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氯喹联合放疗对非小细胞肺癌细胞抑制作用的实验研究

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蚌埠医学院学报 2024年第8期49卷 985-991,997页

作者：纪东东赵翰清李文海孙谦蚌埠医科大学临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学研究生院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学第一附属医院肿瘤放疗科安徽蚌埠233004

目的:探讨氯喹(CQ)联合放疗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及其主要机制。方法:体外培养A549和PC-9细胞,分为C对照组、CQ(8μmol/L)单给药处理组、IR(4 Gy/8 Gy)单放疗处理组、CQ(8μmol/L)+IR(4 Gy/8 Gy)联合... 详细信息

目的:探讨氯喹(CQ)联合放疗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及其主要机制。方法:体外培养A549和PC-9细胞,分为C对照组、CQ(8μmol/L)单给药处理组、IR(4 Gy/8 Gy)单放疗处理组、CQ(8μmol/L)+IR(4 Gy/8 Gy)联合处理组。CQ预处理1 h,进行放疗处理。采用集落克隆实验和EdU结合实验检测各实验组细胞的增殖情况;Transwell实验检测各实验组细胞的侵袭和迁移能力;流式细胞术检测各实验组细胞的细胞凋亡率;电镜观察各实验组细胞的自噬水平;Western blotting实验检测各实验组细胞的自噬和凋亡相关蛋白的表达。结果:集落克隆实验和EdU结合实验结果显示,相比于单CQ处理或单放疗处理组,CQ联合放疗可显著抑制A549和PC-9细胞增殖(P<0.01);Transwell实验结果显示CQ联合放疗可显著抑制A549和PC-9细胞侵袭和迁移(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示CQ联合放疗增加A549和PC-9细胞凋亡(P<0.05);电镜结果显示CQ能够抑制放疗诱导的自噬(P<0.01);Western blotting结果显示CQ联合放疗组的Caspase3水平上调而Bcl-2水平下降,LC3Ⅱ和p62的蛋白表达水平增加的较单CQ或单放疗处理组更为明显(P<0.01)。结论:CQ抑制放疗诱导的自噬,CQ联合放疗抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移,促进NSCLC细胞的凋亡。

关键词：非小细胞肺癌氯喹放疗凋亡自噬

氯喹联合放疗对NSCLC细胞抑制作用的实验研究

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蚌埠医学院学报 2024年

作者：纪东东赵翰清李文海孙谦蚌埠医科大学临床医学院蚌埠医科大学研究生院蚌埠医科大学第一附属医院肿瘤放疗科

关键词：非小细胞肺癌氯喹放疗凋亡自噬

L-苏糖酸镁对组胺和氯喹诱导的小鼠瘙痒敏化的抑制作用

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湖北职业技术学院学报 2024年第2期27卷 109-112页

作者：黄卓乔琬华周鑫湖北职业技术学院湖北孝感432000 广东省人民医院广东广州510030

目的:探究L-苏糖酸镁(L-TAMS)对组胺和氯喹引起的小鼠急性瘙痒及瘙痒敏化的影响。方法:将56只小鼠随机平均分为7组,对照组(A组)、组胺瘙痒敏化组(B组)、氯喹瘙痒敏化组(C组)、L-TAMS+组胺瘙痒敏化组(D组)、L-TAMS+氯喹瘙痒敏化组(E组)... 详细信息

目的:探究L-苏糖酸镁(L-TAMS)对组胺和氯喹引起的小鼠急性瘙痒及瘙痒敏化的影响。方法:将56只小鼠随机平均分为7组,对照组(A组)、组胺瘙痒敏化组(B组)、氯喹瘙痒敏化组(C组)、L-TAMS+组胺瘙痒敏化组(D组)、L-TAMS+氯喹瘙痒敏化组(E组)、组胺瘙痒敏化+L-TAMS组(F组)、氯喹瘙痒敏化+L-TAMS组(G组)。A组生理盐水注射对照,B、D、F组采用组胺(2 mg/ml,50μl)连续注射4天瘙痒敏化造模,C、E、G组采用氯喹(2 mg/ml,50μl)连续注射4天瘙痒敏化造模;D、E组在敏化造模前预防性口服L-TAMS一周,F、G组小鼠在敏化后口服L-TAMS一周。每次注射组胺和氯喹后进行瘙痒行为学测试。结果:与B组相比,D组第1天注射组胺后的搔抓次数没有统计学意义(P>0.05);D组第3、4天注射组胺后的搔抓次数明显减少(P氯喹后的搔抓次数没有统计学意义(P>0.05);E组第4天注射氯喹后的搔抓次数明显减少(P氯喹后的搔抓次数明显减少(P氯喹诱导的瘙痒敏化。

