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水解蛋白注射液通过调节M-CSF改善化疗引起的造血功能障碍的研究

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水解蛋白注射液通过调节M-CSF改善化疗引起的造血功能障碍的研究

作者：王诗淼吉林大学

学位级别：硕士

骨髓抑制主要是由化学药物产生的一种造血功能毒性,与血细胞生成功能障碍有关,通常出现在化疗之后,是具有细胞毒性的化疗药物不可避免的不良反应之一。当前癌症发病率很高,化疗作为恶性肿瘤的首要治疗方式,具有很多无法避免的不良反应... 详细信息

骨髓抑制主要是由化学药物产生的一种造血功能毒性,与血细胞生成功能障碍有关,通常出现在化疗之后,是具有细胞毒性的化疗药物不可避免的不良反应之一。当前癌症发病率很高,化疗作为恶性肿瘤的首要治疗方式,具有很多无法避免的不良反应。骨髓抑制属于较为严重的毒性反应,其主要症状为全身血细胞的减少,其中包括白细胞(White blood cell,WBC)、红细胞(Red blood cell,RBC)和血小板。骨髓抑制的产生是由骨髓中前体血细胞受到损伤,其活性被抑制而导致的。骨髓中干细胞通过持续分化来保持血细胞的动态平衡,如果其受到抑制将无法维持此平衡,破坏造血稳态;还会对免疫功能造成损伤,导致免疫抑制,使机体抗感染能力降低。骨髓抑制不仅减缓化疗的进程,对癌症治疗效果也产生较大影响,严重时还会引起各种并发症,对患者的生命造成威胁。目前骨髓抑制的治疗方法主要是药物治疗、成分输血及造血干细胞移植。药物治疗一般使用集落刺激因子、白细胞介素(Interleukin,IL)、促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)及促血小板生成素(Thrombopoietin,TPO)等。但以上方法存在局限性,都存在一些不可避免的不良反应,还有因费用高而导致很多患者无法承担等问题。临床上需要价格适当、能有效缓解骨髓抑制且不良反应较轻的药物,为寻找这种药物,我们对水解蛋白注射液(Protein hydrolysate injection,PH)进行了研究。PH是一种水解蛋白和山梨醇的无菌溶液,主要成分是氨基酸和多肽,分子量分布在185.0-622.0 g/mol。PH在临床上主要用来治疗手术或其他原因引起的严重创伤、大面积烧伤造成的严重氨基酸缺乏症和各种疾病引发的低蛋白血症等,属于营养药物。本文主要对PH是否能作为抗肿瘤辅助药物缓解化疗导致的造血功能障碍进行了探究。本文通过K562细胞和环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)诱导的造血功能障碍小鼠模型研究了PH的促造血功能。首先采用腹腔注射CTX建立造血功能障碍模型,PH给药后根据小鼠体重及脏器指数、外周血检测、流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)、苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,H&E)染色、免疫组织化学染色法(Immunohistochemistry,IHC)、酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及Western Blot(WB)的结果分析PH对小鼠骨髓造血功能的改善作用。用巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)si RNA(Small interfering RNA)转染K562细胞,PH给药处理后,利用WB观察PH对K562细胞中造血相关蛋白表达的影响。在造血功能障碍小鼠中,PH缓解了小鼠体重减轻的现象,上调了骨髓中造血干/祖细胞(Hematopoietic stem and progenitor cells,HSPCs)、B淋巴细胞、巨噬细胞及粒细胞(Granulocytes,GRA)的数量,恢复了外周血细胞数量,恢复了造血功能障碍小鼠脾脏、胸骨及股骨髁的组织结构,调节了小鼠血清、脾脏、股骨髁和胸骨中M-CSF、IL-2及几种造血相关因子的水平。在K562细胞中,PH能上调细胞中M-CSF、磷酸化(P)-核糖体蛋白S6激酶(Ribosomal protein s6kinases,RSK)1-p90、P-细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2和c-Myc的表达;用si RNA抑制细胞中M-CSF的表达,PH引起的以上几种蛋白表达上调也被抑制。综上,PH能够缓解由CTX引起的各种造血功能相关生理指标异常。PH可以通过调节M-CSF的表达从而改变其他相关指标,结果表明了PH在治疗化疗引起的造血功能障碍中能起到一定的作用,并且其促造血功能与M-CSF相关,这能为日后研究及开发骨髓抑制的治疗药物提供实验基础。

