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高压脉冲电场激活啤酒废酵母细胞中海藻糖酶活性研究

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食品科学 2011年第23期32卷 87-90页

作者：王睦金艳刘明源张美硕杨艺林松毅吉林大学营养与功能食品研究室吉林长春130062

以啤酒酵母细胞中海藻糖酶活性为研究对象,以海藻糖得率为衡量指标,考察不同的电场强度、脉冲数及放置时间对啤酒酵母细胞中海藻糖酶活性的影响情况。研究发现:在pH值为3时,在电场强度为0～50kV/cm、脉冲数为0～10的条件下,未经电场处... 详细信息

以啤酒酵母细胞中海藻糖酶活性为研究对象,以海藻糖得率为衡量指标,考察不同的电场强度、脉冲数及放置时间对啤酒酵母细胞中海藻糖酶活性的影响情况。研究发现:在pH值为3时,在电场强度为0～50kV/cm、脉冲数为0～10的条件下,未经电场处理的啤酒酵母细胞中海藻糖得率要略高于经电场处理过的,同时在经电场处理并放置2h以后,海藻糖的得率逐渐降低,这说明高压脉冲电场能够在不同程度上激活海藻糖酶的活性,但海藻糖酶在一定时间内持续作用于已溶出的海藻糖,导致海藻糖降解。

关键词：啤酒废酵母高压脉冲电场海藻糖酶激活

柑橘大实蝇滞育蛹海藻糖酶和山梨醇脱氢酶活性的动态变化

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植物保护 2020年第4期46卷 144-148页

作者：周志雄袁江江李世香梁玲李传仁长江大学昆虫研究所荆州434025

柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein)是我国西南和华中地区柑橘的主要害虫,以滞育蛹在土壤中越冬。为探讨温度对柑橘大实蝇滞育蛹生理状态的影响,本文测定了12、16、20℃和24℃下柑橘大实蝇滞育蛹海藻糖酶和山梨醇脱氢酶活性的变化... 详细信息

柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein)是我国西南和华中地区柑橘的主要害虫,以滞育蛹在土壤中越冬。为探讨温度对柑橘大实蝇滞育蛹生理状态的影响,本文测定了12、16、20℃和24℃下柑橘大实蝇滞育蛹海藻糖酶和山梨醇脱氢酶活性的变化。结果显示,低温(12℃)下,海藻糖酶活性逐渐上升,高温(24℃)下,海藻糖酶活性逐渐下降;不同温度下山梨醇脱氢酶活性变化不尽相同,在起始阶段(10 d时),柑橘大实蝇滞育蛹山梨醇脱氢酶活性普遍较强,随滞育时间的延长,酶活性出现不同的变化,12℃和20℃下,山梨醇脱氢酶活性呈现“U”形变化趋势,16℃下酶活性逐渐减弱,24℃下酶活性先升后降。16℃下,两种酶活性基本低于同时期其他温度处理。交互作用分析显示,温度和化蛹后天数的交互作用对滞育蛹海藻糖酶和山梨醇脱氢酶活性存在显著影响。上述结果表明,柑橘大实蝇自身生理状态应对不同越冬温度的反应不同,说明越冬温度与柑橘大实蝇滞育期生理水平有着密切的关系。本研究结果对深入了解温度调控柑橘大实蝇滞育期代谢生理机制有一定的参考价值。

关键词：柑橘大实蝇滞育越冬温度海藻糖酶山梨醇脱氢酶

闹羊花素-Ⅲ对菜青虫海藻糖含量及海藻糖酶活性的影响

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华中农业大学学报 2000年第2期19卷 119-123页

作者：钟国华胡美英林进添周利娟华南农业大学昆虫毒理研究室广州510642 仲恺农业技术学院植保系广州510275

闹羊花素 Ⅲ (Rhodojaponin Ⅲ ,简称R Ⅲ )能显著降低 5龄菜青虫血淋巴和肌肉海藻糖含量。R Ⅲ以每虫 1～ 10 μg处理试虫后 6 0h ,血淋巴海藻糖酶活性明显受抑制。R Ⅲ对肌肉海藻糖酶活性的影响依剂量不同而异。处理后 6 0h内 ,10 μ... 详细信息

闹羊花素 Ⅲ (Rhodojaponin Ⅲ ,简称R Ⅲ )能显著降低 5龄菜青虫血淋巴和肌肉海藻糖含量。R Ⅲ以每虫 1～ 10 μg处理试虫后 6 0h ,血淋巴海藻糖酶活性明显受抑制。R Ⅲ对肌肉海藻糖酶活性的影响依剂量不同而异。处理后 6 0h内 ,10 μg处理时无明显影响 ,3～ 5 μg处理则有可逆性激活作用 ,1μg处理则在 6