关键词：瘙痒敏化 L-苏糖酸镁组胺氯喹

含Mn^(2+)化合物和氯喹联合作用对PC12细胞株的毒性机制研究

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公共卫生与预防医学 2024年第4期35卷 16-19页

作者：付小龙余子敬杨永刚遵义医科大学基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室贵州遵义563006 湖北省十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院) 湖北十堰442000

目的观察低浓度含Mn^(2+)化合物和自噬抑制药物氯喹长时间共同作用对神经细胞株PC12细胞的毒性作用及机制。方法取对数生长期PC12细胞,分别给予0(对照)、5、10、25、50、100、200μM氯化锰,5、10、25、50、100μM氯喹;染毒24 h。采用... 详细信息

目的观察低浓度含Mn^(2+)化合物和自噬抑制药物氯喹长时间共同作用对神经细胞株PC12细胞的毒性作用及机制。方法取对数生长期PC12细胞,分别给予0(对照)、5、10、25、50、100、200μM氯化锰,5、10、25、50、100μM氯喹;染毒24 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测氯化锰和氯喹对细胞存活率的影响。并联合给药,观察两种化合物共同作用24、48、72 h对细胞存活率的影响。进一步检测线粒体呼吸功能,探讨氯化锰和氯喹可能的毒性作用机理。结果与空白对照组比较,氯化锰和氯喹单独给药均对细胞增殖活力具有抑制作用,其效应表现为给药剂量不断增加,而细胞存活率逐渐降低。实验选取对细胞增殖活力无显著影响的氯化锰和氯喹浓度分别为40μM和2.5μM;在此浓度下,与空白对照组相比,氯喹单独给药24、48和72 h,其细胞存活率和线粒体呼吸功能没有明显改变;氯化锰单独给药作用72 h,其线粒体呼吸功能未受影响;但氯化锰和氯喹联合给药共同作用72 h后,细胞的存活率和线粒体呼吸功能均显著降低(P氯喹长时间共同作用对PC12细胞具有明显毒性,其毒性机制可能与其对线粒体功能损伤有关。

关键词：氯化锰氯喹环境和食品暴露神经毒性线粒体功能

氯喹抑制铁蛋白自噬并增强肺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

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生物化学与生物物理进展 2022年第2期49卷 370-380页

作者：王永伟肖敏张瑀霍艳武卫涛涛中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

目的肺癌的发病率和致死率高居世界恶性肿瘤首位。尽管肺癌的诊断与治疗治疗已取得进展,但其发病率和致死率仍呈逐年上升的趋势,因此急需寻找有效的干预靶标和治疗手段。方法本文验证了通过自噬抑制剂干预铁蛋白自噬、增加肺癌细胞对化... 详细信息

目的肺癌的发病率和致死率高居世界恶性肿瘤首位。尽管肺癌的诊断与治疗治疗已取得进展,但其发病率和致死率仍呈逐年上升的趋势,因此急需寻找有效的干预靶标和治疗手段。方法本文验证了通过自噬抑制剂干预铁蛋白自噬、增加肺癌细胞对化疗药物敏感性的多药联用策略。通过免疫印迹分析及免疫荧光测定了细胞中铁蛋白的自噬性降解(铁蛋白自噬),通过分析细胞数量及细胞周期测定了细胞增殖,通过分析细胞耗氧速率评估了细胞线粒体氧化磷酸化水平。结果铁螯合剂去铁胺可诱导肿瘤细胞发生铁蛋白自噬;氯喹等自噬抑制剂可有效抑制去铁胺诱导的铁蛋白降解,显著抑制肿瘤细胞线粒体氧化磷酸化,并引发细胞周期阻滞、抑制细胞增殖;去铁胺、氯喹与一线化疗药物顺铂或依托泊苷的联合给药可显著增强化疗药物对肺癌细胞的毒性。结论通过自噬抑制剂和铁螯合剂干预细胞铁代谢有望成为提升肺癌化疗治疗效果的潜在新策略。

