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水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析

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园艺学报 2016年第1期43卷 161-167页

作者：丁安琪冯莹朱里莹徐世荣秦军潘东明福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所福州350002 泉州师范学院资源与环境科学学院福建泉州362000

采用PCR法,从水仙(Narcissus tazetta ***)鳞茎主芽中分离克隆到1个温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL。该基因含有567 bp开放阅读框,编码188个氨基酸。该基因属于lipocalin-2superfamily基因家族;推导的氨基酸序列含有SCR1、SCR2和SCR3 3... 详细信息

采用PCR法,从水仙(Narcissus tazetta ***)鳞茎主芽中分离克隆到1个温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL。该基因含有567 bp开放阅读框,编码188个氨基酸。该基因属于lipocalin-2superfamily基因家族;推导的氨基酸序列含有SCR1、SCR2和SCR3 3个植物lipocalin的典型结构域,与小麦、拟南芥等植物的同源性大于75%;编码的蛋白为稳定酸性亲水蛋白,不含有信号肽,进行N末端朝外由外到内的跨膜运动。qRT-PCR结果分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期NtTIL表达量较低;休眠期表达量先升高后降低。推测NtTIL对水仙鳞茎主芽休眠具有一定调控作用。

关键词：水仙温度诱导运载蛋白克隆表达夏休眠

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水仙内生真菌的分离鉴定及聚类分析

中草药 2014年第11期45卷 1625-1630页

作者：杨明俊李娟王永刚薛鸿燕马雪青杨林兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

目的分离纯化水仙根茎中的内生真菌,并进行菌群组成及其多样性分析。方法采用表面消毒、划线法从水仙鳞茎和根中分离内生真菌,基于形态学特征和核糖体转录间隔区（ITS-rDNA）序列分析,对分离株进行分类鉴定;以内生真菌的多样性指数（H... 详细信息

目的分离纯化水仙根茎中的内生真菌,并进行菌群组成及其多样性分析。方法采用表面消毒、划线法从水仙鳞茎和根中分离内生真菌,基于形态学特征和核糖体转录间隔区（ITS-rDNA）序列分析,对分离株进行分类鉴定;以内生真菌的多样性指数（H）和均匀度指数（E）为指标,分析水仙内生真菌的菌群组成及其多样性。结果共分离到18株内生真菌,其中16株来自根部,2株来自鳞茎,分别占总分离菌株的88.89%和11.11%。PCR扩增其中14株真菌ITS-rDNA,得到大小约500 bp片段,用BLAST软件对其测序结果进行相似性比对,发现4株为青霉属Penicillium,相似性95%-99%;3株为曲霉属Aspergillus,相似性99%-100%;3株为喙枝孢属Rhinocladiella,相似性为99%;其他4株分别为木霉属Trichoderma、链格孢属Alternaria、赤霉属Gibberella和镰孢霉属Fusarium,相似性都为99%。青霉菌为水仙内生真菌优势菌属。通过构建系统发育树发现这14株内生菌明显分为2大类群,Shannon多样性指数为1.778,均匀度为0.913 7。结论水仙内生真菌菌群组成具有一定程度的多样性和差异性。

关键词：水仙内生真菌分离鉴定聚类分析

水仙内生真菌乙酰胆碱酯酶抑制活性菌株的筛选及鉴定

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中国药理学通报 2013年第10期29卷 1461-1464页

作者：杨明俊路鑫龙王永刚姚广玉杨林刘晓风兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050

目的从药用植物水仙中分离、筛选对乙酰胆碱酯酶(AChE)具较高抑制活性的菌株并确定其分类归属。方法采用组织切块法对水仙内生真菌进行分离纯化,纯化后的菌株发酵培养,用乙酸乙酯萃取发酵液,以改良的Ellman方法进行AChE抑制活性的筛选,... 详细信息