关键词：闹羊花素-Ⅲ 菜青虫海藻糖海藻糖酶

麦红吸浆虫滞育期间海藻糖酶和山梨醇脱氢酶活性的变化

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2006年第8期34卷 139-142页

作者：王洪亮仵均祥王丙丽西北农林科技大学植保学院陕西杨凌712100 河南科技学院植保系河南新乡453003

对不同滞育阶段麦红吸浆虫海藻糖酶和山梨醇脱氢酶的活性进行了测定。结果表明，麦红吸浆虫落土滞育前，其幼虫的海藻糖酶活性最高，入土后其活性迅速下降，到9月中旬活性开始上升，随后呈下降趋势，之后又迅速升高至滞育年周期中的最... 详细信息

对不同滞育阶段麦红吸浆虫海藻糖酶和山梨醇脱氢酶的活性进行了测定。结果表明，麦红吸浆虫落土滞育前，其幼虫的海藻糖酶活性最高，入土后其活性迅速下降，到9月中旬活性开始上升，随后呈下降趋势，之后又迅速升高至滞育年周期中的最高水平；不同滞育阶段麦红吸浆虫从脱离麦穗到当年11月以前，一直未检测到山梨醇脱氢酶活性，翌年2～4月，山梨醇脱氢酶的活性急剧增加，至04—20达到整个滞育期间的最高值（0．5042OD／（mL·min））；相同滞育阶段，裸露幼虫海藻糖酶活性和山梨醇脱氢酶活性较结茧幼虫略高，并表现出相同的变化趋势；不同滞育年限麦红吸浆虫海藻糖酶活性和山梨醇脱氢酶活性无明显差异。

关键词：麦红吸浆虫滞育海藻糖酶山梨醇脱氢酶

尿海藻糖酶检测在近端肾小管损害诊断中的临床价值

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中华检验医学杂志 2012年第12期35卷 1135-1138页

作者：韩晓芳谭艳贾海琴侯魏王晶王虹刘瑞平白瑞霞内蒙古自治区人民医院检验科呼和浩特010017

目的探讨尿海藻糖酶（T）在近端肾小管损害中的价值。方法采用实验室指标对照研究，选取2005--2011年在内蒙古自治区人民医院就诊，确诊为肾脏疾病患者134例（男66例，女68例，年龄18—59岁）（急性肾功能衰竭31例、慢性肾功能衰竭30例... 详细信息

目的探讨尿海藻糖酶（T）在近端肾小管损害中的价值。方法采用实验室指标对照研究，选取2005--2011年在内蒙古自治区人民医院就诊，确诊为肾脏疾病患者134例（男66例，女68例，年龄18—59岁）（急性肾功能衰竭31例、慢性肾功能衰竭30例、药物性肾损害20例、肾移植术后21例、肾病综合征32例）和101名健康对照者（男58名，女43名，年龄18～56岁）进行尿T及尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、r-谷氨酰转酞酶（GGT）、β2-微球蛋白（β2-MG）4项指标检测，建立受试者工作特征曲线（ROC）评价系统，比较尿T在近端肾小管损害中的价值。实验数据采用SPSS11．5统计软件进行非参数秩和检验、ROC曲线分析。结果101名健康对照者尿T结果近似正态分布（Z=1．09，P=0．183），结果为（7．14-4．1）μmol／h·g Cr（0～25μmol／h·gCr）男女间差异无统计学意义（t=0．63，P〉0．05）；肾脏疾病各组尿T水平与对照组比较差异有统计学意义（Z=6．80、5．90、5．23、6．00、8．04，P均〈0．01）。ROC曲线分析结果显示，134例患者尿T的ROC曲线下面积为0．9，与NAG、β2-MG、GGT曲线下面积比较差异有统计学意义（P均〈0．01）；分组研究结果显示：4项检测指标在急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭、药物性肾损害、肾移植术后、肾病综合征组中以尿T的ROC曲线下面积最大（0．94、0．85、0．90、0．90、0．91）；尿T约登指数分别为0．85、0．65、0．77、0．66、0．72，其对应的诊断敏感度、特异度分别为90．3％、95．1％；73．3％、92．1％；85．0％、92．1％；81．0％、85．2％；87．5％、84．2％。结论尿T在反映近端肾小管损害的诊断价值优于其他指标，能更好地对近端肾小管功能进行早期判断，对肾脏疾病诊治及预后估计具有重要意义。f手华检验医学杂，士，2012，35：1135—1138）

关键词：肾疾病肾小管,近端海藻糖酶尿分析

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海藻糖酶抑制剂的虚拟筛选及其理论评价

海藻糖酶抑制剂的虚拟筛选及其理论评价

作者：杨艳四川农业大学

学位级别：硕士

随着农业现代化的进步,人工合成有机杀虫剂来防治病虫害已成为提高农作物产量的主要手段之一。为解决传统化学杀虫剂所带来的毒性残留、害虫抗药性等负面问题,新型无公害、绿色农药的研发已成为重要的研究领域。农业生物技术的发展,特... 详细信息

