向钾离子电流,钙激活钾离子电流IK-C和Ik-AHP。 3.在海马ca1区单个神经元模型中,通过计算机仿真分析外界刺激,钾离子浓度以及离子通道电导对海马ca1区单个神经元放电模式的影响。 4.在海马ca3区单个神经元模型中,通过计算机仿真分析外界刺激以及耦合电导gc对海马ca3区单个神经元放电模式的影响。研究结果： 1.海马ca1区单个神经元模型中,仿真结果显示：随着钾离子浓度[K+]。的增加,以及钠通道电导的增加和钾通道电导的减少,海马ca1区单个神经元的放电频率增加。海马ca1区单个神经元的放电行为以单峰或者每个簇内含有两个或三个峰的形式出现,伴随混合放电。快速钠电流INa对海马ca1区周期白发爆发性放电有重要影响,单独的INa足够维持胞体的自发性放电。INap是一个小电流,不足以维持胞体反复自发性放电。 2.海马ca3区单个神经元模型中,仿真结果显示：（1）海马ca3区单个神经元的放电模式大致分为五类：低频率爆发放电,包括非常低频率的爆发放电和低频率爆发放电;高频率节律放电,包括胞体节律放电和胞体一树突节律放电;非周期混合模式的放电。（2）当gc=0mS/cm2时,神经元无爆发放电行为。随着单独胞体输入电流Is的增加,海马ca3区单个神经元放电频率增加,神经元的放电模式表现为周期节律放电（somatic Na spike）;随着单独树突输入电流Id的增加,神经元放电频率增加,神经元的放电模式表现为周期节律放电（ca spike）。当gc=2.1mS/cm2时,随着胞体输入电流Is的增加,神经元的放电频率增加,神经元的放电模式由周期低频率爆发放电,到非周期混合放电,再到周期节律放电,当胞体的输入电流较高时,神经元放电达到一个稳定的去极化状态;随着树突输入电流Id的增加,神经元放电频率增加,神经元的放电模式表现为非常低频率的爆发放电,低频率爆发放电,非周期行为,最后达到稳定的状态。当gc=∞mS/cm2时,胞体室和树突室合并为一个房室,随Is（Id）的增加,放电频率增加,神经元的放电模式表现为节律放电（Na-ca spike）,无爆发放电行为。研究结论： 1.海马ca1区单个神经元模型仿真结果中可见：海马ca1区单个神经元放电模式的变化与外界刺激、[K+]。以及离子通道电导有关。在一定范围内,随外界刺激电流密度、[K+]。和钠离子通道电导的增加以及钾离子通道电导的减少,海马ca1区单个神经元的放电频率增加,放电模式以单峰或者每个簇内含有两个或多个峰的形式出现,伴随混合放电。 2.海马ca3区单个神经元模型仿真结果中可见：海马ca3区单个神经元放电模式的变化与外界刺激和耦合电导gc的值密切相关。随外界刺激电流密度的增加,海马ca3区单个锥体神经元的放电频率增加,放电模式随gc值的不同而不同。当gc的值为0或无穷大时,随外界刺激电流密度的增加,海马ca3区单个锥体神经元的放电模式表现为节律放电,无爆发放电;只有gc的值在中间时才产生爆发放电。

关键词：海马ca1区海马ca3区离子通道电导耦合电导刺激放电模式仿真

海马ca1区Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响

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海马CA1区Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响

作者：全湖先青岛大学

学位级别：硕士

目的：探讨海马Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响。方法：以正常大鼠为对照,通过胃内植入应力传感器、海马ca1区核团微量注射及免疫组织化学等实验方法,观察糖尿病大鼠在清醒状态下胃活动的幅度、频率变化,探讨海马(hippocampal) ca1区... 详细信息

目的：探讨海马Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响。方法：以正常大鼠为对照,通过胃内植入应力传感器、海马ca1区核团微量注射及免疫组织化学等实验方法,观察糖尿病大鼠在清醒状态下胃活动的幅度、频率变化,探讨海马(hippocampal) ca1区注射微量ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响,及其受体阻断剂(D-Lys3-GHRP-6)对其所起的作用。结果：①海马ca1区分别注射20nmol、200nmol或2000nmol ghrelin6min后,糖尿病组和对照组大鼠胃收缩幅度均显著增高(P海马ca1区注入ghrelin+D-Lys3-GHRP-6混合液6min后,与ghrelin+NS组比较,2组大鼠ghrelin促进胃收缩幅度(P0.05);且单用ghrelin受体拮抗剂D-Lys3-GHRP-6对胃收缩幅度(P>0.05)和收缩频率(P>0.05)2组均无显著影响;结论：Ghrelin在海马ca1区通过作用其受体显著促进大鼠胃运动。糖尿病大鼠较正常大鼠对Ghrelin的反应明显降低。

关键词： ghrelin 海马ca1区胃糖尿病大鼠

生长抑素对实验性癫痫大鼠海马ca1区的作用

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生理学报 2000年第2期52卷 131-136页

作者：赵文娟黄显奋上海医科大学神经生物学教研室上海200032

在大鼠海马ca1区微量注射 0 0 3～ 0 3nmol生长抑素 (somatostatin ,SS)后 ,皮层脑电出现单个或成串的棘尖波 ,平均脑电总功率显著升高 ,并且在一定范围内 ( 0 0 0 6～ 0 15nmol)具有剂量依赖性。在海马ca1区微量注射0 0 3～ 0 3n... 详细信息

在大鼠海马ca1区微量注射 0 0 3～ 0 3nmol生长抑素 (somatostatin ,SS)后 ,皮层脑电出现单个或成串的棘尖波 ,平均脑电总功率显著升高 ,并且在一定范围内 ( 0 0 0 6～ 0 15nmol)具有剂量依赖性。在海马ca1区微量注射0 0 3～ 0 3nmolSS可诱发大鼠表现出痫样行为 ,并可加重红藻氨酸诱导的大鼠痫样活动。在 95个大鼠海马脑片上细胞外记录SS对ca1区青霉素诱导的 114个痫样放电单位的影响 ,SS ( 10 -10 ,10 -8,10 -6mol/L)引起 5 9 0 5 %的痫样单位放电频率显著增加 ,2 1 90 %的痫样单位放电频率显著减少 ,提示SS在海马ca1区的作用以促进痫样放电为主。SS抗体 ( 1∶10 0 0 )可部分阻断青霉素诱导的ca1区痫样放电。

关键词：生长抑素癫痫海马ca1区红藻氨酸青霉素