目的从药用植物水仙中分离、筛选对乙酰胆碱酯酶(AChE)具较高抑制活性的菌株并确定其分类归属。方法采用组织切块法对水仙内生真菌进行分离纯化,纯化后的菌株发酵培养,用乙酸乙酯萃取发酵液,以改良的Ellman方法进行AChE抑制活性的筛选,对获得的阳性菌株SX-S101进行形态学观察,用分子生物学方法鉴定其分类地位。结果从水仙的根、鳞茎中共分离到18株内生真菌,活性检测筛选出3株对AChE具较强抑制作用的菌株,其IC50分别为0.4562、0.3897、0.4122 g·L-1;对SX-S101进行分类鉴定,确定其为子囊菌纲(Ascomycetes)喙枝孢属(Rhinocladiella)菌株Rhinocladiella ***60。结论首次从水仙内生真菌中筛选出了1株AChE抑制活性较高的菌株Rhinocladiella ***60,为后续开发阿尔采末症治疗药物提供依据。

关键词：水仙内生真菌分离 AChE抑制剂活性分子鉴定

浙江南麂列岛大檑山屿水仙自然居群的物种多样性、环境解释及空间分布格局分析

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植物资源与环境学报 2017年第3期26卷 100-108页

作者：朱弘蔡厚才尤禄祥伊贤贵杨国栋段一凡陈万东王贤荣南京林业大学生物与环境学院江苏南京210037 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 南麂列岛国家级海洋自然保护区管理局浙江温州325400

在野外调查基础上,对浙江南麂列岛大檑山屿水仙(Narcissus tazetta *** ***.)自然居群5个典型生境(乔木林地、林缘、弃耕地、荒坡和灌木林地)的物种组成和α多样性指数进行分析,并采用典范对应分析(CCA)、最小生成树(MST)分析和空间点... 详细信息

在野外调查基础上,对浙江南麂列岛大檑山屿水仙(Narcissus tazetta *** ***.)自然居群5个典型生境(乔木林地、林缘、弃耕地、荒坡和灌木林地)的物种组成和α多样性指数进行分析,并采用典范对应分析(CCA)、最小生成树(MST)分析和空间点格局分析(SPPA)分别研究水仙自然居群物种分布与主要环境因子的关系、水仙与其伴生种的种间关系及空间分布格局。结果表明:浙江南麂列岛大檑山屿水仙自然居群5个生境共有植物28种,其中,乔木林地、林缘、弃耕地、荒坡和灌木林地分别有16、13、9、8和8种。5个生境中水仙的重要值均最高。弃耕地和乔木林地的Shannon-Wiener多样性指数较高,灌木林地和林缘其次,荒坡最低。5个生境的聚类分析结果显示:弃耕地和乔木林地聚为一组,其他3个生境聚为另一组。CCA排序结果显示:水仙的分布与坡度呈负相关,与土壤的电导率、含水量和温度以及坡向和海拔呈正相关,说明水仙适宜生长于坡度平缓以及土壤的含水量、电导率和温度适中的生境。MST分析结果显示:水仙与其伴生种羊蹄(Rumex japonicus Houtt.)、鬼针草(Bidens pilosa Linn.)、野艾蒿(Artemisia lavandulifolia DC.)的种间关系最近,这3个伴生种应作为水仙自然居群恢复生物治理的重点防控对象。SPPA分析结果显示:荒坡中水仙群丛分布数量相对较多,集中分布于东北角,西部和南部较少;在0.0~0.1 m尺度时,水仙群丛表现为随机分布;在大于0.1 m尺度时,表现为集中分布。研究结果显示:浙江南麂列岛大檑山屿水仙自然居群主要集中分布在东南坡的弃耕地,海岛生境异质性与自身繁殖特性是影响南麂列岛水仙自然居群恢复的关键因素,建议对水仙群落动态进行长期监测和相关研究,并结合岛屿生态系统进行综合管理。

