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复苏后早期快速诱导的治疗性低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的影响

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复苏后早期快速诱导的治疗性低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的影响

作者：陈启江浙江大学

学位级别：硕士

目的:探讨复苏后早期快速诱导治疗性低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的保护作用及可能机制。方法:选用体质量36±2 kg的国产健康雄性白猪41头,所有动物采用随机数字表法分为5组,具体如下:假手术组(n=5)、正常温度组(n=9)、体表降温组(n=9... 详细信息

目的:探讨复苏后早期快速诱导治疗性低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的保护作用及可能机制。方法:选用体质量36±2 kg的国产健康雄性白猪41头,所有动物采用随机数字表法分为5组,具体如下:假手术组(n=5)、正常温度组(n=9)、体表降温组(n=9)、食道降温组(n=9)与连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement treatment,CRRT)降温组(n=9)。假手术组只进行动物准备。其他各组通过右心室电极放电诱发室颤8 min,然后心肺复苏5 min,制备猪心脏骤停复苏模型。于复苏成功后5 min时,体表降温组、食道降温组及CRRT降温组开始诱导治疗性亚低温,目标温度为33 ℃,达标后继续维持至复苏后24h,再以1℃C/h的速率复温至正常温度。低温诱导及维持期间,体表降温组与食道降温组分别经体表冰毯、食道降温导管灌注冰水降温;同时,CRRT降温组经CRRT管路将血液引至体外降温,并持续至复苏后8 h,继以体表冰毯维持低温至复苏后24h。复温期间,所以动物均利用体表冰毯进行复温。实验中,假手术组与正常温度组全程应用体表冰毯仪维持正常体温。在复苏期间,记录各组动物的心肺复苏效果及结局。于复苏后30 h内,动态监测所有动物核心体温的变化。于复苏后1h、3h、6h、12h、24h与30h时,经股静脉采集血样检测肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,IFABP)的含量与二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)的活性。于复苏后30h时,动物实施安乐死,迅速获取回肠末端组织,检测肠黏膜组织炎症因子如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,氧化应激损伤相关指标如丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,以及细胞凋亡指数及其标志蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达水平。结果:1.各组动物的体重、基线的血流动力学、血气分析、乳酸及核心体温等基础特征,组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。心肺复苏期间各组动物的冠脉灌注压、复苏成功率、复苏时间、除颤次数、肾上腺素用量等指标比较,组间差异亦无统计学意义(均P>0.05)。2.低温诱导期间,体表降温组、食道降温组及CRRT降温组动物的核心体温下降速率分别为1.5±0.4℃C/h、2.8±0.7℃/h、9.8±1.6℃/h,达到目标温度所需的时间分别为185±35min、102±17min、28±7min。与体表降温组相比,食道降温组与CRRT降温组动物的降温效率明显提高,组间比较差异均有统计学意义(均P低温维持及复温期间,三组动物的核心体温比较差异无统计学意义(均P>0.05)。3.动物在复苏成功后均出现肠黏膜组织损伤,表现为血清IFABP与DAO水平先上升、后下降的变化趋势,分别在复苏后24h与12h时达到峰值。与正常温度组相比,可见体表降温组在复苏12h后IFABP血清含量明显降低、在复苏后6h后DAO活性显著下降,食道降温组与CRRT降温组在复苏6h后IFABP血清含量明显降低、在复苏后3h后DAO活性显著下降(均P性进一步显著降低(均P低温治疗的动物肠黏膜组织TNF-α、IL-6与MDA含量降低,SOD活性升高,细胞凋亡指数与caspase-3表达减少(均P低温组相比,食道降温组与CRRT降温组动物肠黏膜组织的上述病理损伤进一步减轻(均P治疗性低温可以减轻肠黏膜损伤,考虑与减轻组织炎症反应、氧化应激及细胞凋亡等有关,其中使用经食道导管、CRRT快速诱导低温能较传统的体表降温法效果更明显。

关键词：心脏骤停心肺复苏治疗性亚低温体表降温食道降温导管连续性肾脏替代治疗肠黏膜损伤

亚低温对猪复苏后心肌钙调蛋白激酶Ⅱ和自噬的影响

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中华急诊医学杂志 2020年第1期29卷 43-48页

作者：陈启江徐杰丰吴春双金晓红李子龙王茉丽浙江省宁海县第一医院重症医学科 315600 浙江大学急救医学研究所杭州310009 浙江省温岭市第一人民医院急诊科 317500 浙江省宁波大学医学院附属余姚市人民医院急诊科 315400