随着农业现代化的进步,人工合成有机杀虫剂来防治病虫害已成为提高农作物产量的主要手段之一。为解决传统化学杀虫剂所带来的毒性残留、害虫抗药性等负面问题,新型无公害、绿色农药的研发已成为重要的研究领域。农业生物技术的发展,特别是化学信息学的出现和农药分子设计的应用,为这一研究提供了前所未有的机遇。近年来,针对昆虫生理过程中特有的一些能源物质,如海藻糖、几丁质、生长激素等,来确定新的药物作用靶点,已成为农药研发的新途径。海藻糖作为昆虫飞行过程中的主要能量物质,广泛存在于各类昆虫体内,并且在其能量代谢过程中发挥着关键作用。因此以海藻糖酶为靶标,通过干扰海藻糖在生物机体内的代谢过程,来达到杀虫、抑菌的目的,已成为创新农药研发的一条重要途径。本论文主要围绕海藻糖在昆虫体内的代谢过程展开研究。通过分析GenBank数据库中海藻糖合成酶的序列信息,结合近年来对海藻糖水解酶类抑制剂的报道,利用几个计算机辅助药物设计软件,分别探讨了海藻糖合成酶和水解酶作为新型杀虫剂作用靶标的可能性。实验结果如下: 1.在长期的进化过程中,无脊椎动物海藻糖合成酶已发生基因融合。编码海藻糖-6-磷酸合成酶及海藻糖-6-磷酸酯酶的基因已被一小段内含子连接到一起;2.利用同源模建的方法,首次构建了海藻糖合成酶的三级结构,结构合理性评价显示:CG4104-PA(A)及CG4104-PA(B)的结构都是属于比较合理的构象。另外CG4104-PA(A)与配体的对接结果,使我们获得了在不同的允许低能构象下配体UDP的几何位置信息。同源模建的结果对于海藻糖合成酶抑制剂的研发具有重要的指导意义;3.基于已知的海藻糖水解酶抑制剂的分子结构信息,结合Syby17.0/Gasp软件的分子叠合结果,确定一系列抑制剂结构中与受体作用密切的关键官能团,然后作为提问结构展开基于药效团的小分子化合物数据库搜索。最终从数据库中共找到139个小分子结构。从中挑选20个典型的小分子,利用Tupcat7.0毒性预测软件,

关键词：昆虫飞行肌血淋巴海藻糖海藻糖酶海藻糖酶抑制剂脂肪酸

水稻干尖线虫海藻糖酶Ab-tre-1基因克隆与逆境条件下的表达分析

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核农学报 2016年第12期30卷 2304-2311,2311页

作者：陈曦冯辉束兆林姚克兵魏利辉江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所江苏句容212400

海藻糖酶参与生物体内能量代谢,在抵御逆境胁迫过程中发挥关键作用。水稻干尖线虫是水稻上重要的寄生线虫,能够在多种逆境中存活,严重危害水稻生长。为探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因的功能,利用RACE-PCR技术获得了该线虫海藻糖酶基因全... 详细信息

海藻糖酶参与生物体内能量代谢,在抵御逆境胁迫过程中发挥关键作用。水稻干尖线虫是水稻上重要的寄生线虫,能够在多种逆境中存活,严重危害水稻生长。为探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因的功能,利用RACE-PCR技术获得了该线虫海藻糖酶基因全长,将其命名为Ab-tre-1,并利用实时荧光定量PCR技术分析在线虫卵、不同龄期和若干逆境条件下该基因的表达情况。结果表明,该基因DNA序列长2 083bp,包含9个内含子,开放阅读框1 743 bp,编码580个氨基酸,含有2个典型的海藻糖酶标签基序。进化树结果表明,水稻干尖线虫海藻糖酶与自由生活线虫和动物寄生线虫位于不同进化分支。Ab-tre-1在线虫卵中的表达最高,二龄幼虫和成虫次之,三、四龄幼虫表达水平较低。此外,当水稻干尖线虫暴露于干燥、活性氧、高温和药剂胁迫环境中,Ab-tre-1表达水平均显著提高,表明该基因可能与水稻干尖线虫的抗逆过程有关。本研究结果为阐明水稻干尖线虫海藻糖酶基因抗逆表达提供了理论依据。

关键词：水稻干尖线虫海藻糖酶基因表达逆境

取食不同水稻品种对褐飞虱和稻株内海藻糖及海藻糖酶的影响

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植物保护学报 2016年第3期43卷 398-404页

作者：杨萌萌谢国强沈祺达刘雅俞姗姗唐斌杭州师范大学生命与环境科学学院杭州310036

为明确不同水稻品种与褐飞虱的相互作用关系,以水稻品种TN1(感虫品种)、中浙优1号(生产主栽品种)和IR56(抗虫品种)为研究对象,分别采用蒽酮法和葡萄糖分析试剂测定了褐飞虱取食不同水稻品种后对褐飞虱和稻株体内的海藻糖含量及海藻糖酶... 详细信息