关键词：南麂列岛水仙 α多样性指数生境典范对应分析(CCA) 环境因子空间分布格局

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中国水仙NtMYB8的分离及功能研究

园艺学报 2021年第10期48卷 1895-1906页

作者：吴立璇周平范雨昕王桂青曾黎辉福建农林大学园艺学院福建农林大学园艺植物遗传育种研究所福州350002

从中国水仙(Narcissus tazetta ***)‘金盏银台’中分离获得1个MYB转录因子基因,命名为NtMYB8,GenBank登录号:MF5222090。通过多重序列比对和进化树分析发现,NtMYB8属R2R3-MYB家族,与原花青素激活因子亲缘关系最近;NtMYB8在中国水仙副... 详细信息

从中国水仙(Narcissus tazetta ***)‘金盏银台’中分离获得1个MYB转录因子基因,命名为NtMYB8,GenBank登录号:MF5222090。通过多重序列比对和进化树分析发现,NtMYB8属R2R3-MYB家族,与原花青素激活因子亲缘关系最近;NtMYB8在中国水仙副冠中表达量最高;将NtMYB8在普通烟草瞬时转化,注射的叶片出现微弱红色斑点;转35S-NtMYB8烟草花瓣颜色变化不明显,qPCR检测显示NtMYB8促进转基因烟草类黄酮代谢途径大部分结构基因表达;酵母双杂试验表明NtMYB8能与中国水仙NtbHLH1互作;双荧光素酶瞬时表达试验显示NtMYB8与NtbHLH1互作能够显著促进水仙类黄酮代谢途径关键基因NtFLS的启动子活性。研究结果表明,NtMYB8是中国水仙类黄酮代谢途径的激活因子,可能促进副冠中黄酮醇的合成。

关键词：水仙 R2R3-MYB 类黄酮代谢激活因子结构基因

水仙芽可溶性糖含量及NtTIM基因的表达分析

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基因组学与应用生物学 2016年第12期35卷 3493-3500页

作者：冯莹丁安琪潘东明泉州师范学院资源与环境科学学院泉州362000 福建农林大学园艺学院福州350002

以3年生水仙(Narcissus tazetta ***)鳞茎主芽为材料,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性糖含量;采用PCR法从主芽中分离克隆NtTIM基因并对其序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR方法分析主芽不同生长发育时期和温度诱导下的表达变化。可溶性糖... 详细信息

以3年生水仙(Narcissus tazetta ***)鳞茎主芽为材料,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性糖含量;采用PCR法从主芽中分离克隆NtTIM基因并对其序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR方法分析主芽不同生长发育时期和温度诱导下的表达变化。可溶性糖含量测定结果表明,水仙鳞茎膨大期,主芽可溶性糖含量逐渐降低;休眠期先升高后降低;花芽分化期其含量在均衡的水平(4%左右)。生物信息学分析表明:分离克隆到了1个NtTIM基因,该基因含有765 bp开放阅读框,编码254个氨基酸,属于TIM-phosphatebinding基因家族,推导的氨基酸序列与油菜、芜菁、拟南芥、甘蓝等植物具有85%以上的同源性;编码的蛋白为稳定的呈酸性的疏水蛋白,无信号肽位点但含有1个跨膜结构域、2个N-糖基化位点。qRT-PCR分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期主芽NtTIM基因表达量略升高;休眠期表达量呈阶段性降低;花芽分化期表达量略升高;20℃、25℃、30℃、35℃温度处理时,主芽NtTIM基因表达量随着温度升高而降低,且处理时间越长,其表达量越低。推测NtTIM基因参与调控水仙鳞茎主芽休眠。为进一步研究NtTIM基因的分子功能,以及深入研究水仙夏休眠的分子机制提供帮助。

关键词：水仙可溶性糖 TIM基因基因克隆表达水平

基于转录组的‘黄花2号’水仙ARF基因家族分析

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应用与环境生物学报 2019年第3期25卷 687-694页

作者：李全超刘洋肖瑶宇李琳杨征帆陈晓静福建农林大学园艺学院

生长素反应因子(Auxin response factors,ARFs)在植物生长发育过程调节生长素响应基因表达中发挥着重要的作用.为了解多花水仙ARF家族,基于转录组数据,通过NR、NT、Swiss-Prot和PFAM 4个数据库、NCBI网站和在线软件SMART的注释筛选,利用... 详细信息