目的探讨治疗性亚低温(therapeutic hypothermia,TH)对猪心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后心肌钙调蛋白激酶Ⅱ(Ca^2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)和细胞自噬的影响。方法国产健康雄性白猪20头,体质量33~40 kg,采用随机数字表法分为3组:假手术(sham,S)组(n=4)、CPR组(n=8)与TH组(n=8)。S组仅进行动物准备,不经历心脏骤停/复苏过程。CPR组和TH组采用电刺激诱发室颤8 min,然后心肺复苏5 min,制备猪心脏骤停复苏模型。实验猪复苏成功的标准为室上性自主心律伴平均动脉压>50 mmHg持续5 min以上。复苏成功后,TH组经体表冰毯将体温降至33℃,并维持至复苏后24 h,再以1℃/h复温5 h;S组和CPR组则利用冰毯仪全程维持正常体温。于复苏后6、12、24和30 h时,利用PiCCO法测定每搏输出量(stroke volume,SV)和全心射血分数(global ejection fraction,GEF),同时采用ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白(cardiac troponin I,cTnI)的浓度、全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)的活性。于复苏后30 h处死动物,取左室心尖部心肌组织,采用Western blot法检测CaMKⅡ、微管相关轻链蛋白3Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3,LC3Ⅱ)和p62的蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析和Bonferroni事后检验。结果与S组相比,CPR组和TH组动物出现复苏后心功能障碍及心肌损伤,表现为SV和GEF值降低、血清cTnI浓度增加及CK-MB活性升高(均P性降低,组间比较差异有统计学意义[SV(mL):6 h为25.0±6.9和31.9±3.3,12 h为26.7±5.1和34.6±3.7,24 h为28.8±3.3和35.7±3.2,30 h为29.2±5.2和36.7±3.3;GEF(%):6 h为17.1±2.7和19.9±1.8,12 h为18.7±1.9和21.6±1.8,24 h为19.3±2.3和23.0±2.4,30 h为21.0±1.7和23.7±1.7;cTnI(pg/mL):12 h为564±51和466±56,24 h为534±38和427±60,30 h为476±55和375±46;CK-MB(U/L):12 h为803±164和652±76,24 h为693±96和557±54,30 h为633±91和480±77;均P<0.05]。组织检测分析显示,与S组相比,CPR组和TH组动物在复苏后心肌CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达增加、p62表达减少(均P<0.05)。但与CPR组相比,TH组动物在复苏后心肌CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达减少、p62表达增加(CaMKⅡ:0.73±0.06和0.58±0.05;LC3Ⅱ:0.69±0.09和0.50±0.07;p62:0.40±0.07和0.68±0.14;均P<0.05)。结论TH减轻复苏后心功能障碍与心肌损伤的机制可能与抑制心肌CaMKⅡ表达及细胞自噬等有关。

关键词：心脏骤停心肺复苏心功能障碍心肌损伤治疗性亚低温钙调蛋白激酶Ⅱ 自噬猪

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苏州地区心肺复苏术后早期目标治疗状况

中华急诊医学杂志 2013年第10期22卷 1142-1146页

作者：朱建良张艳杨林刘励军苏州大学附属第二医院急诊科江苏省苏州215004

目的评估苏州地区心肺复苏术后患者早期目标化治疗的状况，为今后完善复苏后规范化治疗提供临床资料。方法采用回顾性队列研究的方法，调查2009-2010年期间苏州地区10家二级甲等及以上综合性医院，其ICU内收治的院内或院外心脏骤停恢复... 详细信息

目的评估苏州地区心肺复苏术后患者早期目标化治疗的状况，为今后完善复苏后规范化治疗提供临床资料。方法采用回顾性队列研究的方法，调查2009-2010年期间苏州地区10家二级甲等及以上综合性医院，其ICU内收治的院内或院外心脏骤停恢复自主循环患者的资料。采集心脏骤停后48h内主要目标化治疗指标：体温（T）、平均动脉血压（MAP）、末梢血氧饱和度（SpO2）、二氧化碳分压（PaCO2）和末梢血糖（Glu）的测定值，比较分析上述指标达到目标值的情况。结果共有101例心脏骤停患者进入本研究。在目标化治疗指标达标率中，SpO2和MAP的达标率分别为90．1％和81．4％；Glu和PaCO2的达标率分别为55．4％和32．8％；而治疗性亚低温（MTH）的达标率最低，仅为10％；上述目标化治疗指标达标率之间的差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论苏州地区心肺复苏术后患者的目标治疗质量仍需提高，尤其应强化对PaCO2和体温的管理力度。

关键词：心脏骤停心肺复苏早期目标治疗治疗性亚低温平均动脉血压末梢血氧饱和度二氧化碳分压末梢血糖

早期经食道快速诱导低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的影响

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中华急诊医学杂志 2018年第4期27卷 399-404页

作者：陈启江徐杰丰金晓红吴春双王茉丽李子龙张茂浙江大学医学院附属第二医院急诊医学科/浙江大学急救医学研究所杭州310009 宁波大学医学院附属余姚市人民医院急诊科浙江省余姚315400

目的探讨复苏后早期经食道快速诱导低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的影响。方法国产健康雄性白猪27头，体质量（36±2）kg。采用随机数字表法分为3组（每组n=9）：常温组（NT组）、体表降温组（SC组）与食道降温组（EC组）。采用电刺激... 详细信息