关键词：肺癌铁蛋白自噬去铁胺氯喹化疗

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氯喹导致大鼠肌组织载脂蛋白E大量表达

生物化学与生物物理进展 1997年第1期24卷 44-48页

作者：顾拥军马加宝小山文隆井原康夫上海医科大学神经生物学教研室山东菏泽医学专科学校小儿科菏泽274030 东京大学医学部脑研究施设脑病理部门

载脂蛋白E (ApoE)与迟发的家族性及孤发性阿尔茨海默 (Alzheimer)病密切相关 .氯喹慢性中毒可诱发某些肌病理改变 ,出现 β淀粉样蛋白 ( βAP)与tau蛋白等的沉积 ,与Alzheimer脑中见到的病理改变类似 .为分析这一改变的机制 ,用逆转录... 详细信息

载脂蛋白E (ApoE)与迟发的家族性及孤发性阿尔茨海默 (Alzheimer)病密切相关 .氯喹慢性中毒可诱发某些肌病理改变 ,出现 β淀粉样蛋白 ( βAP)与tau蛋白等的沉积 ,与Alzheimer脑中见到的病理改变类似 .为分析这一改变的机制 ,用逆转录结合多聚酶链反应技术 (RT PCR)对氯喹处理的大鼠肌肉中ApoE表达的改变进行了研究 .在PCR定量中采用了一种稳定表达的内源性甘油醛 3 磷酸脱氢酶mRNA作为内部参照 .PCR扩增在很宽的循环数范围内成线性 ,且靶mRNA与参照mRNA的扩增效率相当 .氯喹处理后大鼠肌肉中ApoEmRNA的表达从第 6周开始增加 ,第 8周后超过对照组的 2 0多倍 .结果提示。

关键词：氯喹载脂蛋白E 早老性痴呆

氯喹增强BIIB021对T315I突变的慢性粒细胞白血病细胞促凋亡的研究

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中国实验血液学杂志 2022年第4期30卷 1005-1010页

作者：何玮赵彩芳陈丽胡慧仙浙江大学医学院附属金华医院血液科浙江金华321000

目的:探讨氯喹(CQ)联合热休克蛋白90抑制剂BIIB021对T315I突变的慢性粒细胞白血病(CML)p210-T315I细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将p210-T315I细胞株按不同处理分为对照、BIIB021、氯喹、BIIB021+氯喹共4组。经过BIIB02和/或CQ处理24 ... 详细信息

目的:探讨氯喹(CQ)联合热休克蛋白90抑制剂BIIB021对T315I突变的慢性粒细胞白血病(CML)p210-T315I细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将p210-T315I细胞株按不同处理分为对照、BIIB021、氯喹、BIIB021+氯喹共4组。经过BIIB02和/或CQ处理24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡,DAPI染色观察细胞核形态及凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白caspase 3、PARP,自噬相关蛋白p62、LC3-I/II的表达情况。皮下注射p210-T315I细胞,构建CML小鼠荷瘤模型,模型建立后治疗组分别给药(BIIB021和/或氯喹),对照组给PBS和生理盐水,每4 d观察记录荷瘤小鼠局部肿瘤体积,免疫组织化学法检测瘤体组织cleaved-caspase 3和LC3-II表达水平。结果:BIIB021有促p210-T315I细胞凋亡的作用,随着药物浓度升高,细胞凋亡率越高(r=0.91)。氯喹能增强BIIB021相关的促凋亡作用,流式细胞术检测结果显示,联合用药组p210-T315I细胞凋亡率明显高于BIIB021、氯喹单用药组(P氯喹联合BIIB021时,与BIIB021单用相比,LC3-II和p62的表达量增多(P氯喹+BIIB021联用组肿瘤组织中cleaved-caspase 3、LC3-II表达量高于BIIB021单用组。结论:热休克蛋白90抑制剂BIIB021对T315I突变的CML细胞、小鼠模型有促进凋亡的作用,氯喹能增强这一效应,其机制可能与抑制自噬有关。

关键词：热休克蛋白90抑制剂 BIIB021 氯喹 T315I突变慢性粒细胞白血病

氯喹通过抑制NF-κB和MAPK信号通路减轻脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应

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中国病理生理杂志 2020年第7期36卷 1320-1326页

作者：方明楚林振浪温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院新生儿科浙江温州325027

目的:探究氯喹(CQ)对脂多糖(LPS)刺激的BV2小胶质细胞活化的抑制作用及可能机制。方法:将小鼠BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组和LPS+CQ组。LPS+CQ组预先给予CQ(10μmol/L)处理30 min再给予LPS刺激,在LPS组和LPS+CQ组中给予LPS(500μg/L... 详细信息