生长素反应因子(Auxin response factors,ARFs)在植物生长发育过程调节生长素响应基因表达中发挥着重要的作用.为了解多花水仙ARF家族,基于转录组数据,通过NR、NT、Swiss-Prot和PFAM 4个数据库、NCBI网站和在线软件SMART的注释筛选,利用ExPASy-ProtParam tool、SOPMA、Prot Comp、MEME、MAGA和Heml软件进行氨基酸理化性质、蛋白二级结构、亚细胞定位、保守基序、系统进化树和小鳞茎萌发不同时期的表达模式分析.共筛选得到21个ARF家族基因,生物信息学分析12个全长基因蛋白长度在193-1 096 aa之间,预测的分子量(Mr)为20.46-122.2,等电点为5.19-7.97,全部为不稳定的亲水蛋白,亚细胞定位预测均位于细胞核中.进化树和基序分析表明,21个NtARF蛋白分为3个大组,GlassⅢ进一步被分为3个亚组,分支相近的ARF转录因子具有相同或相近的基序. NtARF8、NtARF13、NtARF15、NtARF17和NtARF21都展现较高的表达模式,可能是通过正向调节生长素的含量来促进小鳞茎的萌发.本研究表明,NtARF家族可能在多花水仙扦插繁殖过程中发挥着重要作用,结果可为将来深入研究多花水仙ARF基因家族的功能奠定基础.

关键词：水仙转录组测序 ARF家族生物信息学分析表达分析

低温解除休眠过程中喇叭水仙鳞片中酚酸类物质代谢及相关酶活性的变化

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植物生理学报 2013年第2期49卷 137-143页

作者：程鹏马晓红史益敏上海交通大学农业与生物学院上海200240

测定了低温解除休眠过程中喇叭水仙‘上农早春’鳞片内酚酸类物质的成分和含量变化,以及与酚酸代谢相关的多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化,结果表明,总酚含量呈下降趋势;在检测到的没食子酸、绿原酸、4-羟基苯甲酸、3,4... 详细信息

测定了低温解除休眠过程中喇叭水仙‘上农早春’鳞片内酚酸类物质的成分和含量变化,以及与酚酸代谢相关的多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化,结果表明,总酚含量呈下降趋势;在检测到的没食子酸、绿原酸、4-羟基苯甲酸、3,4-二羟基肉桂酸、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸5种酚酸类物质中,4-羟基苯甲酸含量最高;酚酸类物质含量与PPO活性呈负相关,与PAL活性呈正相关。酚酸类物质含量下降可能是喇叭水仙休眠解除的机制之一。

关键词：酚酸类物质解除休眠相关酶活性物质代谢水仙喇叭鳞片低温

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水仙鳞茎分泌物中抑制物质的分离与鉴定

兰州大学学报（自然科学版） 2000年第1期36卷 92-97页

作者：毕玉蓉汤红官容拱兴兰州大学生命科学学院甘肃兰州730000 兰州大学学报编辑部甘肃兰州730000 香港中文大学生物系

首次报道了水仙(Narcissustazetta)鳞茎分泌液中抑制物质的分离纯化及鉴定的方法.经红外(IR)、紫外(UV)、核磁共振(NMR)、及质谱(MS)等各种分析手段检测确证这种物质就是nar-ciclasine(NCS),是一种生物碱.这种物质能明显抑制白菜种子萌... 详细信息

首次报道了水仙(Narcissustazetta)鳞茎分泌液中抑制物质的分离纯化及鉴定的方法.经红外(IR)、紫外(UV)、核磁共振(NMR)、及质谱(MS)等各种分析手段检测确证这种物质就是nar-ciclasine(NCS),是一种生物碱.这种物质能明显抑制白菜种子萌发及其幼苗的生长.

关键词：水仙鳞茎分泌液抑制物质石蒜科