目的探讨复苏后早期经食道快速诱导低温对猪心肺复苏后肠黏膜损伤的影响。方法国产健康雄性白猪27头，体质量（36±2）kg。采用随机数字表法分为3组（每组n=9）：常温组（NT组）、体表降温组（SC组）与食道降温组（EC组）。采用电刺激法诱发室颤8min，心肺复苏5min，制备心肺复苏猪模型。自主循环恢复（ROSC）后5min时，EC组与SC组外接冰毯仪，分别经食道降温导管与体表冰毯进行降温，目标温度33℃，持续至ROSC后24h，再以1℃m复温5h。NT组全程维持正常体温（38．0±0．5℃）。ROSC后30h内动态监测核心体温，并于ROSC后3、6、12、24与30h时，应用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清肠型脂肪酸结合蛋白（IFABP）的含量与二胺氧化酶（DAO）的活性。ROSC后30h时处死猪，取小肠组织，应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-6（IL-6）的含量，原位末端标记法检测细胞凋亡，免疫组织化学法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的蛋白表达水平。结果EC组降温速率和达标时长均显著优于SC组（2．8℃／h vs．1．5℃／h，102min vs．185min，均P〈0．05）。与NT组相比，EC组在ROSC后3h、SC组在ROSC后6h的IFABP含量与DAO活性均降低（均P〈0．05）。与SC组相比，EC组在ROSC后6hIFABP含量和在ROSC后12hDAO活性均下降[IFABP（pg／ml）：6h为（710±32）vs．（777±52），12h为（870±49）vs．（960±64），24h为（1022±65）vs．（1143±63），30h为（882±71）vs．（1006±45）；DAO（U／ml）：12h为（39．9±1．9）vs．（43．4±3．2），24h为（30．6±2．4）vs．（34．0±3．1），30h为（26．1±2．7）vs．（29．4±2．2），均P〈0．05]。与NT组相比，EC组与SC组TNF-α、IL-6含量减少，且凋亡指数、caspase．3蛋白表达均降低（均P〈0．05）。与SC组相比，EC组炎症反应与细胞凋亡进一步减轻[TNF—α（pg／mL）：（721±94）vs．（922±125）；IL-6（pg／mL）：（454±69）vs．（697±132）；细胞凋亡指数（％）：（6．2±2．6）vs．（12．8±3．0）；caspase-3（IOD）：（8．9±1．6）vs．（15．9±1．9），均P〈0．05]。结论经食道可以快速诱导低温，其效果优于传统的体表降温并产生更好的ROSC后肠保护效应，其机制可能与抑制炎症反应、细胞凋亡等有关。

关键词：心脏骤停心肺复苏治疗性亚低温体表降温法食道降温法肠黏膜损伤炎症反应细胞凋亡

经食道降温对猪复苏后肺损伤及全身性炎症反应的影响

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华西医学 2019年第11期34卷 1261-1267页

作者：徐杰丰吴春双陈启江金晓红张茂浙江大学医学院附属第二医院急诊医学科/浙江大学急救医学研究所杭州310009 宁海县第一医院重症医学科浙江宁波315600 温岭市第一人民医院急诊科浙江台州317500

目的探讨经食道降温对猪心肺复苏后肺损伤及全身性炎症反应的影响。方法采用随机数字表法将32头国产雄性白猪分为假手术组(S组,n=5)、正常温度组(NT组,n=9)、体表降温组(SC组,n=9)与食道降温组(EC组,n=9)。S组仅进行动物准备,其余3组通... 详细信息

目的探讨经食道降温对猪心肺复苏后肺损伤及全身性炎症反应的影响。方法采用随机数字表法将32头国产雄性白猪分为假手术组(S组,n=5)、正常温度组(NT组,n=9)、体表降温组(SC组,n=9)与食道降温组(EC组,n=9)。S组仅进行动物准备,其余3组通过8 min心室颤动与5 min心肺复苏的方法制备心肺复苏模型。S组和NT组使用控温毯全程维持(38.0±0.5)℃。复苏后5 min时,SC组和EC组分别经体表控温毯与食道降温导管降温和维持在33℃持续24 h,再以1℃/h复温5 h。复苏后1、6、12、24、30 h时检测血管外肺水指数(extra-vascular lung water index,ELWI)、肺血管通透性指数(pulmonary vascular permeability index,PVPI),采集动脉血检测氧合指数(oxygenation index,OI),采集静脉血检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白细胞介素-6(inerleukin-6,IL-6)的血清水平。复苏后30 h时处死动物,检测肺组织TNF-α、IL-6、丙二醛含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果复苏后,EC组较SC组诱导低温的速率加快(2.8 vs.1.5℃/h,P低温及复温。与NT组相比,EC组在复苏6 h后、SC组在复苏12 h后的ELWI与PVPI降低,OI升高(均P性升高(P治疗性亚低温,减轻复苏后肺损伤与全身性炎症反应。

关键词：心脏骤停心肺复苏肺损伤炎症反应治疗性亚低温食道降温法

亚低温对猪心肺复苏后心肌钙调蛋白激酶Ⅱ和细胞自噬的影响

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亚低温对猪心肺复苏后心肌钙调蛋白激酶Ⅱ和细胞自噬的影响