关键词：水解蛋白注射液造血功能骨髓抑制 M-CSF

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水解蛋白注射液中色氨酸测定方法的比较

氨基酸和生物资源 1983年第3期11卷 9-13页

作者：林范天顾泽民武汉药品检验所

本文对水解蛋白质注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1一萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还... 详细信息

本文对水解蛋白质注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1一萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还测定了上述二法的吸收曲线和应用两法对武汉地区用不同工艺生产的水解蛋白注射液进行了实际考察。结果表明用酶法生产的水解蛋白,其色氨酸含量可达550μg/ml。

关键词：水解蛋白注射液水解蛋白质吸收曲线二甲氨基苯甲醛方法比对变异系数酶法生产比色测定乙二胺盐酸盐硫酸溶液

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水解蛋白注射液除热原法初探

药学实践杂志 1989年第1期 53-54页

作者：李国帜福州梅峰制药厂

水解蛋白注射液因含有十多种氨基酸,是重要的蛋白质营养剂,故在生产过程中极易被微生物污染,产生热原。国内目前多采用活性炭常规吸附法除去热原,此法不仅活性炭用量大,吸附次数多,而且不彻底。为此我厂在制备工艺上进行改进,兹将初步... 详细信息

水解蛋白注射液因含有十多种氨基酸,是重要的蛋白质营养剂,故在生产过程中极易被微生物污染,产生热原。国内目前多采用活性炭常规吸附法除去热原,此法不仅活性炭用量大,吸附次数多,而且不彻底。为此我厂在制备工艺上进行改进,兹将初步经验简介如下。一、方法取水解蛋白浓缩液按总氮稀释至2％左右,加入0.5％活性炭,于120℃保温2小时,放置过夜;次日加1.2％活性陶土加温搅拌45分钟,过滤;滤液再加1.5～2％活性炭

关键词：活性炭吸附总氮浓缩液水解蛋白注射液保温处理

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水解蛋白注射液致发热、寒战4例

山西医科大学学报 2018年第5期49卷 589-590页

作者：恽艳琴乔逸文爱东空军军医大学第一附属医院药剂科陕西710000

水解蛋白注射液为水解酪蛋白和乳蛋白与山梨醇的灭菌水溶液,含氨基酸与多肽,可以参与蛋白质的合成代谢,促进组织愈合,恢复正常生理功能,临床用于手术严重创伤、大面积烧伤所致的严重氨基酸缺乏及各种疾病引起的低蛋白症。经检索知网、... 详细信息

水解蛋白注射液为水解酪蛋白和乳蛋白与山梨醇的灭菌水溶液,含氨基酸与多肽,可以参与蛋白质的合成代谢,促进组织愈合,恢复正常生理功能,临床用于手术严重创伤、大面积烧伤所致的严重氨基酸缺乏及各种疾病引起的低蛋白症。经检索知网、维普中文数据库,发现仅有3篇关于该药过敏反应的报道。经检索Pubmed,未见有关水解蛋白注射液不良反应的外文报道。现将我院使用该药时所发生的4例药物不良事件,报道如下。

关键词：水解蛋白注射液不良反应滴速

水解蛋白注射液细菌内毒素检测方法的实验研究

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药物分析杂志 1998年第2期18卷 111-112页

作者：李鸣王江融刘用国福建省药品检验所

水解蛋白注射液细菌内毒素检测方法的实验研究福建省药品检验所福州３５０００１李鸣王江融刘用国本文探讨了水解蛋白注射液应用细菌内毒素检查法的可能性．实验结果表明水解蛋白注射液有一定的干扰作用，但通过稀释可消除干扰．１实验... 详细信息

水解蛋白注射液细菌内毒素检测方法的实验研究福建省药品检验所福州３５０００１李鸣王江融刘用国本文探讨了水解蛋白注射液应用细菌内毒素检查法的可能性．实验结果表明水解蛋白注射液有一定的干扰作用，但通过稀释可消除干扰．１实验材料细菌内毒素国家标准品（批号：９...

关键词：细菌内毒素检测水解蛋白注射液

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大豆水解蛋白注射液的制备

延边大学农学学报 1979年第Z1期 12-16+21页

作者：金昌铉白式连李东春延边农学院基础部延边农学院牧医系

蛋白质是机体维持生命活动的最基本的物质基础。在机体内,它们具有多种多样的生理功能,有的是酶,有的是抗体,有的是激素等。蛋白质的结构虽然极为复杂,但其基本结构都是由各种氨基酸分子借肽键相连所形成的多肽链所构成的。因此,氨基酸... 详细信息