目的:探究氯喹(CQ)对脂多糖(LPS)刺激的BV2小胶质细胞活化的抑制作用及可能机制。方法:将小鼠BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组和LPS+CQ组。LPS+CQ组预先给予CQ(10μmol/L)处理30 min再给予LPS刺激,在LPS组和LPS+CQ组中给予LPS(500μg/L)刺激后,各组细胞分别培养30 min、6 h和24 h。倒置显微镜下观察BV2细胞的形态学改变;RT-qPCR和ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA和蛋白表达水平来评估BV2细胞的活化情况;用免疫荧光染色检测NF-κB蛋白核转移情况;用Western blot检测核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)蛋白的表达情况及c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38蛋白的磷酸化水平。结果:LPS刺激后,BV2细胞形态由圆形或椭圆形向多极或纺锤样转变,而预先给予CQ能抑制BV2细胞的形态转变。LPS刺激后,BV2细胞中TNF-α和IL-6的mRNA水平和培养上清液中的蛋白水平明显增加,但预先给予CQ则明显抑制TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达,可见CQ能减轻LPS诱导的BV2细胞炎症反应。此外,LPS刺激后,BV2细胞内IκB-α蛋白大量降解,细胞核内的NF-κB蛋白显著增多,MAPK信号通路中JNK和p38蛋白磷酸化水平明显升高;而预先给予CQ可显著减少IκB-α蛋白的降解,明显抑制NF-κB蛋白向细胞核内转移,显著降低JNK和p38蛋白的磷酸化水平,可见CQ能抑制LPS诱导下BV2细胞内NF-κB和MAPK信号通路的激活。结论:氯喹显著减轻LPS诱导的BV2细胞炎症反应,其机制与抑制NF-κB和MAPK信号通路有关。

关键词：氯喹小胶质细胞脂多糖炎症 NF-κB信号通路 MAPK信号通路

氯喹抑制自噬对呕吐毒素诱导的仔猪生长性能和血液指标变化的影响

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动物营养学报 2019年第10期31卷 4817-4824页

作者：廖思梦齐鸣颜佳梦李建军唐宇龙谭碧娥印遇龙中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室湖南省畜禽健康养殖工程技术中心农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站长沙410125 中国科学院大学北京100008

本试验旨在探究氯喹(CQ)抑制自噬对摄入呕吐毒素(DON)污染饲粮的仔猪生长性能、血液生理生化指标和抗氧化能力的影响。选择24头初始体重[(7.10±0.58)kg]相近的健康长×大二元杂交猪,随机分为3组,分别为对照组(CON组,基础饲粮)、DON组(... 详细信息

本试验旨在探究氯喹(CQ)抑制自噬对摄入呕吐毒素(DON)污染饲粮的仔猪生长性能、血液生理生化指标和抗氧化能力的影响。选择24头初始体重[(7.10±0.58)kg]相近的健康长×大二元杂交猪,随机分为3组,分别为对照组(CON组,基础饲粮)、DON组(饲粮中含1.5 mg/kg DON)、DON+CQ组(饲粮中含1.5 mg/kg DON+灌服10 mg/mL CQ),每组8头,每头为1个重复。试验开始时各组均饲喂常规基础饲粮,CON和DON组灌服8 mL生理盐水;DON+CQ组灌服8 mL CQ,试验开始后第7天,DON和DON+CQ组饲喂含1.5 mg/kg DON的霉变饲粮,持续1周(保持CQ的灌服),试验期共14 d。结果表明:1)与CON组相比,DON组仔猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著降低(P0.05),料重比(F/G)显著低于DON组(P<0.05)。2)与CON组相比,DON组血清尿素氮(UN)含量及谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性显著提高(P<0.05),DON+CQ组血清UN含量和ALP活性显著低于DON组(P<0.05)。与CON组相比,DON组血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量显著降低(P<0.05);DON+CQ组血清GH和IGF-Ⅰ含量显著高于DON组(P<0.05)。3)与CON组相比,DON组血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);DON+CQ组血浆SOD、GST、GSH-Px活性和T-AOC显著高于DON组(P<0.05)。结果提示,CQ抑制自噬能提高DON处理仔猪的生长性能,改善血液生化指标,提高机体抗氧化能力,一定程度上缓解DON对断奶仔猪的毒害作用。

关键词：呕吐毒素仔猪氯喹血液生化指标抗氧化