为明确不同水稻品种与褐飞虱的相互作用关系,以水稻品种TN1(感虫品种)、中浙优1号(生产主栽品种)和IR56(抗虫品种)为研究对象,分别采用蒽酮法和葡萄糖分析试剂测定了褐飞虱取食不同水稻品种后对褐飞虱和稻株体内的海藻糖含量及海藻糖酶活性的影响。结果显示,被褐飞虱取食后,IR56和中浙优1号的海藻糖酶活性分别由无虫状态下的3.56、4.34 nmol·g^(-1)·min^(-1)显著升高至7.53、6.05 nmol·g^(-1)·min^(-1),海藻糖含量分别由12.10、5.14 nmol/μg降至3.14、2.43 nmol/μg,而TN1的海藻糖酶活性由1.46 nmol/μg显著升高至3.05 nmol/μg,海藻糖含量无明显变化。取食TN1、IR56和中浙优1号后,褐飞虱体内的海藻糖含量分别为0.53、0.28和0.20nmol/μg,取食后二者的褐飞虱体内海藻糖含量与TN1组相比较均显著降低;且褐飞虱体内海藻糖酶活性以及3个海藻糖酶基因在mRNA水平均显著低于TN1组。表明海藻糖及海藻糖酶在褐飞虱与抗虫水稻的相互作用中可能发挥着重要的调控作用。

关键词：褐飞虱抗虫水稻海藻糖海藻糖酶

柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中海藻糖酶基因表达模式及酶活力分析

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昆虫学报 2018年第7期61卷 784-794页

作者：王德意汝玉涛王勇马月月那爽孙良振姜义仁秦利沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳110866 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖酶(trehalase,Treh)基因,探讨该基因在柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中的表达模式与海藻糖酶活力变化,为阐明柞蚕蛹滞育期间糖代谢机制提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从柞蚕蛹中克隆获得海藻糖酶... 详细信息

【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖酶(trehalase,Treh)基因,探讨该基因在柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中的表达模式与海藻糖酶活力变化,为阐明柞蚕蛹滞育期间糖代谢机制提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从柞蚕蛹中克隆获得海藻糖酶基因,并对其进行生物信息学分析。采用半定量RT-PCR检测长光照(17L∶7D)处理后的滞育解除柞蚕蛹与对照滞育蛹不同组织中该基因的表达谱;采用实时定量PCR(qPCR)分析其在长光照下滞育解除过程中柞蚕蛹脂肪体中的相对表达量变化。利用3,5-二硝基水杨酸法检测脂肪体中海藻糖酶活力的变化,同时采用蒽酮比色法测定其血淋巴中海藻糖含量。【结果】克隆获得柞蚕3个海藻糖酶基因,分别命名为ApTreh1A,ApTreh1B和ApTreh2(GenBank登录号分别为:KU977455,KU977456和KU977457),开放阅读框(ORF)全长分别为1 797,1 635和1 932 bp,分别编码598,544和643个氨基酸。同源序列比对与系统进化树分析表明,ApTreh1A和ApTreh1B为可溶型海藻糖酶(Treh S),ApTreh2为膜结合型海藻糖酶(Treh M)。半定量RT-PCR检测发现,各组织中ApTreh2比ApTreh1的分布更广且表达量更高。qPCR检测发现,ApTreh1A和ApTreh1B在长光照处理后的柞蚕蛹脂肪体中,21 d时表达量都表现出快速升高[分别是对照组(12L∶12D)的2倍和4.7倍],28 d与35 d时下降,42 d时表达量再次升高;ApTreh2随着滞育的解除表达量逐渐升高,28 d时达到最高(约为对照组的2.7倍),42 d时又出现一个小高峰(约2.3倍),后期逐渐下降。长光照下脂肪体中海藻糖酶活力逐渐升高,21 d时达到最高(约18.5 U),35 d时降到最低(约11.2 U),42 d时其酶活力再次略微升高,之后呈下降趋势,与基因表达变化趋势一致。蛹血淋巴中海藻糖含量在长光照条件下呈现出升高趋势,21 d时达到最高,在整个发育时期的含量比对照组要高。【结论】本研究结果表明柞蚕蛹滞育解除过程中海藻糖酶基因表达的变化与蛹脂肪体中海藻糖酶活性、蛹血淋巴中海藻糖含量的变化趋势呈一致性,提示海藻糖酶基因的表达响应在柞蚕蛹滞育解除中发挥重要作用。

关键词：柞蚕滞育海藻糖酶海藻糖基因表达酶活力