蛋白质是机体维持生命活动的最基本的物质基础。在机体内,它们具有多种多样的生理功能,有的是酶,有的是抗体,有的是激素等。蛋白质的结构虽然极为复杂,但其基本结构都是由各种氨基酸分子借肽键相连所形成的多肽链所构成的。因此,氨基酸在生命过程中的重要性就是非常明显的了。目前巳发现的氨基酸达百余种,但构成机体的氨基酸却只有20多种。其中8种氨基酸是

关键词：水解蛋白注射液氨基酸药厂氨基羧酸豆酪素吸附剂活性炭浓液奶酪素大豆色氨酸注射用水

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用地产豆腐粉生产水解蛋白注射液的研究

中草药 1978年第4期9卷 15-20,49页

作者：田秀费寿耆张永恒王绍玉赵为范黑龙江省肿瘤医院药材科

国内虽有制备大豆水解蛋白的报告,但在生产工艺及鉴别方法等方面仍欠完善。本文介绍了对酸水解豆腐粉制备水解蛋白注射液的工艺条件:酸水解时酸度的选择与水解时间的关系,温度与压力对水解速度的影响,进行考察;井对制品的鉴别检查及含... 详细信息

国内虽有制备大豆水解蛋白的报告,但在生产工艺及鉴别方法等方面仍欠完善。本文介绍了对酸水解豆腐粉制备水解蛋白注射液的工艺条件:酸水解时酸度的选择与水解时间的关系,温度与压力对水解速度的影响,进行考察;井对制品的鉴别检查及含量测定方法,注射液的稳定性等方面进行了研究,确定了用热压酸水解法生产水解蛋白的工艺,选择了水解时最佳酸度、温度与压力,缩短工艺时间,产品收率、纯度优于原工艺。采用分光光度法进行水解蛋白的含量测定,方法简便、灵敏、快速。产品用于临床,证明安全有效,无不良反应。

关键词：水解蛋白注射液薄层层析豆腐粉焦亚硫酸钠

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用猪血纤维蛋白制备水解蛋白注射液

江苏医药 1975年第2期 39-40页

国产水解蛋白注射液过去均系采用酸水解酪蛋白而得。酸水解法有以下一些缺点:(1)酸水解工艺复杂;(2)酪蛋白原料来源困难;(3)酸水解容易破坏色氨酸。为了克服上述一些矛盾,作者在1970-1971年间,曾改用国产At3942中性蛋白酶水解猪血纤维... 详细信息

国产水解蛋白注射液过去均系采用酸水解酪蛋白而得。酸水解法有以下一些缺点:(1)酸水解工艺复杂;(2)酪蛋白原料来源困难;(3)酸水解容易破坏色氨酸。为了克服上述一些矛盾,作者在1970-1971年间,曾改用国产At3942中性蛋白酶水解猪血纤维蛋白制成水解蛋白注射液。现介绍于下: 一、猪血纤维蛋白的制备取新鲜猪血置于桶中,用长竹刷在其中不断搅拌,血纤维蛋白即附着于竹刷上,或彼此互相缠绕成团,将其取出即得含血之纤维蛋白。然后,用水冲洗含血纤维蛋白,至红色洗尽、纤维呈白色为止,再用蒸镏水煮沸灭菌,而后取出纤维挤去水份,称重,即可作为酶水解的底物。

关键词：血纤维蛋白水解蛋白注射液酸水解酪蛋白

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酶水解血蛋白制水解蛋白注射液

氨基酸和生物资源 1981年第3期9卷 26-29页

水解蛋白注射液是目前国内肠道外补充氮素营养的主要来源。虽然复方氨基酸注射液比较先进,但多种纯品氨基酸缺乏,十几种氨基酸很难备齐,且价格昂贵,故在临床上还不能广泛应用。所以研究水介蛋白还相当必要,是符合实际的。水解蛋白是个... 详细信息

水解蛋白注射液是目前国内肠道外补充氮素营养的主要来源。虽然复方氨基酸注射液比较先进,但多种纯品氨基酸缺乏,十几种氨基酸很难备齐,且价格昂贵,故在临床上还不能广泛应用。所以研究水介蛋白还相当必要,是符合实际的。水解蛋白是个相当古老的制剂。在生产原料上,传统使用酪蛋白、纤维蛋白和大豆蛋白;在水介方法上主要采用盐酸或硫酸水介,其次则为胰酶水介。在精制脱酸时,应用钙,钡沉淀硫酸。用阴离子交换树脂脱去氯离子。酸水介方法适用于大批生产。

关键词：水解蛋白注射液血蛋白沉淀硫大豆蛋白大批生产氯离子猪血中性蛋白酶必需氨基酸脱酸